Studija o optimizaciji tehnologije ekstrakcije i antioksidativnoj aktivnosti polisaharida iz cvjetova Yunnan Coffee Arabica

Sažetak: Optimizirati tehnologiju ekstrakcije i proučavatiantioksidansaktivnost odpolisaharidiiz cvijeta kave (ACP), ultrazvučna temperatura, ultrazvučno vrijeme, omjer tekućina-krutina, ultrazvučna snaga, vrijeme uranjanja uzorka i volumni postotak etanola istraženi su korištenjem prinosa ekstrakcije polisaharida kao indikatora. Tada su ultrazvučna temperatura, ultrazvučno vrijeme i ultrazvučna snaga korišteni kao glavni čimbenici utjecaja, tehnologija ekstrakcije je optimizirana metodom odzivne površine.Antioksidansaktivnost ACP-a ispitivana je pomoću DPPH· i ABTS plus · učinaka čišćenja i FRAP testova. Rezultati su pokazali da su optimalni tehnološki uvjeti ultrazvučne ekstrakcije: temperatura ultrazvuka 69,5 stupnjeva, vrijeme ultrazvuka 93 min, snaga ultrazvuka 175 W, omjer tekućina-krutina 10:1 mL/g, vrijeme uranjanja uzorka 3{{ 17}} min, a volumni postotak etanola 80 posto. Ispod prinosa polisaharida bio je 2,292 posto. Rezultati su pokazali da je vrijednost IC50 temeljena na DPPH· učinku čišćenja ACP-a bila 3,844 mg·mL-1, ABTS plus · aktivnost čišćenja bila je 0,921 mmol Trolox/g ACP. Vrijednosti FRAP za ACP pomoću FRAP testa bile su 0,0565 mmol Fe2 plus /g ACP, što je pokazalo da je ACP imao slabantioksidansaktivnost. Ova bi studija pružila teorijsku osnovu za sveobuhvatno korištenje i razvoj nusproizvoda kave.

Ključne riječi:cvijeće kave;polisaharid;ekstrakcija;antioksidativno djelovanje

Kavaje biljka iz roda Rubiaceae (Coffea), uglavnom rasprostranjena u zemljama kao što su Južna Amerika, Srednja Amerika, Afrika i Azija, a uzgaja se u više od 80 zemalja svijeta [1]. Prema "kineskoj Materia Medici", kava ima osvježavajuće, diuretičko i stomačno djelovanje, a uglavnom se koristi kod mentalnog umora i gubitka apetita. Često se koristi kao osvježavajući, diuretik i lijek za želudac. Moderna istraživanja su pokazala da kava sadrži niz aktivnih sastojaka kao što su alkaloidi, fenolne kiseline, flavonoidi i terpeni, koji imaju različita farmakološka djelovanja kao što su zaštita jetre, neuroprotekcija,antioksidansi antidijabetik [2-3]. moje zemljekavau uzgoju dominira kava sitnog zrna, a više od 99 posto je distribuirano u Yunnanu. Yunnan kava sitnog zrna bogata je tvarima, osim kofeina, klorogenske kiseline, trigonelina i drugih komponenti, sadrži i askarozide

I~II[4], panikulozid VI[4], kofarilozid I[4], villanovane I[4], caffarolides A~H[5], caffruenol AB[6], caffruones AD[6] i caffruolide AB[7] i neke nove terpenoide. Među njima je potvrđeno da caffarolides C, D i F imaju određenu aktivnost aktivacije agregacije trombocita in vitro [5]; caffruenol AB i caffruolide AB imaju učinak inhibicije proizvodnje NO izazvane lipopolisaharidima u 264.7 makrofaga [7]. S dubinskim proučavanjem kave, dodana vrijednost kave nastavlja rasti. Posljednjih godina nusproizvodi kave bogati su fenolnim kiselinama, flavonoidima, terpenima, alkaloidima i drugim biološkim

Aktivni sastojci, koji se mogu koristiti kao prirodni i održivi izvori aktivnih sastojaka kao što suantioksidansi, zaštita jetre i zaštita živaca, učinili su istraživanje nusproizvoda kave sve više zabrinutim od strane istraživača [8-10]. Campa i sur. izvijestio da lišće kave sadrži fenolne spojeve [11]; Chen je pregledao bogate kemijske sastojke alkaloida, flavonoida, fenolnih kiselina, terpena itd. u listovima kave i njihove farmakološke aktivnosti kao što su antioksidativna, protuupalna i antibakterijska. [12], te su proučavali učinke metoda obrade lista kave i starosti lista na njegov kemijski sastav i aktivnost [13].

Osim toga, Fu Xiaoping et al. [14-15] su otkrili da sirovi ekstrakt kore male kave Yunnan ima određeni zaštitni učinak i učinak oporavka na oštećene endotelne stanice ljudske pupčane vene, a također ima potencijalantioksidansučinke i otkrio da su glavni cvjetni cijanidini cijanidin-3-glukozid i cijanidin-3-rutinozid.

Cvjetovi kave često se odbacuju kao glavni nusproizvod u industriji uzgoja kave. Međutim, postojeće studije su otkrile da su cvjetovi kave bogati kemijskim komponentama. Stašenko i sur. [16] su pomoću GC-MS analizirali hlapljive i poluhlapljive komponente u malim cvjetovima kave, a rezultati su odredili ukupno 150 spojeva, sa sadržajem n-pentadekana. Najviši, a zatim geraniol. Osim toga, Nguyen et al. [17] proučavali su aktivne sastojke u cvjetovima kave i otkrili da cvjetovi kave imaju visok sadržaj fenolnih spojeva, pa se cvjetovi kave mogu koristiti kao sirovina za dobivanje prirodnihantioksidansaktivni sastojci. Osim toga, cvjetovi kave također sadrže kofein i trigonelin. Kofein je povezan sa smanjenim rizikom od neurodegenerativnih bolesti [18-19]

Trigonelin može spriječiti dijabetes i oštećenje bubrega, a također ima učinak u liječenju neurodegenerativnih bolesti [20-21]. Pinheiro i sur. [22] analizirali su sadržaj četiri aktivne komponente trigonelina, klorogenske kiseline, galne kiseline i kofeina u cvjetovima kave pod različitim metodama sušenja i ekstrakcije HPLC-om, među kojima su kofein i trigonelin imali najveći udio; Antioksidativno djelovanje procijenjeno je ABTS i DPPH eksperimentima, koji su potvrdili da cvijet kave ima antioksidativno djelovanje i može se koristiti kao potencijalna sirovina za izradu čajnih napitaka. Trenutačno postoji nekoliko izvještaja o istraživanju cvjetova kave, ali se iz postojećih izvještaja može vidjeti da cvjetovi kave imaju široku perspektivu primjene kao potencijalni izvor bioaktivnih spojeva.

polisaharidisu makromolekularni spojevi sastavljeni od više od 10 monosaharida vezanih glikozidnim vezama, a široko su prisutni u životinjama, biljkama i mikroorganizmima. Polisaharidi su strukturno složeni, različitih konformacija i relativnih molekulskih masa, kao i sekundarne strukture unutarlančanih i međulančanih vodikovih veza. Moderne studije pokazale su da polisaharidi imaju farmakološke aktivnosti kao što su antioksidans [23-24], usporavaju starenje [25], reguliraju imunitet [26], protuupalno [27] i antitumorski [28]. Biološka aktivnost polisaharida povezana je s njihovom čistoćom, kemijskom strukturom, topljivošću itd. Posljednjih godina biološka aktivnost polisaharida postala je žarište istraživanja prirodnih lijekova, a također je i kanal za otkrivanje novih lijekova i razvoj funkcionalne hrane . Stoga polisaharidi imaju važnu ulogu u području medicine i prehrane. Yunnan moje zemlje glavno je proizvodno područje za sadnju kave, a cvjetovi kave imaju potencijalnu razvojnu vrijednost, ali malo je istraživanja o razvoju cvjetova kave Yunnan, a potencijalna vrijednost cvjetova kave nije istražena. Stoga ovaj rad uzima cvjetove kave sitnog zrna Yunnan kao predmet istraživanja za provođenje istraživanja njegovih aktivnih polisaharida, s ciljem dubljeg istraživanja sveobuhvatne uporabne vrijednosti kave sitnog zrna Yunnan.

U ovom radu,polisaharidprinos je korišten kao indeks procjene za optimizaciju procesa ekstrakcije polisaharida i antioksidativnog kapaciteta cvjetova kave prikupljenih iz grada Baoshan, provincija Yunnan, kako bi se dobili osnovni podaci za daljnji razvoj biološki aktivnih polisaharida. I pružite referencu za proučavanje Yunnan kave sitnog zrna i poboljšanje njezine dodane vrijednosti.

1 Materijali i metode

1.1 Materijali i instrumenti

Kavacvijet Grad Baoshan, provincija Yunnan; Bezvodni alkohol Tianjin Chemical Reagent Co., Ltd.; Anthrone čistoća 98.0 posto, Sinopharm Chemical Reagent Co., Ltd.; koncentrirana sumporna kiselina, klorovodična kiselina Chongqing Chuandong Chemical Co., Ltd.; 1,1-difenil-2- trinitrofenilhidrazin (DPPH), 2,2'-diaza-bis-3-etilbenzotiazolin{{10}}sulfonska kiselina (ABTS), 2, 4,6-tripiridiltriazin (TPTZ), čistoća rutina 98.0 posto, Shanghai Ruiyong Biotechnology Co., Ltd.; vitamin E topiv u vodi čistoće 98,0 posto, Hefei Bomei Biotechnology Co., Ltd.; željezov klorid heksahidrat analitički čist, zapadni

Long Science Co., Ltd.; Kalijev persulfat analitičkog stupnja, Tianjin Damao tvornica kemijskih reagensa; PBS pufer, natrijev acetatni pufer Xiamen Haibiao Technology Co., Ltd.

Kliknite ovdje da saznate više o Rich inpolisaharid

Proizvod za instant kavu Cistanche

FA2104N elektronička vaga, 722-Spektrofotometar Shanghai Qinghua Technology Co., Ltd.; KQ-250DB ultrazvučni instrument, SHZ-D (Ⅲ) cirkulirajuća vodena vakuumska pumpa Gongyi Yuhua Instrument Co., Ltd.; Xuman 1000Y višenamjenska brusilica Yongkang City Boou Hardware Products Co., Ltd.; 800 električna centrifuga Jintan Fuhua Instrument Co., Ltd.; VFD-3000 Vakuumska sušilica zamrzavanjem Beijing Bo Yikang Experimental Instrument Co., Ltd.

1.2 Eksperimentalna metoda

1.2.1 Ekstrakcija cvijeta kavepolisaharidiPogledajte metodu Zheng Tingtinga i sur. [29] s izmjenama. Cvjetovi kave sakupljeni iz grada Baoshan, pokrajina Yunnan, osušeni su u hladu na sobnoj temperaturi, usitnjeni u raspršivaču i propušteni kroz 80-mrežasto sito za upotrebu. Izvažite 2.0 g praha cvijeta kave, dodajte 20.0 mL čiste vode, namačite 30 minuta,

Ultrazvučno na 100 W tijekom 30 minuta na 40 stupnjeva, ohlađeno na sobnu temperaturu, a filtrat je zadržan nakon vakuumske filtracije. Etanol je dodan u filtrat do koncentracije od 80 posto za taloženje i ostavljen stajati 12 h. Nakon centrifugiranja na 4000 o/min tijekom 10 minuta, supernatant je odbačen, a talog je otopljen u vodi i liofiliziran na -80 stupnjeva kako bi se dobio sirovi polisaharid.

Pripremite 5 mg·mL-1 otopinu polisaharida cvijeta kave i ostavite sa strane.

1.2.2. Priprema standardne krivulje polisaharida i određivanje sadržaja polisaharida u cvjetovima kave. Standardna krivulja glukoze nacrtana je u odnosu na metodu antron-sumporne kiseline [30]. Pripremite 0.0, 25.{{10}}, 50.0, 100.{{23} }, 150,0 i 200,0 ug/mL standardne otopine glukoze. Točno pipetirajte 1,00 mL gore navedene standardne otopine glukoze različitih koncentracija, dodajte 1,00 mL čiste vode i stavite u epruvetu s čepom od 25 mL. Dodajte 5,0 mL 2,1 mg·mL-1 otopine antron-sumporne kiseline, dobro protresite, ohladite u kupelji s ledenom vodom, zagrijavajte u kupelji s kipućom vodom 7 minuta i brzo ohladite na sobnu temperaturu u kupelji s ledenom vodom. Koristeći deioniziranu vodu kao slijepu probu,

Apsorbancija A mjerena je kolorimetrijski na 625 nm. Uzimajući sadržaj bezvodne glukoze kao apscisu (0.0, 25.0, 50.0, 1{{1{{12} }}}0.0, 150.0, 200.0 ug), a vrijednost apsorbancije kao ordinatu, nacrtajte standardnu ​​krivulju, a jednadžba standardne krivulje je: Y=0.0051X−0.0092 ( R2=0.9970) (gdje je: Y vrijednost apsorbancije, X količina glukoze, ug).

Precizno pipetirajte određeni volumen gore pripremljene otopine polisaharida cvijeta kave od 5 mg/mL u epruvetu od 25 mL s čepom i dodajte čistu vodu do 2.00 mL. Dodajte 5.0 mL 2,1 mg·mL−1 otopine antron-sumporne kiseline, dobro protresite, ohladite u kupelji s ledenom vodom, zagrijavajte u kipućoj vodenoj kupelji 7 minuta i brzo ohladite na sobnu temperaturu u kupka s ledenom vodom. Apsorbancija A mjerena je kolorimetrijski na 625 nm korištenjem deionizirane vode kao slijepe kontrole. Prinos polisaharida cvijeta kave izračunat je prema jednadžbi standardne krivulje glukoze, a svaki je uzorak ponovljen 3 puta. Rezultati su izraženi kao prosječna vrijednost, a formula za izračun bila je sljedeća:

Prinos polisaharida cvijeta kave ( postoci ) =X×m1×10−35×V×ms×100

U formuli: X je sadržaj polisaharida u V volumenu otopine polisaharida cvijeta kave, ug; V je izmjereni volumen otopine polisaharida, mL; 5 je koncentracija pripremljene otopine polisaharida cvijeta kave, 5 mg·mL−1; m1 liofilizirani cvijet kave Ukupna masa polisaharida, g; ms je masa uzorka cvijeta kave, g.

1.2.3 Jednofaktorski eksperiment

U procesu ekstrakcije polisaharida cvijeta kave uz pomoć ultrazvuka, važni čimbenici koji utječu na prinos polisaharida uglavnom uključuju ultrazvučnu temperaturu, ultrazvučno vrijeme, omjer tekućine i materijala, ultrazvučnu snagu, vrijeme namakanja i koncentraciju taloženja alkohola. Odabrano je pet razina ultrazvučne temperature: 40, 50, 60, 70 i 80 stupnjeva; odabrano je pet razina ultrazvučnog vremena: 30, 60, 90, 120 i 150 min; : 1, 30: 1 mL/g pet razina; ultrazvučna snaga odabire pet razina od 100, 125, 150, 175, 200 W; vrijeme uranjanja odabire pet razina od 30, 60, 90, 120, 150 min; koncentracija etanola odabire pet razina 75 posto, 80 posto, 85 posto, 90 posto, 95 posto pet razina, respektivno, eksperiment s jednim faktorom. Prilikom filtriranja za jedan od parametara

, ostali faktori su: ultrazvučna temperatura 40 stupnjeva, ultrazvučno vrijeme 30 min,

Omjer tekućine i materijala 10:1 mL/g, ultrazvučna snaga 100 W, vrijeme namakanja 30 min

a koncentracija taloženja alkohola 80 posto .

1.2.4 Eksperiment optimizacije površine odziva Prema Box-Benhnken principu eksperimentalnog dizajna, s prinosom polisaharida cvijeta kave kao varijablom odgovora, tri čimbenika koji imaju najveći utjecaj na prinos polisaharida cvijeta kave odabrana su iz jednog faktora. rezultati ispitivanja, kao što je prikazano u tablici 1. Optimizacija ultrazvučne temperature s prinosom polisaharida cvijeta kave kao stupnjem indeksa, ultrazvučnim vremenom i ultrazvučnom snagom.

1.2.5 Test antioksidativne sposobnosti

1.2.5.1 Eksperimenti hvatanja slobodnih radikala DPPH Eksperimenti hvatanja slobodnih radikala DPPH izvedeni su kako je opisano u Ref. [31]. Uzmite 3,9 mL 0.075 mmol/L DPPH reakcijske otopine i pomiješajte je s 100 μL otopina polisaharida različitih koncentracija. Reakcija je provedena na sobnoj temperaturi 30 minuta u mraku, a vrijednosti apsorbancije izmjerene su na 515 nm. Korištenjem rutina kao pozitivne kontrole, stopa hvatanja slobodnih radikala DPPH izračunata je kao: I posto =[(A0–As)/A0]×100 (gdje je: As apsorbancija otopine uzorka; A0 je apsorpcija otopine bez uzorka), a antioksidacijska aktivnost izražena je kao 50-postotna stopa inhibicije (IC50).

1.2.5.2 ABTS plus pokus hvatanja slobodnih radikala

ABTS plus eksperimenti uklanjanja radikala izvedeni su pomoću metode opisane u Ref. [32]. Uzmite 2 mL otopine polisaharida i dodajte je u 2 mL ABTS plus otopine slobodnih radikala, nakon ravnomjernog miješanja, reagirajte na sobnoj temperaturi 6 minuta i izmjerite UV apsorpciju na 734 nm, a rutin je pozitivna kontrola. Formula za izračun ABTS plus sposobnost hvatanja slobodnih radikala je sljedeća: I( postotak )=[(A0–As)/A0]×10{ {12}} (gdje je As apsorbancija otopine uzorka; A0 je apsorbancija otopine bez uzorka) Standardna krivulja određena je mjerenjem Crtež Trolox standardnih otopina s različitim koncentracijama (I posto =0.0247C −0,0046, R2=0.9937), ABTS anti-

Oksidativna aktivnost izražava se kao mmol Trolox/g.

1.2.5.3 Metoda FRAP

Metoda opisana u Ref. [33] korišten je za određivanje FRAP antioksidativnog kapaciteta. Uzmite 5.0 mL TPTZ, 5.0 mL 20 mmol/L FeCl3 i 50 mL puferske otopine natrijevog acetata (300

mmol/L, pH 3,6) za pripremu FRAP radne otopine; 100 μL uzorka pomiješano je s 300 μL vode i 3,0 mL FRAP radne otopine, stavljeno u vodenu kupelj na 37 stupnjeva 30 minuta; apsorbancija je izmjerena na 595 nm. Standardna krivulja pripremljena je s FeSO4 kao standardnom supstancom (A=0.572C0.008, R2=0.9974), a rutin je korišten kao pozitivna kontrola, prema standardnoj krivulji

Izračunajte redukcijsku moć u mmol FeSO4/g polisaharida.

1.3 Obrada podataka

Svi eksperimenti ponovljeni su tri puta i uzeta je prosječna vrijednost. Softver DesignExpert 8.0.6 korišten je za dizajn i analizu eksperimenata površine odziva.

2 Rezultati i analiza

2.1 Eksperimentalni rezultati s jednim faktorom

Rezultati eksperimenta s jednim faktorom prikazani su na slici. Učinak ultrazvučne temperature na prinos polisaharida cvijeta kave: ultrazvučna temperatura bila je 40-80 stupnjeva, a prinos polisaharida bio je 1,0048 posto -1.7982 postotak . U rasponu od 40-70 stupnjeva, prinos polisaharida cvijeta kave postupno se povećavao s porastom ultrazvučne temperature, dosegao je maksimum na 70 stupnjeva i počeo se smanjivati ​​nakon 70 stupnjeva. To može biti posljedica smanjenog prinosa polisaharida zbog razaranja strukture polisaharida cvijeta kave pod uvjetima visoke temperature, o čemu se slično izvještava u literaturi [29,34-35]. Temperatura sonikacije je odabrana na 70 stupnjeva.

Učinak vremena ultrazvuka na prinos polisaharida cvijeta kave: vrijeme ultrazvuka bilo je 30-150 min, prinos polisaharida bio je 1,0369 posto -1.5853 posto, prinos polisaharida se povećao s povećanjem vremena ultrazvuka, i dostigao maksimum pri 90 min, prinos se počeo smanjivati ​​s povećanjem vremena sonikacije. To je zato što kratkotrajna ultrazvučna ekstrakcija ne vodi potpunom otapanju polisaharida, dok će dugotrajna ultrazvučna ekstrakcija razgraditi polisaharide i dovesti do smanjenja prinosa, što je također navedeno u literaturi [29,34-35]. Stoga je odabrano vrijeme sonikacije od 90 minuta.

Učinak omjera tekućine i krutine na prinos polisaharida cvijeta kave: učinak omjera krutine i tekućine na prinos polisaharida je mali. Prinos polisaharida se povećavao s povećanjem omjera tekućine i krutine, te je dosegao maksimum pri 25:1 mL/g. Nakon 25:1 mL/g, prinos se smanjio s povećanjem omjera tekućine i krutine. Manje otapala će dovesti do nedovoljnog otapanja polisaharida, što će rezultirati manjim prinosom polisaharida; više otapala će otopiti polisaharid i otežati njegovo taloženje, au isto vrijeme, prinos će biti smanjen zbog apsorpcije ultrazvučnog zračenja od strane otapala. 29,34−35] također imaju slična izvješća. Uzimajući u obzir da omjer tekućine i materijala ima mali učinak na prinos, kako bi se uštedjela količina reagensa, omjer tekućine i materijala je odabran kao 10:1 mL/g.

Učinak ultrazvučne snage na prinos polisaharida cvijeta kave: ultrazvučna snaga odabrana je kao 100-200 W, a prinos polisaharida bio je 1,1185 posto -1.8583 posto. Nakon W, prinos se smanjio s povećanjem ultrazvučne snage. Povećanje ultrazvučne snage može učinkovito uništiti stanice i tkiva kako bi se polisaharidi otopili u otapalu, tako da je povećanje ultrazvučne snage korisno za taloženje polisaharida; međutim, učinak fragmentacije i toplinski učinak koji proizvode veći ultrazvučni valovi također će povećati otapanje nečistoća u cvjetovima kave. , toplinski će učinak uništiti komponente polisaharida i uzrokovati smanjenje prinosa polisaharida, što je također navedeno u literaturi [36-37]. Stoga je ultrazvučna snaga odabrana na 175 W.

Učinak vremena namakanja na prinos polisaharida cvijeta kave: učinak vremena namakanja na prinos polisaharida bio je mali, vrijeme namakanja bilo je 30-150 min, a prinos polisaharida bio je 1,1827 posto -1. 4609 posto. U rasponu od 30-90 min, prinos polisaharida se povećavao s povećanjem vremena namakanja i dosegao je maksimum u 90 min. Nakon 90 minuta, s povećanjem vremena namakanja, prinos se lagano smanjio i bio je nepromijenjen. Produljenje vremena namakanja može olakšati taloženje polisaharida tijekom ultrazvučne obrade i smanjiti potrošnju energije. Ali predugo namakanje ne može donijeti veći prinos, a predugo namakanje također će uzrokovati otpuštanje drugih komponenti i utjecati na prinos polisaharida. Ovo je slično onome objavljenom u [38]. S obzirom da je utjecaj vremena namakanja mali, radi uštede vremena odabrano je vrijeme namakanja od 30 min.

Učinak koncentracije taloženja alkohola na prinos polisaharida cvijeta kave: koncentracija taloženja alkohola ima mali učinak na prinos polisaharida, koncentracija taloženja alkohola je 75 posto ~95 posto, prinos polisaharida je 0.9703 posto ~1,2806 posto. Prinos polisaharida se povećavao s porastom koncentracije etanola, te je dosegao maksimum od 85 posto. Nakon 85 posto, prinos se smanjio s povećanjem koncentracije etanola. Ekstrakcija vodom i taloženje alkoholom je upotreba polisaharida netopljivog u alkoholu kako bi se on taložio. Kada se količina dodanog etanola poveća, polisaharid je netopljiv u etanolu i taloži se, a prinos se povećava. Kada koncentracija taloženja alkohola prijeđe 85 posto, prinos polisaharida se ne može poboljšati, ali se reagensi troše. Ovo je slično onome objavljenom u [38]. Kako bi se pojednostavio postupak, ovaj rad usvaja metodu izravnog dodavanja etanola za prilagodbu koncentracije alkohola za taloženje. U isto vrijeme, budući da se prinos 80 posto i 85 posto polisaharida ne razlikuje puno, može uštedjeti reagense i smanjiti otpad. Stoga je koncentracija taloženja alkohola odabrana na 80 posto.

2.2 Rezultati ispitivanja odzivne površine

2.2.1 Rezultati ispitivanja površine odziva Ultrazvučna temperatura, ultrazvučno vrijeme i ultrazvučna snaga imaju veliki utjecaj. Stoga je, na temelju gornjih jednofaktorskih eksperimenata, metoda odzivne površine optimizirana za tri uvjeta ultrazvučne temperature, ultrazvučnog vremena i ultrazvučne snage. Rezultati su prikazani u tablici 2. .

Uzimajući prinos polisaharida (Y) kao indeks odgovora, uspostavljen je regresijski model s tri faktora ultrazvučne temperature, ultrazvučnog vremena i ultrazvučne snage, te je dobivena kvadratna regresijska jednadžba:

Y{{0}}.29−0.067A plus 0.{{10}}54B−0. 019C plus 0,34AB plus 0,083AC plus 0,011BC−0,40A2

−0.19B2−0.27C2

2.2.2 Test značajnosti varijance

Rezultati ispitivanja prikazani su u tablici 3.

Prema rezultatima analize varijance u tablici 3, ukupni model je bio značajan (P<0.0001), and the model reached a very significant level, indicating that the difference between different factors was significant; according to the absolute value of the linear coefficient of the regression equation, it can be seen that each factor has a significant effect on the total polysaccharide yield. The order of influence is: A>B>C, that is, ultrasonic temperature> ultrasonic time> ultrasonic power. Lack of fit item P=0.5764>0.05, nedostatak testa prikladnosti stavke nije značajan, što ukazuje da nepoznati čimbenici imaju mali utjecaj na rezultate ispitivanja, a rezidualna stavka je uglavnom uzrokovana slučajnim pogreškama, što ukazuje da je odabir modela prikladan i točan . Utjecaj AB bio je značajan (P<0.05), and the influence of A2, B2, and C2 was extremely significant (P<0.01). In the whole model, the adjustment coefficient R2Adj=0.9277 in the model, indicating that 92.77% of the response value changes can be carried out through the model. Explanation, the coefficient of determination R2 = 0.9684, indicating that the model is highly reliable, and the model fits well with the experiment, and this model can be used for analysis and prediction [39−42].

2.2.3 Odzivne površine i konture

Dijagram površine odziva međudjelovanja različitih čimbenika na prinos polisaharida cvijeta kave prikazan je na slici 2. Interakcija između ultrazvučne temperature i ultrazvučnog vremena pokazala je da je interakcija između ta dva bila značajna; kada je ultrazvučna temperatura ostala nepromijenjena, prinos polisaharida cvijeta kave prvo se povećao, a zatim smanjio s povećanjem ultrazvučnog vremena; kada je ultrazvučno vrijeme ostalo nepromijenjeno, kava Prinos cvjetnog polisaharida prvo se povećao, a zatim smanjio s porastom ultrazvučne temperature. Iz interakcije između ultrazvučne temperature i ultrazvučne snage, može se vidjeti da kada je ultrazvučna temperatura konstantna, prinos polisaharida cvijeta kave prvo raste, a zatim opada s povećanjem ultrazvučne snage; kada ultrazvučna snaga ostaje nepromijenjena, prinos polisaharida cvijeta kave raste s ultrazvučnim valom. Povećanje temperature prvo raste, a zatim se smanjuje. Iz interakcije između ultrazvučnog vremena i ultrazvučne snage, može se vidjeti da kada je ultrazvučno vrijeme konstantno, prinos polisaharida cvijeta kave prvo raste, a zatim opada s povećanjem ultrazvučne snage; kada je ultrazvučna snaga konstantna, prinos polisaharida cvijeta kave raste s povećanjem ultrazvučne snage. Povećanje vremena se prvo povećava, a zatim smanjuje.

Stoga, korištenjem prinosa polisaharida kao standarda za procjenu, rezultati optimizacije metode odzivne površine za tri uvjeta ultrazvučnog vremena, ultrazvučne temperature i ultrazvučne snage su: ultrazvučna temperatura 69,56 stupnjeva, ultrazvučno vrijeme 92,99 min i ultrazvučna snaga 174,01 W, to predviđa se da će pod ovim uvjetom 2,290 posto . Prema stvarnoj situaciji, ultrazvučna temperatura od 69,5 stupnjeva, ultrazvučno vrijeme od 93.00 min, ultrazvučna snaga od 175 W, vrijeme uranjanja od 30 min, omjer tekućine i materijala od 10: 1 mL/g i koncentracija etanola od 80 posto odabrani su za 4 paralelna testa.

Prosječni prinos bio je 2,292 posto ±0,061 posto. U osnovi je blizu teorijske vrijednosti dobivene testom, što ukazuje da postoji dobro podudaranje između predviđene vrijednosti i stvarne vrijednosti, tako da su optimizirani procesni parametri dobiveni površinom odziva u ovoj studiji točni i pouzdani [43].

2.3 Eksperimentalni rezultati antioksidativnog kapaciteta

DPPH test je učinkovit i osjetljiv model procjene antioksidativnog kapaciteta biljaka. Kapacitet hvatanja slobodnih radikala testiranog uzorka povezan je s njegovim potencijalnim kapacitetom doniranja protona; ABTS test naširoko se koristi za procjenu antioksidativnog kapaciteta biljnih uzoraka, koji može testirati uzorke Antioksidacijska aktivnost lipofilnih i hidrofilnih komponenti u FRAP metodi; redukcijska sposobnost prirodnih proizvoda procijenjena je redukcijom Fe3 plus -TPTZ u Fe2 plus -TPTZ [44-45]. Rezultati antioksidativnih eksperimenata polisaharida cvijeta kave prikazani su u tablici 4. Polisaharidi cvijeta kave imaju određene antioksidativne aktivnosti protiv slobodnih radikala DPPH i ABTS plus slobodnih radikala, ali je njihova antioksidativna aktivnost niža od one rutina.

3 Zaključak

U ovom eksperimentu kao sirovina korišten je cvijet sitnog zrna kave Yunnan, apolisaharidod Yunnan sitnog zrnakavacvijet je izvađen ultrazvukom. Utvrđeno je da ultrazvučno vrijeme, ultrazvučna temperatura i ultrazvučna snaga imaju važne učinke na ekstrakciju polisaharida cvijeta kave. Zatim su ultrazvučno vrijeme, ultrazvučna temperatura i ultrazvučna snaga optimizirani površinom odziva, a optimalni procesni uvjeti polisaharida cvijeta kave određeni su kako slijedi: ultrazvučna temperatura 69,5 stupnjeva, ultrazvučno vrijeme 93 min, ultrazvučna snaga 175 W, omjer tekućine i materijala 10:1 mL/g, vrijeme namakanja bilo je 30 min, a koncentracija etanola bila je 80 posto. Pod ovim uvjetima, prinos polisaharida bio je 2,292 posto ±0,061 posto. Metoda može učinkovito poboljšati prinos cvijeta kavepolisaharid, uz skraćivanje vremena ekstrakcije i smanjenje količine upotrijebljenog etanola. Rezultati pokusa s antioksidansima pokazali su da polisaharidi cvijeta kave pokazuju slabu antioksidacijsku sposobnost. Ova studija će pružiti referencu za daljnje odvajanje i pročišćavanje cvijeta kavepolisaharidte istraživanja o njezinu djelovanju i funkciji, a također će dati teorijsku osnovu i potporu daljnjem razvoju i korištenju kave.

podrška:

wallence.suen@wecistanche.com 0015292862950