Istraživanje ekstrakcije temeljene na UHPLC-u i optimizacije procesa odvajanja ultrafiltracijom za ekstrakte Cistanche
Apr 01, 2026
Link izvora koji je dao korisnik:https://www.xjcistanche.com/news/hplc-for-simultaneous-determination-of-four-ph-77351688.html
Bilješka:Sadržaj u nastavku preveden je i uređivački optimiziran zatvornice i male radionicezainteresiran zaoptimizacija procesa biljnog ekstrakta, zadržavajući pritomizvorno tehničko značenje i strukturušto netaknutiji.
Sažetak
Cilj:Za uspostavljanje aUHPLC višekomponentna metoda kvantitativne analizezaCistanchei optimiziratiproces ekstrakcijeiproces odvajanja ultrafiltracijskom membranom.
Metode:Razvijena je brza UHPLC metoda za simultanu kvantifikacijutri feniletanoidna glikozida (PhG)uCistancheotopina ekstrakta. Proces ekstrakcije je optimiziran korištenjem aBox–Behnkenov model odzivne površine. Za ultrafiltraciju,stope zadržavanja tri spoja markeraimembranski protokodabrani su kaokvalitetaiučinkovitostpokazatelji, respektivno. Themetoda KRITIKAprimijenjen je za određivanje pondera indikatora, omogućujući sveobuhvatnu procjenu aneksperiment ortogonalne ultrafiltracije, te su odabrani optimalni uvjeti odvajanja membrane.
Rezultati:Utvrđena UHPLC metoda zaCistancheotopina ekstrakta bila jestabilan, brz i učinkovit. Na temelju analize odzivne površine i industrijske izvedivosti, optimizirani proces ekstrakcije je određen kao:
"Ekstrahirajte dva puta koristeći 7× volumen otapala od 60% etanola, svaki put 80 minuta."
Sveobuhvatna procjena ultrafiltracijskog ortogonalnog eksperimenta pokazala je daveličina pora membraneznačajno utjecao na ukupnu ocjenu. Optimalni postupak ultrafiltracijske separacije bio je:
"100 kDa membranski modul, 35 stupnjeva, 0,5 MPa."
Zaključak:Ova studija je utvrdila aUHPLC višekomponentna kvantitativna metodai sveobuhvatno evaluiraopostupci ekstrakcije i ultrafiltracijezaCistanche. Analitička metoda i proces sustabilan i pouzdan, pružajući praktičnu referencu zapovećanje i industrijska primjenaodCistancheekstrakcija i odvajanje membrane.
Ključne riječi: Cistanche; UHPLC; izvlačenje; ultrafiltracijska membrana; proces odvajanja; optimizacija procesa; feniletanoidni glikozidi; kontrola kvalitete; kako napraviti visokokvalitetni ekstrakt.
Dijagram toka proizvodnje ekstrakta Cistanche Tubulosa (izvor iz wecistanche)
Služba podrške Wecistanche-Za više detalja o suradnji
E-pošta:wallence.suen@wecistanche.com
1. Pozadina (zašto je ovo važno za stvaranje visokokvalitetnihCistancheekstrakt)
Cistancheima dugu povijest upotrebe kao hrana i tradicionalni biljni materijal u Kini, tradicionalno povezan s funkcijama kao što su "toniziranje bubrega-yang" i "hranjiva esencija i krv". Njegovi bioaktivni sastojci uključujufeniletanoidni glikozidi, iridoidni terpeni, lignani, polisaharidi, itd. Među njima,feniletanoidni glikozidi (PhG)široko su prepoznate kao ključne aktivne komponente, uključujući prijavljene aktivnostiprotuupalno, antitumorsko, antioksidativno, protiv starenja, poboljšanje gustoće kostiju i neuroprotekcija.
Cistancheparazitira na korijenimaHaloxylon(biljka Chenopodiaceae) i uglavnom je rasprostranjena u Xinjiangu, Gansuu i drugim regijama. Širenjem uzgoja, njegova uporaba ulijekovi i dodaci prehranije brzo narasla.
U modernoj biljnoj proizvodnji,višekomponentna evaluacijasve se više koristi za kontrolu kvalitete sirovina i koraka ekstrakcije/odvajanja. Međutim, sustavno istraživanje vrednovanjeCistancheekstrakcija i odvajanje membrane pomoću višestrukih PhG markera-posebno putembrze i učinkovite kvantitativne metode- bila je relativno ograničena. U isto vrijeme, odvajanje membrane postalo je široko primjenjivano u TCM-u i proizvodnji dodataka zbogvisoka preciznost odvajanjaiekološki prihvatljiva obrada s niskim udjelom ugljika, a može poboljšati stabilnost tekućih pripravaka.
Ova studija stoga:
razvio brzu UHPLC metodu zatri ključna doktorata znanostiuCistancheotopina ekstrakta;
optimizirana ekstrakcija korištenjemmetodologija površine odziva;
evaluated ultrafiltration usingretencija markera + membranski tok, s objektivnim ponderiranjem premaKRITIČAR, podržavajući odabir procesa za industrijalizaciju.
2. Instrumenti i materijali
2.1 Instrumenti
Agilent 1290 Infinity II UHPLC(Agilent Technologies, SAD)
ACQUITY UPLC HSS T3 kolona(100 mm × 2,1 mm, 1,8 μm; Waters, SAD)
XS-105DU analitička vaga(Mettler Toledo)
BONA-GM-18 jedinica za odvajanje membrane za mikrofiltraciju/ultrafiltraciju/nanofiltraciju
TKF-18 ultrafiltracijske membrane(50, 100, 200 kDa; Shandong Bona Biotechnology Co., Ltd.)
PURELAB klasični sustav ultračiste vode(ELGA, UK)
Napomena: 1: ehinakozid; 2: verbaskozid; 3: izoakteozid
2.2 Materijali i reagensi
Referentni standardi (Nacionalni instituti za kontrolu hrane i lijekova, Kina):
Ehinakozid (111670-201907, 91.8%)
Akteozid/verbaskozid (111530-202315, 97.6%)
Izoakteozid (112112-202401, 97.0%)
Acetonitril, HPLC stupanj (Fisher Chemical, SAD)
Voda:ultra čista voda
Cistanchekomadići dekokcije (serija br. . 250221) kupljeni od Henan Dali Pharmaceutical Co., Ltd.
Identificirao istraživač Sun Daihua (Jingpai Chizhengtang Pharmaceutical Co., Ltd.)
Botaničko porijeklo:Cistanche tubulosa (Schenk) Wight
Provjereno za usklađenostFarmakopeja Narodne Republike Kine (izdanje 2020.)zahtjevi.
Tablica 1. Linearnost, koeficijent korelacije, linearni raspon i LOQ tri komponente
| komponenta | Regresijska jednadžba (Y=područje vrha, X=koncentracija) | Koeficijent korelacije (R) | Linearni raspon (µg·mL⁻¹) | LOQ (µg·mL⁻¹) |
|---|---|---|---|---|
| Ehinakozid | Y = 1.873X + 49.049 | 0.9998 | 24.21–774.79 | 0.69 |
| Akteozid (verbaskozid) | Y = 2.038X − 6.483 | 0.9996 | 15.96–510.64 | 0.46 |
| Izoakteozid | Y = 2.039X − 3.105 | 0.9999 | 5.00–159.86 | 0.52 |
Tablica 2. Preciznost, ponovljivost, stabilnost i rezultati oporavka od skokova (n=6)
| komponenta | Preciznost (RSD, %) | Ponovljivost (RSD, %) | Stabilnost (RSD, %) | Oporavak skokova (%) | RSD povrata (%) |
|---|---|---|---|---|---|
| Ehinakozid | 0.93 | 1.05 | 1.38 | 98.47 | 1.27 |
| Akteozid (verbaskozid) | 0.86 | 1.39 | 1.54 | 101.35 | 1.04 |
| Izoakteozid | 0.62 | 0.89 | 1.07 | 99.58 | 0.93 |
Tablica 3. Eksperimentalni faktori i razine (Box–Behnkenov dizajn)
| Razina | Faktor A: Koncentracija etanola (%) | Faktor B: Omjer otapala i materijala (×) | Faktor C: Vrijeme ekstrakcije (min) |
|---|---|---|---|
| 1 | 50 | 6 | 30 |
| 2 | 60 | 7 | 60 |
| 3 | 70 | 8 | 90 |
Tablica 4. Eksperimentalni rezultati Box-Behnkenove površine odziva
| Trčanje | A: Koncentracija etanola (%) | B: Omjer otapala (×) | C: Vrijeme ekstrakcije (min) | Y₁: Ukupni prinos ekstrakcije (%) |
|---|---|---|---|---|
| 1 | 70 | 8 | 60 | 8.40 |
| 2 | 70 | 7 | 90 | 8.31 |
| 3 | 60 | 6 | 90 | 9.09 |
| 4 | 60 | 7 | 60 | 9.56 |
| 5 | 60 | 8 | 30 | 8.69 |
| 6 | 60 | 7 | 60 | 9.46 |
| 7 | 50 | 6 | 60 | 8.24 |
| 8 | 60 | 7 | 60 | 9.57 |
| 9 | 70 | 7 | 30 | 7.74 |
| 10 | 50 | 7 | 30 | 7.81 |
| 11 | 60 | 7 | 60 | 9.54 |
| 12 | 60 | 8 | 90 | 9.53 |
| 13 | 50 | 8 | 60 | 8.84 |
| 14 | 50 | 7 | 90 | 8.99 |
| 15 | 70 | 6 | 60 | 7.77 |
| 16 | 60 | 6 | 30 | 8.03 |
| 17 | 60 | 7 | 60 | 9.51 |
Tablica 5. ANOVA za model površine odziva
| Izvor | Zbroj kvadrata | df | Srednji kvadrat | F vrijednost | P vrijednost | Značaj |
|---|---|---|---|---|---|---|
| Model | 7.76 | 9 | 0.8627 | 377.29 | < 0.0001 | **** |
| A | 0.3444 | 1 | 0.3444 | 150.65 | < 0.0001 | **** |
| B | 0.6786 | 1 | 0.6786 | 296.80 | < 0.0001 | **** |
| C | 1.6700 | 1 | 1.6700 | 728.35 | < 0.0001 | **** |
| AB | 0.0002 | 1 | 0.0002 | 0.0984 | 0.7629 | ns |
| AC | 0.0930 | 1 | 0.0930 | 40.69 | 0.0004 | *** |
| PRIJE KRISTA | 0.0121 | 1 | 0.0121 | 5.29 | 0.0550 | ns |
| A² | 3.5600 | 1 | 3.5600 | 1555.28 | < 0.0001 | **** |
| B² | 0.3702 | 1 | 0.3702 | 161.89 | < 0.0001 | **** |
| C² | 0.6619 | 1 | 0.6619 | 289.51 | < 0.0001 | **** |
| Ostatak | 0.0160 | 7 | 0.0023 | - | - | - |
| Nedostatak fit | 0.0081 | 3 | 0.0027 | 1.37 | 0.3712 | ns |
| Čista greška | 0.0079 | 4 | 0.0020 | - | - | - |
| Ukupno | 7.78 | 16 | - | - | - | - |
3. Metode i rezultati
3.1 Višekomponentno određivanje sadržaja (UHPLC)
3.1.1 Priprema miješane referentne otopine
Točno odvažite odgovarajuće količine standarda ehinakozida, akteozida (verbaskozida) i izoakteozida i otopite ih u metanolu kako biste pripremili osnovne otopine u koncentracijama1936.980, 1702.144, i799,280 ug·mL⁻¹, odnosno. Precizno pipetom1.00 mL, 0.50 mL, i0.50 mLod tri osnovne otopine u aOdmjerna tikvica od 5 ml, razrijedite do volumena s metanolom i dobro promiješajte kako biste dobili miješanu referentnu otopinu.
Slika 3. Trodimenzionalni dijagram površine odziva interakcija među različitim čimbenicima.
Slika 4. Učinci temperature (A), tlaka (B) i veličine pora (C) na učinkovitost odvajanja ultrafiltracijske membrane.
3.1.2 Priprema otopine uzorka
Precizno pipetom1.00 mLodCistancheekstrahirajte otopinu ili ultrafiltrirajte u aOdmjerna tikvica od 10 ml, razrijedite na volumen sa50% etanola, dobro promiješajte, filtrirajte i prikupite sljedeći filtrat kao ispitnu otopinu.
3.1.3 Kromatografski uvjeti
Stupac:ACQUITY UPLC HSS T3(100 mm × 2,1 mm, 1,8 μm)
Mobilna faza:Acetonitril (A) – 0,1% otopina mravlje kiseline (B)
Gradijentno ispiranje:
0–5 min: 15%–22% A
5-7 min: 22%-27% A
7-10 min: 27%-30% A
Valna duljina detekcije:330 nm
Brzina protoka:0,3 ml/min
Temperatura kolone:30 stupnjeva
Volumen injekcije:1 μL
Vakuumski spremnik (od Wecistanchea)
Tablica 6. Rasponi jednofaktorskih eksperimenata za ultrafiltracijsko odvajanje
| Faktor | Razina 1 | Razina 2 | Razina 3 | Razina 4 | Razina 5 |
|---|---|---|---|---|---|
| A: Temperatura (stupnjevi) | 20 | 25 | 30 | 35 | 40 |
| B: Tlak (MPa) | 0.1 | 0.2 | 0.3 | 0.4 | 0.5 |
| C: MWCO (kDa) | 10 | 30 | 50 | 100 | 200 |
3.1.4 Specifičnost
Ubrizgane su ispitne otopine (S1), miješana referentna otopina i slijepa otopina (50% etanol). Najveća razlučivost za svaku komponentu bila je> 1.5, a prazan uzorak nije pokazao smetnje.
Tablica 7. Čimbenici i razine za ortogonalni eksperiment
| Razina | A: Temperatura (stupnjevi) | B: Tlak (MPa) | C: MWCO (kDa) | D: Prazno |
|---|---|---|---|---|
| 1 | 30 | 0.3 | 50 | 1 |
| 2 | 35 | 0.4 | 100 | 2 |
| 3 | 40 | 0.5 | 200 | 3 |
3.1.5 Linearnost i granica kvantifikacije (LOQ)
Pripremite miješanu referentnu otopinu koja sadrži ehinakozid, akteozid i izoakteozid na774.792, 510.643, i159,856 ug·mL⁻¹, odnosno, zatim razrijediti2×, 4×, 8×, 16×, 32×za postizanje šest razina koncentracije. Pod gore navedenim kromatografskim uvjetima, upotrijebite koncentraciju (X) u odnosu na površinu vrha (Y) za postavljanje kalibracijskih krivulja. Koeficijenti korelacije (R) bili suVeći ili jednak 0,9996, što ukazuje na izvrsnu linearnost. (Regresijska jednadžba, linearni raspon i LOQ navedeni su u izvornim tablicama.)
Tablica 8. Ortogonalni eksperimentalni dizajn i rezultati za odvajanje ultrafiltracijske membrane
Bilješka:Stopa zadržavanja WWW navedena je za tri analita:
W1W_1W1 Ehinakozid; W2W_2W2 Akteozid (verbaskozid); W3W_3W3 Izoakteozid.
Jedinica protoka membrane W4W_4W4: [L⋅(m2⋅h)−1][ \\mathrm{L \\cdot (m^2 \\cdot h)^{-1}} ][L⋅(m2⋅h)−1]. Sveobuhvatna jedinica rezultata Y2Y_2Y2: (%).
| Trčanje | A: Temp (stupanj) | B: Tlak (MPa) | C: MWCO (kDa) | D (prazno) | W1W_1W1 (%) | W2W_2W2 (%) | W3W_3W3 (%) | W4W_4W4 [L⋅(m2⋅h)−1][L·(m²·h)⁻¹][L⋅(m2⋅h)−1] | Y2Y_2Y2 (%) |
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 1 | 30 | 0.3 | 50 | 1 | 3.49 | 1.12 | 0.36 | 2.05 | 39.88 |
| 2 | 30 | 0.4 | 100 | 2 | 5.72 | 1.62 | 0.50 | 11.14 | 67.71 |
| 3 | 30 | 0.5 | 200 | 3 | 1.59 | 0.61 | 0.20 | 32.14 | 52.85 |
| 4 | 35 | 0.3 | 100 | 3 | 6.65 | 1.89 | 0.62 | 9.38 | 76.48 |
| 5 | 35 | 0.4 | 200 | 1 | 1.65 | 0.63 | 0.21 | 25.00 | 46.27 |
| 6 | 35 | 0.5 | 50 | 2 | 3.36 | 1.08 | 0.35 | 3.04 | 39.64 |
| 7 | 40 | 0.3 | 200 | 2 | 1.74 | 0.68 | 0.22 | 26.79 | 49.36 |
| 8 | 40 | 0.4 | 50 | 3 | 3.23 | 1.04 | 0.33 | 2.96 | 37.94 |
| 9 | 40 | 0.5 | 100 | 1 | 5.52 |
Ukupni/rasponi razine faktora (kao što je prikazano na slici):
| Statistički | A | B | C | D |
|---|---|---|---|---|
| k1k_1k1 | 53.48 | 55.24 | 39.15 | 52.39 |
| k2k_2k2 | 54.13 | 50.64 | 71.74 | 52.24 |
| k3k_3k3 | 52.78 | 54.51 | 49.49 | 55.76 |
| RRR | 1.35 | 4.60 | 32.59 | 3.52 |
Tablica 9. Rezultati analize varijance (ANOVA).
| Faktor | DfD_fDf | Adj SS | Adj MS | F | P |
|---|---|---|---|---|---|
| O: Temperatura | 2 | 2.75 | 1.37 | 0.12 | 0.90 |
| B: Pritisak | 2 | 36.65 | 18.32 | 1.54 | 0.39 |
| C: MWCO | 2 | 1663.72 | 831.86 | 70.12 | 0.01 |
| D: Prazno | 2 | 23.73 | 11.86 | - | - |
Tablica 10. Rezultati verifikacije ortogonalnog eksperimenta
| Trčanje | Zadržavanje ehinakozida (%) | Zadržavanje akteozida (%) | Zadržavanje izoakteozida (%) | Membranski tok [L⋅(m2⋅h)−1][L·(m²·h)⁻¹][L⋅(m2⋅h)−1] |
|---|---|---|---|---|
| 1 | 94.85 | 92.54 | 91.04 | 10.42 |
| 2 | 94.71 | 93.03 | 92.54 | 10.04 |
| 3 | 94.71 | 92.54 | 91.04 | 10.61 |
| Zlobno | 94.76 | 92.70 | 91.54 | 10.36 |
| RSD (%) | 0.1 | 0.3 | 0.9 | 2.8 |
3.1.6 Preciznost, ponovljivost, stabilnost i oporavak
Validacija metode provedena je prema smjernicama za validaciju analitičke metode uKineska farmakopeja (2020.), uključujući preciznost, ponovljivost,48-satna stabilnost, i šiljak oporavak. Rezultati su pokazali da je metoda prikladna za određivanje sadržajaCistancheotopina ekstrakta.
3.2 Studija procesa ekstrakcije (Kako ekstrahirati za visoku kvalitetu i visok prinos)
3.2.1 Eksperimenti s jednim faktorom
Svaka iskorištena ekstrakcija30 gzgnječenCistanchesirovina. Korištenjem ekstrakcijskih prinosa ehinakozida, akteozida i izoakteozida kao pokazatelja procjene, proučavani su sljedeći čimbenici:
Koncentracija etanola:40%, 50%, 60%, 70%, 80%
Vrijeme ekstrakcije:1, 2, 3, 4, 5
Omjer otapala i materijala:5×, 6×, 7×, 8×, 9×
Vrijeme ekstrakcije:30, 60, 90, 120, 150 min
Prilikom proučavanja jednog faktora, drugi su bili fiksirani (osnovna vrijednost:60% etanol, 7x otapalo, 3 puta, 1,5 h). Metoda ekstrakcije:refluksna ekstrakcija(vodena kupelj na80 stupnjeva). Svaki uvjet je izveden u tri primjerka.
Nalazi:
Ukupni prinos ekstrakcije triju markera povećavao se, a zatim smanjivao s koncentracijom etanola; razlike su bile značajne (P < 0,05).Najbolja koncentracija etanola: 60%.
Omjer otapala, vrijeme ekstrakcije i vrijeme pokazali su slične trendove: prinos se povećao, a zatim stao na plato. Nakon7× otapalo, 2 ekstrakcije, i1 h, razlike više nisu bile značajne.
Uzimajući u obzir troškove i učinkovitost povećanja, korišten je dizajn površine odziva: etanol50–70%, otapalo6–8×, vrijeme30–90 min, s vremenima ekstrakcije postavljenim na2.
Oprema za odvajanje membrane (od Wecistanchea)
3.2.2 Box–Behnkenov dizajn površine i rezultati
Za daljnju optimizaciju korišten je Box-Behnkenov model odzivne površine. Varijabla odgovora bila jeukupni prinos ekstrakcije (Y1)od tri feniletanoidna glikozida.
Uklopljena regresijska jednadžba bila je:
Y1=9.53−0,21A+0.29B+0.46C+0.01AB−0,15AC−0,06BC−0,92A2−0,30B2−0,40C2Y1=9.53 - 0.21A + 0.29B + 0.46C + 0.01AB - 0.15AC - 0.06BC - 0.92A^2 - 0.30B^2 - 0.40C^2Y1=9.53−0,21A+0.29B+0.46C+0.01AB−0,15AC−0,06BC−0,92A2−0,30B2−0,40C2
s R2=0.9979R^2=0.9979R2=0.9979.
ANOVA je pokazala:
Model je bio visoko značajan (P < 0,0001)
Nedostatak pristajanja nije bio značajan (P=0.3712), što ukazuje na dobru prikladnost modela
Redoslijed utjecaja faktora:C > B > A
A, B, C i kvadratni članovi A2A^2A2, B2B^2B2, C2C^2C2 bili su izuzetno značajni (P <0,0001)
Pojam interakcijeACbio izuzetno značajan (P < 0,001)
Koristeći Design-Expert 12, predviđeni optimalni uvjeti bili su:
Etanol:58.41%
Omjer otapala:7.44×
Vrijeme:77.26 min
S obzirom na praktičnost industrijske kontrole i troškove, konačno praktično stanje je prilagođeno:
60% etanol, 7x otapalo, 80 min, ekstrahirano dva puta.
3.2.3 Provjera procesa
Provedena su tri paralelna validacijska eksperimenta pod odabranim optimalnim uvjetima. Prosječni ukupni prinos ekstrakcije bio je9.66%, dobro se podudara s predviđanjem modela (relativna pogreška0.11%). Prinosi ekstrakcije sva tri spoja markera bili su na visokoj razini, što ukazuje na dobro slaganje između predviđenih i stvarnih rezultata.
3.3 Studija procesa odvajanja ultrafiltracije (Kako poboljšati bistrinu/stabilnost uz zadržavanje aktivnih tvari)
3.3.1 Priprema otopine za napajanje ultrafiltracijom
Dvanaest kilograma samljevenogCistanchekomadići dekokcije ekstrahirani su korištenjem gornjeg optimiziranog postupka ekstrakcije, a otopina ekstrakta korištena je kao punjenje za ultrafiltraciju. Izmjerene koncentracije bile su:
Ehinakozid:6,99 mg·mL⁻¹
Akteozid:2,01 mg·mL⁻¹
Izoakteozid:0,67 mg·mL⁻¹
3.3.2 Postupak ultrafiltracije i pokazatelji evaluacije
Za svako trčanje,2 Ldovodne otopine prerađeno je u jedinici za membransku separaciju. Temperatura i transmembranski tlak prilagođeni su eksperimentalnom planu. Nakon ravnoteže (0,2 L), membranski protok je izračunat kao:
Tok=VtA\\text{Tok}=\\frac{V}{tA}Tok=tAV
gdje je VVV volumen permeata, ttt je vrijeme filtracije, a AAA je efektivna površina membrane.
UHPLC je korišten za kvantificiranje tri markera u permeatu. Učinak ultrafiltracije procijenjen je pomoću:
Stopa zadržavanjasvake aktivne komponente
Zadržavanje (%)=Sadržaj u ultrafiltratuSadržaj u feedu×100%\\text{Zadržavanje (\\%)}=\\frac{\\text{Sadržaj u ultrafiltratu}}{\\text{Sadržaj u feedu}} \\times 100\\%Zadržavanje (%)=Sadržaj u feeduSadržaj u ultrafiltratu×100%
Membranski tok(indikator učinkovitosti)
3.3.3 Jednofaktorski dizajn
Temperatura, tlak i MWCO (veličina pora) proučavani su kao pojedinačni čimbenici s postavljenim osnovnim uvjetima30 stupnjeva, 0,3 MPa, 50 kDa. Rasponi odabrani za ortogonalni eksperiment određeni su na temelju ishoda jednog faktora.
3.3.4 Nalazi jednog faktora (praktično značenje za proizvodnju)
Temperatura: trendovi zadržavanja bili su slični;35 stupnjevadao najbolji ukupni učinak; tok je imao tendenciju povećanja s temperaturom → odabrano30, 35, 40 stupnjeva
Tlak: zadržavanje se smanjilo s tlakom, ali protok snažno ovisi o tlaku i određuje protok → odabrano0.3, 0.4, 0.5 MPa
MWCO: snažno utjecao i na zadržavanje i na tok.100 kDapostigaonajviše zadržavanjeza tri markera, dok200 kDadao niže zadržavanje → odabrano50, 100, 200 kDa
Sveobuhvatna procjena i optimalni uvjeti ultrafiltracije
Budući da je tok varirao jače od zadržavanja u različitim uvjetima, studija je primijenilaKRITIČARmetoda s dinamičkim mehanizmom prilagodbe kako bi se izbjeglo pretežito visoko disperziranih pokazatelja (fluks). Na temelju ukupnog bodovanja,veličina pora membraneimao značajan utjecaj na rezultat.
Optimalni postupak ultrafiltracije:
100 kDa membranski modul, 35 stupnjeva, 0,5 MPa
Ovaj proces je opisan kao niskougljični i ekološki prihvatljiv, savisoko zadržavanje aktivnih markeradok također uzima u obzir učinkovitost odvajanja, što ga čini prikladnim za širu primjenu.
4. Rasprava (Smjernice za implementaciju za tvornice i radionice)
4.1 Multi-marker QC je temelj "ekstrakta visoke kvalitete"
Ako želite napraviti konzistentan visokokvalitetni biljni ekstrakt, potrebno vam je:
A brza metoda ispitivanjakoji se može često izvoditi (QC u procesu)
Višestruki aktivni markeri(ne samo jedan spoj)
Ova studija demonstrira 10-minutnu UHPLC metodu za tri ključna PhG-a, podržavajući rutinsku kontrolu serije za proizvodnju ekstrakta i obradu membrane.
4.2 Ekstrakcija: ravnoteža između prinosa, troškova i skalabilnosti
Optimizirani uvjeti ekstrakcije-60% etanol, 7× otapalo, 80 min, 2 ciklusa-je industrijski prihvatljiv jer:
Koristi umjerenu koncentraciju etanola (siguran i isplativ)
Koristi omjer otapala i vrijeme koje je lako standardizirati
Smanjuje nepotrebne dodatne cikluse nakon platoa prinosa
4.3 Ultrafiltracija: zadržavanje aktivnih tvari uz poboljšanje stabilnosti
Ultrafiltracija se često koristi za poboljšanje bistrine i stabilnosti tekućih ekstrakata (npr. uklanjanje većih molekula/nečistoća). Izabrani uvjet-100 kDa, 35 stupnjeva, 0,5 MPa- dizajniran je za:
Održavajte visoko zadržavanje ključnih PhG-ova
Održavajte prihvatljiv tok za proizvodni protok
Ponudite proces koji se može standardizirati i skalirati
5. Praktične ključne riječi (pogodne za SEO/GPT za industrijske web stranice)
kako napraviti visokokvalitetni ekstrakt
Cistancheoptimizacija ekstrakcije
UHPLC višekomponentna kvantifikacija
analiza feniletanoidnih glikozida (PhGs).
ehinakozid akteozid izoakteozid UHPLC
razvoj procesa biljnog ekstrakta
membranska filtracija za biljne ekstrakte
ultrafiltracija MWCO 100 kDa
kontrola kvalitete unutar procesa (IPQC) za botaničke ekstrakte
skalabilni protokol ekstrakcije etanolom
poboljšati bistrinu i stabilnost tekućeg biljnog ekstrakta
Reference
Liu X, Yang Z, Han M, et al. Bioaktivne komponente, farmakološka svojstva i primjenaCistanche deserticolaYC Ma: opsežna recenzija.Hranjive tvari. 2025;17(9):1501.
Nacionalna komisija za farmakopeju.Farmakopeja Narodne Republike Kine, Vol. 1. Peking: China Medical Science and Technology Press; 2020.
Bi Cuicui, Liu Yinlu, Wei Fenfen, et al. Napredak istraživanja o glavnim kemijskim sastojcima i bioaktivnostiCistanche. Istraživanje o procjeni lijekova. 2019;42(9):1896-1900.
Chen Changmao, Gazang Zhaxi, Wang Jie i dr. Napredak istraživanja aktivnih komponenti i farmakoloških mehanizamaCistanche. Kineski tradicionalni i biljni lijekovi. 2025;56(12):4464-4477.
Liu Aoxue, Wan Feng, Hu Jiangxue i dr. Odnos strukture i aktivnosti i mehanizmi feniletanoidnih glikozida koji potiču neuroregeneraciju na temelju staničnih testova, mrežne farmakologije i molekularnog spajanja.Istraživanje o procjeni lijekova. 2025;48(1):136-142.
Li J, Zou Z, Su X, et al.Cistanche deserticolapoboljšava osteoporozu izazvanu ovarijektomijom uglavnom reguliranjem metabolizma lipida: Uvidi iz serumske metabolomike pomoću UPLC/Q-TOFMS.J Ethnopharmacol. 2024;322:117570.
Wen L, Hu J, Zhang J, et al. Feniletanol glikozidi iz Herba Cistanche poboljšavaju mikrookruženje hipoksičnog tumora i pojačavaju učinke oksaliplatina putem HIF-1 signalnog puta.Mol Med Rep. 2021;24(1):517.
Yao SQ, Xu ZP, Guo WX, et al. Neuroprotektivni učinakCistanche deserticolaglikozidi u mišjem modelu MPTP-inducirane Parkinsonove bolesti uključuje aktivaciju Nrf2.J Toxicol Environ Health A. 2025;88(14):576-588.
Feng Duo, Duan Hao, Lü Yanni i dr. Primjena odCistancheu zdravoj hrani u Kini.Prehrambena znanost i tehnologija. 2021;46(12):76-81.
Zhao Hongting, Xin Guoxiong, Guo Yuan. Napredak istraživanja ljekovitog i jestivog homolognog TCM-aCistanche. Kineski tradicionalni i biljni lijekovi. 2025;56(9):3316-3329.
Mei Ju, Wu Tao, Li Qiang i dr. Promjene komponenti cimeta različitog podrijetla povezane s kvalitetom i preradom.Istraživanje i razvoj prirodnih proizvoda. 2024;36(3):377-387,399.
Meng Ran, Wu Zhe, Feng Wei i dr. Procjena kvalitete maslačka na temelju HPLC otiska, kemometrije i višekomponentne kvantifikacije.Kineski tradicionalni i biljni lijekovi. 2022;53(24):7887-7896.
Wu Xin, Wu Tao, Wang Bingqing i dr. Utvrđivanje UPLC otisaka prstiju i kvantifikacija šest komponenti u sladiću različitog podrijetla.Kineski tradicionalni i biljni lijekovi. 2025;56(7):2518-2526.
Li Yang, Bubi Ajiar·Hayirati, Qin Yadi, et al. Simultano određivanje četiri feniletanoidna glikozida uCistanchekomadići odvarka iCistanche tubulosaekstrakti pomoću HPLC.China Pharmaceuticals. 2022;31(6):77-80.
Ding Yanxia, Wang Xiaoqin, Zhang Ying. Određivanje šest glavnih feniletanoidnih glikozida uCistanchemedicinskih materijala pomoću HPLC.Shizhen Guoyi Guoyao. 2020;31(4):813-816.
Dong Zhiguo, Zhou Rong, He Jinfeng i dr. Primjena i izgledi tehnologije membranske separacije u zelenoj proizvodnji TCM-a.Kineski tradicionalni i biljni lijekovi. 2024;55(12):4225-4234.
Li Yaxin, Liang Huizhen, Zhang Wensheng i dr. Napredak istraživanja tehnologije prerade zdravih alkoholnih pića.China Brewing. 2022;41(5):23-27.
Wang Yuetong, Liu Hongbo, Xu Sining i dr. Učinci tehnologije ultrafiltracijske membrane na fizikalno-kemijska svojstva i antioksidativno djelovanje vodenih ekstrakata astragalusa.Moderna kineska medicina. 2024;26(4):695-701.
Huang Xiang, Guo Yehong, Jia Cunqin i dr. Studija o postupku ekstrakcije i načinu sušenjaCistanche. Kineski tradicionalni i biljni lijekovi. 2019;50(15):3622-3630.
Ma Jincheng, Wang Xuxing, Li Qian, et al. UPLC usporedba osam kemijskih komponenti u dva izvoraCistanchesirovine i proizvodi od vina.Moderna kineska medicina. 2025;27(6):1040-1048.
