Učinci Cistanche Deserticola na akutnu ozljedu pluća kod štakora sa sepsom

Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-pošta:audrey.hu@wecistanche.com

[Sažetak]Cilj: Proučiti učinakCistanche deserticolana akutnomozljeda pluća(ALI) u štakora sa sepsom. Metode: Model sepse napravljen je ligacijom i punkcijom cekuma. Izvršene su histopatološke pretrage i izmjereni biološki markeri ALI. Rezultati: Pod svjetlosnim mikroskopom u skupini s fiziološkom otopinom postojao je edem odmeđuprostor pluća, veliki broj eritrocita i neutrofila te proteina plazme u alveolarnim šupljinama. Theplućamokra/suha težina, stopa neutrofila i sadržaj proteina u tekućini plućnog alveolarnog ispiranja, plućna vaskularna propusnost i plućna alveolarna propusnost i MDA, SOD, kao i MPO, bili su odgovarajuće značajno povećani. U skupini saCistanche deserticolaliječenju, ti su indeksi ALI bili značajno niži od onih u skupini s fiziološkom otopinom.

Zaključak: Cistanche deserticolaima velike učinke na ALI u štakora sa sepsom. Terapijski mehanizam je vjerojatno kroz inhibiciju neutrofila i oksidativnih slobodnih radikala.

【Ključne riječi】Sepsa; Akutna ozljeda pluća; Cistanche deserticola

Sepsa je klinička hitna i kritična bolest, a traženje učinkovitih lijekova za liječenje uvijek je bio veliki problem u kliničkim i osnovnim istraživanjima. Patogeneza sepse u tradicionalnoj kineskoj medicini je nedostatak pravednosti i bujnost zla. Terapija napada na zlo prosperitet tijela jedna je od učinkovitih mjera liječenja.Cistancheje tradicionalni tonik kineske medicine. Farmakološke studije potvrdile su da ima zaštitne funkcije kao što je povećanje stope stanične sinteze DNA i otpornost na radikale bez kisika. Autor eksperimentalno promatra učinakCistanche na oštećenje problema s plućimakod sepse, kako bi se omogućilo učinkovito istraživanje za liječenje sepse.

Cistanche Echinacoside liječi bolesti pluća

1 Materijal i metode

1. 1 ŽivotinjaZdravlje 40 mužjaka 5D štakora, težine 200~250 g, koje je osigurao Eksperimentalni životinjski centar Sveučilišta za znanost i tehnologiju Huazhong, inspekcijski broj kvalitete: TJLA—2008—1670 nasumično su podijeljeni u 3 skupine: 8 skupina s normalnom fiziološkom otopinom, Ig/ Bilo je 12 štakora u skupini s pastom od mL patlidžana i 12 u skupini s 5 g/mLCistancheskupina. Pokusnim životinjama su davani odgovarajući lijekovi rutinskom sondom tijekom 15 dana, dva puta dnevno (Cistancheekstrakt deserticole osigurala je soba za pripremu tradicionalne kineske medicine ove bolnice), a doza od 200 mg/kg korištena je na pokusnim životinjama u skladu s literaturnom metodom U] 12 minuta nakon podvezivanja cekuma i perforacije. Zbirka uzoraka.

1.2 Histološki pregled pluća štakora.Uzmite malu količinu lijevog režnja životinjeplućaiz svake skupine fiksirati s 10 postotnim formaldehidom, rez parafinirati i obojati HE, promatrati običnim optičkim mikroskopom i na temelju toga uzetiplućaproblem napraviti 1 mm3 za 25 Fiksiran je u postotnoj otopini glutaraldehida, zatim fiksiran u 1 postotnoj otopini tetroksida, dehidriran etanolom i acetonom, ugrađen u Epon 81, pripremljeni ultra-tanki presjeci, obojeni uran-olovom i promatrani prijenosnim elektronom mikroskop.

1.3 Određivanje omjera težine mokro/suho kod problema s plućima štakora, omjera broja stanica u tekućini za ispiranje alveola i omjera težine sadržaja proteina.Druga skupina štakora podvrgnuta je alveolarnom ispiranju nakon torakotomije, a tekućina ispiranja je podvrgnuta brojanju stanica i klasifikaciji stanica pod mikroskopom. Metoda Coomassie brilliant blue koristi se za određivanje sadržaja proteina i izračunavanjeplućaindeks propusnosti (protein tekućine alveolarne lavaže/protein plazme, LPI).

1.4 Promjene u plućnoj vaskularnoj propusnosti (PVP) u štakoraPrema metodi koju su uveli Zhou i sur. (2), nakon primjene, životinje u svakoj skupini bile su podvrgnute podvezivanju cekuma i perforaciji, a injekcija lantana od 50 mg/kg femoralne vene korištena je za otvaranje prsnog koša i uklanjanje pluća. Uklonite okolne probleme, natopiteplućau otopini formamida (količina formamida je 20mg/100g tjelesne težine), inkubirati u 45-50T inkubatoru 72h, pričekati da se isperu svi pigmenti u problemima, izvaditi probleme, centrifugirati i uzeti supernatant, koristite ultraljubičasti spektrofotometar za izvođenje kolorimetrije na 620 nm i izračunajte sadržaj etanola prema standardnoj krivulji da odredite promjenu PVP-a.

1.5 Određivanje malondialdehida (MDA) kod problema s plućima štakoraZa određivanje aktivnosti MDA korištena je metoda tiobarbiturne kiseline (TBA). Dodajte 4 mL 1,67 mol/L sumporne kiseline. 0.541 posto fosfonske kiseline na 50 mL ispitnog uzorka, dobro promiješajte, centrifugirajte na 3000 o/min tijekom 10 minuta i obradite talog još jednom kao gore, zatim dodajte 1 mL dvostruko destilirane vode, 1 mL otopine TBA, 95 posto bezvodnog kupka 60 minuta, ekstrakcija s 5 mL n-butanola, tetra etoksi propan kao standard, konačna koncentracija lnmol/L, fluorescentni spektrofotometar na 532 nm za mjerenje apsorbancije.

1.6 Određivanje superoksid dismutaze (SOD) kod problema s plućima štakoraPrema metodi iz literature [4], aktivnost SOD određena je metodom Huangpuyin oksidaze (kit nabavljen od Nanjing Jiancheng Institute of Biological Engineering).

1.7 Određivanje mijeloperoksidaze (MPO) u štakoraplućaproblem.Uzmite problem s plućima da isperete zaostalu krv što je više moguće u izotoničnoj fiziološkoj otopini i stavite je u fosfatni pufer koji sadrži {{0}}.5 posto cetil trimetil bromida (PH6.0) Napravite 5 posto homogenata, i radite prema uputama kompleta.

1.8 Statističke metodeKoristite SPSS statistički softver i izmjerite podatke u (x±s) obliku, koristeći t-test i X2 test.

Cistanche

2 rezultata

2.1 Usporedba omjera težine mokro/suhoplućaproblemi, omjer broja stanica i sadržaj proteina u tekućini alveolarnog ispiranja u svakoj skupini prikazani su u tablici 1.plućaomjer težine mokro/suho u skupini koja je primala fiziološku otopinu bio je značajno veći od onog u skupiniCistanchegrupa (P<0.05 or="" 0.01).="" the="" cell="" count="" ratio="" and="" protein="" content="" in="" the="" alveolar="" lavage="" fluid="" of="" the="">Cistancheskupini bili značajno niži od onih u skupini na fiziološkoj otopini (P<0.05 or="" 0.01).="" 0.="" 01),="" and="" with="" the="" increase="" of="" the="" dose="" concentration,="" it="" shows="" a="" significant="">

Tablica 1. Usporedba omjera težine mokro/suho kod problema s plućima i omjera broja stanica i sadržaja proteina u tekućini alveolarnog ispiranja štakora u svakoj skupini (X ± S)

U usporedbi sa skupinom s normalnom fiziološkom otopinom, P<0.><001. below="" is="" the="">

2.2 Usporedba morfoloških promjena problema s plućima štakora u svakoj skupini. Općenito zapažanje: Theplućau skupini koja je primala fiziološku otopinu bili su značajno povećani i tamnocrveni, s različitim stupnjevima kongestije i edema na površini, te velikim brojem plućnih infarkta na rubu; pluća uCistancheskupina bili su svijetlocrveni s površinom Blaga kongestija i edem, bez očitog infarkta pluća. Promatranje svjetlosnim mikroskopom pokazalo je da je u skupini koja je primala fiziološku otopinu postojala alveolarna i plućna intersticijska kongestija i edem, veliki broj difuznih infiltracija neutrofila u alveolarnoj šupljini, nešto formiranja apscesa i različiti stupnjevi atelektaze, nekroze i kompenzacijskog emfizema. , Tromb i slične prozirne membranske formacije. Gore spomenute lezije u skupini Cistanche značajno su smanjene. U skupini s fiziološkom otopinom alveolarne epitelne stanice su nabubrele, lamelarna tjelešca očito su se ispraznila, formirane su velike vakuole, kapilarne endotelne stanice su natekle, endotelne stanice su kontinuirano ozlijeđene, međustanični prostor se proširio, kapilare i alveolarne bazalne membrane su labave i proširene. Nepravilno zadebljanje, nejednaka debljina. U skupini Cistanche alveolarne epitelne stanice nisu bile natečene, pražnjenje lamelarnih tjelešaca je bilo smanjeno, broj formiranih vakuola bio je mali, veza između kapilarnih endotelnih stanica bila je blizu normalne, a bazalna membrana je bila blago labava i nepravilno zadebljana. U usporedbi sa skupinom koja je primala Ig/niL cistanche, skupina s 5g/mL cistanche imala je manji raspon morfoloških promjena problema s plućima, a stupanj ozljede pluća bio je lakši.

2.3 Usporedba LPI i PVP štakora u svakoj skupini prikazana je u tablici 2. LPI i PVP skupine koja je primala fiziološku otopinu bili su značajno viši nego oni skupine koja je primala Cistanche (PV0.05 ili 0,01 ). LPI i PVP skupine Cistanche bili su niži, što je imalo značajan odnos doze i učinka.

2.4 Usporedba aktivnosti MDA.SOD.MPO uplućaproblemi štakora u svakoj skupini prikazani su u tablici 3. Sadržaj MDA uplućaProblem skupine koja je primala fiziološku otopinu bio je značajno veći od problema skupine koja je primala fiziološku otopinuCistanchedok su aktivnost SOD i aktivnost MPO u plućnom problemu skupine Cistanche značajno povećane (F<0.05 or="">

3 Rasprava

Zatajenje više organa glavni je uzrok ireverzibilnog stanja i visoke stope smrtnosti u kasnoj fazi sepse (5). Zaštita funkcije organa od velikog je značaja za smanjenje visoke stope kliničke smrtnosti od sepse. Pluća su prvi organ višestrukog zatajenja organa. 1/3 bolesnika sa sepsom umire od akutne ozljede pluća (ALI) i sindroma akutnog respiratornog distresa (ARDS). Glavni patofiziološki mehanizam ALI je akumulacija velikog broja neutrofila u problemu pluća i aktivira se i prianja na vaskularne endotelne stanice. Istodobno se povećava koncentracija reducirane koenzima II oksidaze koja prenosi pojedinačne elektrone, uzrokujući respiratorne udare, stvarajući veliku količinu slobodnih radikala kisika i uzrokujući oštećenje i funkciju staničnih membrana i membranskih struktura kroz jaku oksidaciju. Prepreke⑹. Lipidni peroksid odražava promjenu slobodnih kisikovih radikala u problemu i izravno je povezan sa stupnjem oštećenja pluća (7). U tjelesnom enzimskom i neenzimskom antiradikalnom oksidacijskom sustavu, aktivnost SOD održava dobru korelaciju sa stupnjem problematičnog oštećenja ⑺. U usporedbi sa skupinom koja je primala fiziološku otopinu, aktivnosti MDA i SOD skupine Cistanche pokazale su statistički značajne razlike. Cistanche ima funkcije jačanja imunološke funkcije, sprječavanja starenja i povećanja stope sinteze stanične DNA. Eksperimentalni rezultati su pokazali da su plućni koeficijent, PLT, omjer neutrofila u alveolarnoj lavažnoj tekućini i plućna vaskularna propusnost skupine Cistanche bili značajno smanjeni, aktivnost MDA kod plućnog problema smanjena, SOD značajno porastao, a aktivnost MPO smanjena. U isto vrijeme, morfološko promatranje pokazalo je da je stupanj oštećenja pluća značajno smanjen, infiltracija neutrofila je smanjena, a skupina koja je primala 5 g/mL Cistanche imala je manju ozljedu pluća nego skupina koja je primala Ig/mL Cistanche, a postojao je i dobar odnos doza-učinak. To sugerira da Cistanche ima značajan zaštitni učinak na ALI. Mehanizam može biti: (1) Inhibirati migraciju upalnih stanica upluća, smanjuju slobodne radikale kisika koje proizvode neutrofili i druge aktivirane stanice tako da je biofilm zaštićen; (2) Pospješuje sintezu nukleinske kiseline i proteina i štiti od učinka ozljede pluća; (3) Poboljšati imunološku funkciju fagocita i smanjitiplućaproblematično oštećenje uzrokovano endotoksinom. Eksperimentalni rezultati daju eksperimentalnu osnovu za liječenje akutne ozljede pluća u kliničkoj sepsi jačanjem organizma i jačanjem nedostatka.

reference

[1] Jin Huiming. Model sepse nakon podvezivanja cekuma i perforacije [J]. Kineski časopis za patofiziologiju "990, 6 (2): 126 ~ 127.

[2] Zhou WG, Mc Collum MO, Levine BA, et al. Uloga faktora aktivacije trombocita u akutnoj ozljedi pluća povezanoj s pankreatitisom u štakora [J]. Am J Pathol, 1992, 140: 971 -979.

[3] Wang Qian, Zhu Xiaofeng, Zhao Xilong. Eksperimentalne metode suvremene medicine [M]. Peking: People's Medical Publishing House, 2007:508.

[4] Zhang Xiuming, Li Jianzhai, Wei Mingjing. Moderna klinička biokemijska laboratorijska znanost [M]. Peking: People's Military Medical Press, 2008: 896.

[5] Luo Zhengyao. Studije šoka [M]. Tianjin: Tianjin Science and Technology Press, 2008:345.

[6] Xanthous CA, Hall JB. Samsel RW. Endotoksin u ljudskim bolestima, 2. dio Biološki učinak i klinička procjena antiendotoksinskih teorija[J]