Učinak dekokcije Bushen Huoxue Xiezhuo na apoptozu i fibrozu bubrežnog tkiva kod štakora s 5/6 nefrektomijom na temelju HIF-1 / PKM2
Jan 27, 2026
3.4 Učinci dekokcije Bushen Huoxue Xiezhuo na ekspresiju proteina -SMA, TGF-, FN i kolagena-1 u bubrežnom tkivu CRF štakora
Kao što je prikazano na slikama 3~6, u usporedbi s lažno operiranom grupom, ekspresija proteina -SMA, TGF-, FN i kolagena-1 u bubrežnom tkivu modelne skupine bila je značajno povećana (P<0.05). Compared with the model group, the protein expressions of α-SMA, TGF-β, FN, and collagen-1 in renal tissue of all drug-administered groups were significantly decreased (P<0.05). The effect of Bushen Huoxue Xiezhuo Decoction was dose-dependent.
Tablica 2 Učinci Bushen Huoxue Xiezhuo decoction na serumske razine uree, Scr i ₂-MG u CRF štakora (x̄±s, n=10)
| Skupina | Urea/(mmol/L) | Scr/(μmol/L) | ₂-MG/(mg/L) |
|---|---|---|---|
| Lažno upravljana skupina | 6.23±0.63 | 37.35±0.83 | 0.98±0.13 |
| Grupa modela | 23.02±0.73* | 118.57±1.03* | 3.95±1.07* |
| Skupina niske doze | 21.23±0.69# | 112.45±0.87# | 2.57±0.35# |
| Skupina sa srednjom dozom | 18.02±0.54# | 93.18±1.17# | 1.98±0.09# |
| Skupina s visokim dozama | 15.23±0.33# | 87.24±1.08# | 1.13±0.17# |
| Skupina benazeprila | 19.09±0.59# | 105.77±0.67# | 2.48±0.15# |
Napomena: *str<0.05 vs. sham-operated group; #P<0.05 vs. model group
3.5 Učinci izvarka Bushen Huoxue Xiezhuo na ekspresije mRNA HIF-1, PKM2 i HK2 u bubrežnom tkivu CRF štakora
Kao što je prikazano na slici 7, u usporedbi s lažno operiranom grupom, ekspresije mRNA HIF-1, PKM2 i HK2 u bubrežnom tkivu modelne skupine bile su značajno povećane (P<0.05). Compared with the model group, the mRNA expressions of HIF-1α, PKM2, and HK2 in renal tissue of all drug-administered groups were significantly decreased (P<0.05). The effect of Bushen Huoxue Xiezhuo Decoction was dose-dependent.
Slika 3. Učinci formule za tonificiranje bubrega, aktivaciju krvi i uklanjanje zamućenosti na ekspresiju -SMA proteina u bubrežnom tkivu CRF štakora (ICH, ×400)
A. Lažno upravljana grupa
B. Grupa modela
C. Grupa formula niske doze za tonificiranje bubrega, aktivaciju krvi i uklanjanje zamućenosti
D. Grupa formula srednje doze za tonificiranje bubrega, aktivaciju krvi i uklanjanje zamućenosti
E. Grupa formula s visokim dozama za tonificiranje bubrega, aktivaciju krvi i uklanjanje zamućenosti
F. Benazepril Group
Slika 4. Učinci formule za toniziranje bubrega, aktivaciju krvi i uklanjanje zamućenosti na ekspresiju TGF-proteina u tkivu bubrega CRF štakora (ICH, ×400)
A. Lažno upravljana grupa
B. Grupa modela
C. Grupa formula niske doze za tonificiranje bubrega, aktivaciju krvi i uklanjanje zamućenosti
D. Grupa formula srednje doze za tonificiranje bubrega, aktivaciju krvi i uklanjanje zamućenosti
E. Grupa formula s visokim dozama za tonificiranje bubrega, aktivaciju krvi i uklanjanje zamućenosti
F. Benazepril Group
Služba podrške Wecistanche-Za više detalja o suradnji
E-pošta:wallence.suen@wecistanche.com
3.6 Učinci izvarka Bushen Huoxue Xiezhuo na ekspresiju proteina HIF-1, PKM2 i HK2 u bubrežnom tkivu CRF štakora
Kao što je prikazano na slici 8, u usporedbi s lažno operiranom grupom, ekspresija proteina HIF-1, PKM2 i HK2 u bubrežnom tkivu modelne skupine bila je značajno povećana (P<0.05). Compared with the model group, the protein expressions of HIF-1α, PKM2, and HK2 in renal tissue of all drug-administered groups were significantly decreased (P<0.05). The effect of Bushen Huoxue Xiezhuo Decoction was dose-dependent.
3.7 Učinci dekokcije Bushen Huoxue Xiezhuo na ekspresiju proteina Bax, Bcl-2 i kaspaze-3 u bubrežnom tkivu CRF štakora
Kao što je prikazano na slici 9, u usporedbi s lažno operiranom grupom, ekspresija proteina Bax i kaspaze-3 u bubrežnom tkivu modelne skupine bila je značajno povećana, dok je ekspresija proteina Bcl-2 bila značajno smanjena (P<0.05). Compared with the model group, the protein expressions of Bax and Caspase-3 in renal tissue of all drug-administered groups were significantly decreased, and the protein expression of Bcl-2 was significantly increased (P<0.05). The effect of Bushen Huoxue Xiezhuo Decoction was dose-dependent.
Slika 7. Učinci formule za toniziranje bubrega, aktivaciju krvi i uklanjanje zamućenosti na ekspresiju HIF-1 , PKM2 i HK2 mRNA u tkivu bubrega CRF štakora
A. Lažno upravljana grupa
B. Grupa modela
C. Grupa formula niske doze za tonificiranje bubrega, aktivaciju krvi i uklanjanje zamućenosti
D. Grupa formula srednje doze za tonificiranje bubrega, aktivaciju krvi i uklanjanje zamućenosti
E. Grupa formula s visokim dozama za tonificiranje bubrega, aktivaciju krvi i uklanjanje zamućenosti
F. Benazepril Group
Napomena: u usporedbi s lažno operiranom grupom,
∗ P<0.05; Compared with the model group,
#P<0.05
Slika 8. Učinci formule za toniziranje bubrega, aktivaciju krvi i uklanjanje zamućenosti na HIF-1, PKM2 i HK2 proteine u tkivu bubrega CRF štakora
A. Lažno upravljana grupa
B. Grupa modela
C. Grupa formula niske doze za tonificiranje bubrega, aktivaciju krvi i uklanjanje zamućenosti
D. Grupa formula srednje doze za tonificiranje bubrega, aktivaciju krvi i uklanjanje zamućenosti
E. Grupa formula s visokim dozama za tonificiranje bubrega, aktivaciju krvi i uklanjanje zamućenosti
F. Benazepril Group
Slika 9. Učinci formule za toniziranje bubrega, aktivaciju krvi i uklanjanje zamućenosti na ekspresiju proteina Bax, Bcl-2 i kaspaze-3 u tkivu bubrega CRF štakora
A. Lažno upravljana grupa
B. Grupa modela
C. Grupa formula niske doze za tonificiranje bubrega, aktivaciju krvi i uklanjanje zamućenosti
D. Grupa formula srednje doze za tonificiranje bubrega, aktivaciju krvi i uklanjanje zamućenosti
E. Grupa formula s visokim dozama za tonificiranje bubrega, aktivaciju krvi i uklanjanje zamućenosti
F. Benazepril Group
Napomena: u usporedbi s lažno operiranom grupom,
∗ P<0.05; Compared with the model group,
#P<0.05
4 Rasprava
Posljednjih godina broj oboljelih od KBB-a je u porastu, a značajno je porasla i njegova prevalencija. Na temelju osnovne patogeneze CKD kao "nedostatka kompliciranog s viškom", profesor Tan Jinchuan predložio je terapeutski princip toniziranja bubrega i slezene, aktiviranja cirkulacije krvi i dreniranja zamućenja. Prethodne studije pokazale su da dekokcija Bushen Huoxue Xiezhuo može regulirati putove kao što su autofagija, apoptoza i fibroza kako bi se zaštitila funkcija bubrega. Relevantne studije pokazale su da rabarbara, astragalus, anđelika, Salvia miltiorrhiza i njihovi aktivni sastojci mogu inhibirati fibrozu bubrega i zaštititi funkciju bubrega [7]. Rezultati ove studije pokazali su da su u usporedbi s modelnom skupinom, sve dozne skupine Bushen Huoxue Xiezhuo decoctiona poboljšale serumske razine uree, Scr i ₂-MG, kao i taloženje kolagenih vlakana u bubrežnom tkivu u različitim stupnjevima, što sugerira da Bushen Huoxue Xiezhuo decoction igra važnu ulogu u zaštiti bubrežne funkcije i odgađanju bubrežne fibroze.
Značajno, slični zaštitni učinci na bubrege prijavljeni su za Cistanche tubulosa, klasičnu biljku TCM-a poznatu kao "pustinjski ginseng" i priznatu kao vrhunski ljekoviti materijal koji hrani bubrege [15]. U teoriji TKM-a, Cistanche tubulosa je visoko cijenjena zbog svoje sposobnosti da "okrepi bubrežni yang i nadoknadi esenciju", a moderna istraživanja su potvrdila da je bogata aktivnim sastojcima kao što su ehinakozid, verbaskozid i flavonoidi [15]. Ove komponente mogu inhibirati apoptozu bubrežnih stanica, potaknuti proliferaciju bubrežnih stanica, popraviti oštećeno bubrežno tkivo i proširiti bubrežne krvne žile - učinci koji su usklađeni sa zaštitnim mehanizmima bubrega uočenim u Bushen Huoxue Xiezhuo decoction [15]. Takva otkrića naglašavaju potencijal TCM biljaka sa svojstvima koja njeguju bubrege u liječenju KBB-a.
Apoptoza je jedan od važnih mehanizama u osnovi patogeneze CRF-a. U fiziološkim uvjetima održava se delikatna dinamička ravnoteža između proapoptotičkih i antiapoptotičkih članova obitelji. Nakon što se apoptoza prekomjerno aktivira, to će dovesti do patoloških promjena u glomerulima i bubrežnim tubulima, čime se oštećuje bubrežna funkcija. Kada se proapoptotski protein Bax aktivira, on inducira povećanje propusnosti vanjske membrane mitohondrija, što rezultira kolapsom potencijala unutarnje membrane mitohondrija i otpuštanjem citokroma C (CytC) u citoplazmu, što aktivira kaspazu-9 i dalje pokreće apoptotičku kaskadu ovisnu o kaspazi-3 [8]. Relevantne studije pokazale su da u proksimalnim tubularnim epitelnim stanicama izbacivanje Bax gena ili pojačana ekspresija Bcl-2 može učinkovito inhibirati apoptotski proces [9]. Ova studija je otkrila da su sve doze Bushen Huoxue Xiezhuo decoctiona značajno smanjile ekspresiju pro-apoptotskih čimbenika Bax i Caspase-3 i povećale ekspresiju anti-apoptotskog faktora Bcl-2, što sugerira da Bushen Huoxue Xiezhuo decoction može poboljšati funkciju bubrega blokiranjem apoptotičkog puta.
Bubrežna fibroza je kronična bolest bubrega posredovana višestrukim citokinima, regulirana višestrukim signalnim putovima i potaknuta višestrukim čimbenicima. To je čest put koji vodi do završnog stadija bubrežne bolesti, karakteriziran oštećenjem bubrežnog tkiva, upalom, taloženjem ECM-a i prijelazom tubularnog epitela u mezenhim. Bubrežna fibroza uključuje glomerularnu fibrozu i tubulointersticijsku fibrozu [8]. Studije su potvrdile da je glavna patološka manifestacija ranog CRF bubrežna fibroza, a odgoda progresije bubrežne fibroze je od velike važnosti za smanjenje oštećenja bubrega i ublažavanje progresije bubrežnog zatajenja [10]. TGF- je ključni podtip pokretača fibroze, koji regulira sintezu ECM-a kroz Smad signalni put. FN je uključen u staničnu adheziju, migraciju i sklapanje ECM-a. Glavni stanični izvor prekomjernog taloženja ECM-a su miofibroblasti, a njihova strukturna transdiferencijacija ključni je čimbenik u nastanku i razvoju bubrežne fibroze. Kolagen-1 uglavnom potječe iz miofibroblasta, a -SMA, kao jedna od glavnih morfoloških karakteristika i aktivacijskih markera miofibroblasta, razine ekspresije obaju pozitivno koreliraju sa stupnjem bubrežne fibroze [11]. Relevantne studije su pokazale da su u različitim kroničnim bubrežnim bolestima ekspresije mRNA i proteina -SMA i kolagena-1 značajno povećane, praćene teškom bubrežnom fibrozom [12]. U ovoj studiji, Bushen Huoxue Xiezhuo decoction značajno je smanjio ekspresiju markera fibroze kao što su -SMA, TGF-, FN i kolagen-1, što ukazuje da Bushen Huoxue Xiezhuo decoction ima važne učinke na poboljšanje bubrežne funkcije i usporavanje napredovanja bubrežne fibroze.
HIF-1 /PKM2 signalni put usko je povezan s apoptozom. HIF-1 može pospješiti apoptozu transkripcijskom aktivacijom Bax i inhibicijom Bcl-2, a PKM2 može imati učinke reguliranjem proteina povezanih s apoptozom kao što je p53 nakon nuklearne translokacije [13]. Kao jedan od ključnih regulatora hipoksičnog odgovora sisavaca, HIF-1 može pojačati ekspresiju TGF-a putem HIF-1 u hipoksičnim epitelnim stanicama bubrežnih tubula u modelu bubrežne intersticijske fibroze, čime se aktiviraju putovi povezani sa Smad-om i inducira ekspresija markera fibroze kao što su -SMA i kolagen-1. Osim što sudjeluje u regulaciji apoptoze, PKM2 također podržava energetske potrebe fibroznih stanica regulacijom glikolitičkog metabolizma [14]. Rezultati ove studije pokazali su da su razine HIF-1, PKM2 i HK2 u bubrežnom tkivu skupine modela CRF bile značajno povećane, dok su one u skupinama TCM značajno smanjene, što sugerira da Bushen Huoxue Xiezhuo decoction može inhibirati apoptozu i odgoditi bubrežnu fibrozu potiskivanjem aktivacije puta HIF-1 /PKM2 u bubrežnom tkivo.
Ukratko, Bushen Huoxue Xiezhuo decoction može inhibirati staničnu apoptozu i fibrozu kod štakora s CRF-om, poboljšati oštećenje bubrega kod štakora modela CRF-a, a njegov mehanizam može biti povezan s regulacijom HIF-1 /PKM2 signalnog puta.
Reference
[1] American Journal of Health-System Pharmacy. Kdigo 2024 kliničke smjernice za procjenu i liječenje kronične bubrežne bolesti [J]. Kidney International, 2024, 105(4S): 117-314.[2] Zhang L, Liu L, Bai M, et al. HE4 izazvan hipoksijom u stanicama tubularnog epitela potiče nakupljanje izvanstaničnog matriksa i fibrozu bubrega putem NF-κB[J]. FASEB Journal, 2020., 34(2): 2554-2567.[3] Hu D, Wang L, Zhang Y, et al. Sanqi oralna otopina ublažava bubrežnu fibrozu potiskivanjem aktivacije fibroblasta putem HIF-1 /PKM2/glikolize u kroničnoj bubrežnoj bolesti[J]. Journal of Ethnopharmacology, 2024, 335: 118679.[4] Palsson-Mcdermott EM, Curtis AM, Goel G, et al. Piruvat kinaza M2 regulira aktivnost Hif-1 i indukciju IL-1 te je kritična determinanta Warburgovog učinka u makrofagima aktiviranim LPS-om [J]. Cell Metabolism, 2015, 21(1): 65-80.[5] Vidi EJ, Cullen V. Komentar o ažuriranju kliničkih smjernica KDIGO za upravljanje krvnim tlakom u kroničnoj bubrežnoj bolesti iz 2021. [J]. Nephrology (Carlton, Vic), 2025, 30(1): e14414.[6] Wu ZH, Cao WX, Tan M, et al. Istraživanje učinaka izvarka rabarbare Xiezhuo na autofagiju i apoptozu kod štakora s kroničnim zatajenjem bubrega na temelju puta mTORC1/p70S6K [J]. Lishizhen Medicine and Materia Medica Research, 2023, 34(2): 321-324.[7] Wang J, Li YT, Liu DW, et al. Napredak istraživanja o mehanizmu glavnih aktivnih komponenti antrakinona rabarbare protiv fibroze bubrega[J]. Istraživanje tradicionalne kineske medicine, 2023., 36(10): 92-96.[8] Askari H, Seifi B, Kadkhodaee M, et al. Zaštitni učinci sumporovodika na kroničnu bolest bubrega smanjenjem oksidativnog stresa, upale i apoptoze [J]. EXCLI Journal, 2018, 17: 14-23.[9] Solà-Riera C, García M, Ljunggren HG, et al. Hantavirus inhibira apoptozu sprječavanjem gubitka potencijala mitohondrijske membrane preko regulacije faktora za preživljavanje BCL-2[J]. PLoS Pathogens, 2020., 16(2): e1008297.[10] Yuan L, Wang L, Wang H, et al. Icariin inhibira hipermetilaciju Epo promotora, regulira prijelaz pericit-miofibroblast i poboljšava bubrežnu anemiju u 5/6 nefrektomiranih štakora [J/OL]. Farmakologija i klinike kineske Materia Medice: 1-17 [2025-12-17]. https://doi.org/10.13412/j.cnki.zyyl.20250408.004.[11] Sravani S, Saifi MA, Godugu C. Riociguat ublažava ozljedu bubrega i fibrozu u životinjskom modelu [J]. Biochemical and Biophysical Research Communications, 2020., 530(4): 706-712.[12] Li L, Zhou G, Fu R, et al. Polisaharidi ekstrahirani iz Balanophora polyandra Griff (BPP) ublažavaju bubrežnu fibrozu i EMT inhibicijom Hedgehog puta [J]. Journal of Cellular and Molecular Medicine, 2021, 25(6): 2828-2840.[13] Rana NK, Singh P, Koch B. CoCl₂-simulirana hipoksija inducira staničnu proliferaciju i mijenja obrazac ekspresije gena povezanih s hipoksijom uključenih u angiogenezu i apoptozu [J]. Biološka istraživanja, 2019, 52(1): 12.[14] Wang Z, Yu J, Hao D, et al. Transkriptomski potpisi koji reagiraju na aktivator PKM2 TEPP-46 u hiperglikemijskim proksimalnim epitelnim tubularnim stanicama ljudskih bubrega [J]. Frontiers in Endocrinology, 2022, 13: 965379.[15] Chengdu WeCistanche Bio-Tech., Co Ltd. Cistanche za hranjenje bubrega [EB/OL]. https://www.xjcistanche.com/cistanche-extract-product/cistanche-for-nourishing-kidney.html, 01.08.2022.
