Test opterećenja furosemidom i intersticijska fibroza u biopsijama bubrega kod kronične bubrežne bolesti

Jesús Rivero1, Francisco Rodríguez2, Virgilia Soto2, Etienne Macedo3, Lakhmir S. Chawla3, Ravindra L. Mehta3, Sucheta Vaingankar2, Pranav S. Garimella3, Carlos Garza2 i Magdalena Madero2*

Sažetak

Pozadina:Intersticijska fibroza(IF) na biopsiji bubrega jedan je od najjačih čimbenika rizika za napredovanje bolesti bubrega. Test opterećenja furosemidom (FST) je validirani alat koji predviđa ozbiljnost akutnogbubregozljeda(osobito na 2 h) u kritično bolesnih pacijenata. Budući da se furosemid izlučuje kroz bubrežne tubule, odgovor na FST predstavlja tubularni sekretorni kapacitet. Koliko znamo, nema podataka o korelaciji između funkcionalnog tubularnog kapaciteta procijenjenog pomoću FST-a i IF-a na biopsijama bubrega pacijenata skroničnibubregbolest(CKD). Cilj ove studije bio je utvrditi povezanost između količine izlučenog urina (UO), mase izlučenog furosemida (FEM) i IF na biopsijama bubrega nakon FST.

Metode:Ova studija uključila je 84 bolesnika koji su bili podvrgnuti biopsiji bubrega za kliničke indikacije i FST. Postotak fibroze određen je morfometrijskom tehnikom i pregledan od strane neuropatologa. Svi su pacijenti podvrgnuti FST prije biopsije. Volumen urina i natrij u urinu mjereni su uz koncentracije furosemida u urinu u različitim vremenima (2, 4 i 6 h). Koristili smo utvrđenu jednadžbu za određivanje MKE. Vrijednosti su izražene kao srednja vrijednost, standardna devijacija ili postotak i Pearsonova korelacija.

Rezultati:Prosječna dob sudionika bila je 38 godina, a 44 posto bili su muškarci. Prevalencija dijabetes melitusa, hipertenzije i korištenja diuretika bila je značajno veća s uznapredovalim stupnjem fibroze. Nefrotski sindrom i akutna disfunkcija bubrežnog presatka bili su najčešće indikacije za biopsiju. eGFR je bio obrnuto proporcionalan stupnju fibroze. Ispitanici s najvišim stupnjem fibroze (stupanj 3) pokazali su značajno niži UO u prvom satu FST-a u usporedbi s nižim stupnjem fibroze (p {{0}}.015). Isto tako, ukupni UO i FEM bili su progresivno niži s višim stupnjevima fibroze. Inverzno linearna korelacija između FEM i stupnja fibroze (r=− 0,245,p = 0.02).

Zaključci:Naši nalazi pokazuju da intersticijska fibroza korelira s ukupnom količinom urina i FEM. Potrebne su daljnje studije kako bi se utvrdilo mogu li UO i FST biti neinvazivni alati za procjenu intersticijske fibroze.

Probna registracija:ClinicalTrials.gov NCT02417883.

Ključne riječi:intersticijska fibroza, ureza,Biopsija bubrega, Test opterećenja furosemidom

Za više informacija obratite seemily.li@wecistanche.com

cistanche acteosides poboljšava rad bubrega

Pozadina

Kronična bolest bubrega(CKD), osobito u uznapredovalim stadijima, smatra se jednim od najozbiljnijih javnozdravstvenih problema u svijetu [1, 2]. Dugo su vremena ulagani napori da se razumiju čimbenici rizika povezani s razvojemfibroza bubrega, budući da se smatra jednim od najjačih čimbenika rizika za napredovanje CKD-a, neovisno o etiologiji CKD-a, budući da predstavlja konačni uobičajeni put od ozljede [3]. Tubuli i intersticijski odjeljak zajedno čine približno 80 posto bubrežne mase i stoga su više od složene strukture potpornog sustava [4-6]. Postoje tri glavne poznate histološke strukture koje se mogu procijeniti za fibrozu: glomeruloskleroza, vaskularna skleroza i tubularna atrofija/tubulointersticijska fibroza (IFTA) [7, 8]. IFTA je konačni rezultat anatomske i funkcionalne neravnoteže gdje oštećenje bubrega premašuje poznati kompenzacijski mehanizmi popravka gdje različiti medijatori generiraju prijelaz iz normalne tubularne strukture u miofibroblaste i elemente izvanstaničnog matriksa [9, 10]. U ovom trenutku promjene su nepovratne i stoga snažno povezane sbolest bubregaprogresija [11]. Ispitivanja provedena na pacijentima koji su podvrgnuti transplantaciji bubrega sugeriraju da je IFTA snažno povezana s otkazivanjem presatka, progresijom i povećanom smrtnošću [12-14].

Nekoliko desetljeća vrednovanjerad bubregatemelji se prvenstveno na mjerenju brzine glomerularne filtracije (mGFR) ili na jednadžbama koje se temelje na kreatininu ili cistatinu C gdje se procjenjuje brzina glomerularne filtracije [15-29]. Ove metode međutim ne mjere funkciju tubula niti procjenjuju stupanj atrofije tubula ili intersticijske fibroze. Ispitani su neki alati za procjenu funkcije tubula, kao što su kapacitet razrjeđivanja, koncentracija [18-31] i acidifikacija urina [31-33], uz izlučenu frakciju natrija i uree (FENA i FEUN) [34-36 ], međutim, oni nisu naširoko korišteni u kliničkoj praksi. Dokazano je da furosemid stres test (FST) predviđa ozbiljnost i akutnostbubregozljeda(osobito nakon 2 h) u kritično bolesnih pacijenata i pokazao se superiornijim od urinarnih biomarkera [37]. Furosemid mora biti aktivno transportiran ljudskim transporterima organskih aniona (toplina) u proksimalnom tubulu u lumen tubula kako bi se izlučio. Budući da je izlučivanje furosemida urinom posredovano transportnim sustavom organskih aniona proksimalnih tubula, procijenili smo jesu li izlučivanje furosemida u urinu i povezani diuretski odgovor povezani s ozbiljnošću tubulointersticijalnog oštećenja utvrđenog u biopsijama bubrega. Namjeravali smo procijeniti vrijeme i veličinu izlučivanja furosemida i izlučivanja urina i utvrditi mogu li ove mjere biti informativne s obzirom na IF kod pacijenata koji su podvrgnuti biopsiji bubrega.

metode

metode

Uključili smo stacionarne bolesnike koji su primljeni u bolnicu radi biopsije bubrega s kliničkom indikacijom (alograft i nativni). Pacijenti su primljeni na nefrološki odjel Instituta Nacional de Cardiologia Ignacio Chavez. Bolesnici su morali biti stariji od 18 godina, imati eGFR kreatinina veći ili jednak 15 ml/min prema CKD-EPI [38] i morali su biti hemodinamski stabilni. Ispitanici su bili isključeni ako nisu prihvatili sudjelovanje u studiji ili ako medicinski tim nije smatrao da je pacijentica prikladna za studiju, ako su imali poznatu alergiju na furosemid, bili na nadomjesnoj bubrežnoj terapiji ili bili trudni (Sl. 1). Istraživanje je provedeno između travnja 2015. i kolovoza 2017. godine.

Istraživanje je odobreno od institucionalnog etičkog povjerenstva za istraživanje i registrirano pod brojem 15–920. Pisani informirani pristanak dobiven je od svih sudionika.

Intervencija

Tijekom hospitalizacije radi biopsije bubrega učinjen je test s furosemidom. Većina FST-a učinjena je 1 dan nakon što je biopsija bubrega obavljena uz punu suglasnost medicinskog tima. Kako bi se izbjegle pogreške u mjerenju urina kod pacijenata koji nisu imali kateter za mokraćni mjehur na dan pretrage, mjerenje volumena mokraćnog mjehura nakon mokrenja provedeno je sonografijom zdjelice.

Sve 84 biopsije bubrega učinjene su uz bolesnikov krevet uz ultrazvučno navođenje (Sonosite®). Za biopsiju bubrega koristili smo Biopsy Gun (BARD Magnum®) i igle, zahvati su rađeni u lokalnoj anesteziji.

Furosemid stres test

Intravenski furosemid primijenjen je u dozi od 1 mg/kg ako ispitanici nisu bili izloženi diureticima tijekom prethodnih 7 dana i u dozi od 1,5 mg/kg ako su bili izloženi diureticima petlje unutar 7 dana prije ispitivanja [37]. Obavljen je medicinski nadzor i stroga satna kvantifikacija UO. UO je prikupljan na početku i svaki sat do šestog sata (slika 2). Status volumena procijenio je liječnik, pacijenti koji su bili hipovolemični ili su imali hemodinamsku nestabilnost bili su isključeni iz studije (n=5), 76 ispitanika bilo je euvolemično, a 8 ispitanika bilo je hipervolemično. Nadoknada tekućine euvolemijskim subjektima daje se u omjeru 1:1 cc na temelju prethodne količine urina po satu. Hipervolemični pacijenti nisu primili intravensku nadoknadu tekućine.

Histopatološka analiza

Uzorak bubrega

Biopsiju bubrega obradio je odjel za patologiju Instituta Nacional de Cardiologia Ignacio Chávez. Sva tkiva biopsije bubrega smatrana su dostatnim za histopatološku procjenu. Iskusni bubrežni patolog koji nije vidio rezultate FST-a opisao je stupanjintersticijska fibroza, izravnom vizualizacijom svjetlosnog mikroskopa, s naglaskom na bojanje Massonovog trikroma. Dodatno, postotak fibroze je procijenjen optičkim lektorskim strojem (morfometrija) pomoću analizatora Olympus BX51 mikroskopa, slikovnog softvera Image-PN-Plus 6 i kamere: VF Evolution C (pola Cybernetics). Ova tehnika je prihvaćena kao standard jer je reproducibilnija [39]. IF rezultat je kategoriziran u tri skupine prema postotku fibroze: stupanj I < 25="" posto,="" stupanj="" 2,="" 26-50="" posto="" i="" stupanj="" 3=""> 50 posto. Budući da su tubularna atrofija (TA) i IF u visokoj korelaciji, TA se rutinski ne opisuje u našim patološkim izvješćima.

Izlučivanje furosemida urinom: UO je prikupljan svakih sat vremena tijekom 6 sati i pohranjen odvojeno u alikvotima. Analize furosemida određene su u pojedinačnim uzorcima prikupljenim u satima 2 (0–2 h), 4 (2–4 h), 6 (4–6 h) i u mješavini svih urina.

HPLC analiza furosemida u uzorcima urina pročišćena je upotrebom Oasis MCX uloška (dio #1860{{10}}0254 Oasis MCX 3 cc uloška 60 mg 30 μm). Uložak je ispran s 2 ml metanola, a zatim s 2 ml Milli-Q vode i napunjen uzorkom urina (0,5 ml podešen na pH 6,0 s 2 M HCl i razrijeđeno s 0,5 ml MilliQ vode). Zatim je uložak ispran s 1 ml 2 postotne mravlje kiseline kako bi se uklonili kiseli spojevi, nakon čega je slijedio 1 ml metanola kako bi se uklonili neutralni spojevi, a vezani furosemid je eluiran s 1 ml 5 postotnog amonijevog hidroksida u metanolu. Isprana frakcija amonijevog hidroksida osušena je u speed-vacu, rekonstituirana u 100 ul MilliQ vode i kvantificirana validiranim HPLC testom [40]. Korištena HPLC kolona bila je Thermo Scientific Acclaim 120 T, 3X150 mm, C18, 3 um, 120 A, sa zaštitnim uloškom TSK 120 T. Brzina protoka bila je 0,5 ml/min, temperatura kolone 40 stupnjeva, a vrijeme rada 15 min. Otapalo za izokratsko eluiranje bilo je 30 posto acetonitrila i 70 posto kalijevog fosfatnog monobaznog pufera (10 mM, pH 3,85). Volumen uzorka od 50 ul je ubrizgan i furosemid je detektiran na UV 233 nm, vrijeme zadržavanja 6,3 min.

Procijenili smo jednadžbu mase izlučenog furosemida (FEM) izraženu kao postotak pomoću sljedeće jednadžbe:

Statistička analiza

Sve vrijednosti su izražene kao srednje vrijednosti, standardna devijacija i postoci. Rezultati su izraženi kao prosjek, standardna devijacija (SD) ili proporcije prema potrebi. Usporedbe su napravljene korištenjem chi [2] za proporcije i pomoću Student T-testa za neovisne uzorke (usporedba između skupina) prema odgovoru na furosemid. Pearsonovim testom utvrđena je korelacija između stupnja fibroze i odgovora na FST. Koristili smo statistički program SPSS 16 verzija.

Rezultati

Prosječna dob bila je 38 godina, 44 posto bili su muškarci, a srednja vrijednost eGFR bila je 64 ± 42 ml/min/1,72 m2. Prisutnost šećerne bolesti, hipertenzije i uzimanja diuretika bila je dominantno veća kod fibroze III stupnja. Tijekom ispitivanja nije bilo epizoda hipotenzije ili hipokalijemije. Kao što je i očekivano, eGFR se smanjio kaointersticijska fibrozapovećana (Tablica 1). Nefrotski sindrom i akutna disfunkcija bubrežnog presatka bili su najčešće indikacije za biopsiju.

Primijetili smo da ispitanici s fibrozom stupnja 3 pokazuju značajno niži volumen urina u satima 1, 4 i ukupni urin u usporedbi s stupnjevima I i II (155 mL ± 181 nasuprot 316 mL ± 262 nasuprot 328 ± 353) (tablica 2). (FEM) je bio progresivno niži s višim stupnjevima fibroze, u 2. i 4. satu (1,6 i 0.8 za fibrozu III. stupnja u odnosu na 6,8 i 4.0) (tablica 2 i slika 3 ). Kada se zasebno analizira korelacija između FEM2 i fibroze bila je značajna (p=0.04) u nativnim bubrezima, ali ne i u

skupina za transplantaciju (p=0.26)

Provedena je pod-analiza kako bi se procijenilo ponašanje FEM-a u različitim vremenima s obzirom na graničnu točku koja je pokazala najbolju površinu ispod krivulje u prethodno prijavljenim kohortama u literaturi s akutnom ozljedom bubrega (200 ml enureze), utvrdivši da je FEM u drugom satu mjerenje koje najbolje korelira s ovom točkom rezanja. (tablica 4)

Uočena je inverzna korelacija između UO i stupnja fibroze (što je veći odgovor u izlučenom urinu, to je niži stupanj fibroze) (kvadratna korelacija {{0}}.072, po svaki ml promjene u UO došlo je do 0.2 promjene u fibrozi). Analiza osjetljivosti Budući da je albumin neophodan za lučenje furosemida, procijenili smo Pearsonovu korelaciju između albumina u serumu i izlučenog urina i FEM. Postojala je značajna korelacija između serumskog albumina i ukupnog UO (p=0,008) (Kod viših serumskih albumina primijetili smo veći UO), ali nije bilo značajne korelacije između albumina i FEM (p=0).64 ). Isto tako, nije bilo korelacije između razina proteinurije i FEM (p=0.48). Kada se zasebno analizira, korelacija između proteinurije i FEM-a u nativnim i presađenim bubrezima nije bila različita (p=0.25 u odnosu na p=0.86). Kao što se očekivalo, postojala je značajna korelacija između eGFR (CKDEPI) i FEM2 (p=0.001) i između eGFR i fibroze (p=< 0.001)="" (slika="" 4a,="" b).="" konačno,="" budući="" da="" je="" većina="" biopsija="" alografta="" obavljena="" zbog="" disfunkcije="" alografta,="" procijenili="" smo="" stopu="" akutne="" ozljede="" bubrega="" u="" našoj="" populaciji.="" kreatinini="" su="" procijenjeni="" 3="" mjeseca="" prije="" i="" 3="" mjeseca="" nakon="" studije="" korištenjem="" neparametarskog="" testa="" (wilcoxonov="" test="" raspona)="" za="" usporedbu.="" u="" svim="" usporedbama="" srodnih="" uzoraka="" pronašli="" smo="" p="" vrijednosti="" veće="" od="" 0,1="" (p="NS)." rezultati="" se="" nisu="" razlikovali="" između="" alografta="" i="" nativnih="">

Rasprava

U našoj studiji uspjeli smo utvrditi povezanost između funkcionalne tubularne procjene s FST-om i stupnja intersticijske fibroze dobivene u biopsijama bubrega. Volumen urina korelirao je sa stupnjem fibroze, a izlučena masa furosemida smanjivala se kako se fibroza povećavala. Koliko znamo, ovo je prva studija koja je utvrdila tubularni anatomsko-funkcionalni odnos.

Otkrili smo da je masa izlučenog furosemida nakon 2 sata (FEM2) u korelaciji s niskom količinom urina tijekom istog vremenskog okvira. FEM2 je zamišljen da funkcionira slično kao forsirani izdahnuti volumen (FEV1) u testovima plućne funkcije. Zdrava osoba može izdahnuti većinu zraka iz pluća u 1 s. Slično tome, zdrava osoba s punim brojem funkcionalnih nefrona može brzo eliminirati furosemid iz urina. Međutim, kada je prisutna tubularna disfunkcija, kao što je slučaj s tubularno-intersticijalnom fibrozom, fibrozirani bubreg gubi sposobnost učinkovitog premještanja furosemida iz plazme u lumen tubula. Ova vrsta funkcionalnog testiranja može predstavljati osnovu za procjenu tubularne funkcije na neinvazivan način. marker tubularne funkcije i povezan je s padom eGFR-a i kardiovaskularnim ishodima.

Neke od prvih studija za procjenu tubularne funkcije proveli su naša grupa i drugi prije 30 godina. U tim je studijama funkcionalni kapacitet tubula procijenjen promatranjem razlike između klirensa kreatinina i klirensa inulina [43]. U tim je studijama glomerularna rezerva procijenjena proteinskim izazovom. Ova su istraživanja provedena na tri skupine bolesnika: zdravi pacijenti, davatelji bubrega i bolesnici s kroničnom bubrežnom bolesti, pokazujući kod potonjih manju sposobnost povećanja GFR-a prije primjene proteina i ograničen tubularni klirens kreatinina [44]. Međutim, ti testovi ostaju istraživački alat i mogu biti glomazni zbog toga što punjenje proteinima kao takvo ima ograničenu kliničku primjenjivost.

Ideja da se procijeni tubularna funkcija primjenom intravenskog furosemida oslanja se na sposobnost lijeka da se izlučuje u proksimalnom tubulu. Da bi furosemid povećao izlučivanje urina, furosemid se mora aktivno izlučivati ​​u proksimalni lumen, a funkcije debelog uzlaznog kraka, prohodnost lumina i sabirni kanal moraju biti očuvani. Test opterećenja s furosemidom korišten je u kliničkoj praksi samo u kontekstu akutne ozljede bubrega i pokazalo se da predviđa ishode u ovoj populaciji. Standardna doza intravenskog furosemida isporučena je kritično bolesnim pacijentima s KDIGO stadijem I ili II AKI, a zatim je procijenjen odgovor izlaza urina. {{0}}h izlučenog urina < 100="" ml/h="" kao="" odgovor="" na="" izazov="" furosemidom="" predviđa="" progresiju="" do="" kdigo="" stadija="" iii="" aki="" unutar="" 14="" dana="" s="" karakterističnim="" područjem="" ispod="" krivulje="" (auc)="" primatelja="" od="" 0,87="" [37="" ].="" ovaj="" je="" test="" bio="" bolji="" od="" mnogih="" urinarnih="" biomarkera="" koji="" se="" koriste="" za="" predviđanje="" aki.="" naknadne="" studije="" fst-a="" u="" aki="" pokazale="" su="" da="" je="" izvedba="" fst-a="" robusna="" i="" dosljedna="" za="" procjenu="" progresije="" i="" oporavka="" aki="" [45-48].="" međutim,="" nijedna="" od="" ovih="" studija="" nije="" mjerila="" izlučenu="" masu="">

Procjena i praćenje CKD primarno su usmjereni na GFR i stupanj proteinurije. Iako nije prikazano u ovoj studiji, FST može kliničarima ponuditi neinvazivni funkcionalni alat za procjenu tubularne funkcije u bolesnika s bubrežnom bolešću. Ipak, čini se da FST nudi nove informacije za ove pacijente.

Naša studija ima nekoliko prednosti. Prvo, studija istražuje novi koncept tubularne funkcije i njezinu povezanost s intersticijskom fibrozom u biopsijama bubrega. Drugo, količina fibroze na biopsijama bubrega također je procijenjena morfometrijom uklanjajući potencijalnu pristranost promatranja od strane patologa. Treće, osim izlučenog urina, mjerili smo masu furosemida izlučenu urinom. Na kraju, ova analiza pokazuje da FST nudi više informacija u usporedbi s klasičnom procjenom GFR-a.

Naša studija također ima ograničenja. Prvo, ovo je studija presjeka i nemamo podatke o utjecaju FST-a na opadanje funkcije bubrega tijekom vremena. Drugo, snaga povezanosti među različitim analiziranim varijablama (intersticijska fibroza, FEM, CKD-EPI i ukupno izlučivanje urina) bila je značajna samo u podskupini s prirodnim bubrezima u usporedbi sa skupinom s transplantiranim bubregom, vjerojatno u odnosu na veću bubrežnu masu i veću veličinu uzorka skupine nativnih bubrega. Konačno, iako statistički značajne, korelacije nisu bile jake.

Zaključci

Zaključno, naši nalazi to potvrđujuintersticijska fibrozakorelira s FST i s ukupnim izlučenim urinom i s masom izlučenog furosemida. Ovo bi se moglo uspostaviti kao neinvazivni alat za procjenu intersticijske fibroze i može ponuditi više prognostičkih informacija u odnosu na same eGFR i proteinuriju. Potrebne su daljnje longitudinalne studije kako bi se utvrdilo je li FST povezan sbubregfunkcijaopadati tijekom vremena.

Reference

1. Jha V, Garcia-Garcia G, Iseki K, et al. Kronična bubrežna bolest: globalna dimenzija i perspektive. Lanceta. 2013;382:260–72.

2. De Nicola L, Zocalli C. Prevalencija kronične bubrežne bolesti u općoj populaciji: heterogenost i zabrinutost. Nephrol Dial transplantacija. 2016; 31: 331–5.

3. Liu Y. Stanični i molekularni mehanizmi bubrežne fibroze. Nat Rev Nephrol. 2011;7:684–96.

4. Kaissling B, Hegyi I, Loffing J, et al. Morfologija intersticijskih stanica zdravog bubrega. Anat Embryol. 1996;193:303-18.

5. Alcorn D, Maric C, McCausland J. Razvoj bubrežnog intersticija. Pediatr Nephrol. 1999;13:347-54.

6. Kaissling B, Le Hir M. Bubrežni kortikalni intersticij: morfološki i funkcionalni aspekti. Histochem Cell Biol. 2008;130:247–62.

7. Hewitson TD. Fibroza u bubregu: je li zajednički problem prepolovljen problem? Fibrogeneza Popravak tkiva. 2012; 5: S14.

8. Iwano M, Neilson EG. Mehanizmi tubulointersticijske fibroze. Curr Opin Nephrol Hypertens. 2004;13:279-84.

9. Tampa D, Zeisberg M. Potencijalni pristupi preokretu ili popravljanju fibroze bubrega. Nat Rev Nephrol. 2014;10:226–37.

10. Portilla D. Apoptoza, fibroza i starenje. Nephron Clin Pract. 2014;127: 65–9.

11. Nath K. Tubulointersticijske promjene kao glavna determinanta u progresiji oštećenja bubrega. Am J Kidney Dis. 1992;20:1-17.

12. Mannon RB, Matas AJ, Grande J, et al. Upala u područjima tubularne atrofije u biopsijama alografta bubrega: snažan prediktor zatajenja alografta. Am J Transplant. 2010;10:2066-73.

13. Haas M. Chronic allograft nephropathy odnintersticijska fibrozai tubularna atrofija: što je ime? Curr Opin Nephrol Hypertens. 2014;23:245-50.

14. Venner JM, Famulski KS, Reeve J, et al. Odnosi između ozljeda, fibroze i vremena u transplantaciji bubrega kod ljudi. JCI Insight. 2016;1:e85323.

15. Smith HW. Bubreg: građa i funkcija u zdravlju i bolesti. New York: Oxford University Press, Inc; 1951. str. 191–2.

16. Myers GL, Miller WG, Coresh J, et al. Preporuke za poboljšanje mjerenja kreatinina u serumu: izvješće laboratorijske radne skupine Nacionalnog programa edukacije o bubrežnim bolestima. Clin Chem. 2006;52:5-18.

17. Ferguson M, Waikar SS. Utvrđeni i novi markeri funkcije bubrega. Clin Chem. 2012;58:680–9.

18. Gowda S, Desai PB, Kulkarni SS, et al. Markeri testova bubrežne funkcije. N Am J Med Sci. 2010;2:170–3.

19. Bauer JH, Brooks CS, Burch RN. Klinička procjena klirensa kreatinina kao mjere brzine glomerularne filtracije. Am J Kidney Dis. 1982;2:337–46.

20. Nilsson-Ehle P, Grubb A. Novi markeri za određivanje GFR: klirens joheksola i koncentracija cistatina C u serumu. Kidney Int Suppl. 1994;46:S17–9.

21. Levey AS, Bosch JP, Lewis JB, et al. Točnija metoda za procjenu brzine glomerularne filtracije iz serumskog kreatinina: nova jednadžba predviđanja. Ann Intern Med. 1999;130:461-70.

22. Grubb AO. Cistatin C—svojstva i upotreba kao dijagnostički marker. Adv Clin Chem. 2000;35:63-99.

23. Knight EL, Verhave JC, Spiegelman D, et al. Čimbenici koji utječu na razine cistatina C u serumu osim funkcije bubrega i utjecaj na mjerenje funkcije bubrega. Kidney Int. 2004;65:1416-21.

24. Coresh J, Astor BC, McQuillan G, et al. Kalibracija i nasumična varijacija testa serumskog kreatinina kao kritični elementi korištenja jednadžbi za procjenu brzine glomerularne filtracije. Am J Kidney Dis. 2002;39:920-9.

25. Cockcroft DW, Gault MH. Predviđanje klirensa kreatinina iz serumskog kreatinina. Nefron. 1976;16:31-4.

26. Luka RG. Urea i BUN. N Engl J Med. 1981;305:1213-5.

27. Herrington D, Drusano GL, Smalls U, et al. Lažno povišenje razine kreatinina u serumu. JAMA. 1984;252:2962.

28. Ibrahim H, Mondress M, Tello A, et al. Alternativa formulama za Cockcroft-Gault i modificiranje prehrane kod bubrežnih bolesti u predviđanju GFR kod osoba s dijabetesom tipa 1. J Am Soc Nephrol. 2005; 16:1051-60.

29. Froissart M, Rosset J, Jacquot C, et al. Prediktivni učinak modifikacije prehrane kod bubrežne bolesti i Cockcroft-Gaultove jednadžbe za procjenu bubrežne funkcije. J Am Soc Nephrol. 2005;16:763–73.

30. Zerbe RL, Robertson GL. Usporedba mjerenja vazopresina u plazmi sa standardnim neizravnim testom u diferencijalnoj dijagnozi poliurije. N Engl J Med. 1981;305:1539-46.

31. Halperin ML, Richardson RM, Bear RA, et al. Amonij u mokraći: ključ za dijagnozu distalne renalne tubularne acidoze. Nefron. 1988;50:1-4.

32. Batlle DC. Segmentna karakterizacija defekata u acidifikaciji skupljačkih tubula. Kidney Int. 1986;30:546-54.

33. Sabatini S, Kurtzman NA. Patofiziologija renalnih tubularnih acidoza. Semin Nefrol. 1991;11:202-11.

34. Carvounis CP, Nisar S, Guro-Razuman S. Značaj frakcijskog izlučivanja uree u diferencijalnoj dijagnozi akutnog zatajenja bubrega. Kidney Int. 2002;62:2223-9.

35. Rabb H. Procjena urinarnih markera u akutnom zatajenju bubrega. Curr Opin Nephrol Hypertens. 1988;7:681-6.

36. Miller TR, Anderson RJ, Linas SL, et al. Urinarni dijagnostički pokazatelji u akutnom zatajenju bubrega: prospektivna studija. Ann Intern Med. 1978;88:47-57.

37. Chawla LS, Davison DL, Brasha-Mitchell E, et al. Razvoj i standardizacija testa opterećenja s furosemidom za predviđanje ozbiljnosti akutne ozljede bubrega. Crit Care. 2013;17:R207.

38. Levey AS, Stevens LA, Schmid CH, et al. Nova jednadžba za procjenu brzine glomerularne filtracije. Ann Intern Med. 2009;150:604-12.

39. Farris AB, Adams CD, Brousaides N, et al. Morfometrijska i vizualna procjena fibroze u biopsijama bubrega. J Am Soc Nephrol. 2011;22:176–86.

40. Youm I, Youan BB. Validirana reverzno-fazna tekućinska kromatografija visoke učinkovitosti za kvantifikaciju furosemida u tabletama i nanočesticama. J Anal Methods Chem. 2013;2013:207028.

41. Schardijn GH, Statius van Eps LW. Beta 2-mikroglobulin: njegov značaj u procjeni bubrežne funkcije. Kidney Int. 1987;32:635-41.

42. Garimella PS, Biggs ML, Katz R, et al. Uromodulin u urinu, funkcija bubrega i kardiovaskularne bolesti u starijih odraslih osoba. Kidney Int. 2015;88:1126-34.

43. Herrera J, Rodriguez-Iturbe B. Stimulacija tubularnog izlučivanja kreatinina u zdravlju i u stanjima povezanim sa smanjenom masom nefrona. Dokazi za tubularnu funkcionalnu rezervu. Nephrol Dial transplantacija. 1998; 13: 623–9.

44. Barai S, Gambhir S, Prasad N, et al. Funkcionalni rezervni kapacitet bubrega u različitim stadijima kronične bubrežne bolesti. Nefrologija. 2010;15:350–3.

45. Udomkarnjananun S, Townamchai N, Iampenkhae K, et al. Test opterećenja s furosemidom kao biomarker za predviđanje odgođene funkcije presatka kod transplantacije bubrega. Nefron. 2019;141:236-48.

46. ​​Lumlertgul N, Peerapornratana S. Trakarnvanich Tet al. Rano naspram standardnog početka bubrežne nadomjesne terapije u bolesnika s akutnom bubrežnom ozljedom koji ne reagiraju na test stresa furosemidom (ispitivanje FST). Crit Care. 2018;22:101.

47. Rewa OG, Bagshaw SM, Wang X, et al. Test opterećenja s furosemidom za predviđanje pogoršanja akutne ozljede bubrega u kritično bolesnih pacijenata: multicentrična, prospektivna, opservacijska studija. J Crit Care. 2019;52:109–14.

48. Van der Voort PH, Boerma EC, Pickkers P. Furosemid stres test za predviđanje bubrežne funkcije nakon kontinuirane bubrežne nadomjesne terapije. Crit Care. 2014;18:429.