Dizajn nano-lijekova temeljen na fiziološkim svojstvima glutationa

Sažetak:Glutation (GSH) je uključen i regulira važne fiziološke funkcije tijela kao bitan antioksidans. GSH ima važnu ulogu uantioksidacija, detoksikacija, protiv starenja, jačanje imuniteta, iantitumorsko djelovanje. Ovdje, na temelju fizioloških svojstava GSH u različitim bolestima, uglavnom uključujućijaka reduktivnost GSH, visok sadržaj GSH u tumorskim stanicama, iSmanjenje NADPH kada se GSSH reducira na GSH, opširno izvještavamo o načelima dizajna, učinku i potencijalnim problemima raznihnano-lijekovi za dijabetes, Rak, bolesti živčanog sustava, fluorescentne sonde, slike i hrana. Ove studije u potpunosti iskorištavaju fiziološku i patološku vrijednost GSH i razvijaju izvrsne metode dizajnanano-lijekovivezano za GSH, što pokazuje važan znanstveni značaj i istaknutu vrijednost primjene za istraživanja povezanih bolesti u kojima GSH sudjeluje ili na koje odgovara.

Ključne riječi:glutation; fiziološko svojstvo; nano-lijekovi; pregled

Kliknite ovdje da biste dobili Cistanche za usporavanje starenja

1. Struktura glutationa

Glutation (GSH) je otkrio Hopkins 1921. [1], a tripeptidni je spoj formiran od glutaminske kiseline, cisteina i glicina kondenzacijom peptidne veze. Njegov kemijski naziv je -L-glutamil-L-cisteil-glicin, a molekulska formula je C10H17O6SN3 [2]. Postoje dvije vrste glutationa, naime reducirani glutation (GSH) i oksidirani glutation (GSSG). Struktura GSH sadrži aktivnu reducirajuću skupinu, sulfhidril (-SH), koja se lako oksidira i dehidrogenira. Glutation peroksidaza (GSH-Px) može katalizirati GSH u GSSG, dok glutation reduktaza (GSH-R) može koristiti nikotinamid adenin dinukleotid fosfat (NADPH) da katalizira GSSG u GSH. Glavna aktivna skupina GSSG je disulfidna veza (-SS-). Biosintezu GSH izravno kontrolira sustav sintaze, a ne kao sintezu proteina na ribosomu [3-5]. Specifična struktura i postupak sinteze prikazani su na slici 1.

2. Fiziološka funkcija GSH

GSH se nalazi u gotovo svakoj stanici tijela [6] i široko je prisutan u raznim bitnim organima i tkivima, kao što su krv, jetra i bubrezi, u kojima su jetra i bubrezi glavni sintetski, metabolički i izlučujući organa GSH [7]. Općenito, GSH ima važnu fiziološku ulogu u organizmima, dok se GSSG treba reducirati na GSH da bi se postigla fiziološka aktivnost. GSH održava normalnu funkciju imunološkog sustava i ima očite antioksidativne i detoksikacijske učinke. Štoviše, jedinstvena struktura GSH čini ga istaknutim hvatačem slobodnih radikala u tijelu [8-10]. Stoga GSH ima prednosti izvrsne uloge u sprječavanju starenja, jačanju imuniteta i antitumorskom djelovanju [11-13]. Kada se u stanici stvori mala količina H2O2, GSH reducira H2O2 u H2O s GSH-Px, dok se oksidira u GSSG. GSSG prihvaća H plus i reducira se u GSH s GSH-R, tako da se reakcija hvatanja slobodnih radikala u tijelu može nastaviti, čime se štiti struktura i funkcija stanične membrane od interferencije i oštećenja oksida [14]. Osim toga, GSH također ima učinak ublažavanja neuronske ekscitatorne intoksikacije [15], što se može koristiti za ublažavanje toksičnih i nuspojava uzrokovanih kemoterapijom u bolesnika s malignim tumorima [16].

Iako GSH igra važnu ulogu u fiziološkim funkcijama, postoje značajna ograničenja, uključujući njegovu nemogućnost prodiranja u stanične membrane, laku oksidaciju, lošu stabilnost i nisku bioraspoloživost, što dramatično ugrožava učinkovitost liječenja bolesti. Nanotehnologija je nova tehnologija za isporuku lijekova koja čini biološki aktivnu tvar ugrađenom ili modificiranom na nanomaterijalima uglavnom putem fizikalnih, kemijskih i drugih metodologija konjugacije. Nanočestice nastale inkapsulacijom ili samosastavljanjem mogu ne samo zaštititi biološku aktivnost GSH-a, već i poboljšati njegovu stabilnost i bioraspoloživost. Osim toga, snažna redukcijska karakteristika GSH u mikrookruženju može se koristiti za cijepanje specifičnih nanočestica koje reagiraju na redoks kako bi se postigli učinci kontroliranog otpuštanja i ciljanih lijekova. Stoga se u ovom pregledu zasebno usredotočujemo na načela dizajna, učinke i potencijalne probleme različitih nano-lijekova koji se temelje na fiziološkom svojstvu GSH u različitim bolestima. Štoviše, trenutni izazovi i buduće strategije za razvoj nano-lijekova također se raspravljaju sa stajališta praktične primjene.

3. Sustavi za isporuku nano-lijekova

Uz velika ulaganja i brzi razvoj posljednjih godina, nanotehnologija se primjenjuje u svim područjima biomedicinske znanosti i tehnologije [17]. Slično tome, nanotehnologija pruža novi pristup isporuci lijekova, posebno ciljanoj isporuci lijekova. Ciljani sustavi za isporuku lijekova isporučuju željene lijekove do oboljelih dijelova i smanjuju distribuciju do normalnih tkiva ili stanica [18]. Prednosti nanočestica kao sustava za dostavu lijekova opisane su kako slijedi: (1) Otapaju netopljive lijekove i sprječavaju razgradnju lijeka iz tijela; (2) produžiti vrijeme cirkulacije lijekova; (3) pokazuju dobru biokompatibilnost i biorazgradivost; (4) posjeduju visoku sposobnost punjenja lijekom i nisku toksičnost; (4) selektivno isporučiti lijekove do terapijskih ciljeva, kao što su tumorsko tkivo, tumorske stanice, stromalne stanice povezane s tumorom i suborganele [19]. Do sada su razvijeni brojni materijali poput polimera, lipida i anorganskih materijala koji su se koristili kao nosači lijekova za kontrolu otpuštanja lijekova [20,21]. Osim toga, stimulacija REDOX odgovora visoko je cijenjena u liječenju bolesti i naširoko se koristi u nanomedicinskoj isporuci lijekova [22,23]. REDOX potencijali u mikrookolišima su multivarijabilni u različitim tkivima i mogu se koristiti za dizajn sustava isporuke osjetljivih na REDOX. Stoga, dizajn i proizvodnja nanočestica koje reagiraju na glutation mogu biti obećavajući pristup za ciljanu isporuku lijekova [24].

4. Dizajn nano-lijekova za dijabetes temeljen na fiziološkim svojstvima GSH

4.1. Dizajn nano-lijekova temeljen na ulozi GSH u oksidativnom stresu

Potvrđeno je da je oksidativni stres dominantna patogeneza dijabetesa, a hiperglikemija je primarni čimbenik rizika za poticanje proizvodnje reaktivnih kisikovih vrsta (ROS). Postoji više vrsta ROS, kao što su slobodni radikali superoksidnog aniona (O2−), vodikovog peroksida (H2O2), hidroksilnog radikala (OH−), dušikovog dioksida (NO2) i dušikovog oksida (NO) i tako dalje [25]. Niz antioksidansa u normalnom tijelu uključuje vitamin A, vitamin C, vitamin E, GSH, superoksid dismutazu (SOD), GSH-Px i GSH-R, itd. [26]. Među njima, GSH je važan član tjelesnog endogenog antioksidansa. Ima prednosti hvatanja slobodnih radikala, ublažavanja oštećenja i održavanja redoks ravnoteže u stanicama [27]. Kada je tijelo napadnuto slobodnim radikalima, GSH se može koristiti kao izravni hvatač slobodnih radikala, ko-supstrat GSH-Px, kofaktor enzimske reakcije i konjugat mnogih endogenih reakcija za poboljšanje oksidativnog stresa i odgode razvoj dijabetesa [28].

Značajno je da su mnogi istraživači dizajnirali nano-lijekove za liječenje dijabetesa i komplikacija na temelju fiziološke uloge GSH u oksidativnom stresu. Wei Wang i sur. [29] dizajnirali su novi antioksidativni liposom glutationa (GSH-LIP) za primjenu u terapiji dijabetičke nefropatije. GSH-LIP ne samo da može poboljšati bioraspoloživost GSH, već i ukloniti višak ROS-a izazvan oksidativnim stresom i poboljšati antioksidativni kapacitet. Xiao i sur. [30] razvili su sustav isporuke koji se sastoji od nanočestica Eudragit L100- cisteina/reduciranog glutationa (Eul-cys/GSH NPs) za oralnu dostavu inzulina. Otkrili su da Eul-cys/GSH NP mogu pospješiti intestinalnu apsorpciju inzulina i produljiti vrijeme smanjenja šećera u krvi, što sugerira da bi Eul-cys/GSH NP mogli biti obećavajući sustav za isporuku u dijabetičkoj terapiji. Gore navedeni dizajni nano-lijekova GSH bili su da su lijekovi inkapsulirani u fosfolipidima ili amfifilnim materijalima, kao što su liposomi i micele, kao što je prikazano na slici 2A. Kuan i sur. [31] dizajnirali su magnetske nanočestice vezane za GSH koje su pripremljene kovalentnom vezom GSH i nanočestica. Pokazalo se da bi ova magnetska nanočestica vezana za GSH mogla zadržati približno 87 posto aktivnosti enzima i dobiti peptid sličan glukagonu -1, peptidni hormon za terapiju dijabetesa tipa 2. Ovaj dizajn nano-lijeka kombinirao je SH u GSH sa silla-NH2 kovalentnom vezom, kao što je prikazano na slici 2B. Mottaghipisheh i sur. [32] otkrili su da ekstrakti S. marianum, B. vulgaris i D. sophia koji kombiniraju nanočestice CuO pokazuju određeni učinak na štakore s dijabetesom i mogu značajno smanjiti sadržaj GSH-Px kako bi se spriječila oksidacija GSH. Istraživačka skupina Gurunathan [33] koristila je Au nanočestice (AuNP) za liječenje dijabetesa i nadoknadila rupe u tjelesnom antioksidativnom obrambenom sustavu. Eksperimentalni rezultati pokazali su da su razine GSH, superoksid dismutaze (SOD), katalaze i GSH-Px bile značajno povećane u dijabetičkih štakora liječenih AuNP-ovima, inhibicijom peroksidacije lipida i stvaranja ROS-a tijekom hiperglikemije. Većina ovih nano-lijekova su aktivni nano enzimi koji izravno djeluju na GSH ili GSH-Px kako bi regulirali sintezu GSH, kao što je prikazano na slici 2C.

Slika 2. Nano-lijekovi za dijabetes dizajnirani su na temelju GSH. (A) GSH je inkapsuliran u Enteric eudragit L100-cistein za pripremu reduciranih nanočestica glutationa (Eul-cys/GSH NPs) [30]; (B) GSH-vezane magnetske nanočestice (SPION@silica-NH2). GSH je reagirao s anhidridom maleinske kiseline da bi se formirale nanočestice SPION@silica-GSH [31]; (C) slike nanočestica CuO i enzima Au nanočestica s transmisijskog elektronskog mikroskopa [32,33]

4.2. Dizajn nano-lijekova temeljen na ulozi GSH u putu poliola

Kada se koncentracija glukoze u krvi kod dijabetesa poveća i premaši normalni metabolički kapacitet, mnogo glukoze se metabolizira poliolnim putem. Aldoza reduktaza (AR) u poliolnom putu reducira prekomjernu glukozu u sorbitol pomoću NADPH kao kofaktora. Velika količina akumulacije sorbitola rezultira prekomjernom količinom sorbitola u stanici i oštećuje propusnost stanice zbog njihove niske lipofilnosti. Posljedično, sorbitol ne prodire kroz staničnu membranu i dalje uzrokuje oticanje i pucanje stanica, izazivajući niz dijabetesa i razvoj kroničnih komplikacija [34-37]. GSSH može iscrpiti NADPH i biti reduciran u GSH pomoću GSH-R. Ako je sinteza GSH normalna ili ako dođe do dramatičnog pada GSH, potrošnja NADPH će se sigurno povećati [21]. Stoga je put poliola obrnut kako bi se obuzdala proizvodnja sorbitola, što predstavlja novi cilj za prevenciju i ublažavanje dijabetesa (Slika 3A).

Natječući se za NADPH s GSH-R i stoga rezultirajući smanjenom količinom GSH, poliolni put povećava osjetljivost na unutarstanični oksidativni stres. Wang i sur. [29] pripremili su nove antioksidativne GSH liposome (GSH-LIP) koji su primijenjeni u terapiji dijabetičke nefropatije. Pokazalo se da GSH-LIP učinkovito iscrpljuje NADPH kako bi blokirao put poliola i dramatično ublažio dijabetičku nefropatiju, što je pružilo novu teorijsku osnovu za istraživanje nano-lijekova u terapiji dijabetičke nefropatije.

5. Dizajn nano-lijekova za tumor temeljen na fiziološkim svojstvima GSH

5.1. Nanočestice provode mehanizme isporuke ciljanog tumora

5.1.1. Pasivno ciljanje

Pasivno ciljanje uglavnom ovisi o njegovoj nanometarskoj veličini i mikrovaskularnoj strukturi na mjestu tumora. U usporedbi s normalnim tkivima, većina tumorskih tkiva ima nepotpuno vaskularno remodeliranje zbog snažnog rasta i metabolizma, s razmakom od 10-1000 nm između vaskularnog endotela. Stoga nanočestice odgovarajuće veličine mogu dospjeti u tumorsko tkivo kroz cirkulaciju i obogaćuju se u tumorskom tkivu kroz učinak poboljšane propusnosti i zadržavanja (EPR) [38]. Općenito se vjeruje da nanočestice veličine 10-100 nm imaju bolji EPR učinak [39]. S druge strane, stanje rasta i gustoća vaskularnog endotela u područjima tumora također mogu utjecati na EPR učinak [40].

5.1.2. Aktivno ciljanje

Kako bi se dodatno poboljšao unos sustava za isporuku nano-lijekova od strane tumorskih stanica, površina nanočestica može se modificirati s aktivno ciljanim ligandima, tako da mogu ući u stanice putem endocitoze posredovane receptor-ligandom prepoznavanjem specifičnih receptora na površine tumorskih stanica [41]. U usporedbi s pasivnim ciljanjem, nanočestice s aktivnim ciljanjem imaju veću specifičnost i mogu značajno povećati intracelularnu koncentraciju lijeka u tumorskim stanicama [42].

5.1.3. Sustav za isporuku nano-lijekova koji reagira na tumorsko mikrookruženje

U usporedbi s normalnim tkivima, tumorska tkiva i stanice predstavljaju jedinstvene karakteristike mikrookruženja, koje uglavnom odražavaju sljedeće aspekte [43]: (1) pH vrijednost: tumorsko okruženje je slabo kiselo, pH 6,5–7.0. Inkluzije tumorskih stanica ili lizosomi imaju niži pH od 4.0–6.0 [44]; (2) tumorske stanice predstavljaju reduktivno okruženje u kojem koncentracija glutationa može doseći 1-10 mM, što je 100-1000 puta više od one u krvnom okruženju [45]; (3) mitohondriji tumorskih stanica predstavljaju oksidativno okruženje, u kojem koncentracija reaktivnih kisikovih vrsta (ROS) može doseći razinu mM [46]. Sustav za isporuku nanolijekova koji reagira na pH: promjena svojstava tijela pod stimulacijom pH čini da se nanočestice depolimeriziraju kako bi se postigla svrha ciljane dostave lijeka u tumorske stanice [47]. Reduktivni sustav za isporuku nanolijekova: prema razlici koncentracije GSH u tumorskim stanicama i normalnim tkivima, dizajnirani su materijali nanonosači osjetljivi na redukciju. Disulfidne ili disselenske veze sadržane u materijalu nosača mogu se reducirati unutarstaničnim GSH i prekinuti, uzrokujući tako drastične promjene u svojstvima nosača i oslobađajući inkapsulirane lijekove [48].

5.2. Dizajn nano-lijekova temeljen na smanjenju NADPH tijekom redukcije GSSG u feroptozi

Ferroptoza je programirani put stanične smrti koji karakterizira promijenjena homeostaza željeza i redoks. Općenito se vjeruje da je posebnost feroptoze nakupljanje ROS-a ovisno o željezu, što dovodi do peroksidacije lipida i stanične smrti [49]. Nadalje, feroptoza također pokazuje pad regulacije jezgrenog enzima GPX4 u antioksidativnom sustavu (sustav glutationa). Lipidne perokside će očistiti GPX4. Ako je aktivnost GPX4 inhibirana, proizvodit će se više lipidnih peroksida što će rezultirati oksidativnom neravnotežom i pojavom feroptoze [50]. Stoga su inhibicija GPX4 ili modulacija biosinteze GSH radi smanjenja aktivnosti GPX4 dva tipična pristupa za indukciju feroptoze. GSSG se reducira u GSH s GSH-R i trošenjem NADPH. NADPH je esencijalni intracelularni redukcijski agens za eliminaciju lipidnih hidroperoksida, a kada su ti procesi poremećeni, pokreće se feroptoza [51]. Osim toga, drugi mehanizam feroptoze je arahidonska kiselina/adreninska kiselina (AA/AdA), u kojoj je nakupljanje PE-AA-OOH još jedan očiti marker feroptoze. Vrijedno je napomenuti da nakupljanje PE-AA-OOH u stanicama ovisi o aktivnosti GPX4, a PE-AA-OOH se može oksidirati u PE-AA-OH u prisutnosti GPX4 [52-54]. Stoga se smanjenje NADPH, prekomjerni PE-AA-OOH i nedostatak GPX4 općenito predlažu kao glavne karakteristike inducirane feroptoze [55-57], kao što je prikazano na slici 3B.

Slika 3. Patogeneza GSH uključena u: (A) mehanizam poliolnog puta [21]; (B) mehanizam feroptoze [58].

Wang i sur. [58] dizajnirali su azobenzenski povezivač s polipeptidom konjugiranim s nitroimidazolom (DHM@RSL3), koji se cijepao u anaerobnom okruženju. Nanomicele DHM@RSL3 ušle su u stanice i cijepale se kako bi oslobodile RSL3, neku vrstu inhibitora GPX4. U međuvremenu, azobenzen iscrpljuje NADPH, ključni koenzim u sintezi GSH i Trx(SH)2, što dovodi do smanjenja sadržaja GSH i Trx(SH)2, te dvostruko inducira feroptozu za promicanje apoptoze tumorskih stanica. Zhao i sur. [59] pripremili su RSL3 željezni FL induktor fluorescencije, koji je inkapsuliran u micele za ciljanje GPX4. Otkrili su da su u modelima stanica adenokarcinoma jajnika ljudi otpornih na lijekove micele RSL3 bile 30 puta toksičnije od kontrolnih micela koje se mogu aktivirati. To je uglavnom zbog pada GSH, koji povećava sposobnost RSL3 da inducira feroptozu.

5.3. Dizajn nano-lijekova temeljen na GSH redukcijskoj sposobnosti u tumorskom mikrookruženju

5.3.1. Teorija o redoks-osjetljivosti u sustavu isporuke nano-lijekova

GSH se smatra primarnim merkaptan-disulfidnim redoks puferom kao redukcijskim sredstvom u stanicama [60,61]. Koncentracija GSH u krvi je samo 0,1 posto do 1 posto one u stanicama [62], stoga je krv obično okruženje u kojem GSH manje posreduje redoks reakcije. Međutim, tumorske stanice karakterizirane su abnormalnim tumorskim metabolizmom i povišenom razinom GSH kada se proizvodi oksidativni stres, a citosolna koncentracija GSH u tumorskim stanicama (2-20 mmol·L -1 ) je 1000 puta veća od one u normalnim stanicama, što rezultira predstavljaju jaku reducirajuću okolinu [63,64]. Ova ekstremna razlika u koncentraciji čini GSH redoks okidačem u sustavu za isporuku lijeka. Stoga se pojavio ciljani sustav za isporuku nano-lijekova osjetljiv na redoks, čija je glavna značajka dizajna uvođenje odgovarajućih kemijskih veza u okosnicu nosača, bočni lanac ili sredstvo za umrežavanje. Štoviše, te su kemijske veze relativno stabilne u normalnom okruženju ljudskog tijela, uključujući krv i tkivo, ali se lako podvrgavaju redoks reakcijama s visokim koncentracijama GSH, što dovodi do cijepanja kemijskih veza radi otpuštanja lijekova i postizanja točne isporuke lijekova u tumorskim stanicama [65,66].

5.3.2. Kemijske veze koje reagiraju s GSH

Redoks-osjetljive kemijske veze igraju ključnu ulogu u redoks-osjetljivom ciljanom sustavu isporuke nano-lijekova, koji je ekvivalentan prekidaču sustava isporuke i izravno utječe na otpuštanje lijeka. Postoje neke uobičajene kemijske veze osjetljive na redoks, poput disulfidne veze (-SS-), mono tioeterske veze (-S-), konjugirane veze -Pt-O-, diselenidne konjugirane veze (-Se-Se-) , konjugirana veza -Se-N-, mono selenska veza (-Se-). Među njima, disulfidna veza je naširoko korištena za razvoj sustava za isporuku lijeka koji reagira na redukciju za terapiju raka. Vrste i karakteristike uobičajenih kemijskih veza osjetljivih na redoks prikazane su u tablici 1.

5.3.3. Dizajn nano-lijeka temeljen na različitim kemijskim vezama Nano-lijek sa SS

Disulfidna veza (SS) je jedna od najčešćih veza osjetljivih na smanjenje GSH, a glavna metoda uvođenja -SS- je dizajn prolijekova s ​​redoks-osjetljivim vezama. Shao i sur. [67] uspješno su spojili kamptotecin i klorambucil disulfidnim vezama kako bi dizajnirali novi prolijek konjugiran s lijekom. Pod visokim koncentracijama GSH u tumorskim stanicama, disulfidne veze se uništavaju i učinkovito oslobađaju ova dva lijeka protiv raka. U usporedbi s jednim lijekom protiv raka, dva lijeka protiv raka mogu ne samo učinkovito ubiti tumorske stanice, već i značajno smanjiti štetne nuspojave na normalne stanice (Slika 4A). Khorsand i sur. [68] dizajnirali su razgradive micele koje reagiraju na tiol i koje se sastoje od visećeg metakrilatnog polimernog bloka obilježenog disulfidom (PHMssEt) i hidrofilnog poli (etilen oksida) (PEO) bloka. Disulfidna veza u PEO-b-PHMssEt se cijepa pod djelovanjem GSH, što dovodi do nestabilnosti samoorganiziranih micela. Ova nestabilnost micela izazvana GSH-om promijenila je njihovu distribuciju veličine i stvorila velike agregate, čime se povećalo oslobađanje inkapsuliranih lijekova protiv raka i omogućila višenamjenska aplikacija za dostavu lijeka (Slika 4B). Sun i sur. [69] pripremili su nanočestice PTX-SS CIT s većom dvostrukom redoks osjetljivošću, bržim otpuštanjem lijeka specifičnog za tumor i jačom antitumorskom aktivnošću (Slika 4C). Luo i sur. [70] dizajnirali su nove konjugate koji reagiraju na redoks premošćivanjem PTX i OA s disulfidnom vezom (PTX-SS-OA). Nanočestice PTX SS-OA pokazale su izrazitu superiornost u odnosu na taksol i PTX-OA, a tumor je gotovo potpuno nestao kod miševa nakon tretmana nanočesticama (Slika 4D). Nadalje, postoji mnogo dizajna nano-lijekova za terapiju protiv tumora temeljenih na disulfidnim vezama [71,72], koji pružaju obećavajuću perspektivu za dizajn sustava za isporuku nano-lijekova.

Slika 4. Shematski dizajn različitih lijekova protiv raka koji reagiraju na GSH s disulfidnom vezom. (A) Kamptotecin i klorambucil konjugirani s disulfidnom vezom (SS) supramolekularni lijekovi protiv raka. Cijepanje nanočestica do CPT s GSH [67]; (B) Razgradive PEO-b PHMssEt micele koje reagiraju na GSH. PEO-b-PHMssEt cijepanje u PEO-b-PHMSH s GSH [68]; (C) prolijekovi PTX-SS-CIT premošteni disulfidnom vezom cijepaju se na različite spojeve s GSH [60]; (D) konjugati koji reagiraju na redoks premošćivanjem PTX i OA s disulfidnom vezom (PTX-SS-OA). PTX-SS-OA cijepanje u PTX s GSH [70].''

Pitajte za više:

E-pošta:wallence.suen@wecistanche.com whatsapp: plus 86 15292862950