2. DIO Antioksidacija i citoprotekcija akteozida i njegovih derivata: usporedba i mehanička kemija

Dio 2 Kako Cistanche Acteoside antioksidans štiti stanice?

Kliknite ovdje za 1. dio

Za više informacija kontaktirajte:Joanna.jia@wecistanche.com

Cistanche deserticola ima mnoge učinke, kliknite ovdje da biste saznali više

3. Rasprava

Poznato je da je antioksidativno djelovanje prirodnih fenolnih spojeva uključeno u prijenos elektrona (ET) [18,19]. Stoga su neki ET-temeljeni testovi redukcije metala naširoko korišteni za procjenu antioksidativnih razina fenola, kao što su FRAP i CUPRAC testovi. Smjernice FRAP testa moraju biti ispunjene s pH manjim od 3,6. Takvo kiselo okruženje uspješno je potisnulo H plus ionizaciju iz fenola; stoga se FRAP test smatra pukim ET procesom [20,21]. Učinkovitost odakteozidi njegovih derivata u FRAP testu implicira da, kada akteozid i njegovi derivati ​​djeluju kao antioksidansi, mogu koristiti put ET da ispolje svoje antioksidativno djelovanje.

Osim toga, proveli smo i CUPRAC test u puferu pH 7,4. Kao što se vidi u Suppl. 1,akteozidi njegovi derivati ​​su ovisno o dozi povećali svoj Cu^{2 plus}-smanjenje postotaka snage, što ukazuje da bi mogli ostati ET potencijal na fiziološkom pH. Međutim, njihovi ET potencijali smanjivali su se sljedećim redoslijedom:akteozid> forzitozid B > poliumozid (Tablica 1). Ova dinamika jasno sugerira da su apiozilni dio u forzitozidu B i ramnozilni dio u poliumozidu smanjili ET potencijal.

Kako bi se ispitala mogućnost da se ET pojavljuje tijekom procesa hvatanja radikala, u studiju je uveden slobodni radikal PTIO・ u središtu kisika. Dokazi cikličke voltametrije otkrili su da je PTIO・-čišćenje ispod pH 5.0 redoks reakcija jednog elektrona. Opažanje kojeakteozidi njegovi derivati ​​mogli bi učinkovito ukloniti PTIO・ radikal pri pH 4,5, sugerira mogućnost ET tijekom procesa uklanjanja radikala. Očito, ovo otkriće dodatno podupire gore navedene rezultate FRAP i CUPRAC testova, te prethodne rezultate da je donirajući elektron (e) značajka fenolnih antioksidansa [23].

Međutim, pri fiziološkom pH 7,4, PTIO・-čišćenje nije samo put ET, već uključuje i put prijenosa protona (H plus ). Tijekom procesa, PTIO・ je sugerirano da prihvati H^plusod fenola za proizvodnju vrhunca proizvoda ([PTIO-H]^plus). Jer H^plus-prijenos je uvijek popraćen ET u postupnim ili sinkronim mehanizmima [24], realan (ili konačni) proizvod je [PTIO-H] molekula [22]. PTIO・-čišćenje pri pH 7,4 (Dodatak 1) podrazumijeva daakteozida njegovi derivati ​​također posjeduju H plus -transfer potencijal. Vrijednosti IC50 (Tablica 1) pokazuju da relativni H^plus-transferni potencijali bili su silaznim redoslijedom odakteozid>forzitozid B > poliumozid. Jasno je da su apiozil i ramnozil dijelovi također oslabili H^plus-transferni potencijal tijekom antioksidativnog procesa.

Kao što je prethodno objašnjeno, tijekom antioksidativnog procesa fenola, ET obično prati proton (H^plus) prijenos kako bi se formiralo nekoliko antioksidativnih mehanizama [24], kao što je prijenos atoma vodika (HAT) [23,25-27], sekvencijalni prijenos elektron-proton (SEPT) [26,27], sekvencijalni gubitak protona jednog elektrona prijenos (SPLET) [26] i protonski spregnuti prijenos elektrona (PCET) [24-26,28]. Na primjer, ABTS plus • -čišćenje, reakcija u kojoj dominira prijenos jednog elektrona (SET) [29], također je nedavno dokazano da je pod utjecajem H plus razina [30]. ABTS plus • -čišćenje je stoga analiza antioksidansa koja se temelji na više putova [21,31]. Činjenica da seakteozidi njegovi derivati ​​mogli bi očistiti ABTS plus ・ radikale ukazuje na to da bi njihovo antioksidativno djelovanje također moglo biti posredovano višestrukim putevima. Ova hipoteza dodatno je potvrđena dokazima iz testa čišćenja DPPH・, reakcije koja uključuje HAT, ET, SEPT i PCET višestruke putove [26,32]. Međutim, kvantitativna analiza temeljena na IC₅₀vrijednosti (Tablica 1) otkrile su da u aspektima ABTS-a koji se temelji na više putova plus --čišćenja i DPPH*-čišćenja,akteozidbio je bolji od svog odgovarajućeg forzitozida B i ramnozid poliumozida. Prema tome, može se zaključiti da apiol i ramnozilni dijelovi na kraju ometaju višestruke potencijale (osobito ET i H^plus-transfer) tijekom procesa hvatanja slobodnih radikala.

Kao što su primijetili autori i drugi [14,26], tijekom antioksidativnog procesa može se pojaviti i RAF reakcija. Međutim, kako bi se potvrdila mogućnost RAF-a, tri fenilpropanoidna glikozida zajedno s kavenom kiselinom proučavana su pomoću UPLC-ESI-Q—TOF-MS/MS analize. Utvrđeno je da kafeinska kiselina daje dimerni produkt, dok tri fenilpropanoidna glikozida nisu proizvela vršnu količinu RAF produkta. Ovo otkriće jasno sugerira da tri fenilpropanoidna glikozida ne mogu proći RAF put kako bi ispoljili svoje antioksidativno djelovanje. Budući da se tri fenilpropanoidna glikozida mogu smatrati esterima kafeinske kiseline (Slika 1), takva razlika između kafeinske kiseline i estera kafeinske kiseline također ukazuje na to da veliki dio može spriječiti stvaranje RAF-a.

Sve zajedno, s aspekta hvatanja slobodnih radikala,akteozidi njegovi derivati ​​mogu proći više puta kako bi ispoljili svoje antioksidativno djelovanje. Ovi putovi antioksidansa barem su uključeni u ET i H plus prijenos (ali ne i RAF). Naša su otkrića djelomično poduprta teoretskom studijom kojaakteozidmogao djelovati antioksidativno putem SPLET puta. U procesu, akteozid bi mogao prvo deprotonirati (H^plus-transfer) da bi se dobio anion. Smatra se da se deprotonacija događa u kateholnim dijelovima slabe kiselosti. Naknadno, anion je donirao elektrone da bi nastao oblik fenoksi radikala [33]. Međutim, fenoksi radikali s pn konjugacijom stabilni su do neke mjere. Naravno, u tom smislu je u budućnosti potreban daljnji eksperimentalni rad.

Vrijedno je spomenuti da stanični oksidativni stres također može potjecati od prijelaznih metala (osobito Fe^{2 plus}). Fe^{2 plus}ion, međutim, može transformirati H₂O₂molekule u najštetnije •OH radikale Fentonovom reakcijom (Fe²plus plus H2O2 T Fe³plus plus ・OH plus OH^-). Stoga slabljenje Fe²plus razine mogu učinkovito inhibirati ・OH radikale za oslobađanje staničnog oksidativnog stresa. Zapravo, keliranje željeza prirodnim fenolnim antioksidansima sada je razvijeno u učinkovitu terapiju za neke bolesti uzrokovane oksidativnim stresom [34,35].

U ovoj studiji, akteozid i njegovi derivati ​​su predloženi kao učinkoviti Fe^{2 plus}-kelatore promjenama spektroskopije i boja otopine (slika 2). Ipak, akteozid je inferioran u odnosu na dva glukozida u keliranju Fe^{2 plus}a forzitozid B s apiozilnim ostatkom je inferioran poliumozidu s ramnozilnim ostatkom. Na temelju usporedbe njihovih preferencijalnih konformacija (Slika 1, desno), predlaže se da apiozil (ili ramnozil) dio može pomoći glavnom ligandu (fenilpropanoidna skupina) u keliranju Fe^{2 plus}. Takav sinergijski učinak nedvojbeno jača Fe^{2 plus}-sposobnost keliranja i povećava UV-vis vrhove. Međutim, ramnozil je učinkovitiji od apiozila u svom Fe^{2 plus}- sposobnost keliranja. Razlika se može pripisati činjenici da se ramnozil pojavljuje u egzocikličkom obliku (tj. aL-ramnopiranozil), dok je apiozil u pentacikličkom obliku (tj. pD-apiofuransil). Poznato je da je egzociklički oblik veći i stabilniji. Stoga je egzociklički ramnozil učinkovitiji u usporedbi s pentacikličkim apiozilom u svom Fe^{2 plus}- sposobnost keliranja.

Kako bismo testirali mogu li akteozid i njegovi derivati ​​ukloniti ROS, proveli smo test autooksidacije pirogalola. Kao što se vidi u Suppl. 1, svi bi mogli učinkovito čistiti — radikal, tipični ROS koji se pojavljuje u stanicama. Međutim, relativna bioaktivnost se smanjivala redoslijedom poliumozid > forzitozid B >akteozid. Ovaj redoslijed je također paralelan s redoslijedom citoprotektivnih učinaka (Tablica 2). Ovo otkriće ukazuje na to da je opći učinak ramnozilnog ostatka ili apiozilnog ostatka pojačati ROS-hvatajuće ili citoprotektivne učinke.

4. Materijali i metode

4.1. Kemikalije i životinje

Akteozid (CAS broj: 61276-17-3, 97 posto), forzitozid B (CAS broj: 81525-13-5, 97 posto) dobiveni su od BioBioPha (Kunming, Kina, Suppl. 3). Poliumozid (CAS broj: 94079-81-9, 97 posto) naš je tim izolirao iz tradicionalne kineske biljkeCallicarpa periHT Chang (Dodatak 3). DPPH・,(±)-6-hidroksil-2,5,7,8-tetrametilkroman-2-karboksilna kiselina (Trolox), 2,9-dimetil{{ 9}},10-fenantrolin (neokuproin), 2,4,6-tripiridiltriazin (TPTZ) i pirogalol kupljeni su od Sigma-Aldrich Shanghai Trading Co. (Šangaj, Kina). (NHq'ABTS [2,2'-azino-bis (3-etilbenzen-tiazolin-6-sulfonska kiselina diamonijeva sol)] dobivena je od Amresco Chemical Co. (Solon, OH, SAD). PTIO・radikal je kupljen od TCI Development Co., Ltd. (Šangaj, Kina). Kafeinska kiselina je kupljena od Nacionalnog instituta za kontrolu farmaceutskih i bioloških proizvoda (Peking, Kina). Dulbeccov modificirani Eagleov medij (DMEM), fetalni goveđi serum (FBS) i tripsin nabavljeni su od Gibco (Grand Island, NY, SAD). Komplet za ispitivanje AnnexinV/propidium jodid (PI) kupljen je od Invitrogena (Carlsbad, CA, SAD). Svi ostali reagensi bili su analitičke kvalitete.

Štakori Sprague-Dawley (SD) stari 4 tjedna dobiveni su iz Centra za životinje Kineskog medicinskog sveučilišta Guangzhou. Protokol ovog eksperimenta proveden je pod nadzorom Institucionalnog odbora za etiku životinja na kineskom Sveučilištu Guangzhou (broj odobrenja 20170306A).

4.2. Testovi redukcije metala (FRAP& CUPRAC)

Ispitivanja redukcije metala uključuju Fe^{3 plus}-test reducirajuće snage i Cu^{2 plus}-provjera reducirajuće snage. Fe^{3 plus}-redukcijski test uspostavili su Benzie i Strain i službeno je nazvan FRAP [20]. Eksperimentalni protokol ovog testa opisan je u prethodnom izvješću [9]. Ukratko, FRAP reagens je pripremljen svježe miješanjem 10 mM TPTZ, 20 mM FeCl_3,i {{0}}.25 M acetatni pufer u omjeru 1:1:10 na pH 3,6. Ispitni uzorak (x=4-20 L, 0,05 mg/mL) dodan je u (20 — x) 95 postotnog etanola, a zatim 80 RL FRAP reagensa. Nakon 30-min inkubacije na sobnoj temperaturi, apsorbancija je izmjerena na 595 nm pomoću čitača mikropločica (Multiskan FC, Thermo Scientific, Šangaj, Kina). Relativna redukcijska moć uzorka izračunata je pomoću sljedeće formule:

gdje_maxbila je maksimalna apsorbancija reakcijske smjese s uzorkom, a A_minje minimalna apsorbancija u ispitivanju. A je apsorbancija uzorka.

Cu^{2 plus}-smanjujuća moć također može karakterizirati razinu antioksidansa i stoga se naziva CUPRAC. Ovaj je test proveden u skladu s prethodno objavljenom metodom [36]. Ukratko, 12 RL vodene otopine CuSOq (10 mmol/L), 12 RL etanolne otopine neokuproina (7,5 mmol/L) i (75 — x) RL CH₃COONH₄puferska otopina ({{0}}.1 mol/L, pH 7,5) dodana je u jažice s različitim volumenima uzorka (0,05 mg/mL, 4-20 |^L). Apsorbancija na 450 nm nakon 30 minuta izmjerena je korištenjem gore spomenutog čitača mikropločica. Relativna CUPRAC snaga izračunata je pomoću formule za FRAP. A_maxbila je maksimalna apsorbancija reakcijske smjese s uzorkom, a A_minje minimalna apsorbancija u ispitivanju. A je apsorbancija uzorka.

4.3. PTI0・- Ispitivanje čišćenja

Testovi uklanjanja PTIO* (pri pH 4,5 ili pH 7,4) provedeni su na temelju naše metode [16]. Ukratko, otopina ispitnog uzorka (x=0-20 ^L, 1 mg/mL za pH 4,5 i {{10}},5 mg/mL za pH 7,4) dodana je u (20 — x) rL 95 postotnog etanola, nakon čega slijedi 80 RL vodene otopine PTIO*. Vodena otopina PTIO* pripravljena je pomoću otopine fosfat-maslac (0,1 mM, pH 4,5 ili pH 7,4). Smjesa je održavana na 37 stupnjeva 2 h, a apsorbancija je zatim izmjerena na 560 nm korištenjem gore spomenutog čitača mikropločica. Postotak inhibicije PTIO* izračunat je na sljedeći način:

gdje je A stupanj apsorbancija kontrole bez uzorka, a A je apsorbancija reakcijske smjese s uzorkom.

4.4. ABTSplus*-Čišćenje i DPPH*- Ispitivanja čišćenja

ABTS*^plus-aktivnost čišćenja procijenjena je prema metodi [37]. ABTS plus * proizveden je miješanjem 0.2 mL ABTS diamonijeve soli (7,4 mmol/L) s 0.2 mL kalijevog persulfata (2,6 mmol/L). Smjesa je držana u mraku na sobnoj temperaturi 12 h kako bi se omogućilo dovršenje stvaranja radikala prije nego što se razrijedi destiliranom vodom (u omjeru od približno 1:20) tako da je njezina apsorbancija na 734 nm bila { {16}}.35 土 0.01 koristeći gore spomenuti čitač mikropločica. Da bi se odredila aktivnost čišćenja, ispitni uzorak (x=4-20 RL, 0,05 mg/mL) dodan je u (20 — x) RL destilirane vode, a zatim 80 RL ABTS plus * reagensa, a apsorbancija na 734 nm je izmjeren 3 minute nakon početnog miješanja, koristeći destiliranu vodu kao slijepu probu.

DPPH* aktivnost hvatanja radikala određena je kako je prethodno opisano [18]. Ukratko, 75 RL otopine DPPH* (0.1 rM) pomiješano je s navedenim koncentracijama uzorka (0.025 mg/mL, 5-25 RL) otopljenim u metanolu. Smjesa je držana na sobnoj temperaturi 30 minuta, a apsorbancija je izmjerena na 519 nm pomoću gore spomenutog čitača mikropločica.

Postoci ABTS plus •-aktivnosti hvatanja i DPPH*-aktivnosti hvatanja izračunati su na temelju formule prikazane u odjeljku 4.3.

4.5. UPLC—ESI—Q-TOF—MS/MS analiza PPH* Reakcijski proizvodi

Ova se metoda temelji na našoj prethodnoj studiji [25]. Metanolna otopina akteozida pomiješana je s otopinom DPPH* radikala u metanolu u molarnom omjeru 1:2, a dobivena smjesa inkubirana je 24 sata na sobnoj temperaturi. Smjesa proizvoda je zatim filtrirana kroz 0.22-Rm filter i analizirana pomoću UPLC sustava opremljenog C18 kolonom (2.0 mm id x 100 mm, 1,6 Rm, Phenomenex, Torrance, CA, SAD). Mobilna faza korištena je za eluiranje sustava i sastojala se od smjese metanola (faza A) i vode (faza B). Kolona je eluirana pri brzini protoka od 0,3 mL/min sa sljedećim gradijentnim programom eluiranja: 0-10 min, 60-100 posto A; 10-15 min, 100 posto A. Volumen ubrizgavanja uzorka postavljen je na 1 RL za odvajanje različitih komponenti. ESI-Q-TOF-MS/MS analiza provedena je korištenjem Triple TOF 5600plusMaseni spektrometar (AB SCIEX, Framingham, MA, SAD) opremljen ESI izvorom, koji je radio u načinu negativne ionizacije. Raspon skeniranja postavljen je na 100-2000 Da. Sustav je radio sa sljedećim parametrima: napon ionskog raspršivanja, —4500 V; grijač izvora iona, 550 stupnjeva C; zavjesni plin (CUR, N2), 30 psi; plin za raspršivanje (GS1, zrak), 50 psi; Tis plin (GS2, zrak), 50 psi. Potencijal deklasterizacije (DP) postavljen je na —100 V, dok je energija sudara (CE) postavljena na —40 V s rasponom energije sudara (CES) od 20 V. RAF proizvodi

su kvantificirani ekstrakcijom odgovarajuće molekularne formule iz ukupnog ionskog kromatograma (Dodatak 2).

Prethodno spomenuti eksperiment ponovljen je korištenjem forzitozida B, podijumske strane i kavene kiseline. Odgovarajućim/zvrhovi su ekstrahirani iz odgovarajuće molekulske formule iz ukupnog ionskog kromatograma (Dodatak 2).

4.6. Analiza UV-Vis-spektra Fe^{2 plus}-Kelirajući proizvodi

Fe^{2 plus}-produkti reakcije keliranja akteozida-Fe^{2 plus}procijenjeni su pomoću UV-Vis-spektroskopije [13]. Za pokus, 300 metanolne otopine akteozida (0,24 mM) dodano je u 700 mL vodene otopine FeCl? 4H20 (168 mM). Otopina je zatim snažno miješana. Potom je dobivena smjesa skenirana pomoću UV-Vis spektrofotometra nakon sat vremena (Unico 2600A, Šangaj, Kina) od 200-850 nm.

Prethodno spomenuti eksperiment je ponovljen korištenjem forzitozida B, ili podijumske strane, umjesto akteozida.

4.7. Test autooksidacije pirogalola za superoksidni anion (•O2~) Čišćenje

Mjerenje aktivnosti čišćenja superoksidnog aniona (・.{{0}}) temeljilo se na našoj metodi [17]. Ukratko, uzorak je otopljen u etanolu od 1 mg/mL. Otopina uzorka (x rL) pomiješana je s Tris-HCl puferom (980 — x rL, 0,05 M, pH 7,4) koji sadrži EDTA (1 mM). Kada je dodano 20 uL pirogalola (60 mM u 1 mM HCl), smjesa je odmah protresena na sobnoj temperaturi. Apsorpcija na 325 nm smjese je mjerena (Unico 2100, Shanghai, Kina) u odnosu na Tris-HCl pufer kao slijepa proba svakih 30 s tijekom 5 minuta. — Sposobnost čišćenja izračunata je na sljedeći način:

4.8. Citoprotektivni učinak prema bmMSC-ima pod oksidativnim stresom (MTT analiza)

BmMSC su uzgojeni u skladu s našim prethodnim izvješćima [38] s malim izmjenama. Ukratko, koštana srž je dobivena iz femura i tibije štakora. Uzorci koštane srži razrijeđeni su s DMEM (low glucose) koji je sadržavao 10 posto FBS. BmMSC su pripremljeni gradijentnim centrifugiranjem na 900 g tijekom 30 minuta na 1,073 g/mL Percolla. Pripremljene stanice su odvojene tretmanom s 0,25 posto tripsina i prenesene u tikvice s kulturama pri 1 x 104/cm². BmMSC na prolazu 3 procijenjeni su na homogenost kultiviranih stanica pomoću detekcije CD44 pomoću MTT testa [39].

MTT test korišten je za procjenu citoprotektivnog učinka akteozida i njegovih derivata prema bmMSC [40]. Model ozljede uspostavljen je na temelju prethodne studije [41]. Protokol eksperimenta ukratko je ilustriran na slici 3.

4.9. Statistička analiza

Svaki pokus u odjeljcima 4.2-4.4 i 4.7 izveden je u tri primjerka, a pokus MTT analize izveden je u pet primjeraka. Podaci su zabilježeni kao srednja vrijednost土SD (standardna devijacija). Krivulje doza-odgovor iscrtane su pomoću profesionalnog softvera Origin 6.0 (OriginLab, Northampton, MA, SAD). Vrijednost IC50 definirana je kao konačna koncentracija od 50 posto inhibicije radikala (relativna snaga redukcije) [42]. Statističke usporedbe napravljene su jednosmjernom ANOVA kako bi se otkrile značajne razlike korištenjem SPSS 13.0 (SPSS Inc., Chicago, IL, SAD) za Windows.p< 0.05 smatra se statistički značajnim.

5. Zaključci

Tri prirodna fenilpropanoidna glikozida, naime, akteozid, forzitozid B i podium side, mogu biti uključeni u višestruke puteve ispoljavanja antioksidativnog djelovanja, uključujući ET, H plus -prijenos; i Fe^{2 plus}-keliranje, ali ne RAF. ET i H^plus-putovi prijenosa mogu biti ometeni ramnozilnim ostatkom ili apiozilnim ostatkom; međutim, Fe^{2 plus}-put keliranja može se poboljšati ostacima šećera (osobito ramnozilnom skupinom). Opći učinak ramnozilnog ostatka ili apiozilnog ostatka je da pojača sposobnost uklanjanja ROS-a koja uključuje više puta. Stoga su forzitozid B i poliumozid superiorniji od akteozida u citoprotektivnim učincima.

Dopunski materijali:Dodatni materijali dostupni su na internetu. 1. Krivulje doza-odgovor; 2. HPLC-MS spektri; 3. Potvrde o analizi akteozida, forzitozida B i poliumozida.

Zahvale:Ovaj rad podržali su Nacionalna znanstvena zaklada Kine (81573558, 81603269), Projekt znanosti i tehnologije Guangdonga (2017A050506043) i Zaklada prirodnih znanosti provincije Guangdong (2 017A030312009, 2015A030310491).

Doprinosi autora:Xian Li i Dongfeng Chen osmislili su i dizajnirali eksperimente; Aichi Wu je pripremio poliumozid; Yulu Xie, Qian Guo i Penghui Xue izveli su eksperimente s antioksidansima; Ke Li i Wei Zhao izveli su MTT eksperimente; Hong Xie je analizirao podatke; Jiasong Guo je proveo eksperiment na slici 2D; Xian Li je napisao rad. Svi su autori pročitali i odobrili konačni rukopis.

Sukob interesa:Autori izjavljuju da nema sukoba interesa.

akteoziducistanche

A kratice

ABTS plus • 2,2'-azino-bis (3-etilbenzo-tiazolin-6-sulfonska kiselina) radikal

bmMSC mezenhimalne matične stanice dobivene iz koštane srži

CUPRAC bakar koji smanjuje antioksidativni kapacitet

dAMP 2'-deoksiadenozin-5'-monofosfatni radikal

DMEM Dulbeccov modificirani Eagleov medij

dGMP 2^/-deoksigvanozin-5'-monofosfatni radikal

DPPHe 1,1-difenil-2-pikril-hidrazinski radikal

ET prijenos elektrona; FBS: Fetalni goveđi serum

FRAP feri ion koji smanjuje antioksidacijsku snagu;

HAT prijenos atoma vodika

MTT 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difenil

PCET protonski spregnuti prijenos elektrona

PTIOe 2-fenil-4,4,5,5-tetrametilimidazolin-1-oksil 3-oksidni radikal

Stvaranje adukta RAF radikala

ROS reaktivne vrste kisika

SCNT prijenos jezgre somatske stanice

SEPT sekvencijalni prijenos elektron-proton

SPLET sekvencijalni gubitak protona prijenos jednog elektrona

TPTZ 2,4,6-tripiridil triazin

Trolox (±)-6-hidroksil-2,5,7,8-tetrametilkroman-2-karboksilna kiselina

Reference

1. Kubica, P.; Szopa, A.; Ekiert, H. Proizvodnja verbaskozida i fenolnih kiselina u biomasi Verbena Officinalis L. (verbene) uzgojene u različitim in vitro uvjetima. Nat. proizvod Res. 2017, 31, 1663-1668.

2. Lee, JH; Chun, JL; Kim, KJ; Kim, EY; Kim, DH; Lee, BM; Han, KW; Park, KS; Lee, KB; Kim, MK Učinak akteozida kao zaštitnika stanica za proizvodnju kloniranog psa. PLoS ONE 2016,11, e0159330.

3. Wang, HQ; Xu, YX; Yang, J.; Zhao, XY; Sunce, XB; Zhang, YP; Guo, JC; Zhu, CQ Acteoside štiti stanice ljudskog neuroblastoma SH-SY5Y od |3-amiloida inducirane ozljede stanica. Brain Res. 2009,1283,139-147.

4. Yang, JH; Yan, Y.; Liu, HB; Wang, JH; Hu, JP Zaštitni učinci akteozida protiv oštećenja izazvanih rendgenskim zrakama u fibroblastima ljudske kože. Mol. Med. Rep. 2015, 12, 2301-2306.

5. Liu, CH; Liu, TS; Luo, CQ; Zhang, J.; Zeng, XY; Cui, L.; Xie, LJ Određivanje forzitiazida B i poliumozida u različitim podrijetlima i dijelovima iz Callicarpa kwangtungensis. Zhongguo Zhong Yao Za Zhi 2013, 38, 3324-3326.

6. Jiang, WL; Tian, ​​JW; Fu, FH; Zhu, HB; Hou, J. Neuroprotektivna učinkovitost i terapeutski prozor forzitozida B: Ina štakorski model cerebralne ishemije i reperfuzijske ozljede. Eur. J. Pharmacol. 2010, 640, 75-81.

7. Pan, N.; Hori, H. Antioksidativno djelovanje akteozida i njegovih analoga na peroksidaciju lipida. Redox Rep. 1996, 2, 149-154.

8. Zheng, RL; Shi, YM; Jia, ZJ; Zhao, CY; Zhang, Q.; Tan, XR Brzi popravak DNK radikala. Chem. Soc. Rev. 2010, 39, 2827-2834.

9. Li, XC; Mai, WQ; Chen, DF Kemijska studija o zaštitnom učinku protiv oštećenja DNA izazvanih hidroksilnim skupinama i antioksidativnog mehanizma miricitrina. J. Chin. Chem. Soc. 2014, 61, 383-390.

10. Shi, YM; Wang, WF; Huang, CY; Jia, ZJ; Yao, S.; Zheng, RL Brzo popravljanje oksidativnog oštećenja DNA fenilpropanoidnim glikozidima i njihovim analozima. Mutagenesis 2008, 23, 19-26.

11. Jiang, Q.; Li, XC; Tian, ​​YG; Lin, QQ; Xie, H.; Lu, WB; Chi, YG; Chen, DF Liofilizirani vodeni ekstrakti Mori Fructusa i Mori Ramulusa štite mezenhimske matične stanice od oštećenja tretiranih eOH-om: Biotest i antioksidativni mehanizam. BMC komplement. Alternativa. Med. 2017, 17, 242.

12. Wang, TT; Zeng, GC; Li, XC; Zeng, HP In Vitro studije o antioksidativnom i zaštitnom učinku 2-supstituiranih-8-derivata hidroksikinolina protiv H2O2-induciranog oksidativnog stresa u BMSC-ima. Chem. Biol. Drug Des. 2010, 75, 214-222.

13. Liu, JJ; Li, XC; Lin, J.; Li, YR; Wang, TT; Jiang, Q.; Chen, DF Sarcandra Glabra (Caoshanhu) štiti mezenhimalne matične stanice od oksidativnog stresa: Bioevaluacija i mehanička kemija. BMC komplement. Alternativa. Med. 2016, 16, 423.

14. Li, XC; Han, L.; Li, YR; Zhang, J.; Chen, JM; Lu, WB; Zhao, XJ; Lai, YT; Chen, DF; Wei, G. Zaštitni učinak sinapina protiv oštećenja mezenhimskih matičnih stanica izazvanih hidroksilnim radikalima i mogućih mehanizama. Chem. Pharm. Bik. 2016, 64, 319-325.

15. Bertolo, A.; Capossela, S.; Frankl, G.; Baur, M.; Potzel, T.; Stoyanov, J. Oksidativni status predviđa kvalitetu ljudskih mezenhimalnih matičnih stanica. Matične stanice Res. Ther. 2017, 8, 3.

16. Li, XC 2-Fenil-4,4,5,5-Tetrametilimidazolin-1-oksil 3-oksid (PTIOe) uklanjanje radikala: novi i jednostavni antioksidans Test in vitro. J. Agric. Food Chem. 2017, 65, 6288-6297.

17. Li, X. Poboljšana metoda autooksidacije pirogalola: pouzdan i jeftin test uklanjanja superoksida prikladan za sve antioksidanse. J. Agric. Food Chem. 2012, 60, 6418-6424.

18. Li, XC; Jiang, Q.; Wang, TT; Liu, JJ; Chen, DF Usporedba antioksidativnih učinaka kvercitrina i izokvercitrina: razumijevanje uloge 6〃-OH skupine. Molecules 2016, 21,1246.

20. Leopoldini, M.; Marino, T.; Russo, N.; Toscano, M. Antioksidativna svojstva fenolnih spojeva: H-atom u odnosu na mehanizam prijenosa elektrona. J. Phys. Chem. A 2004, 108, 4916^922.

20. Benzie, IFF; Strain, JJ. Sposobnost plazme za smanjenje željeza (FRAP) kao mjera "antioksidativne snage": FRAP test. analno Biochem. 1996, 239, 70-76.

21. Gulcin, I. Antioksidativna aktivnost sastojaka hrane: pregled. Arh. Toxicol. 2012., 86, 345-391.

23. Goldstein, S.; Russo, A.; Samuni, A. Reakcije PTIO i karboksi-PTIO s ・NO, ・NO2 i O2. J. Biol. Chem. 2003, 278, 50949-50955.

23. Li, X.; Han, WJ; Mai, WQ; Wang, L. Antioksidativna aktivnost i mehanizam tetrahidroamentoflavona in vitro. Nat. proizvod Komun. 2013, 8, 787-789.

24. Zhang, HY; Wu, W.; Mo, YR Studija protonsko spregnutog prijenosa elektrona (PCET) s četiri eksplicitna dijabatska stanja na ab initio razini. Računanje. Teor. Chem. 2017, 1116, 50-58.

25. Lin, J.; Li, XC; Chen, L.; Lu, WZ; Chen, XW; Han, L.; Chen, DF Zaštitni učinak protiv oštećenja DNA izazvanih hidroksilnim radikalima i antioksidativni mehanizam [6]-gingerola: kemijska studija. Bik. Korean Chem. Soc. 2014, 35, 1633-1638.

26. Iuga, C.; Alvarez-Idaboy, JR; Russo, N. Antioksidativna aktivnost trans-resveratrola prema hidroksilnim i hidroperoksilnim radikalima: studija kvantne kemije i računalne kinetike. J. Org. Chem. 2012, 77, 3868-3877. [CrossRef] [PubMed]

27. Li, XC; Hu, QP; Jiang, SX; Li, F.; Lin, J.; Han, L.; Hong, YL; Lu, WB; Gao, YX; Chen, DF Flos Chrysanthemi Indici Štiti od hidroksil-induciranih oštećenja DNA i MSC putem antioksidativnog mehanizma. J. Saudi Chem. Soc. 2015, 19, 454-460.

28. Amić, A.; Marković, Z.; Marković, JMD; Stepanić, V.; Lučić, B.; Amic, D. Prema poboljšanom predviđanju sposobnosti flavonoida za uklanjanje slobodnih radikala: značaj dvostrukih PCET mehanizama. Food Chem. 2014, 152, 578-585.

29. Lee, CH; Yoon, JY UV izravna fotoliza 2,2'-i-bis(3-etilbenzotiazolin-6-sulfonata) (ABTS) u vodenoj otopini: Kinetika i mehanizam. J. Photochem. Photobiol. A 2008, 197, 232-238.

30. Aliaga, C.; Lissi, EA Reakcija radikala izvedenih iz 2,2'-azinobis(3-etilbenzotiazolin-6-sulfonske kiseline (ABTS) s hidroperoksidima. Kinetika i mehanizam. Int. J. Chem. Kinet. 1998, 30, { {8}}.

32. Osman, AM; Wong, KKY; Fernyhough, A. ABTS Oksidacija polifenola vođena radikalima: Izolacija i strukturno objašnjenje kovalentnih adukata. Biochem. Biophys. Res. Komun. 2006, 346, 321-329.

32. Osman, AM Višestruki putovi reakcije 2,2-difenil-1-pikrilhidrazil radikala (DPPHe) s (plus)-katehinom: dokazi za stvaranje kovalentnog adukta između DPPHe i oksidiranog oblika polifenola. Biochem. Biophys. Res. Komun. 2011, 412, 473-478.

33. Lopez-Munguia, A.; Hernandez-Romero, Y.; Pedraza-Chaverri, J.; Miranda-Molina, A.; Regla, I.; Martinez, A.; Castillo, E. Analozi fenilpropanoidnih glikozida: enzimska sinteza, antioksidativna aktivnost i teorijska studija njihovog mehanizma hvatanja slobodnih radikala. PLoS ONE 2011, 6, e20115.

34. Perron, NR; Brumaghim, JL Pregled antioksidativnih mehanizama polifenolnih spojeva koji se odnose na vezanje željeza. Cell Biochem. Biophys. 2009, 53, 75-100.

35. Devos, D.; Moreau, C.; Devedjian, JC; Kluza, J.; Perrault, M.; Laloux, C.; Jonneaux, A.; Ryckewaert, G.; Garcon, G.; Rouaix, N.; et al. Ciljanje kelirajućeg željeza kao terapeutskog modaliteta kod Parkinsonove bolesti. Antioksid. Redox signal. 2014, 21, 195-210.

36. Čekić, SD; Baškan, KS; Totem, E.; Apak, R. Test modificiranog bakrenog smanjenja antioksidativnog kapaciteta (CUPRAC) za mjerenje antioksidativnih kapaciteta proteina koji sadrže tiol u smjesi s polifenolima. Talanta 2009, 79, 344-351.

37. Li, XC; Chen, DF; Mai, Y.; Wen, B.; Wang, XZ Podudarnost između antioksidativnih aktivnosti in vitro i kemijskih komponenti Radix Astragali (Huangqi). Nat. proizvod Res. 2012, 26, 1050-1053.

38. Chen, DF; Li, XC; Xu, ZW; Liu, XB; Du, SH; Li, H.; Zhou, JH; Zeng, HP; Hua, ZC Heksadekanska kiselina iz dekokcije Buzhong Yiqi izazvala je proliferaciju mezenhimskih matičnih stanica koštane srži. J. Med. Hrana 2010, 13, 967-975.

39. Li, X.; Liu, JJ; Lin, J.; Wang, TT; Huang, JY; Lin, YQ; Chen, DF Zaštitni učinci dihidromiricetina protiv »OH-induciranih oštećenja mezenhimskih matičnih stanica i mehanička kemija. Molecules 2016, 21, 604.

40. Wang, GR; Li, XC; Zeng, HP sinteza, antioksidacijska aktivnost (E)-9-p-tolil-3-2-(8-hidroksi-kinol- 2-il)vinil-karbazola i (E){{8 }}(p-Anisil)-3-2-(8-hidroksi-kinol-2-il)vinil-karbazol i njihova indukcija proliferacije mezenhimskih matičnih stanica. Acta Chim. Grijeh. 2009, 67, 974-982.

41. Li, X.; Wei, G.; Wang, X.; Liu, D.; Deng, R.; Li, H.; Zhou, J.; Li, Y.; Zeng, H.; Chen, D. Ciljanje puta Shh putem atraktilenolida potiče hondrogenu diferencijaciju mezenhimalnih matičnih stanica. Biol. Pharm. Bik. 2012, 35,1328-1335.

42. Li, XC; Gao, YX; Li, F.; Liang, AF; Xu, ZM; Bai, Y.; Mai, WQ; Han, L.; Chen, DF Maclurin štiti mezenhimalne matične stanice od oštećenja izazvanih hidroksilnim radikalima: procjena antioksidansa i mehanički uvid. Chem. Biol. Interakcija. 2014, 219, 221-228.

Dostupnost uzorka: Uzorak spoja poliumozida dostupan je od autora.

© 2018 autora. Vlasnik licence MDPI, Basel, Švicarska. Ovaj je članak članak s otvorenim pristupom koji se distribuira prema odredbama i uvjetima licence Creative Commons Attribution (CC BY) (http:ZZcreativecommons.org/licenses/byZ4.0Z).