Jesu li saune korisne ili štetne za autosomno dominantnu policističnu bolest bubrega? Ispitivanje modelom miša Ⅱ

III Rezultati

1. Promjene općih parametara zbog ponovljenog sauniranja

Tablica 1 sažima fiziološke podatke dobivene na kraju eksperimenta. Utvrđeno je da je tjelesna težina SW skupine značajno veća od one u TS skupini (p < 0.05). Unos hrane i vode iz slavine svih skupina bili su slični (NS). Unos vode koja sadrži 4% saharoze nije utjecao na razinu glukoze u krvi u TS i SW skupinama (NS u odnosu na kontrolu). Čini se da je osmolalnost urina TS i SW skupina niža od one kontrolne skupine.

KLIKNITE OVDJE DA DOBIJETE PRIRODNI ORGANSKI EKSTRAKT CISTANCHE S 25% EHINAKOSIDA I 9% AKTEOZIDA ZA FUNKCIJU BUBREGA

2. Učinak opetovanog odlaska u saunu na funkciju bubrega i povećanje ciste

Tablica 2 sažima parametre bubrežne funkcije. Razine kreatinina u plazmi ili razine ureje u krvi (BUN) u skupini TS bile su nešto više od onih u kontrolnoj skupini. Nasuprot tome, povećanje ciste u skupini TS bilo je malo inhibirano u usporedbi s onim u kontrolnoj skupini. Došlo je do sličnog cističnog povećanja tubula u svim skupinama na kraju eksperimenta. Reprezentativno cistično širenje tubula prikazano je na slici 2.

cistanche-kidney disease-2(50)

3. Ekspresija i fosforilacija Hsp-a u bubregu ponovljenom saunom

Proveli smo Western blot analizu Hsp da odredimo toplinsko opterećenje bubrega (slika 3A). Kao što smo prethodno izvijestili13), TS skupina pokazala je približno 3.08-struko povećanje ekspresije Hsp27 i približno 1.95-puta povećanje fosforilirane ekspresije Hsp27, u usporedbi s kontrolnom skupinom. Nije primijećeno takvo povećanje u skupini SW u usporedbi s kontrolnom skupinom (Slika 3A, D, E). Međutim, ekspresija Hsp9{{10}} u TS i SW skupinama smanjila se za približno 0.61-puta odnosno 0.51-puta, u usporedbi s kontrolnom skupinom (slika 3A, C). Fosforilirani Hsp90 bio je slično izražen u svim skupinama (Slika 3A, B).

Slika 2 A: Reprezentativne fotomikrografije (×2,5) presjeka bubrega obojenog HE. Mjerna traka: 300 μm. B: Kvantitativno određivanje cistične ekspanzije tubula promatrano je u svim skupinama. Podaci su prikazani kao srednja vrijednost ± SEM. n=3 za svaku grupu.

4. Ekspresija rasta stanica i proteina povezanih s veličinom u bubregu

Prethodno je objavljeno da je Hsp90, koji je uključen u formiranje cista i rast ADPKD, prekomjerno izražen u ljudskim i mišjim cistama bubrega povezanim s PKD). Nakon potvrde smanjene ekspresije Hsp90 u bubrezima u skupinama TS i WS, potvrdili smo ekspresiju rasta stanica i proteina povezanih s veličinom16). Pretjerana aktivacija mreže PI3K/Akt/mTOR dobro je poznati patogeni događaj koji dovodi do hiperproliferacije. Kod policistične bolesti bubrega, mTOR kaskada potiče rast ciste povećanjem proliferacije, veličine i metabolizma epitelnih stanica bubrežnih tubula15), 17). Ekspresija Erk1/2, koji je uključen u signalni put proliferacije epitelnih stanica ciste18), bila je smanjena u TS i SW skupinama u usporedbi s onom u kontrolnoj skupini (P <0,05, TS u odnosu na kontrolu; Slika 4A, D , E). Međutim, nije bilo promjena u ekspresiji Akt i mTOR (Slika 4A, B, C, F, G).

Cistanche-chronickidney disease-2(80)

5. Učinak saune ili vode s 4% saharoze na put apoptoze

Kaspaze se izražavaju kao neaktivni prekursori unutar stanica i aktiviraju se kao odgovor na različite podražaje stanične smrti. Aktivacija uključuje dimerizaciju i često oligomerizaciju pro-kaspaza, nakon čega slijedi cijepanje na malu podjedinicu i veliku podjedinicu19). Aktivirane kaspaze cijepaju specifične ciljne supstrate i dovode do stanične smrti. Postoje dvije metode za otkrivanje aktivacije kaspaze, jedna je metoda koja koristi antitijelo, a druga je metoda koja koristi supstrat kaspaze. U metodi koja koristi antitijelo, ono se može detektirati količinom necijepanog prekursora i/ili cijepane kaspaze. Kaspaza3, koja je jedna od efektorskih kaspaza, ključni je regulator apoptoze. Aktivirana kaspaza-3 može cijepati višestruke strukturne i regulatorne proteine, koji su ključni za preživljavanje i održavanje stanica. Kako bismo procijenili je li sauna utjecala na apoptozu, izmjerili smo količinu ekspresije pro-kaspaze3 i cijepane kaspaze3 standardnim Western blotingom. Slika 5 pokazuje da je došlo do malog povećanja aktivnosti kaspaze3 u TS i SW skupinama, u usporedbi s onom u kontrolnoj skupini.