Simptomi kroničnog umora, depresije i anksioznosti kod dugotrajnog COVID-a snažno su predviđeni neuroimunim i neurooksidativnim putevima koji su uzrokovani upalom tijekom akutne infekcije 2. dio

3.4. Predviđanje fiziološko-afektivnog fenomena pomoću TO2, NT i ukupnog Ca

Cistanche može djelovati kao sredstvo protiv umora i pojačivač izdržljivosti, a eksperimentalne studije su pokazale da dekokcija Cistanche tubulosa može učinkovito zaštititi jetrene hepatocite i endotelne stanice oštećene kod plivajućih miševa koji nose težinu, pojačati ekspresiju NOS3 i pospješiti jetreni glikogen sinteza, čime se postiže učinkovitost protiv umora. Ekstrakt Cistanche tubulosa bogat feniletanoidnim glikozidom mogao bi značajno smanjiti razinu serumske kreatin kinaze, laktat dehidrogenaze i laktata te povećati razinu hemoglobina (HB) i glukoze u ICR miševa, a to bi moglo igrati ulogu protiv umora smanjujući oštećenje mišića i odgađanje obogaćivanja mliječne kiseline za skladištenje energije kod miševa. Tablete Compound Cistanche Tubulosa značajno su produžile vrijeme plivanja s utezima, povećale rezervu glikogena u jetri i smanjile razinu uree u serumu nakon vježbanja kod miševa, pokazujući svoj učinak protiv umora. Uvarak Cistanchis može poboljšati izdržljivost i ubrzati uklanjanje umora kod miševa koji vježbaju, a također može smanjiti povišenje serumske kreatin kinaze nakon vježbanja s opterećenjem i održavati normalnu ultrastrukturu skeletnih mišića miševa nakon vježbanja, što ukazuje da ima učinke za povećanje fizičke snage i protiv umora. Cistanchis je također značajno produljio vrijeme preživljavanja miševa otrovanih nitritima i povećao otpornost na hipoksiju i umor.

Kliknite na Umor mišića

【Za više informacija:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:8613632399501】

Tablica 4 prikazuje višestruke regresijske analize s fizio-afektivnim fenomenom kao ovisnom varijablom i TO2, NT i ukupnim Ca kao eksplanatornim varijablama. U regresijama br. 1 i br. 2 uveli smo prvi PC izdvojen iz čistih FF, HAMD, HAMA i BDI i fiziosomskih HAMD i HAMA rezultata (nazvan PC rezultat fizio-afektivnog fenomena, koji odražava ukupnu težinu) kao zavisnu varijablu. Otkrili smo da je 46.0% varijance u ovom PC-u (regresija #1) objašnjeno ukupnim Ca, NT indeksom i BMI. Slike 1 i 2 prikazuju djelomičnu regresiju fizio-afektivnog PC rezultata za ukupni Ca odnosno NT indeks. Nakon uvođenja vršnog BT i SpO2 u regresiju #2, otkrili smo da je veliki dio varijance (52,4%) u fizio-afektivnom fenomenu PC objašnjen vršnim BT i NT (oba pozitivno povezana). Slika 3 prikazuje djelomičnu regresiju rezultata fenomena za vršni BT. U svim regresijskim analizama provedenim s čistim rezultatima FF, HAMD, HAMA i BDI te rezultatima fiziosoma HAMD i HAMA, NT indeks i ukupni Ca uvijek su bili najznačajniji prediktori.

Kako bismo otkrili jesu li zajednički faktor izdvojen iz indeksa NT i TO2 i ukupnog Ca povezani sa zajedničkim faktorom izdvojenim iz kliničkih ljestvica, proveli smo kanoničku korelacijsku analizu. Tablica 5 prikazuje rezultate ove analize, s kliničkim ljestvicama kao skupom zavisnih varijabli i NT, TO2 i kalcijem kao skupom objašnjavajućih varijabli. Kanonska komponenta ekstrahirana iz NT kompozita, TO2 i ukupni Ca snažno su korelirali s fizio-afektivnim simptomima i objasnili 35,5% varijance u potonjim.

3.5. Predviđanje fizio-somatskih i afektivnih domena pomoću biomarkera

U tablici 4, regresije #3 do #6 prikazuju rezultate regresija s čistim rezultatima FF, HAMD, HAMA i BDI i rezultatima fiziosoma HAMD i HAMA kao ovisnim varijablama i zasebnim biomarkerima kao eksplanatornim varijablama (bez unosa NT indeksa ) kako bi se razjasnilo koji su biomarkeri bili najpredvidljiviji. U ovim regresijskim analizama također smo unijeli status cijepljenja kao lažnu varijablu; naime, AstraZeneca (da=1, ne=0), Pfizer (da=1, ne=0) i Sinopharm (da=1, ne {{8 }}). Otkrili smo da se 37,1% varijance u čistim FF rezultatima (regresija #3) može objasniti ukupnim Ca (obrnuto), CRP-om, obrazovanjem, AOPP, BMI i cijepljenjem s AstraZenecom (sve pozitivno povezano). Rezultati regresije #4 otkrili su da ukupni Ca (obrnuto), CRP, obrazovanje, AOPP, MPO i cijepljenje AstraZenecom (sve pozitivno) predviđaju 41,3% varijance u čistim HAMD rezultatima. Otkrili smo da, za regresiju #5, ukupni Ca (obrnuto povezan), CRP, obrazovanje, AOPP i IL-1 (svi pozitivno povezani) objašnjavaju 37,2% varijance u čistom BDI rezultatu. Regresija #6 pokazala je da se značajan dio varijance (18,3%) u čistom HAMA rezultatu može predvidjeti ukupnim Ca (obrnuto povezano), CRP-om i MPO (oba pozitivno povezana). Rezultati regresije #7 pokazali su da je kod dugotrajnih pacijenata s COVID-om 37,4% varijance u rezultatima HAMD fiziosoma objašnjeno ukupnim Ca i cijepljenjem Sinopharmom (obrnuto) te CRP-om i IL-18 (oboje pozitivno povezano). Regresija #8 pokazala je da ukupni Ca (obrnuto povezan), MPO i BMI (oboje pozitivno povezani) objašnjavaju 21,7% varijance u rezultatima HAMA fiziosoma.

3.6. Rezultati PLS analize

Slika 4 prikazuje prvi PLS model, koji je procijenio jesu li učinci SpO2 i vršnog BT (uvedeni kao jedan pokazatelj; naime, TO2 indeks) na fizio-afektivni fenomen dugog COVID-a (unesen kao latentni vektor uzet iz šest poddomene ljestvice ocjena) posredovane su preko NT i Ca (IL-10 i TAC nisu bili značajni). Budući da je višestruka regresijska analiza pokazala i učinke cijepljenja, kao dodatnu eksplanatornu varijablu unijeli smo cijepljenje Sinopharmom (da=1, ne=0). Sa SRMR-om od 0.{{20}}45, kvaliteta modela bila je zadovoljavajuća i uočili smo odgovarajuće vrijednosti valjanosti pouzdanosti konstrukcije za fizio-afektivni fenomen s AVE=0. 613, rho A=0.920, kompozitna pouzdanost=0.904 i Cronbachova alfa=0.873. Sva opterećenja za šest pokazatelja fizio-afektivnog fenomena bila su > 0.7. CTA je pokazao da potonji vektor nije pogrešno specificiran kao reflektivni model, a povez preko očiju ukazao je na prihvatljivu unakrsno validiranu redundantnost konstrukta 0.364. PLSPredict je pokazao da indikatori konstrukta imaju pozitivne Q2 predviđene vrijednosti, što ukazuje da je pogreška predviđanja niža od najnaivnijeg mjerila. Potpuna PLS analiza puta pokazala je da je 61,6% varijance u fizio-afektivnom fenomenu objašnjeno regresijom za NT, Ca, TO2 indeks i cijepljenje te da je TO2 indeks objasnio 16,2% i 17,1% varijanci u NT i Ca , odnosno. Infekcija SARS-CoV-2 objasnila je 47,0% varijance u TO2 indeksu. Dok je TO2 imao značajne izravne učinke na fenomen, također je imao značajne i specifične neizravne učinke posredovane preko NT (t=4.10, p < 0.001) ili Ca (t=4.13, p < 0,001). Infekcija je rezultirala vrlo značajnim ukupnim neizravnim učinkom na dugi fenomen COVID-a (t=8.92, p < 0,001).

Kako bismo ispitali učinke SpO2 i vršnog BT-a na zasebne biomarkere dugog COVID-a i odredili koji su biomarkeri najvažniji u predviđanju fenomena, proveli smo drugu analizu PLS putanje (vidi sliku 5). Uz SRMR od 0.040, kvaliteta modela bila je odgovarajuća, a valjanost pouzdanosti konstrukcije latentne konstrukcije također je bila odgovarajuća (nije prikazano, jer je bilo slično onome objašnjenom na slici 4). Otkrili smo da je 46,8% varijance objašnjeno regresijom s Ca, CRP, IL-1, AOPP, MPO i cijepljenjem. SpO2 je imao značajne učinke na AOPP i MPO, dok je vršni BT utjecao na MPO, CRP i Ca.

4. Rasprava

4.1. Fizičko-afektivni fenomen dugog COVID-a

Prvi veći rezultat ove studije bio je da smo uspjeli izdvojiti jedan replicirajući latentni vektor iz fizio-somatskih i afektivnih rezultata na ljestvici ocjena. Ovo je potvrdilo rezultate druge studije provedene na neovisnom uzorku iračkih COVID-19 pacijenata i kontrola [32]. Štoviše, i potonja i trenutna studija otkrile su da je fizio-afektivna jezgra dugog COVID-a bila snažno predviđena kombiniranim učincima povećanog vršnog BT-a i sniženog SpO2 tijekom akutne faze bolesti. Kao što je prethodno objašnjeno [31], povećani vršni BT i sniženi SpO2 odražavaju težinu infekcije–imuno–upalne jezgre akutnog COVID-a-19. Ovi rezultati pokazuju da je fizio-afektivna jezgra tijekom akutnog i dugotrajnog COVID-a u velikoj mjeri posljedica putova infekcija-imuno-upale. Rezultati potvrđuju da fiziosomatski simptomi, uključujući kronični umor; fizio-somatski simptomi, uključujući bol, GIS, malaksalost i autonomne simptome; i afektivni simptomi dijele zajedničke imunološko-upalne putove, kao što je prikazano u uvodu.

4.2. Povećani NT zbog aktivacije NLRP3 predviđa fizio-afektivni fenomen

Drugi glavni ishod bio je taj da smo uspjeli konstruirati novu klasu endofenotipa na temelju povećanog NT tijekom dugog COVID-a i sniženog SpO2 i povećanog vršnog BT tijekom akutne faze bolesti (ovaj klaster je nazvan TO-NT dugi COVID). Potonji klaster pacijenata karakteriziran je povećanim pokazateljima aktivacije upale NLRP3, s povećanim IL-1 i kaspazom 1, blagom upalom s povećanim CRP-om, povećanim MPO i AOPP-ima i nižim ukupnim razinama Ca. Treba naglasiti da je non-TO-NT klaster pacijenata također pokazao povećani NT, iako znatno manji od TO-NT klastera. Iako je IL-10, negativni imunoregulacijski citokin, značajno povećan u dugotrajnom COVID-u, nije predvidio fenomen nakon uzimanja u obzir drugih biomarkera. Ono što je najvažnije, pacijenti koji pripadaju skupini TO-NT pokazali su vrlo značajna povećanja u fizio-afektivnim rezultatima, što ukazuje na jaku povezanost između biomarkera akutnog i dugotrajnog COVID-a i fizio-afektivnih simptoma. Štoviše, NT indeks i ključne komponente ovog indeksa — naime, povećani IL-1, CRP, MPO i AOPP i sniženi Ca — predvidjeli su veliki dio varijance u fizio-afektivnom fenomenu. Kao takva, ova je studija apstrahirala fizio-afektivni fenomen dugog COVID-a u konkretniji koncept vođen NT-om.

Zanimljivo je primijetiti da su genetske varijante NLRP3 (naime varijante NLPR3 rs10157379 T > C i NLPR3 rs10754558 C > G) povezane s umorom, mijalgijom, hiperalgezijom i malaksalošću u fazi akutne infekcije [20]. Abnormalna aktivacija NLRP3 tijekom akutne infekcije može dovesti do patološke ozljede tkiva [22] i može poduprijeti pretjerani imunološki odgovor budući da pridonosi citokinskoj oluji u akutnom COVID-19 [51,52]. Nekoliko je studija objavilo da su kaspaza 1, IL-1 i IL-18 povezani s depresijom, anksioznošću i umorom, što ukazuje na implikaciju upale NLRP3 u patofiziologiji ovih bolesti [53-57] . NLRP3 može aktivirati enzim kaspazu 1, koji zauzvrat pokreće proupalne citokine IL-1 i IL-18 za induciranje piroptoze (stanična smrt kao odgovor na proupalne signale), i igra ključnu ulogu kod neuroinflamacije [58].

IL-1 je neophodan za pokretanje i održavanje imunološko-upalnih reakcija u središnjem živčanom sustavu (SŽS) i može utjecati na integritet krvno-moždane barijere (BBB), što dovodi do curenja perifernih imunoloških stanica u SŽS [59,60]. Štoviše, IL-1 posreduje u aktivaciji mikroglije i astrocita, što rezultira infiltracijom T stanica u središnji živčani sustav, čime se pojačava proupalno stanje proizvodnjom IL-6 i TNF- zajedno s neurotoksičnim metabolitima, povećavajući ekscitotoksičnost i oštećenje neurona [36,61]. IL-18 je jedan od medijatora imunosti posredovane stanicama i pokreće T helper (Th) 1 i B stanice da generiraju adhezijske molekule, proupalne citokine i kemokine [62,63]. Osim toga, IL-18 može povećati mikroglijalnu ekspresiju kaspaze 1 i matriksnih metaloproteinaza i stvaranje proupalnih citokina [64], te može uzrokovati oštećenje neurona povećanjem Fas liganda u glijalnim stanicama [57]. Visoke razine IL-1 i IL-18 otkrivene su u bolesnika s infekcijom CNS-a, ozljedama mozga, Alzheimerovom bolešću i multiplom sklerozom [65-67]. Sve u svemu, aktivacija NLRP3 rezultira neurotoksičnim učincima tako što potiče sintezu drugih štetnih metabolita ili izravno oštećuje neurone.

【Za više informacija:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:8613632399501】