Sažetak

Pozadina:Agregacija trombocita i uznapredovali krajnji produkti glikacije (AGE) i oksidativni stres poznati su kao ključni čimbenici za razvoj kardiovaskularnih bolesti i dijabetičkih komplikacija. U tom kontekstu, konzumacija voća i povrća, dobrih izvora antioksidativnih spojeva, uglavnom se navodi kao učinkovit način prevencije ljudi od ovih bolesti. Trenutna studija usmjerena je na procjenu antioksidativnih, antitrombocitnih i antiglikacijskih aktivnosti cvjetova (PF), lišća (PL), kore (PP), soka (PJ) i ulja sjemenki nara (Punica granatum L.) (PSO) .

Glikozid cistanhe također može povećati aktivnost SOD-a u tkivima srca i jetre, te značajno smanjiti sadržaj lipofuscina i MDA u svakom tkivu, učinkovito čisteći različite reaktivne kisikove radikale (OH-, H₂O₂, itd.) i štiteći od oštećenja DNA uzrokovanog pomoću OH-radikala. Cistanche feniletanoidni glikozidi imaju jaku sposobnost hvatanja slobodnih radikala, veću reducirajuću sposobnost od vitamina C, poboljšavaju aktivnost SOD u suspenziji spermija, smanjuju sadržaj MDA i imaju određeni zaštitni učinak na funkciju membrane spermija. Cistanche polisaharidi mogu pojačati aktivnost SOD i GSH-Px u eritrocitima i tkivu pluća eksperimentalno starih miševa uzrokovanih D-galaktozom, kao i smanjiti sadržaj MDA i kolagena u plućima i plazmi, te povećati sadržaj elastina, imaju dobar učinak čišćenja na DPPH, produžiti vrijeme hipoksije u starim miševima, poboljšati aktivnost SOD u serumu i odgoditi fiziološku degeneraciju pluća u eksperimentalno starim miševima Uz stančnu morfološke degeneraciju, pokusi su pokazali da Cistanche ima dobru antioksidacijsku sposobnost i ima potencijal da bude lijek za prevenciju i liječenje bolesti starenja kože. U isto vrijeme, ehinakozid u Cistancheu ima značajnu sposobnost hvatanja slobodnih radikala DPPH i može hvatati reaktivne vrste kisika, spriječiti degradaciju kolagena izazvanu slobodnim radikalima, a također ima dobar učinak popravka na oštećenje aniona slobodnih radikala timina.

Kliknite na Cistanche i Tongkat Ali Reddit

【Za više informacija: david.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】

Metode: Antioksidativna aktivnost je mjerena protiv ABTS radikala i lipidne peroksidacije. Antiglikacijska aktivnost određena je pomoću formiranja intenziteta fluorescencije AGE u sustavu BSA/riboza. Antitrombocitna aktivnost je mjerena u plazmi bogatoj trombocitima (PRP) protiv adenozin difosfata (ADP), kolagena i arahidonske kiseline (AA).

Rezultati:PF ekstrakt pokazao je najveću antioksidacijsku aktivnost protiv ABTS-a i peroksidacije lipida s IC50 vrijednostima od 0.7mg/mL odnosno 0.63mg/mL. Što se tiče aktivnosti protiv glikacije, PP, PF i PL umjereno su inhibirali stvaranje AGE-a sličnih pentozidinima u usporedbi s pozitivnim kontrolama s vrijednošću AGE-IC50 od 0,4 mg/mL. PJ i PSO nemaju nikakav anti-AGE učinak. Svi su ekstrakti selektivno inhibirali agregaciju trombocita uzrokovanu s jednim, dva ili tri induktora na način ovisan o dozi. PF je bio najjači inhibitor uzrokovan sva tri induktora, s inhibicijskim učincima u rasponu od 35,6 do 66,6 posto. PP i PJ pokazali su antitrombocitni učinak protiv ADP-a i kolagena, a PL i PSO samo protiv AA.

Zaključci:Ovi rezultati sugeriraju da neki ekstrakti nara pokazuju potencijal in vitro antiglikacijskih i antitrombocitnih aktivnosti

Ključne riječi:Nar, antitrombocitna aktivnost, krajnji produkti napredne glikacije, oksidativni stres, peroksidacija lipida

Pozadina

Šipak (Punica granatum L.), nadaleko je poznat kao vrlo snažno antioksidativno voće [1-3]. Zabilježeno je da je antioksidacijska moć soka od nara 3-puta veća od snage crnog vina ili zelenog čaja [4] i 8-puta veća od onih otkrivenih u sokovima od naranče [5]. Osim toga, jedno prirodno voće koje se mnogo istražuje je šipak i njegovi sastojci za koje je objavljeno da imaju snažnu biološku aktivnost i ljekovitu vrijednost. Opisano je da sok, kora, ulje sjemenki, listovi i ekstrakti cvijeta nara imaju in vitro kao i in vivo antidijabetičko [6], protuupalno [7], antioksidativno djelovanje, djelovanje protiv pretilosti [8] i antitumorsko djelovanje. 9]. Ovi korisni učinci povezani su s prisutnošću vrlo visokih razina antioksidansa poput polifenolnih spojeva, uključujući hidrolizabilne tanine, antocijanine i flavonole [10]. U našim prethodnim studijama o antidijabetičkim učincima nara, rezultati naglašavaju neuroprotektivne učinke ekstrakata nara i pokazuju da dugotrajno uzimanje nara može biti potencijalna alternativna strategija za prevenciju HFD (High Fat High Fructose Diet) induciranog inzulina otpornost i oksidativni stres [6, 11]. Konzumacija soka, lišća i kore nara rezultirala je značajnim smanjenjem razine glukoze i inzulina u plazmi natašte. Posljedično, homeostatski indeks inzulinske rezistencije (HOMA-IR) koji se koristi za kvantificiranje inzulinske rezistencije bio je redom smanjen što ukazuje na značajno poboljšanje inzulinske osjetljivosti.

U tom smo kontekstu pokušali procijeniti učinak ekstrakata nara protiv najpoznatijih komplikacija dijabetesa kao što su agregacija trombocita i napredni krajnji produkti glikacije (AGE) za koje je objavljeno da su povezani s progresijom dijabetesa i starenjem [12, 13] . Inhibicija funkcije trombocita već je dugo prihvaćena kao strategija za liječenje akutnih vaskularnih aterotrombotičkih bolesti kao što su dijabetes, kardiovaskularne bolesti i ishemijski moždani udar [14, 15]. Uznapredovali krajnji proizvodi glikacije (AGE) povezani su s većim rizikom od dijabetičkih komplikacija kao što su dijabetička retinopatija, neuropatija i nefropatija [16]. Osim toga, objavljeno je nekoliko izvješća o inhibitornom učinku različitih dijelova stabla nara na stvaranje AGE [17] ili agregaciju trombocita [18]. U ovom smo radu in vitro istraživali anti-AGE i antitrombocitne kapacitete i neke antioksidativne aktivnosti soka nara (PJ), kore (PP), cvjetova (PF), lišća (PL) i ulja sjemenki (PSO).

Metode

Biljni materijali i ekstrakcija

Lišće i plodovi ubrani su sa stabala nara Tounsi u listopadu 2021. iz regije Mahdia, Tunis. Autentičnost sorte potvrdio je taksonomist dr. Faten Zaouay s Odjela za hortikulturu, Visokog agronomskog instituta, Chott-Meriem (Sveučilište u Sousseu, Tunis), a primjerak vaučera pohranjen je u našoj nacionalnoj zbirci koja se održava u dva primjerka u Gabesu i Chott-Mariemu (Sousse), s kodom 'TNl, TN2, TN3, TN5, TN5".

Ekstrakti nara pripremljeni su kako je opisano u našoj prethodnoj studiji [11]. Voće je oprano i ručno oguljeno. Arile su iscijeđene pomoću komercijalne miješalice (Moulinex, Francuska). Ekstrahirani sok je centrifugiran na 15000 okretaja u minuti 15 minuta. Zatim je supernatant rekuperiran i liofiliziran. Listovi, cvjetovi i kora ploda osušeni su, usitnjeni u prah i ekstrahirani metanolom (MeOH) 50 g/250 ml u mraku 48 sati. Svaki ekstrakt je filtriran kroz filter papir Whatman br. 42 i isparen do suhog korištenjem rotacijskog isparivača (Heidolph, Njemačka) pod vakuumom na 45 stupnjeva i pohranjen na -20 stupnjeva za daljnje određivanje. Sjemenke nara su osušene i samljevene u prah. Nafta je ekstrahirana po soxhlet metodi. Oko 30 g sjemena je ekstrahirano s 200 ml heksana na sobnoj temperaturi tijekom 6 sati. Otapalo je uklonjeno isparavanjem na 40 stupnjeva, a ulje je isprano strujom dušika i pohranjeno na -20 stupnjeva u zatvorenim epruvetama.

ABTS analiza uklanjanja radikala

Antioksidativni kapacitet ekstrakata nara pomoću ABTS (2,2′-casino-bis (3-etilbenzotiazolin-6-sulfonske kiseline) analize mjeren je prethodnom metodom [19]. Ukratko, ABTS• plus radikal otopina je proizvedena reakcijom osnovne otopine ABTS (5 mM) s otopinom kalijevog persulfata (K2S2O8) (2,7 mM). Za procjenu antioksidativnog kapaciteta, otopina ABTS• plus razrijeđena je fosfatnim puferom (20 mM, pH 7,4) kako bi se dobila apsorbancija 0.700±0,020 na 660 nm. Ten, ABTS• plus otopina pomiješana je s ekstraktima nara pripremljenim u različitim koncentracijama. Nakon inkubacije, apsorbancija je izmjerena na 734 nm. Korištena je askorbinska kiselina kao pozitivna kontrola. Postotak inhibicije ABTS• plus radikala izračunat je sljedećom formulom:

Kontrola se odnosi na otopinu koja sadrži čisti MeOH umjesto uzorka, a uzorak se odnosi na apsorbanciju otopina koje sadrže ekstrakt nara. Učinkovita koncentracija uzorka potrebna je za smanjenje apsorbancije ABTS• plus za 50 posto (EC50).

Peroksidacija lipida metodom željezovog tiocijanata

Inhibicija peroksidacije lipida ekstraktima nara ispitana je prema prethodnom postupku [20]. Linoleinska kiselina (LA) korištena je kao lipidni matriks, a 2,2'-azobis (2-metilpropionamidin) dihidroklorid (AAPH) kao inicijator slobodnih radikala. Pripremljene su različite koncentracije svakog ekstrakta nara. Svaka koncentracija je pomiješana s 1,3 posto (w/v) metanolnog LA i 0.2M fosfatnog pufera (pH 7,0) i peroksidacija je započeta dodavanjem otopine AAPH (55,3 mM) u fosfatnom puferu. Kontrolna otopina je pripremljena dodavanjem čistog MeOH umjesto uzorka. Nakon inkubacije na 50 stupnjeva tijekom 24 sata u mraku, reakcijska smjesa je otopljena u 3:1 (v/v) otopini H2O-MeOH. Deset, dodana je 10 postotna vodena otopina NH4SCN i 20 mM FeCl2 u 3,5 postotnoj HCl. Nakon 3 minute inkubacije na sobnoj temperaturi, izmjerena je apsorbancija na 546 nm u odnosu na odgovarajuću slijepu probu. Kao pozitivna kontrola korištena je askorbinska kiselina. Rezultati su izraženi kao postotak inhibicije peroksidacije lipida:

Kontrolaodnosi se na otopinu koja sadrži čisti MeOH umjesto uzorka, a uzorak se odnosi na apsorbanciju otopina koje sadrže ulje. Određen je EC50.

Napredni test inhibicije krajnjih produkata glikacije

Inhibicija stvaranja AGE-a sličnih pentozidinima i vrijednosti EC50 određene su i izračunate korištenjem prethodno opisane metode Séro et al. 2013, s malim izmjenama [21]. Ukratko, BSA (10 mg/mL) je inkubiran s D-ribozom (0,5 M) zajedno s testiranim ekstraktom u 50 mM fosfatnom puferu pri pH 7,4 (NaN3, 0,02 posto). Otopine su inkubirane u 96- mikrotitarskim pločama na 37 stupnjeva 24 sata u zatvorenom sustavu prije mjerenja AGE fluorescencije. Fluorescencija nastala inkubacijom, pod istim BSA (10 mg/mL) i uvjetima testiranog ekstrakta, oduzeta je za svako mjerenje. Pentosidin-slična (λexc 335nm, λem 385nm) AGEs fluorescencija je mjerena uporabom mikropločnog spektrofluorometra. Postotak stvaranja AGE-a izračunat je kako slijedi za svaku koncentraciju ekstrakta i određene su vrijednosti EC50:

AGEs ( postoci )=[intenzitet fluorescencije (uzorak) − intenzitet fluorescencije (prazan uzorak)] ∗100/[intenzitet fluorescencije (kontrola) − intenzitet fluorescencije (prazan uzorak)]

In vitro procjena aktivnosti antiagregacije trombocita

Svježa krv je dobivena od zdravih dobrovoljaca s negativnom poviješću konzumacije lijekova, pića ili hrane koja može utjecati na agregaciju tijekom najmanje 10 dana i poželjno je da su gladovali preko noći jer prisutnost hilomikrona također može poremetiti obrasce agregacije. Studiju je odobrilo lokalno etičko povjerenstvo Sveučilišne bolnice Hedi Chaker u Sfaxu, Tunis.

Venska krv je sakupljena u plastičnu epruvetu koja je sadržavala trinatrijev citrat 109 mM. PRP je dobiven centrifugiranjem na sobnoj temperaturi 12 minuta pri 200×g. PRP je pažljivo uklonjen izbjegavajući kontaminaciju crvenim krvnim stanicama ili buffy coatom i pohranjen na sobnoj temperaturi do testiranja. Svi testovi trebaju biti dovršeni unutar 3 sata od pripreme PRP-a. Preostala krv je potom centrifugirana na 2000 x g tijekom 20 minuta kako bi se dobila plazma siromašna trombocitima (PPP). Koristili smo probni panel agregacijskih sredstava: adenozin 5'-difosfat (ADP, 20 μM), kolagen (5 ug/mL) i arahidonska kiselina (2 mM).

PRP i PPP korišteni su za postavljanje 0 odnosno 100-postotnog prijenosa svjetlosti u agregometru. Agregacija trombocita je praćena najmanje 5 minuta nakon dodavanja agonista.

Za ekstrakte listova (PL), cvjetova (PF), soka (PJ) i kore (PP) nara, prethodno su pripremljene različite koncentracije za svaki ekstrakt otopljen u DMSO (na {{0}}.05 posto konačno koncentracija). Za PSO, različite koncentracije otopljene su u 70-postotnom polietilen glikolu (PEG) koji je široko korišteno otapalo in vivo za otapanje spojeva netopivih u vodi. Deset mikrolitara svakog ekstrakta dodano je u 260 μL kontrolnog PRP-a, a zatim je smjesa inkubirana najmanje 5 minuta (do 30 minuta) na 37 stupnjeva prije dodavanja agonista. Dodano je deset kolagena (5 ug/mL), AA (2 mM) ili ADP (20 μmol/L) i promjena oblika trombocita i agregacija praćeni su 5 minuta. DMSO (0,5 posto v/v) korišten je kao negativna kontrola, a aspirin je korišten kao pozitivna kontrola.

D=agregacija trombocita u prisutnosti ispitivanih spojeva

S=agregacija trombocita u prisutnosti otapala.

Inhibicijska aktivnost agregacije trombocita izražena je kao postotak inhibicije u usporedbi s onom izmjerenom samo za nosač (DMSO ili PEG). Svaki uzorak mjeren je u tri primjerka, a podaci su prikazani kao srednja vrijednost ± SD. Vrijednosti učinkovitih koncentracija potrebnih za 50-postotnu inhibiciju agregacije trombocita (EC50) dobivene su iz najmanje tri određivanja.

Statistička analiza

Rezultati su izraženi kao srednja vrijednost najmanje tri neovisna mjerenja, osim ako su prijavljene standardne devijacije (srednje vrijednosti ± SD) i analizirani pomoću SPSS ver. 21.0, stručno izdanje. Za antioksidativne aktivnosti korišten je Duncanov test za procjenu značajnosti glavnih učinaka na razini vjerojatnosti od 5 posto (P<0.05).

Rezultati i rasprava

Antioksidativna svojstva ekstrakata nara

Antioksidativni kapaciteti ekstrakata nara izmjereni su ABTS i testovima lipidne peroksidacije. Rezultati su sažeti u tablici 1 i izraženi su kao vrijednost EC50. Niži EC5{{10}} ukazuje na veću antioksidacijsku aktivnost. Utvrđeno je da se ekstrakti međusobno razlikuju po antioksidativnom djelovanju. Na primjer, PF je pokazao najveću antioksidacijsku aktivnost protiv ABTS s EC50 vrijednostima od 0,7 mg/ml, superiornijim čak i od standardne askorbinske kiseline koja je imala IC50 od 1,4 mg/ml. PF je pokazao drugi najniži EC50 za analizu lipidne peroksidacije (0,63 mg/mL), nešto veći od standardne askorbinske kiseline (0,52 mg/mL), međutim, ta razlika nije bila statistički značajna (p < 0,05). PP ekstrakt praćen PL i PJ ekstraktima može učinkovito smanjiti ABTS slobodnih radikala. Isti je redoslijed pronađen u testovima peroksidacije lipida. Međutim, PSO je pokazao najslabiju antioksidacijsku aktivnost u oba in vitro testa. Zabilježeno je da postoji uspostavljena veza između sadržaja fenola i antioksidativnog kapaciteta [22]. U našoj prethodnoj studiji [23] proučavali smo sadržaj fenola u cvjetovima, lišću, kori i soku nara te smo usporedili njihovu reducirajuću moć i anti-DPPH aktivnost. Rezultati pokazuju da su svi organi također imali učinkovitu reducirajuću moć i antiradikalno djelovanje. Cvjetovi i listovi bili su bogatiji fenolima i pokazali su se najjačim antioksidansima.

Anti-AGEs kapacitet ekstrakata nara

The anti-glycation capacities of pomegranate extracts evaluated by their inhibition of the formation of global fluorescent AGEs in the BSA/ribose system are depicted in Fig. 1 and Table 2. PP, PF, and PL extracts demonstrated a dose-response inhibition of the pentosidine-like AGEs formation (Fig. 1) with an AGE-EC50 value of 0.4mg/ml  (Table 2). This anti-AGEs capacity is considered moderate compared to that exhibited by Aminoguanidine (AGEEC50; 0.16-0.17mg/mL) and weak compared to Rutoside trihydrate (AGE-EC50; 0.05mg/mL). However, results show that PJ and PSO haven't any anti-AGE effect (AGEEC50; >1 mg/mL). U dvostruko slijepoj studiji, Sohrab (2015.) je zaključio da sok od nara (Punica granatum) smanjuje peroksidaciju lipida, ali nema učinka na uznapredovale glikirane krajnje proizvode u plazmi kod odraslih s dijabetesom tipa 2 [24]. Naši rezultati koji se tiču ​​soka od nara nisu u skladu s nekim prošlim nalazima koje je izvijestio Liu (2014.), koji je otkrio da je ekstrakt ploda nara (PFE) pokazao snažnu aktivnost protiv glikacije [25]. Antiglikacijsko djelovanje različitih ekstrakata nara može se pripisati njihovim fenolnim sastojcima. Kumagai (2015.), pokazao je da je stvaranje AGE-a izvedeno iz BSA s glukozom, fruktozom i gliceraldehidom in vitro bilo potisnuto ovisno o koncentraciji dodatkom ekstrakta ploda nara PFE i njegovih fenolnih komponenti kao što su punikalin, punikalagin, elagična kiselina i galna kiselina kiselina [17].

Antitrombocitna aktivnost ekstrakata nara

Procijenjena je sposobnost dijelova nara da inhibiraju agregaciju trombocita ljudskog PRP-a izazvanu ADP-om, kolagenom i AA kao snažnim induktorima agregacije. Tablica 3 prikazuje inhibitorne učinke različitih ekstrakata u različitim koncentracijama i aspirina kao pozitivne kontrole, a tablica 4 sažima EC50 vrijednosti ekstrakata ili spojeva nara sa srednjim vrijednostima triju mjerenja. Svi su ekstrakti selektivno inhibirali agregaciju trombocita uzrokovanu s jednim, dva ili tri induktora na način ovisan o dozi.

Utvrđeno je da je ekstrakt cvijeća najsnažniji inhibitor agregacije trombocita uzrokovane sva tri induktora, s inhibicijskim učincima u rasponu od 35,6 do 66,6 posto pri 3,5 mg/mL. Bio je aktivan protiv agregacije trombocita izazvane kolagenom s vrijednošću EC50 od 2,8 mg/mL, zatim protiv agregacije trombocita izazvane AA s vrijednošću EC50 od 3,85 mg/mL i s 4.{ {15}} mg/mL kada je agregaciju stimulirao ADP. U usporedbi s Aspirinom kao pozitivnom kontrolom, PF, PP i PJ imaju inhibitorne učinke na agregaciju izazvanu kolagenom. Međutim, Aspirin je inhibirao agregaciju izazvanu AA i ADP s EC50 od 0,42 odnosno 0,66 mg/ml, ali nije pronađen učinak protiv kolagena. U ovoj studiji i našoj prethodnoj studiji [23] utvrđeno je da je PF najantioksidativniji dio nara protiv DPPH radikala, ABTS radikala i peroksidacije lipida u usporedbi s PP, PL i PJ. Ovo otkriće možda objašnjava zašto je PF bio najbolji inhibitor agregacije trombocita. Osim toga, PF je bogat fenolima (16,6 posto) uključujući uglavnom hidrolizirane tanine (elagitanin) i topivim dijetalnim vlaknima (30,2 posto) [26]. Prethodno je dokazano da su hidrolizirani tanini vrlo učinkoviti u inhibiciji funkcije trombocita [18]. S druge strane, antitrombocitna aktivnost dijetalnih vlakana bila je nesigurna [27, 28]. Dakle, pretpostavili smo da se snažna i višestruko ciljana antitrombocitna aktivnost PF-a može pripisati hidroliziranim taninima, glavnim fenolima koji se nalaze u ovom organu.

PP i PJ pokazali su inhibitorske učinke i na ADP i na agregaciju trombocita izazvanu kolagenom. Međutim, nije prikazan nikakav učinak za oba ekstrakta kada je AA korištena kao agonist. Naši rezultati ne potvrđuju ono što su otkrili Mattiello i sur., 2009. koji pokazuju da oba ekstrakta inhibiraju odgovor trombocita na AA [18]. Usporedba EC50 vrijednosti otkrila je da PP smanjuje ADP i kolagenom izazvanu agregaciju trombocita učinkovitije od PJ.

Razlika u inhibitornom učinku između oba ekstrakta može se objasniti razlikom u antioksidativnom kapacitetu. PP je bio snažniji antioksidans od PJ protiv ABTS radikala i peroksidacije lipida u ovoj studiji, kao i protiv DPPH radikala i redukcijske moći [23]. Ovo objašnjenje nije bilo u skladu s nekim prethodnim izvješćima koja su sugerirala da se čini da antitrombocitni potencijal voća nije povezan ili suprotan njihovom antioksidativnom djelovanju [29, 30]. PL i PSO su mogli inhibirati samo ADP-potaknutu agregaciju trombocita, dok nisu bili učinkoviti kada su se kolagen i AA koristili kao agonisti.

Zaključak

Zaključno, cvjetovi, listovi i kora nara imaju in vitro inhibitorne učinke na glikaciju proteina i agregaciju trombocita. Ovi učinci pripisani su antioksidativnim svojstvima nekoliko aktivnih spojeva nara. Međutim, potrebna su daljnja istraživanja kako bi se potvrdili ovi rezultati i postiglo dublje razumijevanje njegovog mehanizma djelovanja, prije nego što se predloži kao prirodni inhibitor AGE. Svojstvo antioksidansa? Aktivni spojevi u naru potencijalno/doprinose ovim svojstvima.

Kratice

AA: arahidonska kiselina; AAPH: 2,2'-azobis (2-metilpropionamidin) dihidroklorid; ABTS: 2,2′-casino-bis (3-etilbenzotiazolin-6-sulfonska kiselina; ADP: adenozin difosfat (ADP); AGEs: krajnji produkti napredne glikacije; BSA: Bovinov serumski albumin; DMSO: dimetil sulfoksid ; FeCl2: željezni klorid; HCl: klorvodična kiselina; HFD: dijeta bogata masnoćama i fruktozom; K2S2O8: otopina kalijevog persulfata; LA: linolna kiselina; MeOH: metanol; NaN3: natrijev azid; NH4SCN: amonijev tiocijanat; PEG: polietilen glikol; PRP : Plazma bogata trombocitima; PPP: Plazma siromašna trombocitima.

Priznanja

Izjava o smjernicama za biljke

Autentičnost sorte potvrdio je taksonom dr. Faten Zaouay s Odsjeka za hortikulturu, Visokog agronomskog instituta, Chott-Meriem (Sveučilište u Sousseu, Tunis), a primjerak vaučera pohranjen je u našoj nacionalnoj zbirci koja se održava u duplikatu u Gabesu i Chott-Mariemu (Sousse), s oznakom 'TNl, TN2, TN3, TN5, TN5". Studija je u skladu s relevantnim institucionalnim, nacionalnim i međunarodnim smjernicama i zakonodavstvom, a dopuštenje za sakupljanje Punica granatum L. dobiveno je od Regionalnog istraživačkog centra Hortikultura i organski Chott-Mariem, IRESA-Sveučilište u Sousseu, 8.P.57-4042, Tunis.

Prilozi autora

ZA i IA; metodika, ZA; i IA; softver, AZ i RC; validacija, resursi, ZA; pisanje—izvorna priprema nacrta, JG; nadzor, MH i SH; pisanje—pregled i uređivanje. Svi su autori pročitali i složili se s objavljenom verzijom rukopisa.

Financiranje

Ovaj rad je financiralo Ministarstvo visokog obrazovanja i znanstvenih istraživanja-Tunis.

Dostupnost podataka i materijala

Skupovi podataka generirani tijekom i/ili analizirani tijekom trenutne studije dostupni su od odgovarajućeg autora na razuman zahtjev.

Deklaracije

Etičko odobrenje i pristanak za sudjelovanje

Ovu studiju je odobrilo lokalno etičko povjerenstvo Sveučilišne bolnice Hedi Chaker u Sfaxu, Tunis. Svi pokusi izvedeni su prema odgovarajućim smjernicama i propisima. Informirani pristanak dobiven je od svih ispitanika i/ili njihovih zakonskih skrbnika.

Suglasnost za objavu

Nije primjenjivo.

Suprotstavljeni interesi

Autori izjavljuju da nema sukoba interesa.

Podaci o autoru

1 Biokemijski laboratorij, LR12ES05 "Prehrana - funkcionalna hrana i vaskularno zdravlje", Medicinski fakultet, Sveučilište u Monastiru, 5019 Monastir, Tunis. 2 Centre Régional de Transfusion Sanguine de Sfax, Route El-Ain Km 0,5, CP 3003 Sfax, Tunis.

Reference

1. Hanafy SM, Abd El-Shafea YM, Saleh WD, Fathy HM. Kemijsko profiliranje, in vitro antimikrobno i antioksidativno djelovanje ekstrakata kore nara, naranče i banane protiv patogenih mikroorganizama. J Genet Eng Biotechnol. 2021; 19:80.

2. Benchagra L, Berrougui H, Islam MO, Ramchoun M, Boulbaroud S, Hajjaji A, et al. Antioksidativni učinak ekstrakta marokanskog nara (sorta Punica granatum L. Sefri) bogatih Punicalaginom protiv procesa oksidativnog stresa. Hrana. 2021;10:2219.

3. Akuru EA, Chukwuma CI, Oyeagu CE, Erukainure OL, Mashile B, Setlhodi R, et al. Nutritivni i fitokemijski profil kore nara ("čudesna sorta") i njegovi učinci na jetreni oksidativni stres i metaboličke promjene. J Food Biochem. 2022:46.

4. Gil MI, Tomas-Barberan FA, Hess-Pierce B, Holcroft DM, Kader AA. Antioksidativno djelovanje soka od nara i njegov odnos s fenolnim sastavom i preradom. J Agric Food Chem. 2000;48:4581–9.

5. Rosenblat M, Hayek T, Aviram M. Antioksidativni učinci konzumacije soka od nara (PJ) kod dijabetičara na serum i na makrofage. Ateroskleroza. 2006;187:363-71.

6. Amri Z, Ben Khedher MR, Zaibi MS, Kharroubi W, Turki M, Ayadi F, et al. Antidijabetički učinci ekstrakata nara kod štakora dugotrajno hranjenih mastima s visokim sadržajem fruktoze. Clin Phytoscience. 2020; 6:55.

7. Harzallah A, Hammami M, Kępczyńska MA, Hislop DC, Arch JRS, Cawthorne MA, et al. Usporedba potencijalnih preventivnih učinaka ulja cvijeta, kore i sjemenki nara na inzulinsku rezistenciju i upalu kod miševa na modelu pretilosti izazvane prehranom s visokim udjelom masti i saharozom. Arch Physiol Biochem. 2016;122:75–87.

8. Al-Muammar MN, Khan F. Pretilost: preventivna uloga nara (Punica granatum). Prehrana. 2012;28:595-604.

9. Amri Z, Kharroubi W, Fidanzi-Dugas C, Leger DY, Hammami M, Liagre B. Inhibicija rasta i pro-apoptotski učinci ekstrakata ukrasnog nara u stanicama Du145 ljudskog raka prostate. Nutr Rak. 2020;72:932–8.

10. Arlotta C, Puglia GD, Genovese C, Toscano V, Karlova R, Beekwilder J, et al. MYB5-like i bHLH utječu na sastav flavonoida u naru. Plant Sci. 2020;298:110563.

11. Amri Z, Ghorbel A, Turki M, Akrout FM, Ayadi F, Elfeki A, et al. Učinak ekstrakata nara na moždane antioksidativne markere i aktivnost kolinesteraze kod pretilosti izazvane prehranom s visokim udjelom masti i fruktoze u modelu štakora. BMC komplement Altern Med. 2017;17:339.

12. Okura T, Ueta E, Nakamura R, Fujioka Y, Sumi K, Matsumoto K, et al. Visoki krajnji produkti uznapredovale glikacije u serumu povezani su sa smanjenim izlučivanjem inzulina u bolesnika s dijabetesom tipa 2: kratko izvješće. J Diabetes Res. 2017;2017.

13. Al-Sofani ME, Yanek LR, Faraday N, Kral BG, Mathias R, Becker LC, et al. Dijabetes i odgovor trombocita na niske doze aspirina. J Clin Endocrinol Metab. 2018;103:4599-608.

14. McEwen BJ. Utjecaj prehrane i nutrijenata na funkciju trombocita. Semin Thromb Hemost. 2014;40:214–26.

15. Lim ST, Coughlan CA, Murphy SJX, Fernandez-Cadenas I, Montaner J, Thijs V, et al. Ispitivanje funkcije trombocita u prolaznom ishemijskom napadu i ishemijskom moždanom udaru: opsežan sustavni pregled literature. Trombociti. 2015;26:402-12.

16. Dhananjayan K, Forbes J, Münch G. Napredna glikacija, dijabetes i demencija. U: Dijabetes tipa 2 i demencija; 2018. str. 169–93 (prikaz, stručni).

17. Kumagai Y, Nakatani S, Onodera H, Nagatomo A, Nishida N, Matsuura Y, et al. Antiglikacijski učinci ekstrakta ploda nara (Punica granatum L.) i njegovih komponenti in vivo i in vitro. J Agric Food Chem. 2015;63:7760–4.

18. Mattiello T, Trifrò E, Jotti GS, Pulcinelli FM. Učinci soka od nara i ekstrakta polifenola na funkciju trombocita. J Med Food. 2009;12:334–9.

19. Delgado-Anrade C, Morales FJ. Razotkrivanje doprinosa melanoidina antioksidativnoj aktivnosti kave. J Agric Food Chem. 2005;53:1403–7.

20. Olszewska MA, Presler A, Michel P. Profiliranje fenolnih spojeva i antioksidativno djelovanje suhih ekstrakata iz odabrane vrste Sorbus. Molekule. 2012;17:3093-113.

21. Séro L, Sanguinet L, Blanchard P, Dang BT, Morel S, Richomme P, et al. Podešavanje 96-testa fluorescencije na mikrotitarskoj ploči s jažicom za identifikaciju inhibitora AGE u sirovim biljnim ekstraktima. Molekule. 2013;18:14320-39.

22. Piluzza G, Bullitta S. Korelacije između sadržaja fenola i antioksidativnih svojstava u dvadeset i četiri biljne vrste tradicionalne etnoveterinarske uporabe na području Mediterana. Pharm Biol. 2011;49:240-7.

23. Amri Z, Zaouay F, Lazreg-Aref H, Soltana H, Mneri A, Mars M, et al. Fitokemijski sadržaj, sastav masnih kiselina i antioksidativni potencijal različitih dijelova nara: usporedba između jestivih i nejestivih sorti uzgojenih u Tunisu. Int J Biol Macromol. 2017;104:274–80.

24. Sohrab G, Angoorani P, Tohidi M, Tabibi H, Kimiagar M, Nasrollahzadeh J. Sok od nara (Punicagranatum) smanjuje peroksidaciju lipida, ali ne utječe na uznapredovale glikirane krajnje produkte u plazmi kod odraslih s dijabetesom tipa 2: randomizirano dvostruko ispitivanje slijepo kliničko ispitivanje. Hrana. Nutr Res. 2015:59.

25. Liu W, Ma H, Frost L, Yuan T, Dain JA, Seeram NP. Fenolni spojevi nara inhibiraju stvaranje krajnjih proizvoda napredne glikacije uklanjanjem reaktivnih karbonilnih vrsta. Funkcija hrane. 2014;5:2996-3004.

26. Aviram M, Volkova N, Coleman R, Dreher M, Reddy MK, Ferreira D, et al. Fenolni spojevi nara iz kore, listova i cvjetova su antiaterogeni: studije in vivo na miševima s nedostatkom aterosklerotskog apolipoproteina E (E0) i in vitro na uzgojenim makrofagima i lipoproteinima. Časopis za poljoprivrednu i prehrambenu kemiju. 2008;56:1148–57.

27. Hannan JMA, Rokeya B, Faruque O, Nahar N, Mosihuzzaman M, Azad Khan AK, et al. Učinak frakcije topivih dijetalnih vlakana Trigonella foenum graecum na glikemijski, inzulinski, lipidemijski i status agregacije trombocita štakora tipa 2 dijabetičkog modela. J Ethnopharmacol. 2003;88:73–7.

28. Bagger M, Andersen O, Nielsen JB, Ryttig KR. Dijetalna vlakna smanjuju krvni tlak, ukupni kolesterol u serumu i agregaciju trombocita u štakora. Br J Nutr. 1996;75:483-93.

29. Dutta-Roy AK, Gordon MJ, Kelly C, Hunter K, Crosbie L, Knight-Carpentar T, et al. Inhibicijski učinak ekstrakata ginka bilobe na agregaciju trombocita kod ljudi. Trombociti. 1999;10:298-305.

30. Dutta-Roy AK, Crosbie L, Gordon MJ. Učinci ekstrakta rajčice na agregaciju ljudskih trombocita in vitro. Trombociti. 2001;12:218-27.

Napomena izdavača 

Springer Nature ostaje neutralan u pogledu tvrdnji o nadležnosti u objavljenim kartama i institucionalnim vezama.

【Za više informacija: david.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】