Kakav je učinak Cistanche Tubulosa, Učinci vodenog ekstrakta Cistanche Tubulosa na crijevnu mikrobiotu miševa s crijevnim poremećajima
Feb 25, 2022
Molimo kontaktirajteoscar.xiao@wecistanche.comza više
Poremećaji crijevne mikrobiotepovezuju se s mnogim bolestima. *Prijavljeno je da vodeni ekstrakt iz Cistanche tubulosa (CT), tradicionalne kineske biljne formule, igra ulogu u zaštiti ljudskog crijeva. Međutim, malo se zna o njegovim učincima na crijevnu mikrobiotu. *Ova studija je provedena kako bi se utvrdilo može li CT vodeni ekstrakt modulirati crijevni mikrobiom kod miševa s crijevnim poremećajima. Otkrili smo da se oštećena crijevna morfologija koja je posljedica liječenja cefiksimom može spasiti korištenjem CT vodenog ekstrakta. * Usporedba mikrobne raznolikosti između miševa tretiranih CT ekstraktom i kontrolnih miševa također je pokazala da se poremećaj u zajednici mikrobioma modelnih skupina može obnoviti tretmanom s visokim i srednjim koncentracijama vodenog ekstrakta. Liječenje cefiksimom dovelo je do značajnog smanjenja mliječne kiselinekisele bakterije; međutim, dodatak CT vodenog ekstrakta obnovio je rast ovih bakterija mliječne kiseline. Nadalje, CT vodeni ekstrakt uspio je ublažiti dramatične promjene u metaboličkim putovima crijevnog mikrobioma izazvane cefiksimom. *Ova otkrića pružila su uvid u korisne učinke vodenog ekstrakta CT-a na crijevnu mikrobiotu, a također su pružila važnu referencu za razvoj srodnih lijekova u budućnosti.

Kliknite ovdje da saznate više
1. Uvod
Crijevni mikroorganizmi uglavnom koloniziraju lumen crijeva i sloj sluznice te se međusobno povezuju s domaćinom kroz razmjenu materijala i energije, transformaciju i druge procese [1]. *oni su signalna središta koja integriraju poruke okoliša, poput prehrane, s genetskim i imunološkim signalima, posljedično utječući na metabolizam domaćina, imunitet, živčani sustav i odgovor na infekcije [2]. Normalno postoji dinamička ravnoteža između crijevne flore i domaćina; međutim, disbioza crijeva može rezultirati promjenama u ravnoteži između zdravlja i bolesti, imunološkim poremećajima i mnoštvom bolesti [3]. Umjerene promjene u crijevnoj mikrobioti su prihvatljive za domaćina; međutim, to još uvijek može pružiti prilike za pojačavanje promjena u drugim otežavajućim čimbenicima, kao što su bakteriofagi, bakteriocini i oksidativni stres [4]. Prethodne studije pokazale su da etanolni ekstrakt Cistanche tubulosa (CT), tradicionalne kineske biljne formule, može regulirati mikrobni sastav crijeva u štakora [5], a ukupni glikozidi CT-a prilagodili su poremećenu crijevnu mikrobiotu [6]. Vrste Cistanche, koje uglavnom parazitiraju na korijenju vrste Tamarix, nazivaju se i "pustinjski ginseng", a tonik koji se sastoji od stabljikaCistanchedeserticola(CD) iCistanche tubulosa(CT) koristi se kaobiljni lijek[7]. *e glavne kemijske komponente CT-afeniletanolni glikozidi(PHG), koji su antioksidativne tvari [8, 9], utvrđeno je da poboljšavaju reproduktivnu disfunkciju [10], potiskuju aktivaciju zvjezdastih stanica jetre, blokiraju provođenje signalnih putova u TGF- 1/SMAD [11], i spriječiti fibrozu jetre izazvanu goveđim albuminom u štakora [12]. Među više od 100 komponenti u CT-u, polisaharid je također jedna od važnih tvari s obilnim sadržajem [13, 14]. Prethodne studije pokazale su da polisaharidi C. deserticola induciraju melanogenezu u melanocitima, smanjuju oksidativni stres [15], ublažavaju kognitivnu disfunkciju reguliranjem antioksidativnih i protuupalnih procesa u štakora [16], štite stanice PC12 od ozljeda izazvanih OGD/RP [17] , poboljšavaju apsorpciju ehinakozida in vivo i utječu na crijevnu mikrobiotu [18]. Probiotici su živi nepatogeni mikroorganizmi koji imaju zdravstvene prednosti i osiguravaju mikrobnu ravnotežu u gastrointestinalnom traktu kada se primjenjuju u odgovarajućim količinama [19]. *mogu pojačati nespecifične stanične imunološke odgovore karakterizirane aktivacijom makrofaga, stanica prirodnih ubojica (NK) i antigen-specifičnih citotoksičnih limfocita T te otpuštanjem različitih citokina na način specifičan za soj i ovisan o dozi [20]. Probiotski sojevi poboljšavaju svojstva crijevnog epitela putem TJ modulacije, a dokazano je da specifični probiotski sojevi reguliraju ekspresiju mucina, čime utječu na svojstva sloja sluzi i neizravno reguliraju imunološki sustav crijeva [21]. Sojevi bakterija mliječne kiseline (LAB) i Bifidobacterium glavni su probiotici koji se koriste u mnogim područjima [22-26]. *njihove su zdravstvene dobrobiti brojne, a njihov antioksidativni kapacitet važan je čimbenik u njihovim zdravstvenim funkcijama[27]. Probiotici mogu kelirati metalne ione kako bi ih spriječili da kataliziraju oksidaciju [28, 29]; također mogu povećati ekspresiju antioksidativnih enzima [30, 31], proizvesti različite metabolite s antioksidativnim djelovanjem [32, 33], posredovati u antioksidativnim signalnim putovima [34-36] i regulirati enzime koji proizvode reaktivne kisikove vrste (ROS) i odgovor crijevnih mikroorganizama na oksidativni stres [37]. Nedavna studija je pokazala da polisaharidi CD-a mogu stimulirati rast nekih bakterija mliječne kiseline, što bi moglo imati koristi za ljudsko zdravlje [38]. Međutim, sadržaj polisaharida u CD-u razlikuje se od onog u CT-u [7, 39], a ta razlika može dovesti do različitih učinaka na crijevne mikroorganizme. Nadalje, iako CD polisaharidi mogu smanjiti oksidativni stres aktiviranjem puta NRF2/HO-1 [15], učinci jednog polisaharida mogu se razlikovati od ukupnog učinka višestrukih sastava u CT-u. *nas, potrebno je precizno definirati djelovanje CT vodenih ekstrakata na crijevne mikroorganizme. Osim toga, ventilatori se također mogu oduprijeti oksidativnom stresu [40] i potisnuti upalne odgovore posredovane lipopolisaharidom aktiviranjem puta Keap1/Nrf2/HO-1 [41]. *prije je od velike vrijednosti određivanje učinka CT vodenog ekstrakta. Osim toga, učinci određenih sastojaka vodenog ekstrakta CD-a na oksidativni stres i crijevnu floru sugeriraju da bi otpornost na oksidativni stres mogla biti povezana s promjenama crijevne flore. Kako bismo popunili praznine u znanju o gore navedenim temama, istražili smo učinak vodenog ekstrakta na crijevnu mikrobiotu miševa s poremećajem crijevne flore. *Ovi rezultati pružit će vrijedne informacije o mogućim mehanizmima kroz koje se mijenja crijevna flora i daje otpornost crijeva na oksidativni stres.https://www.xjcistanche.com/news/what-s-the-effect-of-cistanche-tubulosa-effec-54312367.html
2. Materijali i metode
primjenjivane dnevno u 12:00 h, a ostale tvari primjenjivane su svakodnevno u 15:00 h. Tijekom pokusa, skupine C, D, E i F držane su u modelu stanja crijevnih poremećaja. * Feces je prikupljan svakih sedam dana na sterilnom operabilnom stolu i pohranjen na -20 stupnjeva. 2.4. Histopatološko promatranje debelog crijeva miševa. Na kraju eksperimenta, miševi su ubijeni cervikalnom dislokacijom, a njihov sadržaj debelog crijeva je sakupljen na sterilnom operabilnom stolu i pohranjen na -80 stupnjeva; u isto vrijeme, uzorci tkiva debelog crijeva su fiksirani u 10 posto neutralnom formalinu.*en, uzorci su dehidrirani korištenjem gradijenta koncentracije etanola, hijalinizirani korištenjem ksilena, uklopljeni u parafin, razrezani i obojeni hematoksilin-eozinom. Morfološke promjene na sluznici debelog crijeva promatrane su i uspoređivane optičkim mikroskopom. Izmjerena je duljina resica i dubina kripte u debelom crijevu te je izračunat omjer duljine resica i dubine kripte (V/C vrijednost) (51).2.5. Ekstrakcija DNK i izgradnja knjižnice. DNK je ekstrahirana iz fecesa pomoću EZNA ®Soil DNA Kita (Omega Bio-Tek, Norcross, GA, SAD) prema protokolu proizvođača. Kvaliteta DNK određena je pomoću fluorometra (QuantiFluor™–ST, Promega Corporation, SAD). Upareni primeri u V3-V4 regiji 16s rDNA dizajnirani su za umnožavanje regije i proizvodnju fragmenata DNA od 466 bp. *prednji početni bio je 341F (-5-CCTACGGGNGGCWGCAG-3-), a obrnuti početni bio je 806R (-5-GGACTACHVGGGTATCTAAT-3-). Svaki PCR volumen bio je 25 µL, sadržavao je 2,5 µL 10 × PCR pufera, 2 µL dNTP-a, 1 µL svakog primera i 20-30 ng uzorka DNA. *en, indeksirani adapteri su pričvršćeni na kraj amplikona za generiranje biblioteka sekvenciranja. *biblioteke su validirane korištenjem QuantiFluor™ fluorometra i kvantificirane na 10 nmol. 2.6. Sekvenciranje gena 16s rRNA i analiza mikrobne zajednice. *e Illumina platforma (Illumina MiSeq) korištena je za dobivanje 2 × 250 bp uparenih podataka. Operativne taksonomske jedinice (OTU) dobivene su pomoću softvera Uparse kroz standardno grupiranje u skupine s 97 posto sličnosti. *Naivni Bayesov algoritam dodjele RDP klasifikatora korišten je za usklađivanje OTU-ova s bazom podataka Greengene Izdanje 13.5 i izvođenje označavanja vrsta. *e alfa raznolikost crijevne mikrobiote izračunata je pomoću Shannonovog i Simpsonovog indeksa, a razlike među skupinama analizirane su linearnom diskriminantnom analizom Effect Size (LEfSe). *e beta raznolikost analizirana je analizom glavnih koordinata (PCoA) Brady–Curtisovih razlika. PICRUSt2 korišten je za procjenu mikrobnog metaboličkog kapaciteta crijevnog mikrobioma [42]. 2.7. Statistička analiza podataka. SPSS 20 korišten je za jednosmjernu ANOVA-u, a eksperimentalni podaci su izraženi kao X ± S; X označava prosječnu vrijednost, a S označava standardnu devijaciju.

3. Rezultati
3.1. 8e Učinak CT vodenog ekstrakta na morfologiju debelog crijeva.* Reprezentativni spojevi (ehinakozid i acetonid) i njihove koncentracije u CT ekstraktu potvrđeni su HPLC-om (Slika S1). Kako bismo odredili učinak vodenog ekstrakta na crijeva, istraživali smo duljinu resica debelog crijeva i dubinu udubljenja nakon tretmana vodenim ekstraktom. *e resice debelog crijeva u skupinama s normalnom i visokom dozom (A, B i D) bile su duže i poput prsta, dok su resice debelog crijeva u modelu i skupinama s niskom dozom (C i F) bile kratke, a vrhovi resice debelog crijeva bile su slomljene (Slika 1). U skladu s tim, visoka doza CT vodenog ekstrakta značajno je povećala duljinu resica debelog crijeva i smanjila dubinu udubljenja kod miševa s crijevnim poremećajima u usporedbi s miševima u modelnoj skupini (P < 0.01).="" nasuprot="" tome,="" dubina="" udubljenja="" nije="" se="" značajno="" razlikovala="" između="" skupine="" s="" visokom="" dozom="" i="" normalne="" skupine="" (p=""> 0,05) (Tablica S1). *Ovi rezultati pokazuju da visoka doza CT vodenog ekstrakta može poboljšati morfologiju unutar debelog crijeva miševa s crijevnim poremećajima. 3.2. 8e Učinak CT vodenog ekstrakta na raznolikost crijevne mikrobiote. Proveli smo sekvenciranje gena 16s rRNA kako bismo istražili potencijalni uzrok morfoloških promjena unutar debelog crijeva i istražili promjene u crijevnoj mikrobioti nakon tretmana CT vodenim ekstraktom. Iz neobrađenih podataka dobiveno je prosječno 100 553 efektivnih oznaka, u rasponu od 77 734 do 125 144 (Tablica S2). *jeleni su grupirani u 4932 OTU-a (Tablica S3). Zatim smo analizirali raznolikost crijevne mikrobiote na temelju Tezeja. *e Shannonov i Simpsonov indeks nije pokazao razliku između skupine A (normalno s CT vodenim ekstraktom) i B skupine (normalno bez CT vodenog ekstrakta) (Slika 2(a)). *indicirano je da kod miševa bez liječenja cefiksimom vodeni ekstrakt CT možda nije imao dodatne korisne ili štetne učinke na -raznolikost crijevne mikrobiote. Međutim, raznolikost u modelnoj skupini (C) pokazala je trend pada u usporedbi s onom u normalnim skupinama. *e miševi tretirani visokim i srednjim dozama CT vodenog ekstrakta pokazali su znakove oporavka raznolikosti, dok takav fenomen nije primijećen kod miševa tretiranih niskom dozom CT vodenog ekstrakta (Slika 2(a)). U međuvremenu, PCoA je otkrio da su normalne skupine (A i B) i skupine s crijevnim poremećajima kojima su davane visoke doze (D) i srednje doze (E) CT vodenih ekstrakata imale tendenciju da imaju kraće udaljenosti između uzoraka od onih u modelnoj skupini iu niskim dozama. -doza C Vodeni ekstrakt dodatak skupini (F) (Slika 2(b)). *rezultati pokazuju da CT vodeni ekstrakt može pomoći u poboljšanju raznolikosti crijevne mikrobiote kod miševa s crijevnim poremećajima. 3.3. Promjene u sastavu crijevne mikrobiote tretirane CT vodenim ekstraktom. * Profili sastava mikrobiote uspoređeni su među različitim skupinama. Na razini vrste, relativna brojnost proteobakterija u modelnoj skupini bila je veća od one u drugim skupinama.https://www.xjcistanche.com/news/protective-effects-of-taxifolin-on-pazopanib-i-54206149.html

(Slika 3(a)). *Povećanje proteobakterija sugerira da je mikrobiom modelnih miševa promijenjen cefiksimom i da bi CT vodeni ekstrakt mogao koristiti crijevnoj mikrobioti budući da je povećana prevalencija proteobakterija središnji biljeg poremećene crijevne flore [43-45]. Osim toga, na razini roda, relativna zastupljenost Lactobacillusa u modelnoj skupini smanjila se u usporedbi s onom u normalnoj skupini i skupini s visokom dozom; međutim, povećao se u usporedbi s onim u skupini sa srednjom i niskom dozom (Slika 3(b)). *Ovi rezultati pokazuju da bi ekstrakt visoke doze CTaqueous mogao potaknuti rast nekih bakterija iz roda Lactobacillus. Diferencijalna mikrobiota između ispitivanih skupina dodatno je određena LEfSe analizom. *analiza je pokazala da su se nakon tretmana cefiksimom značajno povećale relativne količine Turicibacter, Alphaproteobacteria, Acidobacteria, Betaproteobacteriales i Chloroflflexi, dok su relativne količine lactobacillusa, Eubacterium_nodatum_skupine, Pseudono cardiales i Christensenellaceae_R-7_skupina značajno se smanjila u usporedbi s onima u normalnoj skupini (Slika 4(a)). Zapanjujuće, kada je modelna skupina nadopunjena visokom dozom CT vodenog ekstrakta, relativne količine Muribaculaceae, Lactobacillus, Kin eosporiaceae, Eubacterium no datum skupine i Pedobacter bile su značajno povećane u usporedbi s onima u modelnoj skupini. U međuvremenu, relativne količine Rhodobacter, Ruminococcaceae UCG_013, Roseburia, Ruminiclostridium_9 i Candidatus Stoquefifichus značajno su se smanjile u usporedbi s onima u modelnoj skupini (Slika 4(b)).


3.4. Funkcije crijevne mikrobiote povezane s liječenjem CT vodenim ekstraktom. Koristili smo softver PICRUSt2 za predviđanje metaboličkih putova crijevne mikrobiote, a normalna skupina korištena je kao referenca za analizu promjena u drugim skupinama. Pod liječenjem cefiksimom, povećala se relativna zastupljenost razgradnje etilbenzena, biosinteza neribosomalnih peptida sideroforne skupine i metabolizam ksenobiotika putem citokroma P450; nakon tretmana s visokim i srednjim dozama vodenih ekstrakata, njihova se relativna zastupljenost vratila na normalne razine. U međuvremenu, relativno obilje puta metabolizma cijanoaminokiselina smanjilo se pod liječenjem cefifiksimom; međutim, povećao se nakon tretmana s visokim dozama CT vodenog ekstrakta. Nadalje, općenito, promjene u različitim putevima metabolita nakon liječenja cefiksimom bile su značajne u usporedbi s onima u normalnoj skupini; međutim, dodavanjem vodenog ekstrakta uspjelo se spriječiti prekomjerne promjene (Slika 5).
4. Rasprava
skupine prevladavaju u ljudskom crijevu; Utvrđeno je da je omjer Bacteroidetes/Firmicutes smanjen kod pretilih ljudi u usporedbi s onim kod mršavih ljudi, a utvrđeno je da se taj omjer povećava s gubitkom težine kod ljudi na dvije vrste niskokalorične dijete [38, 41, 43–45, 48 , 53, 54]. U međuvremenu, Turicibacter, koji je povezan s pretilošću [55], bio je značajno povišen u skupini modela u usporedbi s onima u drugim skupinama. Značajno je da je raznolikost crijevne mikrobiote u modelu miševa poboljšana dodatkom vodenog ekstrakta. Uočili smo neke specifične crijevne bakterije kod miševa pod različitim tretmanima; na primjer, Lactobacillus i Muribaculaceae dva su glavna bakterijska roda koja su se povećala u skupini tretiranoj visokom dozom vodenog ekstrakta u usporedbi s onima u modelnoj skupini (Slika 4). Nedavne studije pokazale su da polisaharidi vodenih ekstrakata CT-a posjeduju značajne antioksidativne aktivnosti in vitro [56] i mogu pospješiti rast nekih bakterija mliječne kiseline, što bi moglo koristiti zdravlju domaćina [43]. Paralelno, Muribaculaceae su probiotički organizmi povezani s dugovječnošću [57]. *ese je predložio da bi mehanizam kojim CT vodeni ekstrakt poboljšava crijevnu mikrobiotu mogao biti poticanje ili zaštita rasta probiotskih organizama. Još jedna bakterija vrijedna pažnje bila je bakterija YE57. Iako je visoka doza ekstrakta CTaqueous potaknula relativnu brojnost bakterije YE57 u ovoj studiji (Slika 4), prethodne studije su otkrile da je njezina brojnost veća u normalnim crijevima nego u crijevima tretiranim visokokoncentriranim ostatkom biljnog čaja [ 58] te da je njegova brojnost smanjena nakon intervencije s Bacillus licheniformis u kombinaciji s XOS (ksilooligosaharidima) [59]. Prema nama, uloga ove bakterije u crijevnoj mikrobioti zaslužuje daljnje proučavanje. Osim toga, relativno mali broj uzoraka u ovoj studiji mogao bi uzrokovati mjerenje lažno pozitivnih i lažno negativnih rezultata, a predlaže se buduća studija na većim uzorcima kako bi se potvrdili identificirani bakterijski markeri.
Sastav vodenog ekstrakta CT-a mogao bi biti važan zbog svojih učinaka na sastav i funkcionalne promjene u crijevnoj mikrobioti miševa s crijevnim poremećajima. PSG-ovi su uobičajene aktivne komponente koje se nalaze u CD-u i CT-u, a ehinakozid je identificiran kao glavni PNG u [60]. Proteklih desetljeća pokazalo se da ehinakozid posjeduje mnoge farmakološke aktivnosti, kao što su učinci protiv starenja i neuroprotektivni učinci, poboljšanje srčane funkcije, smanjenje hiperlipidemije i hiperglikemije te prevencija dijabetesa izazvanog pretilošću i metaboličkog sindroma [53, 61-65]. . Zapravo, otkrili smo promjene u metaboličkim putovima crijevne mikrobiote.* Liječenje cefiksimom dovelo je do obogaćivanja bakterija povezanih s razgradnjom etilbenzena i biosintezom neribosomskih peptida sideroforne skupine, dok su tretmani s visokom i srednjom dozom CT-a vodeni ekstrakt mogao bi ublažiti te promjene, što ukazuje da je ovaj ekstrakt ublažio bakterijsku zajednicu povezanu s tim funkcijama. Uz to, povećano obogaćivanje bakterija povezano s metaboličkim putem cijanoaminokiseline pod tretmanom visokim dozama vodenog ekstrakta i njegovo smanjeno obogaćivanje u modelnim miševima ukazuje da CT vodeni ekstrakt može pospješiti metabolizam cijanoaminokiseline. *Promjene u relevantnim metabolitima mogle bi ovom vodenom ekstraktu osigurati farmakološke aktivnosti.

Iako je mehanizam kojim CT vodeni ekstrakt mijenja sastav i funkciju crijevne mikrobiote složen, postoje neke naznake za nagađanje o potencijalnom mehanizmu. Zabilježeno je da i bakterije mliječne kiseline i CT vodeni ekstrakti mogu antagonizirati oksidativni stres. Oksidativni stres koji se javlja tijekom upale čest je čimbenik koji pogoršava crijevne poremećaje snažnim smanjenjem mikrobne raznolikosti crijeva i poticanjem porasta specifičnih bakterija (4). Naprotiv, reaktivne kisikove vrste također potiču selektivni rast bakterijskih skupina kroz disanje nitrata i tetrationata [66–68]; na primjer, bakterije iz obitelji Enterobacteriaceae mogu brzo rasti kao posljedica promjena u sastavu crijevne flore u oksidativnim uvjetima tijekom upale [69, 70]. Većina živih organizama razvija enzimatsku obranu, neenzimsku antioksidacijsku obranu i mehanizme popravka za hvatanje kisikovih radikala [71].
Međutim, ti izvorni antioksidativni sustavi općenito nisu dovoljni za sprječavanje oksidativnog oštećenja živih organizama. Nekoliko dodatnih sintetskih antioksidansa, uključujući butilirani hidroksianisol i butilirani hidroksitoluen, naširoko se koristilo za smanjenje oksidacije, ali je njihova sigurnost dovedena u pitanje [72, 73]. *prije su se istraživači okrenuli pronalasku sigurnijih i prirodnijih antioksidansa dobivenih iz prirodnih tvari. Zbog sposobnosti polisaharida i bakterija mliječne kiseline da eliminiraju oksidativni stres, utvrđivanje preciznog antioksidativnog mehanizma CT vodenih ekstrakata na crijevnu mikrobiotu zahtijeva daljnja istraživanja u budućnosti.

U zaključku,otkrili smo da je vodeni ekstrakt CT mogao poboljšati crijevnu mikrobiotu u miševa s crijevnim poremećajima promicanjem raznolikosti, moderiranjem metaboličkih promjena i preoblikovanjem strukture crijevne mikrobiote, a ovi rezultati mogu pružiti referencu za razvoj srodnih lijekova u budućnost. Dostupnost podataka*e statistika operativnih taksonomskih jedinica među svakim uzorkom podataka koji se koriste za potporu nalazima ove studije uključeni su u datoteke s dodatnim informacijama, a podaci o sekvenciranju 16s rRNA koji se koriste za potporu nalazima ove studije bit će objavljeni nakon objave. Sukob interesa*Autori izjavljuju da nemaju sukoba interesa. Zahvala*Studiju su financijski podržali grantovi Nacionalne zaklade za prirodne znanosti Kine (81860766). Dodatni materijali Slika S1: HPLC detekcija vodenog ekstrakta Cistanche tubulosa. (a) *vrh ehinakozida i akteozida u referentnom materijalu pojavljuje se na 5,066 min i 9,988 min odvojeno. (b) *vrh ehinakozida i acetonida u vodenom ekstraktu pojavljuje se na 5,097 min i 10,076 min odvojeno, a koncentracije su 236 mg/g i 12,7 mg/odvojeno. Tablica S1: duljina resica debelog crijeva i dubina udubljenja. Tablica S2: Statistički podaci podataka o sekvenciranju 16S rRNA. Tablica S3: statistika operativnih taksonomskih jedinica u svakom uzorku. (dopunski materijal)
Članak dolazi iz Hindawi Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine Volume 2021, ID članka 4936970, 11 stranica https://doi.org/10.1155/2021/4936970




