Cjepiva protiv krpelja i skriveni naspram izloženih antigena

Sažetak:

Razvoj cjepiva protiv krpelja uglavnom ovisi o identifikaciji prikladnih antigena, koji bi idealno trebali imati različite značajke. To bi trebale biti ključne molekule u biologiji krpelja, kodirane jednim genom, izražene kroz životne faze i tkiva krpelja, sposobne inducirati B i T stanice da promiču imunološki odgovor bez alergenih, hemolitičkih i toksičnih učinaka; i ne bi trebao biti homologan domaćinu sisavcu. Rasprava o ovoj temi i korisnosti "izloženih" i "skrivenih" antigena učinkovito je istražena u publikaciji Nuttalla i sur. (2006). Ovaj komentar namjerava raspravljati o važnosti takve studije u području imunološke kontrole krpelja.

Cjepivo protiv krpelja učinkovit je način prevencije bolesti koje prenose krpelji. Može potaknuti tijelo da razvije imunitet protiv krpelja, kako bi zaštitio ljude od bolesti koje krpelji prenose. Cjepiva protiv krpelja usko su povezana s imunitetom. Cijepljenje protiv krpelja može ojačati ljudski imunitet i učinkovito spriječiti pojavu bolesti koje prenose krpelji.

Cjepivo protiv krpelja je preventivno cjepivo čija je glavna komponenta virus akari. Nakon cijepljenja protiv krpelja, ljudsko tijelo će razviti određenu količinu imuniteta i stvoriti zaštitnu barijeru za zaštitu ljudskog tijela od infekcije bolestima koje prenose krpelji. Cjepiva protiv krpelja mogu učinkovito spriječiti pojavu bolesti koje prenose krpelji kao što su infuzijska groznica, planinska groznica i Lassa groznica te imaju pozitivan zaštitni učinak na ljudsko zdravlje.

Osim cijepljenja protiv krpelja, važan čimbenik u prevenciji bolesti koje prenose krpelji je i imunitet organizma. Što je imunitet organizma jači, to se učinkovitije odupire bolestima koje prenose krpelji. Stoga trebamo posvetiti pozornost tjelovježbi, održavanju zdravlja i jačanju imuniteta u svakodnevnom životu. Na primjer, više tjelesnih vježbi, održavanje dobrih navika rada i odmora, zdrava prehrana i unos hranjivije hrane poput voća i povrća mogu učinkovito poboljšati naš imunitet.

Ukratko, cjepiva protiv krpelja usko su povezana s imunitetom. Cijepljenje protiv krpelja može ojačati ljudski imunitet i učinkovito spriječiti pojavu bolesti koje prenose krpelji. Istodobno, moramo paziti i na svakodnevne navike očuvanja zdravlja i jačanja imuniteta, kako bismo zaštitili svoj organizam od bolesti koje prenose krpelji. S ove točke gledišta, moramo poboljšati svoj imunitet. Cistanche može značajno poboljšati naš imunitet jer Cistanche ima i antivirusno i antikancerogeno djelovanje, što može ojačati sposobnost imunološkog sustava za borbu i poboljšati imunitet organizma.

Kliknite zdravstvene prednosti cistanche

Ključne riječi:

Kontrola krpelja; cjepivo; "izloženi" antigen; "skriveni" antigen.

1. Uvod

Krpelji su ektoparaziti koji mogu dvojako utjecati na svoje domaćine jer njihovo hematofagno ponašanje izravno utječe na domaćina, a njihova kompetencija kao vektora raznih patogena čini ove ektoparazite velikom prijetnjom zdravlju životinja i javnosti. Životinjska industrija je upoznata s krpeljima i bolestima koje se prenose krpeljima, kao što su anaplazmoza, erlihioza, babezioza i teilerioza, budući da se svake godine bilježe značajni ekonomski gubici uzrokovani mortalitetom i morbiditetom životinja, liječenjem bolesti i suzbijanjem krpelja. Trenutačno se glavna mjera kontrole krpelja i bolesti koje prenose krpelji (TTBD) sastoji od kemijskih proizvoda koji se izravno primjenjuju na životinje. Ovi proizvodi zagađuju tlo i proizvode životinjskog podrijetla te također doprinose otpornosti krpelja.

Ideja korištenja imuniteta domaćina i cijepljenja za borbu protiv krpelja nije nova. Korištenje prirodno stečenog imuniteta i homogenata žlijezda slinovnica (poznatih kao "izloženi" antigeni) kao izvora inducirane zaštite [1-3] bio je prvi korak u nastojanju da cjepiva postanu alternativna metoda kontrole krpelja. Od objavljivanja pionirskih studija Williama Tragera 1939. [3] i Allena i Humphreysa 1979. [4], provedeni su mnogi projekti za stvaranje cjepiva protiv krpelja. U potrazi za ovim ciljem, slijedili su se različiti putovi, ali stvarnost je da nakon što su 1990-ih godina puštena u promet cjepiva na bazi Bm86-, malo je kandidata doseglo faze prije stavljanja na tržište [5]. Komercijalizacija ovih cjepiva potaknula je znanstvenike da traže druge antigene koji mogu reproducirati ili čak nadmašiti učinke poznatog "probavnog proteina nepoznate funkcije" stočnog krpelja, Rhipicephalus (Boophilus) microplus.

Ovo otkriće usmjerilo je pozornost istraživačke zajednice na ideju da bi se "skriveni" antigen mogao koristiti za izazivanje snažnog imunološkog odgovora, a odatle pitanje da li i "izloženi" i "skriveni" antigeni predstavljaju potrebne uvjete za uključivanje u potencijalnom cjepivu protiv krpelja. Posljednjih godina, korisnost integracije jedne ili druge vrste antigena u cjepiva protiv krpelja raspravlja se u nizu različitih publikacija, u konsenzusu je da se "skriveni" antigeni definiraju kao oni koji su obično skriveni od imunološkog sustava domaćina i, "izloženi" antigeni se definiraju kao oni koji se izlučuju u slini krpelja tijekom pričvršćivanja i hranjenja, izazivajući imunološki odgovor. Domaćini imunizirani s "izloženim" antigenima potiču se trajnim kontaktom s krpeljima, dok cijepljenje s "prikrivenim" antigenima zahtijeva naknadne inokulacije kako bi se osigurala kontinuirana zaštita [6]. Nakon pokusa koje su proveli Allen i Humphreys [4], u kojima su zamorci i goveda bili imunizirani antigenima iz djelomično hranjenih crijeva Dermacentor andersoni i drugih unutarnjih organa, druga su izvješća pokazala da se prirodni imunitet životinja protiv zaraze krpeljima može poboljšati upotrebom homogenata krpelja iz uslijedili su cijeli krpelji ili određeni organi [7–9].

Godine 1988. Willadsen i Kemp okarakterizirali su "skriveni" antigen kao ključnu prednost u usporedbi s "izloženim" antigenima: nevjerojatnost da krpelji razviju imunološku evaziju [10]. Ubrzo nakon toga, ova je tvrdnja dodatno raspravljena i potkrijepljena eksperimentalnim testovima koji su uključivali Bm86 antigen [11,12]. Od tada je nekoliko "skrivenih" i "izloženih" (izlučenih) antigena razmatrano i analizirano, pokazujući jaka i slaba svojstva u kontroli zaraze krpeljima. Uz već spomenutu dobrobit prirodnog poticanja, postignutog korištenjem "izloženih" antigena, cjepiva formulirana s tim antigenima imaju i druge relevantne karakteristike: stimuliraju prirodno stečenu otpornost na hranjenje krpeljima i ciljaju različite molekule i/ili različite faze u usporedbi s cjepivima formuliranim sa "prikrivenim" antigenima [13]. Iz mnogih eksperimenata koji su provedeni, kako bi se testirali potencijalni kandidati za cjepivo, pojavila se nova ideja koja se sastojala od korištenja antigena koji pokazuju karakteristike koje nude i "izloženi" i "skriveni" tipovi, koji su nazvani, cjepiva s dvostrukim djelovanjem.

Upotrebom navodnog cementnog proteina krpelja (64P) iz Rhipicephalus appendiculatus kao antigena, dokazana je indukcija upalnog odgovora na mjestu hranjenja i istovremeno povećanje titra antitijela [14,15]. Kako su istraživanja napredovala, drugi "izloženi" i "skriveni" antigeni pokazali su potencijal kao kandidati za cjepivo, a neki su kombinirani kako bi se poboljšala učinkovitost cjepiva protiv različitih vrsta krpelja i protiv patogena koje prenose krpelji, kao što je Anaplasma sp. i Babesia sp. [16]. Prikupljajući relevantne informacije u vezi s istraživanjima koja su bila usmjerena na razvoj cjepiva protiv krpelja temeljenih na obje vrste antigena, publikacija Nuttall i sur. iz 2006. raspravljala je o optimalnim rekvizitima cjepiva i novim formulacijama te se bavila nužnošću razumijevanja odnosa između domaćina i parazita kako bi se identificirali prikladni kandidati za razvoj cjepiva, čineći ovaj rukopis "klasičnim radom" za istraživače koji rade na polju TTBD imunološke kontrole.

2. Otkriće

Put za smanjenje TTBD-a podržan integriranim mjerama, čiji su sastavni dio rekombinantna cjepiva, i dalje predstavlja glavno ograničenje: identifikacija zaštitnih antigena. Recenzija Nuttala i sur. (2006), prikuplja eksperimentalnu potporu za korištenje i "skrivenih" i "izloženih" antigena u razvoju cjepiva protiv krpelja, ističući nove mogućnosti kao što su cjepiva s dvostrukim djelovanjem i cjepiva za blokiranje prijenosa (osmišljena za blokiranje razvoja parazita unutar krpelja, smanjujući zaraznost krpelja i ograničavajući prijenos). Prikazana je definicija "izloženih" i "skrivenih" antigena i karakterizacija njihovog "načina djelovanja", s obzirom na imunološki odgovor domaćina.

Ako "izloženi" antigeni prirodno izazivaju imunološki odgovor domaćina djelovanjem dendritičnih stanica, koje obrađuju i prezentiraju te antigene T limfocitima, pokrećući imunološki odgovor posredovan stanicama ili protutijelima, "skrivene" one, koje se prirodno ne prezentiraju imunološki mehanizam domaćina, može izazvati snažan humoralni imunitet, stvarajući antitijela sposobna doseći i narušiti svoje ciljeve, što bi bilo štetno za preživljavanje krpelja [6,13]. Glavni problem s takozvanim "izloženim" antigenima je taj što tijekom hranjenja žlijezde slinovnice izlučuju mnoštvo bioaktivnih molekula kako bi nadvladale hemostatske, upalne i imunološke mehanizme domaćina [17], zbog čega je nevjerojatno da jedan antigen krpelja inducira učinkovit imunološki odgovor. S druge strane, "skriveni" antigeni imaju koristi od elementa iznenađenja na način na koji parazit nije "pripremljen" za blokadu tih skrivenih proteina, međutim, može biti potrebno ponavljanje pokretanja imunosnih mehanizama domaćina.

Klasični rad također iznosi popis testova koji su koristili dvije vrste antigena koji su objavljeni prije 2006. Naveden je primjer prethodno spomenutog Bm86 antigena, a ovom primjeru su drugi "skriveni" antigeni kao što je Vitellin, koji je testiran na R. microplus kod goveda. Drugi "skriveni" antigeni proučavani su u različitim okruženjima, na primjer, HLS1, HLS2 i P27/30, testirani protiv Haemaphysalis longicornis, Voraxin protiv Amblyomma hebraeum i 4D8 protiv Ixodes scapularis.

Paralelno, "izloženi" antigeni kao što su kalretikulin, protein koji veže imunoglobulin, protein koji veže histamin, P29, HL 34, RIM36 i 64TRP testirani su protiv različitih vrsta krpelja, Amblyomma americanum, D. variabilis i R. microplus, R appendiculatus, odnosno H. longicornis [6]. Općenito, rezultati su bili obeshrabrujući i nijedan nije dosegao fazu komercijalnog razvoja, iako su neki od njih testirani na govedima, što je slučaj za 64TRPs, koji je testiran protiv R. appendiculatus.

U to vrijeme poseban naglasak stavljen je na rekombinantne verzije kandidata za cjepivo 64P koje pokazuju ne samo humoralni nego i odgovor odgođenog tipa. U ovom slučaju, nakon imunizacije, oštećeni su pričvršćivanje krpelja, hranjenje i cjelovitost srednjeg crijeva, uzrokujući smrt krpelja. Još jedna prednost ovog antigena je činjenica da je izgrađen s više od jednog očuvanog epitopa, što povećava njegove šanse za učinkovitost. Napredujući od koncepta i otkrića u vezi s "izloženim" i "skrivenim" antigenima i cjepivima s dvostrukim djelovanjem i blokiranjem prijenosa, razmatrana je metoda ciljanja ne samo na kontrolu vektora, već i na inhibiciju ili smanjenje prijenosa patogena. R. appendiculatus 64TRP također je testiran u tom smislu, koristeći I. ricinus zaražen virusom krpeljnog encefalitisa (TBEV) na modelu miša, pokazujući obećavajuće rezultate.

U ovoj studiji, cijepljenje rekombinantnim proteinom ne samo da je oslabilo hranjenje krpelja i poremetilo crijeva krpelja, već je i zaštitilo miševe od smrtonosne infekcije TBEV-om. Autori su sugerirali da kontrola infekcije vjerojatno proizlazi iz interakcija na razini Langerhansovih stanica, koje igraju ulogu u prijenosu TBEV-a koji prenose krpelji i koje moduliraju komponenta(e) u slini krpelja [18]. S obzirom na napredak u tehnikama molekularne biologije u to vrijeme (genomika, transkriptomika i proteomika povezana s, na primjer, utišavanjem gena posredovanim interferencijom RNA) očekivalo se da će takve tehnologije biti ključne za izgradnju znanja o složenim interakcijama između krpelja, parazita , i domaćini koji u konačnici olakšavaju/pomažu prijedlog novih cjepiva protiv TTBD-a. Predstavljen je pristup sustavne biologije, naglašavajući prednosti proučavanja mreža koje podržavaju stanične funkcije [16].

3. Utjecaj

Šesnaest godina nakon objavljivanja, pregled pod nazivom "Izloženi i skriveni antigeni kao ciljevi cjepiva za kontrolu krpelja i bolesti koje prenose krpelji", Nuttall i sur., ostaje prekretnica. To nije zato što predstavlja revolucionarno otkriće, već zato što je to čvrsta zbirka dokaza koji podupiru različite istraživačke puteve koji se slijede u potrazi za učinkovitim cjepivima protiv krpelja i patogena koje prenose krpelji. Od tada je najmanje 68 različitih "izloženih" i/ili "skrivenih" antigena testirano u ispitivanjima cijepljenja protiv različitih vrsta krpelja s ciljem postizanja smanjenja infestacije krpeljima (Tablica 1) [19-59]. Atraktivna ideja o cjepivima za blokiranje prijenosa također je napredovala, a neke su studije uključile hipotezu da oštećenje antigena koji cilja krpelja također može utjecati na životni ciklus patogena koji se odvija unutar njegovog vektora (Tablica 1).

Uključenost žlijezda slinovnica u temeljni proces hranjenja krvlju i prijenosa patogena učinila ga je metom istraživanja. Također, pristup antitijelima domaćina proteinima srednjeg crijeva nastavio je stimulirati zanimanje za ovo tkivo, ali drugi antigeni otkriveni u jajniku ili jajima, kao što je CDK10/Cyclin-ovisna kinaza iz I. persulcatus [41] i enzim koji razgrađuje vitelin [23] i pro-katepsin u žumanjku, iz R. microplus [19] također su ispitani u ispitivanjima cijepljenja. Međutim, ako je postojala početna zabrinutost u vezi s klasifikacijom antigena prema izloženosti imunološkom sustavu domaćina, negdje usput istraživači su se počeli fokusirati na funkciju i ulogu biologije krpelja, a ne na takvu klasifikaciju.

Posljednjih godina, ono što možemo nazvati velikom revolucijom u omics pristupima, omogućilo je usporedbu genoma, transkriptoma, proteoma, au novije vrijeme i metaboloma različitih vrsta krpelja, tkiva, stadija, infekcija i statusa hranjenja među ostalima, što, povezano s tehnologijom RNA interferencije su, iz više akademske perspektive, proširili znanje o biologiji parazita, generirajući goleme količine informacija o interakcijama krpelja-domaćina-patogena i, u više primijenjenom pogledu, odredili relevantne molekule uključene u temeljne biološke procese krpelja koji se mogu pregledani kao zaštitni antigeni [60].

Katalozi gena i proteina koji su identificirani kao različito zastupljeni kao odgovor na određeno stanje javno su dostupni u spremištima i mogu se pregledati kao kandidati za cjepivo protiv krpelja, a njihov odabir određuju kriteriji istraživača. Iako raste svijest o potrebi stvaranja modela za analizu postojećih podataka, nažalost, ovi resursi, koji se mogu smatrati prvim korakom na putu prema otkrivanju pogodnih ciljeva, uglavnom su nedovoljno istraženi. Reverzna vakcinologija, koju je uveo Rino Rappuoli [61] također je primijenjena u razvoju cjepiva protiv krpelja, s razvojem bioinformatičkih cjevovoda dizajniranih za identifikaciju prikladnih meta [54,62,63].

Postupno je također postalo jasno da je potrebno analizirati i iskoristiti prednosti različitih antigena, epitopa, formulacija cjepiva i imunoloških odgovora domaćina kako bi se postigla učinkovita zaštita. Kombiniranjem antigena s dokazanom učinkovitošću i aktiviranjem različitih imunoloških mehanizama očekuje se sinergistički učinak na zaštitu. U poljskim uvjetima testirano je cjepivo sastavljeno od tri rekombinantna proteina krpelja, koje je samo dalo djelomičnu zaštitu protiv bakterije R. microplus kod zatvorenih goveda. Imunizacija cistein endopeptidazom koja razgrađuje vitelin (VTDCE), prokatepsinom žumanjka Boophilus (BYC) iz R. microplus i glutation S-transferazom iz H. longicornis (GST-Hl) rezultirala je povećanom razinom zaštite od infestacija R. microplus u usporedba s pojedinačnim antigenom [64].
Obećavajući antigen Subolesin (SUB) kombiniran je s njegovim ortologom Akirinom, što je rezultiralo visokom učinkovitošću cjepiva kod kunića protiv I. ricinus i D. reticulatus [65], a nedavno je objavljena studija koja pokazuje potencijal kombiniranja SUB s Bm{{ 1}} [66]. Ova strategija također je dovela do kombinacije SUB s antigenima patogena kako bi se postiglo cjepivo s dvostrukim učinkom. Cijepljenje s SUB/Anaplasma marginale glavnim površinskim proteinom 1a rezultiralo je značajnim smanjenjem infestacije krpeljima kod goveda i ovaca, kao i smanjenjem Babesia bigemina od 30 posto [67]. Osim toga, pokazalo se da je himera Q38 Subolesin/Akirin koja sadrži očuvane zaštitne epitope također antigen kandidat za kontrolu infestacija više vrsta krpelja [68]. Peptid ribosomskog proteina P{{10}} još je jedan antigen koji se trenutno razmatra za razvoj cjepiva. Unatoč tome što je dio konzerviranog proteina, upotrijebljeni peptidni slijed razlikuje se od ortologa domaćina kralježnjaka i visoko je očuvan među krpeljima. Peptidi su mali i stoga su slabo imunogeni, zahtijevaju molekule nosače kao adjuvans, dodajući kemijsku stabilnost i pojačavajući imunološki odgovor. Hemocijanin ključanice iz Megathura crenulata (KLH) korišten je zajedno s P0 i rezultati su pokazali visoku zaštitu od infestacije krpeljima [37,69,70] u različitim rodovima krpelja. Stoga se istražuje ideja da se pojedinačne učinkovitosti Bm86 i P0 mogu poboljšati konjugacijom obaju antigena [69-71] [37,69,70].

Veliki izazov otkrivanja antigena prikladnog za razvoj i komercijalizaciju cjepiva protiv krpelja ostaje i danas. Međutim, postignut je značajan napredak u identifikaciji i potvrđivanju kandidata, a antigeni koji pokazuju obećavajuće rezultate (osobito kod goveda, zbog važnosti TTBD-a u životinjskoj proizvodnji) poduprli su registraciju patenata. Na primjer, sam ili u savezu s Bm86, zaštitni antigen SUB je antigen u koji se polažu velike nade (patent US20050123554A1 i WO2014154847A1). Različite studije pokazale su pozitivne učinke protiv različitih ektoparazita i patogena člankonožaca, kao što je objavljeno za Plasmodium sp. [72] i za A. marginale koju prenose krpelji [38]. Godine 2009. rezultati imunizacije goveda feritinom 2 protiv I. ricinus podržali su zahtjev za patent (US8168763B2). Nedavno je otkriveno da cijepljenje s proteinom povezanim s membranom, Aquaporin, ima visoku učinkovitost kada se istraživalo u ispitivanjima cjepiva s pen [39], što je omogućilo registraciju patenta US20180085443A1 2017.

Zanimljivo je primijetiti da se potonji antigeni mogu klasificirati kao "skriveni", podupirući koncept da ne samo da su antigeni izlučeni slinom ("izloženi") antigeni dio imunološke ravnoteže koja se javlja između krpelja i domaćina, već i da su ti "skriveni" "molekule stimuliraju snažan pozitivan imunološki odgovor posredovan T stanicama i B stanicama. Bilo da je antigen "skriven" ili "izložen", identifikacija učinkovitog antigena samo je prvi korak u razvoju cjepiva. Posao koji slijedi nakon prepoznavanja kao prikladnog antigena za razvoj cjepiva uključuje najprije procjenu imunogenosti, kombinacije s adjuvansima i formulacijama cjepiva, odabir sustava isporuke nakon čega slijedi validacija cjepiva u kontroliranim i terenskim uvjetima. Ako svi prethodni koraci daju zadovoljavajuće rezultate, tada treba izvršiti proizvodnju velikih razmjera i komercijalizaciju.

Imunološka zaštita smatra se najodrživijom metodom kontrole krpelja i bolesti koje prenose krpelji, budući da zaobilazi nedostatke akaricida, naime pojavu otpornosti krpelja te kontaminaciju životinja i okoliša. Cijepljenje s "izloženim" i "skrivenim" antigenima krpelja iskorištava prednost ili prirodno stečenog ili umjetno induciranog humoralnog imunološkog odgovora, ali potrebno je više studija za razumijevanje specifičnih imunoloških odgovora koji ovise o širokom nizu čimbenika kao što su vrsta i/ili pasmina domaćina, dob domaćina, imunokompetentnost ili prethodna izloženost krpeljima. Za višestruki imunološki odgovor domaćina, raznolikost krpelja i posebnosti životnog ciklusa čine razvoj cjepiva protiv krpelja složenim izazovom [73,74], ali iako je put pred nama dug, članak Nuttalla i sur., objavljen 2006., je bitno štivo pri ulasku u svijet istraživanja krpelja.

Doprinosi autora:

Konceptualizacija SA i AD; pisanje—priprema izvornog nacrta, SA i AD; pisanje—pregled i uređivanje, SA i AD; vizualizacija, SA i AD Svi su autori pročitali i složili se s objavljenom verzijom rukopisa.

Financiranje:

Ovo istraživanje nije dobilo vanjska sredstva.

Izjava institucionalnog odbora za reviziju:

Nije primjenjivo.

Izjava o informiranom pristanku:

Nije primjenjivo.

Izjava o dostupnosti podataka:

Nije primjenjivo.

Zahvale:

Autori bi željeli zahvaliti FCT-u na financiranju Centra za istraživanje i razvoj, Globalnog zdravlja i tropske medicine (GHTM—UID/04413/2020).

Sukob interesa:

Autori izjavljuju da nema sukoba interesa.

Reference

1. Randolph, SE Regulacija populacije krpelja: Uloga stečene otpornosti kod prirodnih i neprirodnih domaćina. Parazitologija 1979, 79, 141–156. [CrossRef]

2. Brown, SJ Imunologija stečene otpornosti na krpelje. Parazitol. Danas 1985., 1, 166–171. [CrossRef] [PubMed]

3. Trager, W. Stečena imunost na krpelje. J. Parasitol. 1939, 25, 57. [Usprkos Ref]

4. Allen, JR; Humphreys, SJ Imunizacija zamoraca i goveda protiv krpelja. Nature 1979, 280, 491–493. [CrossRef] [PubMed]

5. de la Fuente, J.; Almazán, C.; Canales, M.; Pérez de la Lastra, JM; Kočan, KM; Willadsen, P. Desetogodišnji pregled učinkovitosti komercijalnog cjepiva za kontrolu infestacije krpeljima na govedu. Anim. Health Res. Rev. 2007, 8, 23–28. [CrossRef] [PubMed]

6. Nuttall, PA; Trimnell, AR; Kazimirova, M.; Labuda, M. Izloženi i skriveni antigeni kao meta cjepiva za kontrolu krpelja i bolesti koje prenose krpelji. Imunol protiv parazita. 2006, 28, 155–163. [CrossRef] [PubMed]

7. Johnston, LAY; Kemp, DH; Pearson, RD Imunizacija goveda protiv Boophilus microplus korištenjem ekstrakata dobivenih iz odraslih ženki krpelja: Učinci induciranog imuniteta na populaciju krpelja. Int. J. Parasitol. 1986, 16, 27–34. [CrossRef]

8. Kemp, DH; Agbede, RIS; Johnston, LAY; Gough, JM Imunizacija goveda protiv Boophilus microplus korištenjem ekstrakata dobivenih iz odraslih ženki krpelja: Hranjenje i preživljavanje parazita na cijepljenim govedima. Int. J. Parasitol. 1986, 16, 115–120. [CrossRef]

9. Opdebeeck, JP; Wong, JY; Jackson, LA; Dobson, C. Cjepiva za zaštitu Hereford goveda od goveđeg krpelja, Boophilus microplus. Imunologija 1988, 63, 363–367.

10. Willadsen, P.; Kemp, DH Cijepljenje "skrivenim" antigenima za kontrolu krpelja. Parazitol. Danas 1988., 4, 196–198. [CrossRef]

For more information:1950477648nn@gmail.com