Cistanche tablete ublažavaju kronični prostatitis preko STAT3/HIF-1 /osovine glikolize: dokazi iz in vivo i metabolomskih studija

3. Rezultati

3.1 Eksperimentalna analiza in vivo

3.1.1 Opća opažanja u EAP štakora tretiranih Cistanche tabletama

Tijekom eksperimenta štakori u kontrolnoj skupini pokazali su sjajno krzno, budno ponašanje te normalno hranjenje i aktivnost. Nasuprot tome, štakori u modelnoj skupini pokazali su mutno krzno i ​​letargiju, što ukazuje na uspješnu indukciju modela. Nakon tretmana saCistanche tablete, primijećena su poboljšanja u stanju krzna i ukupnoj vitalnosti.

 

Tablica 1. Usporedba 24-satnog izlučivanja urina i unosa vode u štakora (x̄ ± s, n=7)

Skupina	Doza (mg·kg⁻¹)	Volumen urina (mL)	Unos vode (mL)
Kontrolirati	-	19.38 ± 6.57	18.75 ± 11.88
Model	-	11.00 ± 5.58¹)	11.50 ± 6.16
Tamsulozin	34.2	17.88 ± 3.48	14.38 ± 10.84
Cistanche tablete	197.2	11.00 ± 5.18	10.63 ± 3.20
	591.5	21.50 ± 10.28⁴)	16.25 ± 10.26
	1,774.4	26.00 ± 6.91⁴)	18.13 ± 4.58

3.1.2 Učinci Cistanche tableta na unos vode i izlučivanje urina kod EAP štakora

Unos vode i volumen urina važni su pokazatelji zdravlja štakora. Posljednjeg dana doziranja, štakori su stavljeni u metaboličke kaveze za 24-satno mjerenje. U usporedbi s kontrolnom skupinom, modelna skupina pokazala je značajno smanjenje volumena urina (P<0.05), while water intake was slightly reduced but not statistically significant. In comparison to the model group, the medium- and high-dose Cistanche tableteskupine su pokazale značajno povećanje volumena urina (P<0.01), with modest but non-significant improvement in water intake (Table 1). These results suggest that Cistanche tableteublažava smetnje mokrenja uzrokovane prostatitisom.

3.1.3 Učinci na indeks organa i morfologiju prostate

Indeks prostate služi kao važan pokazatelj za procjenu upale i strukture žlijezda. U usporedbi s kontrolnom skupinom, modelna skupina pokazala je značajno smanjenje indeksa prostate (P<0.05). After treatment, the prostate index improved significantly in all Cistanche tabletegrupe (P<0.05 or P<0.01), indicating reduced inflammation (Table 2).

Indeks slezene odražava sustavnu imunološku aktivnost. Bio je značajno povišen u model štakora (P<0.01) but decreased significantly following Cistanche tableteliječenje (P<0.01), suggesting immunomodulatory effects. Morphologically, prostates in the model group were smaller, dull-colored, firmer, and showed strong adhesions. In contrast, prostates from the control and treatment groups were larger, brighter, and easier to dissect.

Tablica 2. Usporedba indeksa prostate i indeksa slezene u štakora (x̄ ± s, n=7)

Skupina	Doza (mg·kg⁻¹)	Indeks prostate (%)	Indeks slezene (%)
Kontrolirati	-	10.57 ± 0.98	18.75 ± 11.88
Model	-	7.00 ± 1.15¹)	11.50 ± 6.16²)
Tamsulozin	34.2	9.00 ± 1.91³)	14.38 ± 10.84
Cistanche tablete	197.2	10.43 ± 2.23³)	10.63 ± 3.20⁴)
	591.5	11.57 ± 1.99⁴)	16.25 ± 10.26
	1,774.4	12.57 ± 1.51⁴)	18.13 ± 4.58⁴)

Bilješka:
¹²) P< 0,05 iliP< 0,01 u odnosu na kontrolu;
³⁴) P< 0,05 iliP< 0,01 u odnosu na model.

3.1.4 Učinci na serumske citokine

Rezultati ELISA testa pokazali su da su razine IL-8 i IL-1 u serumu bile značajno povišene u skupini modela (P<0.01), indicating heightened inflammation. Treatment with the positive control and medium/high doses of Cistanche tableteznačajno smanjen IL-8 (str<0.01), while all doses reduced IL-1β (P<0.05 or P<0.01), indicating anti-inflammatory effects (Table 3).

Uz to, razine IgG u serumu bile su značajno povećane u skupini modela (P<0.05), but significantly decreased in the high-dose group (P<0.01), suggesting that Cistanche tabletemože regulirati imunološke odgovore i smanjiti stvaranje imunoloških kompleksa.

Tablica 4. Usporedba ekspresije proteina HK i MINPP1 u tkivu prostate štakora (x̄ ± s, n=3)

Skupina	Doza (mg·kg⁻¹)	HK Izraz	MINPP1 izraz
Kontrolirati	-	0.37 ± 0.10	0.038 ± 0.006
Model	-	8.16 ± 0.79²)	0.004 ± 0.001²)
Tamsulozin	34.2	0.68 ± 0.11⁴)	0.028 ± 0.004⁴)
Cistanche tablete	197.2	4.35 ± 0.62⁴)	0.014 ± 0.001⁴)
	591.5	2.18 ± 0.31⁴)	0.017 ± 0.001⁴)
	1,774.4	1.27 ± 0.26⁴)	0.028 ± 0.005⁴)

Bilješka:
²) P< 0,01 u odnosu na kontrolu;
⁴) P< 0,01 u odnosu na model.

3.1.5 Histopatološka procjena tkiva prostate

Bojanje HE otkrilo je ozbiljnu limfocitnu infiltraciju, oštećenje žlijezda i atrofiju u skupini modela. Nasuprot tome, tretirane skupine pokazale su poboljšanu strukturu žlijezda i smanjenu infiltraciju upalnih stanica, što ukazuje na toCistanche tableteučinkovito ublažio upalu i oštećenje tkiva (Slika 1).

3.1.6 Ekspresija MINPP1 i HK proteina u tkivu prostate

Imunohistokemijska analiza pokazala je da je ekspresija HK proteina značajno povećana u modelnoj skupini (P<0.01), but significantly reduced after Cistanche tableteliječenje (P<0.01). Conversely, MINPP1 expression was significantly decreased in the model group (P<0.01), but significantly increased after treatment (P<0.01) (Figure 2, Table 4). These results suggest that Cistanche tabletemože potisnuti glikolizu snižavanjem HK i povećanjem MINPP1.

3.1.7 Ekspresija p-STAT3 i HIF-1 proteina

Rezultati Western blota pokazali su značajno povišenu ekspresiju p-STAT3 i HIF-1 u skupini modela u usporedbi s kontrolama (P<0.01). Treatment with low and high doses of Cistanche tableteznačajno preokrenuo ove promjene (P<0.01) (Figure 3, Table 5).

 

Cistanche blagotvorno djeluje na zdravlje bubrega i prostate

 

 

 

3.2 Metabolomska analiza seruma

3.2.1 Kontrola kvalitete podataka i identifikacija metabolita

Uzorci za kontrolu kvalitete (QC) pokazali su usko grupiranje, što ukazuje na pouzdane podatke (Slika 4A). Jasno razdvajanje između kontrolnih i modelnih skupina potvrdilo je uspjeh modela. Jasna razlika između modela i visoke dozeCistanche tableteskupini naznačen terapijski učinak (Slika 4B). Test permutacije dao je R²Y=0.94, potvrđujući da je model PLS-DA robustan i da nije previše opremljen (Slika 4C).

3.2.2 Diferencijalna analiza metabolita

Koristeći VIP > 1 i P < 0,05 kao pragove, identificirano je 85 pojačano reguliranih i 108 smanjeno reguliranih metabolita između kontrolne i modelne skupine. Između modela i visoke dozeCistanche tableteskupini, identificirana su 84 regulirana metabolita i 100 metabolita s nižom regulacijom. Ukupno 96 različitih metabolita značajno je promijenjeno u sve tri skupine (Slika 5; pogledajte dodatne podatke za potpuni popis).

 

Narudžbenica za vaše tablete cistanche

 

3.2.3 Analiza obogaćivanja metaboličkog puta

Analiza obogaćivanja otkrila je da su različiti metaboliti uglavnom uključeni u:

Biosinteza terpenoida i steroida

Glikoliza/glukoneogeneza

Metabolizam piruvata

Oksidativna fosforilacija

Metabolizam arahidonske kiseline

(Slika 6A). Ovi nalazi sugeriraju daCistanche tabletemože poboljšati simptome prostatitisa modulacijom ravnoteže hormona, metabolizma energije i antioksidativnog kapaciteta.

Ključni metaboliti zahvaćeni glikolitičkim putem uključivali su -D-glukozu (M179T285_NEG), glicerat-2,3P2 (M333T352_2_POS), glicerat-2P (M371T18_NEG) i piruvat (M87T113_NEG) (Slika 6B).

 

 

Cistanche i ekstrakt cistanche munufactorer u Kini

4. Rasprava

Kronični prostatitis složeno je stanje s višestrukom etiologijom, uključujući imunološke i metaboličke disfunkcije. U ovoj studiji korišten je EAP štakorski model za procjenu učinkovitostiCistanche tabletei upotrijebio je metabolomiku kako bi istražio njegove mehanizme djelovanja. Rezultati to pokazujuCistanche tabletepoboljšati ponašanje, uspostaviti ravnotežu urina i vode, smanjiti imunološko opterećenje slezene i smanjiti razine imunoloških kompleksa.

Tablica 5. Usporedba ekspresije proteina p-STAT3 i HIF-1 u tkivu prostate štakora (x̄ ± s, n=3)

Skupina	Doza (mg·kg⁻¹)	p-STAT3	HIF-1
Kontrolirati	-	0.51 ± 0.03	0.67 ± 0.06
Model	-	1.09 ± 0.09²)	0.88 ± 0.03²)
Cistanche tablete	197.2	0.65 ± 0.06⁴)	0.69 ± 0.01⁴)
	1,774.4	0.51 ± 0.02⁴)	0.65 ± 0.05⁴)

Bilješka:
²) P< 0,01 u odnosu na kontrolu;
⁴) P< 0,01 u odnosu na model.

Histološki i ELISA podaci potvrdili su smanjenu upalu i razine citokina. Mehanički,Cistanche tabletečini se da djeluje putem:

Inhibicija STAT3 fosforilacije → smanjenje IL-17 sekrecije

Smanjenje HIF-1 → ublažavanje hipoksije i glikolitičke aktivacije

Snižavanje HK i povećanje MINPP1 → poremećaj glikolitičkog metabolizma

Ovaj trostruki mehanizam prekida začarani krugupala–hipoksija–metabolička disregulacija(Slika 7).

Poznato je da IL-17 pridonosi kroničnom prostatitisu regrutiranjem neutrofila i induciranjem lokalne upale. STAT3 je kritičan za Th17 diferencijaciju i IL-17 transkripciju. Aktivirani STAT3 veže IL-17 pojačivače gena, potičući njegovu ekspresiju. IL-17 također aktivira put PI3K/Akt, koji je povezan s autoimunim i upalnim bolestima. U ovoj studiji,Cistanche tabletesmanjeni p-STAT3, što ukazuje na smanjenu proizvodnju IL-17 i njezine nizvodne učinke.

Štoviše, aktivirani Akt stabilizira HIF-1 inhibicijom prolil hidroksilaza (PHDs), povećavajući HIF-1 stabilnost. HIF-1 je ključni regulator glikolize i regulira ekspresiju HK kako bi se potaknula proizvodnja energije pod hipoksijom.Cistanche tabletesmanjena HIF-1 i HK dok je regulirana prema gore MINPP1, čime se ublažava glikolitička prekomjerna aktivacija.

Prekomjerna glikoliza dovodi do nakupljanja laktata, održavajući upalu i potičući diferencijaciju Th17, čime se održavapetlja upala–hipoksija–glikoliza. Cistanche tabletečini se da prekidaju ovaj ciklus, rješavajući i upalu i metaboličku neravnotežu.

Osim toga, laktat može poboljšati IL-17 sintezu, pridonoseći kroničnoj upali. Za razliku od NSAID-a koji ciljaju samo na upalu,Cistanche tabletenude dvostruko djelovanje na obaimunološke i metaboličke osi, making them a promising multi-target herbal intervention.

 

Zaključak

Ova studija to otkrivaCistanche tableteublažiti kronični prostatitis:

Inhibicija STAT3/IL-17 osi za smanjenje imunološke upale

Regulacija HIF-1 i glikolize za poboljšanje oksigenacije tkiva i metabolizma

Moduliranje HK i MINPP1 za suzbijanje glikolitičkog prenaprezanja

Ova otkrića daju znanstvenu osnovu za razvojBiljni dodaci na bazi cistanheciljanjeimunološko-metabolička disfunkcija kod kroničnog prostatitisa. Buduća bi istraživanja trebala dodatno istražiti bioaktivne sastojke Cistanche i potvrditi te mehanizme u kliničkim uvjetima.