Neuroprotektivni učinci četiri feniletanoidna glikozida na H2O2-induciranu apoptozu na PC12 stanicama putem Nrf2/ARE puta
Mar 04, 2022
Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-pošta:audrey.hu@wecistanche.com
Maiquan Li 1, Tao Xu 1, Fei Zhou 1, Mengmeng Wang 1, Huaxin Song 1, Xing Xiao i Baiyi Lu 1,*
1. Uvod
Oksidativni stres, koji je neravnoteža homeostaze antioksidansa, izaziva peroksidaciju lipida, oštećenje proteina i DNK, starenje stanica i smrt stanica. Ovaj proces vjerojatno pridonosi nekoliko neurodegenerativnih poremećaja, kao što su Alzheimerova bolest (AD), Parkinsonova bolest (PD) i ishemija/reperfuzija [1]. Vodikov peroksid (H2O2), koji je jedna od glavnih reaktivnih vrsta kisika (ROS), poznato je da uzrokuje peroksidaciju lipida i oštećenje DNA [2]. Štoviše, H2O2 je endogeni izvor slobodnih hidroksilnih radikala koji pridonose pozadinskoj razini staničnog oksidativnog stresa [3,4]. Stoga terapijske strategije za sprječavanje apoptoze izazvane oksidativnim stresom mogu imati potencijal u liječenju neurodegenerativnih bolesti.
Nuklearni faktor eritroid 2-srodan faktor 2 (Nrf2) je transkripcijski faktor koji je snažno povezan s oksidativnim stresom. Aktivacija Nrf2 inducira transkripciju brojnih antioksidativnih i detoksikacijskih gena, uključujući hem oksigenazu-1 (HO-1), NAD(P)H kinon oksidoreduktazu 1, protuupalni [13] i imunomodulatorni [14 ] bioaktivnosti. Osmanthusfragrans čest je sastojak nekoliko azijskih namirnica i već se dugo konzumira. Prethodno smo pokazali da ekstrakti cvijeta O.fragrans poboljšavaju prostorno učenje i pamćenje, inhibiraju oksidativna oštećenja i pokazuju neuroprotektivne aktivnosti u starenju izazvanom d-galaktozom u ICR modelu miša [15]. Salidrozid, akteozid i izoakteozid glavni su odgovor PhG-a za antioksidativne aktivnosti ekstrakata cvjetova O.fragrans [16].
Studije o neuroprotektivnom učinku PhG-a dale su poželjne rezultate. Salidrozid je značajno smanjio staničnu apoptozu stanica PC12 koje su bile izložene MPP plus [17,18]. Akteozid je također ublažio MPP plus-induciranu apoptozu i oksidativni stres u PC12 stanicama [19] i A p25-35-induciranu ozljedu SH-SY5Y stanica [20]. Ehinakozid je ispitivan na apoptozi izazvanoj faktorom tumorske nekroze-a (TNFa) u stanicama SH-SY5Y [21], dopaminergičkoj toksičnosti izazvanoj MPTP-om u miševa [22], glutamatom ozlijeđenim primarnim kulturama kortikalnih stanica štakora [23] i { {19}}Oštećenje PC12 stanica izazvano OHDA [24]. Rezultati su pokazali da PhGs pokazuju citoprotektivni učinak i potencijalni su agensi za liječenje neurodegenerativnih bolesti. Studije su pokazale da su antioksidativna svojstva PhG u pozadini mnogih drugih bioaktivnosti ovih spojeva [25]. Međutim, malo je studija istraživalo molekularni mehanizam PhG protiv oksidativne toksičnosti.
U našem istraživanju odabrali smo četiri tipična PhG-a kako slijedi: salidrozid (feniletanoidni monosaharidi), akteozid (feniletanoidni disaharidi), izoakteozid (feniletanoidni disaharidi) i ehinakozid (feniletanoidni trisaharidi). Koristili smo model smrti neurona pomoću diferenciranih stanica PC12 [26] kako bismo istražili zaštitni učinak i molekularni mehanizam PhG-a na modelu stanica PC12 izazvanog H2O2-. Pokazali smo da su PhGs aktivirali put Nrf2/ARE vezanjem na protein 1 (Keap1) povezan s ECH-om sličnim Kelchu. Ovaj proces pojačao je antioksidativne enzime i povećao otpornost PC12 stanica na oksidativni stres.
Liječenje neurodegenerativnih bolesti:PhG iz cistanhe
2. Rezultati
2.1. PhG suzbija H2O2-citotoksičnost u PC12 stanicama
Ispitani su citotoksični učinci H2O2 i PhG (0.1,1,5 i 10 卩g/mL) na PC12 stanice. Rezultati su pokazali da je H2O2 inducirao gubitak vitalnosti stanica PC12 na načine ovisne o koncentraciji i vremenu (Slika 1A). Izlaganje stanica PC12 200 H2O2 tijekom 2 h rezultiralo je preživljavanjem stanica od 57,4 posto. Prethodno tretiranje stanica s PhG-ima na 0.1, 1, 5 i 10 昭/mL nije imalo učinka na vitalnost stanica (Slika 1B) i značajno je zaštitilo PC12 stanice od oštećenja izazvanih H2O2- poboljšanjem održivost stanica kao 9.549-22.141 posto , 12.092-25.289 posto , 1.470-9.289 posto , odnosno 3.411-11.441 posto ( Slika 1C). Međutim, predtretman salidrozidom (0,1 ^g/mL), izoakteozidom (0,1, 1, 5 i 10 ^g/mL), ehinakozidom (0,1,1 i 5 ^g/mL) nije pokazao značajnu razliku na stanicama izazvanim HzOz ozljeda. Prethodno tretiranje stanica PhG-ima također je poboljšalo morfološke karakteristike izazvane H2O2 (Slika 1D).
Slika 1.PhG suzbijaju citotoksičnost izazvanu H2O2-u PC12 stanicama. Viabilnost stanica je detektirana MTT testom. Citotoksični učinak H2O2 (A) i PhGs (B) u različitim koncentracijama na PC12 stanice. (C) PhGs oslabljen H2O2-induciranim smanjenjem vitalnosti stanica. PC12 stanice su inkubirane s PhG (0.1 i 10 mg/mL) 24 h, a zatim su inkubirane s 200 pM H2O2 još 2 sata h nakon što su PhG uklonjeni. (D) Morfološko promatranje. Stanice nakon tretmana promatrane su fazno-kontrastnim mikroskopom (x100), CK: normalna skupina, H2O2: skupina tretirana H2O2, HL: skupina tretirana niskom dozom salidrozida, HH: skupina tretirana visokom dozom salidrozida, ML: skupina tretirana niskom dozom akteozida, MH: skupina liječena visokim dozama akteozida, IL: skupina liječena niskim dozama izoakteozida, IH: skupina liječena visokim dozama izoakteozida, SL: skupina liječena niskim dozama ehinakozida, SH: skupina liječena visokim dozama ehinakozida. ** p < 0,01="" naspram="" neliječene="" skupine;="" #="" p="">< 0,05,="" u="" odnosu="" na="" skupinu="" tretiranu="" s="" h2o2;="" ##="" p="">< 0,01,="" u="" odnosu="" na="" skupinu="" tretiranu="" s="">
2.2. PhG suzbija H2O2-inducirano intracelularno nakupljanje ROS-a, lipidnu peroksidaciju (MDA) i povećanu aktivnost superoksid dismutaze (SOD) u PC12 stanicama
Izlaganje stanica PC12 200 pM H2O2 tijekom 2 sata povećalo je razine ROS-a, sadržaj MDA i smanjilo aktivnost SOD-a (Slika 2). Predtretman PhGs smanjio je razinu ROS-a, salidrozida i akteozida, a predtretman visokim dozama izoakteozida i ehinakozida značajno je smanjio razinu ROS-a (p < 0,01).="" predtretman="" salidrozidom="" nije="" pokazao="" učinak="" na="" sadržaj="" mda,="" ali="" predtretman="" akteozidom="" značajno="" je="" smanjio="" sadržaj="" mda="" (p="">< 0,05).="" predtretman="" izoakteozidom="" i="" ehinakozidom="" značajno="" je="" smanjio="" sadržaj="" mda="" na="">
Slika 2.PhG su blokirali nakupljanje ROS i MDA i povećali aktivnosti SOD u PC12 stanicama. Stanice PC12 inkubirane su s PhG (0.1 i 10 4g/mL) 24 sata, a zatim su inkubirane s 200 |^M H2O2 još jedan 2 h nakon što su PhGs uklonjeni. (A) PhG blokiraju akumulaciju ROS i MDA. (B) PhG blokira nakupljanje MDA. (C) PhG su povećali aktivnosti SOD. CK: normalna skupina, Model: skupina liječena H2O2, Salidroside: skupina liječena salidrozidom, Acteoside: skupina liječena akteozidom, Isoacteoside: skupina liječena izoakteozidom, Echinacoside: skupina liječena ehinakozidom. ** p < 0.01="" naspram="" neliječene="" skupine;="" #="" p="">< 0,05,="" u="" odnosu="" na="" skupinu="" tretiranu="" s="" h2o2,="" ##="" p="">< 0,01,="" u="" odnosu="" na="" skupinu="" tretiranu="" s="">
2.3. PhGs reverzna H2O2-inducirana apoptoza u PC12 stanicama
Tretman H2O2 (200 |1M) tijekom 2 sata značajno je povećao apoptozu u PC12 stanicama, s ukupnom stopom apoptoze do 16,02 posto (Slika 3). Međutim, prethodna obrada s PhG (0,1 i 10 卩g/mL) tijekom 24 sata smanjila je stopu apoptoze na način ovisan o koncentraciji (p < 0,01).="" salidrozid,="" akteozid,="" izoakteozid="" i="" ehinakozid="" značajno="" su="" smanjili="" postotak="" stanične="" apoptoze="" za="" 4.750-6.627="" posto,="" 4.413-5.800="" posto,="" 6.593-10.047="" posto,="" i="" 1.530-7.510="">
Slika 3. PhG su preokrenuli apoptozu izazvanu H2O2- u PC12 stanicama. PC12 stanice su inkubirane s PhGs (0.1 i 10 卩g/mL) 24 h, a zatim su inkubirane s 200 pM H2O2 još 2 h nakon PhG su uklonjeni. Zatim je mjerena apoptoza protočnom citometrijom pomoću PI/FITC fluorescentne sonde. CK: normalna skupina, Model: skupina liječena H2O2, Salidroside: skupina liječena salidrozidom, Acteoside: skupina liječena akteozidom, Isoacteoside: skupina liječena izoakteozidom, Echinacoside: skupina liječena ehinakozidom. ** p < 0,01="" naspram="" neliječene="" skupine;="" ##="" p="">< 0,01,="" u="" odnosu="" na="" skupinu="" tretiranu="" s="">
2.4. PhGs reverzirao H2O2-inducirano smanjenje ekspresije proteina HO-1, NQO1, GCLC i GCLM
HO{{0}}, NQO1 i glutamat-cistein ligaza (GCL) važni su stanični antioksidativni enzimi, a HO-1, NQO1 i katalitičke ili modificirane podjedinice GCL-a (GCLC ili GCLM) su Nrf2-regulirani nizvodni geni [27]. Ekspresija proteina HO-1, NQO1, GCLC i GCLM opažena je nakon tretmana. Utvrđena je očita razlika između ekspresije proteina HO-1 i NQO1 sa ili bez H2O2 (Slika 6A-C) (p < 0.01).="" phg="" (0.1="" i="" 10="" p^g/ml)="" preokrenuli="" su="" h2o2-induciranu="" nižu="" regulaciju="" ekspresije="" proteina="" ho-1="" (osim="" salidrozida="" na="" {{32}="" }.1="" pg/ml),="" nqo1="" (osim="" akteozida="" na="" 0.1="" pg/ml)="" (p="">< {{40}}.01).="" h2o2="" je="" također="" smanjio="" ekspresiju="" proteina="" gclc="" i="" gclm="" (p="">< 0.05)="" (slika="" 6a,="" d,="" e).="" phg="" (0.1="" i="" 10="" pg/ml)="" preokrenuli="" su="" h2o2-induciranu="" nižu="" regulaciju="" ekspresije="" proteina="" gclc="" (osim="" ehinakozida="" pri="" 0,1="" pg/ml)="" (p="">< 0,01)="" i="" gclm="" (osim="" salidrozida="" pri="" 0,1="" pg/ml)="" (p="">< 0,01).="" zatim="" su="" kemijski="" inhibitori="" za="" ho-1="" upotrijebljeni="" za="" daljnju="" procjenu="" uloge="" antioksidativnih="" enzima="" u="" regulaciji="" zaštite="" phg="" od="" citotoksičnosti="" izazvane="" h2o2-.="" phg="" (0,1="" i="" 10="" pg/ml)="" spriječio="" je="" citotoksičnost="" izazvanu="" h2o2-,="" ali="" je="" takav="" zaštitni="" učinak="" poništio="" inhibitor="" ho-1="" znpp="" (p="">< 0,01)="" pri="" 20="" pm="" (slika="" 6f,="" p="">< 0,01)="">
2.5. Keap1 ekspresija i analiza molekularnog spajanja
U fiziološkim uvjetima, Keap1 djeluje kao represorski protein Nrf2 tako što se veže za Neh2 domenu Nrf2 i usmjerava Nrf2 na E3 ubikvitin ligazu temeljenu na Cul3-za ubikvitinaciju i kasniju razgradnju pomoću 26S proteasoma [28]. Kapacitet vezanja PhG-a na Keap1 procijenjen je analizom molekularnog spajanja kako bi se istražio mehanizam pod njihovim antioksidativnim učinkom.
Antioksidativno djelovanje: CistanchePhGs
3. Rasprava
Istraživali smo neuroprotekciju PhG-a na citotoksičnost izazvanu H2O2 u PC12 stanicama. Rezultati pokazuju da je prethodna obrada PhGs značajno potisnula citotoksičnost izazvanu HzOz, smanjila unutarstaničnu razinu ROS-a, poboljšala razinu unutarstaničnih antioksidativnih enzima i na kraju poništila citotoksičnost izazvanu H2O2-u PC12 stanicama. Štoviše, PhG su povećali transkripcijsku aktivaciju Nrf2, preokrenuli HzOz-induciranu nižu regulaciju ekspresije proteina HO-1, NQO1, GCLC i GCLM. Uz to, PhGs je pokazao potencijalnu interakciju s veznim mjestom Nrf2 u proteinu Keap1.
U oštećenju PC12 stanica izazvanom H2O2-, lipidna peroksidacija, koja se odnosi na oksidativnu razgradnju lipida, povećala je propusnost membrana, što je dovelo do oštećenja stanica [29]. Stvaranje MDA naširoko se koristi kao indeks peroksidacije lipida [30]. H2O2 je povećao proizvodnju ROS-a i iscrpio antioksidativne obrambene enzime, kao što su SOD, katalaza i GPx. Taj proces dovodi do oksidativnog stresa [31], koji igra ključnu ulogu u uzročno-posljedičnoj posljedici i napredovanju većine neurodegenerativnih poremećaja. U skladu s prethodnim studijama, uočili smo povećanu razinu ROS-a, smanjene intracelularne antioksidativne enzime i pojačanu apoptozu PC12 stanica nakon tretmana H2O2. Predtretman PhGs značajno je oslabio HzOz-induciran porast intracelularnog ROS-a, poboljšao unutarstanične antioksidativne enzime i konačno poništio HzOz-induciranu citotoksičnost u PC12 stanicama.
Kuang i sur. [32] izvijestili su da je ehinakozid pokazao značajan neuroprotektivni učinak na citotoksičnost izazvanu H2O2- u PC12 stanicama kroz mitohondrijski apoptotski put. U ovoj smo studiji otkrili da su ehinakozid, salidrozid, akteozid i izoakteozid pokazali neuroprotektivne učinke pojačavanjem antioksidativne aktivnosti stanica PC12 jer su povećali transkripcijsku aktivaciju Nrf2 i regulirali nizvodnu ekspresiju proteina HO-1, NQO1, GCLC i GCLM. Brojne su studije jasno pokazale da aktivacija ciljnih gena Nrf2, posebice HO-1, u astrocitima i neuronima snažno štiti od upale, oksidativnog oštećenja i stanične smrti. Prijavljeno je da je sustav HO-1 vrlo aktivan u središnjem živčanom sustavu, a njegova modulacija očito igra ključnu ulogu u patogenezi neurodegenerativnih poremećaja [33]. Nedavne studije također su razjasnile ulogu Nrf2 u progresiji i riziku od PD [9] i Keap1 kao učinkovitu metu za reaktivaciju Nrf2 u AD [34]. Rezultati podupiru nove dokaze za Nrf2 kao terapeutsku metu u neurodegenerativnim bolestima.
Analiza molekularnog spajanja pokazala je da se PhG mogu vezati na Keap1, sa sljedećim kapacitetima vezanja: ehinakozid > izoakteozid > akteozid > salidrozid. U skladu s ovim rezultatima, prethodna obrada PhGs dovela je do Nrf2 nuklearne translokacije, sa sljedećom ekspresijom Nrf2 u jezgri: ehinakozid > izoakteozid * akteozid > salidrozid. Pretpostavili smo da je broj glikozida utjecao na mogući način vezanja PhGs i Keap1, a način vezanja dodatno je uzrokovao otpuštanje Nrf2 iz Keap1. Ovaj proces rezultirao je aktivacijom Nrf2 i nizvodnih gena i konačno štiti PC12 stanice od oksidativnog stresa izazvanog H2 O2 -.
Neuroprotektivni učinci cistanhePhGs
4. Materijali i metode
4.1. Kemijski spojevi i reagensi
Salidrozid (CAS br. {{0}}), akteozid (CAS br. 61276-17-3), izoakteozid (CAS br. 61303-13-7) i ehinakozid (CAS br. {{3} }) kupljeni su od YYuanye Biotechnology Company (Šangaj, Kina). PhGs je otopljen u PBS kako bi se proizvela osnovna otopina od 10 mg/mL, koja je pohranjena na -20 stupnjeva. H2O2 je kupljen od Aladdin® (Šangaj, Kina). RPMI-1640 medij i fetalni goveđi serum kupljeni su od Hyclone (Logan, UT, SAD), a 0,5 postotni tripsin EDTA, penicilin i streptomicin kupljeni su od Keyi (Hangzhou, Kina). MDA, SOD dijagnostički setovi, MTT i DCFH-DA kupljeni su od Beyotime Institute of Biotechnology (Nanjing, Jiangsu, Kina). Komplet za dvostruko bojenje Annexin V-FITC/PI kupljen je od Solarbio Life Sciences (Peking, Kina). Antitijela na Nrf2, Histon H3, Keap1, HO-1, NQO1, GCLC, GCLM i p-aktin, anti-mišji peroksid hrena (HRP) IgG i anti-zečji HRP-IgG kupljeni su od Abcam-a (London, UK). Inhibitori HO-1 i ZnPP nabavljeni su od Sigma Chemical Co. (St. Louis, MO, SAD). RNAiso Plus, PrimeScript™RT komplet reagensa s gDNA brisačem i SYBR® Premix Ex Taq™ II kupljeni su od Takara (Shiga, Japan). Lipofectamine® RNAiMAX transfekcijski reagens kupljen je od Thermo Fisher Scientific (Waltham, UK). Nrf2 siRNA sekvence bile su sljedeće: naprijed, CCGAAUUACAGUGUCUUAA; i naličje, UUAAGACACUGUAAUUCGG. U međuvremenu, kontrolne sekvence siRNA bile su sljedeće: naprijed, UUCUCGAACGUGUCACGU; i obrnuto, ACGUGACACGUUCGGAGAA.
4.2. Kultura stanica
Linija nadbubrežnog feokromocitoma miša (stanice PC12) dobivena je od Instituta za biokemiju i staničnu biologiju, SIBS, (CAS, Šangaj, Kina). Stanice su održavane u RPMI-1640 (Hyclone) koji sadrži 10 posto fetalnog goveđeg seruma (Hyclone), 100 U/mL penicilina i 0,1 mg/mL streptomicina na 37 stupnjeva s 5 posto CO2. Medij se mijenjao svaki drugi dan.
4.3. Ispitivanje vitalnosti stanica
Stanice PC12 nasađene su u 96-ploče s jažicom u količini od 2 x 104 stanica po jažici. Nakon pričvršćivanja, stanice su prethodno inkubirane sa ili bez inhibitora 20 minuta, inkubirane sa ili bez PhGs 24 sata, a zatim inkubirane s H2O2 još 2 sata nakon što su PhGs uklonjeni. Nakon inkubacije, stanice su tretirane s 5 mg/mL MTT tijekom 4 sata na 37 stupnjeva, a mediji su pažljivo uklonjeni. Kristali formazana koje su formirale preživjele stanice otopljeni su u 150 mL DMSO da se dobije plava boja [35], a apsorbancija je izmjerena na 570 nm na čitaču ploča. Kontrole su koristile istu koncentraciju medija sa samim DMSO. Viabilnost stanica je normalizirana kao postotak kontrole.
Koncentracije PhG (0.1, 1, 5 i 10 Rg/mL) odabrane su ovisno o analizi citotoksičnosti PhG i prijavljenom citoprotektivnom učinku ehinakozida [32]. Prema izvješću, nije bilo citotoksičnog učinka prikazanog ispod 10 Rg/mL, a objavljeno je da ehinakozid pokazuje citoprotektivni učinak u modelu stanica oštećenih HzOz.
4.4. Test apoptoze
Apoptoza je otkrivena kompletom za dvostruko bojenje Annexin V-FITC/PI (Solarbio). Stanice PC12 nasađene su u 6-pločice s jažicom u 2 x 105 stanica/jažici. Nakon pričvršćivanja, stanice su tretirane s PhGs (0,1 i 10 ug/mL) 24 sata i inkubirane s H2O2 još 2 sata nakon što su PhGs uklonjeni. Nakon inkubacije, stanice su isprane u hladnom PBS-u, centrifugirane dva puta na 1500 okretaja u minuti tijekom 10 minuta i resuspendirane u 500 ul pufera za vezanje. FITC-om obilježen aneksin V (5 rL) i propidij jodid.
Kratice
GCLC glutamat-cistein ligaza-katalitička podjedinica
GCLM glutamat-cistein ligaza-katalitička modifikatorska podjedinica
H2O2 vodikov peroksid
HO-1 hem oksigenaza 1
Keap1 Kelch ECH asocijacijski protein 1
NQO1 NAD(P)H kinon oksidoreduktaza 1
Nrf2 nuklearni faktor eritroid 2-srodan faktor 2
PhGs salidrozid, akteozid, izoakteozid i ehinakozid
ROS reaktivne vrste kisika
ZnPP cink protoporfirin
Ekstrakt Cistanche deserticola: PHG cistanche
Reference
1. Sun, AY; Chen, YM Oksidativni stres i neurodegenerativni poremećaji. J. Biomed. Sci. 1998, 5, 401-414. [CrossRef] [PubMed]
2. Maheshwari, A.; Mikro, MM; Aggarwal, A.; Sharma, RK; Nandan, D. Putovi uključeni u apoptozu zametnih stanica testisa izazvanu H2O2 in vitro. FEBS J. 2009, 276, 870-881. [CrossRef] [PubMed]
3. Halliwell, B. Reaktivne vrste kisika i središnji živčani sustav. J. Neurochem. 1992, 59,1609-1623. [CrossRef] [PubMed]
4. Richardson, JS; Subbarao, KV; Ang, LC O mogućoj ulozi peroksidacije slobodnih radikala izazvane željezom u neuralnoj degeneraciji u Alzheimerovoj bolesti. Ann. NY Acad. Sci. 1992, 648, 326-327. [CrossRef] [PubMed]
5. Zhang, DD Mehanička istraživanja Nrf2-Keap1 signalnog puta. Lijek Metab. Rev. 2006, 38, 769-789. [CrossRef] [PubMed]
6. Itoh, K.; Tong, KI; Yamamoto, M. Molekularni mehanizam koji aktivira Nrf2-Keap1 put u regulaciji adaptivnog odgovora na elektrofile. Slobodan Radić. Biol. Med. 2004, 36, 1208-1213. [CrossRef] [PubMed]
7. Kong, AN; Owuor, E.; Yu, R.; Hebbar, V.; Chen, C.; Hu, R.; Mandlekar, S. Indukcija ksenobiotičkih enzima mapiranim putem kinaze i elementom antioksidativnog ili elektrofilnog odgovora (ARE/EpRE). Lijek Metab. Rev. 2001, 33, 255-271. [CrossRef] [PubMed]
8. Buendia, I.; Michalska, P.; Navarro, E.; Gameiro, I.; Egea, J.; Leon, R. Nrf2-ARE put: nova meta protiv oksidativnog stresa i neuroupale u neurodegenerativnim bolestima. Pharmacol. Ther. 2016, 157, 84-104. [CrossRef] [PubMed]
10. Skibinski, G.; Hwang, V; Ando, DM; Daub, A.; Lee, AK; Ravisankar, A.; Modan, S.; Finucane, MM; Shabby, dipl. Finkbeiner, S. Nrf2 ublažava LRRK2- i neurodegeneraciju izazvanu a-sinukleinom moduliranjem proteostaze. Proc. Natl. Akad. Sci. SAD 2016, 114, 1165-1170. [CrossRef] [PubMed]
10. Jimenez, C.; Riguera, R. Feniletanoidni glikozidi u biljkama: Struktura i biološka aktivnost. Nat. proizvod Rep. 1994, 11, 591-606. [CrossRef] [PubMed]
11. Georgiev, M.; Alipieva, K.; Orhan, I.; Abrašev, R.; Denev, P.; Angelova, M. Antioksidativna i inhibicijska aktivnost kolinesteraze Verbascum xanthophoeniceum Griseb. i njegovi feniletanoidni glikozidi. Food Chem. 2011, 128, 100-105. [CrossRef] [PubMed]
12. Li, N.; Wang, J.; Ma, J.; Gu, Z.; Jiang, C.; Yu, L.; Fu, X. Neuroprotektivni učinciCistanches HerbaTerapija pacijenata s umjerenom Alzheimerovom bolešću. Dopuna temeljena na dokazima. Alternativa. Med. 2015, 2015, 103985. [CrossRef] [PubMed]
13. Liu, YL; On, WJ; Mo, L.; Shi, MF; Zhu, YY; Pan, S.; Li, XR; Xu, QM; Yang, SL Antimikrobne, protuupalne aktivnosti i toksikologija feniletanoidnih glikozida iz Monochasma savatieri Franch. bivši Maksim. J. Ethnopharmacol. 2013, 149, 431-437. [CrossRef] [PubMed]
14. Dong, Q.; Yao, J.; Fang, JN; Ding, K. Strukturna karakterizacija i imunološka aktivnost dvaju polisaharida koji se ekstrahiraju hladnom vodom izCistanche deserticola YC Ma. ugljikohidrat. Res. 2007, 342, 1343-1349. [CrossRef] [PubMed]
15. Xiong, L.; Mao, S.; Lu, B.; Yang, J.; Zhou, F.; Hu, Y.; Jiang, Y.; Shen, C.; Zhao, Y. Ekstrakt cvijeta Osmanthusfragrans i Acteoside štite od starenja izazvanog d-galaktozom u ICR mišjem modelu. J. Med. Hrana 2016, 19, 54-61. [CrossRef] [PubMed]
16. Jiang, Y.; Mao, S.; Huang, W.; Lu, B.; Cai, Z.; Zhou, F.; Li, M.; Lou, T.; Zhao, Y. Phenylethanoid Glycoside Profiles and Antioxidant Activities of Osmanthusfragrans Lour. Flowers pomoću UPLC/PDA/MS i simuliranog modela probave. J. Agric. Food Chem. 2016, 64, 2459-2466. [CrossRef] [PubMed]
17. Li, X.; Da, X.; Li, X.; Sunce, X.; Liang, Q.; Tao, L.; Kang, X.; Chen, J. Salidroside štiti od MPP plus-inducirane apoptoze u PC12 stanicama inhibiranjem puta NO. Brain Res. 2011, 1382, 9-18. [CrossRef] [PubMed]
18. Zhang, L.; Ding, W.; Sun, H.; Zhou, Q.; Huang, J.; Li, X.; Xie, Y.; Chen, J. Salidroside štiti PC12 stanice od MPP plus-inducirane apoptoze putem aktivacije puta PI3K/Akt. Food Chem. Toxicol. 2012, 50, 2591-2597. [CrossRef] [PubMed]
19. Sheng, GQ; Zhang, JR; Pu, XP; Ma, J.; Li, CL Zaštitni učinak verbaskozida na neurotoksičnost izazvanu 1-metil-4- fenilpiridinijevim ionom u stanicama PC12. Eur. J. Pharmacol. 2002, 451, 119-124. [CrossRef]
20. Wang, H.; Xu, Y.; Yan, J.; Zhao, X.; Sunce, X.; Zhang, Y.; Guo, J.; Zhu, C. Acteoside štiti stanice ljudskog neuroblastoma SH-SY5Y od oštećenja stanica izazvanih beta-amiloidom. Brain Res. 2009, 1283, 139-147. [CrossRef] [PubMed]
21. Min, D.; Jin, YZ; Yong, J.; Zheng, BL; Yao, HW Echinacoside spašava neuronske stanice SHSY5Y od apoptoze izazvane TNFa. Brada. Pharmacol. Bik. 2005, 505, 11-18.
22. Zhao, Q.; Gao, JP; Li, WW; Cai, DF Neurotrofični i neurospašavajući učinci ehinakozida u subakutnom MPTP mišjem modelu Parkinsonove bolesti. Brain Res. 2010, 1346, 224-236. [CrossRef] [PubMed]
23. Koo, KA; Sung, SH; Park, JH; Kim, SH; Lee, KY; Kim, YC In vitro neuroprotektivne aktivnosti feniletanoidnih glikozida iz Callicarpa dichotoma. Planta Med. 2005, 71, 778-780. [CrossRef] [PubMed]
24. Liu, YG; Li, X.; Xiong, C.; Yu, B.; Pu, X.; Ye, XS Sintetski feniletanoidni glikozidni derivati kao potencijalni neuroprotektivni agensi. Eur. J. Med. Chem. 2015, 95, 313-323. [CrossRef] [PubMed]
25. Fu, G.; Pang, H.; Wong, YH Prirodni feniletanoidni glikozidi: potencijalni tragovi za nove terapije. Curr. Med. Chem. 2008, 15, 2592-2613. [CrossRef] [PubMed]
26. Greene, LA; Tischler, AS Uspostavljanje noradrenergičke klonske linije stanica feokromocitoma nadbubrežne žlijezde štakora koje reagiraju na faktor rasta živaca. Proc. Natl. Akad. Sci. SAD 1976, 73, 2424-2428. [CrossRef] [PubMed]
27. Liang, QN; Sheng, YC; Jiang, P.; Ji, LL; Xia, YY; Min, Y.; Wang, ZT Razlika antioksidativnog sustava glutationa u jetri tek odbijenih i mladih miševa i njegova uključenost u hepatotoksičnost izazvanu izolinom. Arh. Toxicol. 2011, 85, 1267-1279. [CrossRef] [PubMed]
28. Kobayashi, A.; Kang, M.; Okawa, H.; Ohtsuji, M.; Zenke, Y; Chiba, T.; Igarashi, K.; Yamamoto, M. Senzor oksidativnog stresa Keap1 funkcionira kao adapter za E3 ligazu temeljenu na Cul3-za regulaciju proteasomalne degradacije Nrf2. Mol. Ćelija. Biol. 2004, 24, 7130-7139. [CrossRef] [PubMed]
29. Cornelius, C.; Crupi, R.; Calabrese, V; Graziano, A.; Milone, P.; Pennisi, G.; Radak, Z.; Calabrese, EJ; Cuzzocrea, S. Traumatska ozljeda mozga: Oksidativni stres i neuroprotekcija. Antioksid. Redox signal. 2013, 19, 836-853. [CrossRef] [PubMed]
30. Hou, Z.; Luo, W.; Sunce, X.; Hao, S.; Zhang, Y.; Xu, F.; Wang, Z.; Liu, B. Fiziološka otopina bogata vodikom štiti od oksidativnog oštećenja i kognitivnih nedostataka nakon blage traumatske ozljede mozga. Brain Res. Bik. 2012, 88, 560-565. [CrossRef] [PubMed]
31. Ansari, MA; Roberts, KN; Scheff, SW Vremenski tijek oksidativnog stresa izazvanog kontuzijom i sinaptičkih proteina u korteksu u štakorskom modelu TBI. J. Neurotrauma 2008, 25, 513-526. [CrossRef] [PubMed]
33. Kuang, R.; Sun, Y.; Yuan, W.; Lei, L.; Zheng, X. Zaštitni učinci ehinakozida, jednog od feniletanoidnih glikozida, na H2O2-induciranu citotoksičnost u PC12 stanicama. Planta Med. 2009, 75, 1499-1504. [CrossRef] [PubMed]
33. Scapagnini, G.; Vasto, S.; Abraham, NG; Caruso, C.; Zella, D.; Fabio, G. Modulacija puta Nrf2/ARE polifenolima iz hrane: prehrambena neuroprotektivna strategija za kognitivne i neurodegenerativne poremećaje. Mol. Neurobiol. 2011, 44, 192-201. [CrossRef] [PubMed]
34. Kerr, F.; Sofolaadesakin, O.; Ivanov, DK; Gatliff, J.; Gomez, PB; Bertrand, HC; Martinez, P.; Callard, R.; Snoeren, I.; Cochem, HM Direct Keap1-Nrf2 poremećaj kao potencijalni terapeutski cilj za Alzheimerovu bolest. PLoS Genet. 2017, 13, e1006593. [CrossRef] [PubMed]
35. Hansen, MB; Nielsen, SE; Berg, K. Ponovno ispitivanje i daljnji razvoj precizne i brze metode bojanja za mjerenje rasta/ubijanja stanica. J. Immunol. Methods 1989, 119, 203-210. [CrossRef]
36. Press, C. Virtualni pregled u otkrivanju lijekova; Crc Press: Boca Raton, FL, SAD, 2005.
38. Muegge, I.; Martin, YC; Hajduk, PJ; Fesik, SW Procjena bodovanja PMF-a u spajanju slabih liganda s veznim proteinom FK506. J. Med. Chem. 1999, 42, 2498—2503. [CrossRef] [PubMed]
38. Kuntz, ID; Blaney, JM; Oatley, SJ; Langridge, R.; Ferrin, TE Geometrijski pristup interakcijama makromolekula-ligand. J. Mol. Biol. 1982,161, 269-288. [CrossRef]
39. MD, E.; Murray, CW; Auton, TR; Paolini, GV; Mee, RP Empirijske bodovne funkcije: I. Razvoj brze empirijske bodovne funkcije za procjenu afiniteta vezanja liganada u receptorskim kompleksima. J. Comput.-Aided Mol. des. 1997,11, 425-445.
© 2018 autora. Vlasnik licence MDPI, Basel, Švicarska. Ovaj je članak članak s otvorenim pristupom koji se distribuira prema odredbama i uvjetima licence Creative Commons Attribution (CC BY) (http:ZZcreativecommons.org/licenses/byZ4.0Z).
