Stereološka studija strukture bubrežne i nadbubrežne žlijezde crvenonoge jarebice (Alectoris Chukar)
May 04, 2023
Pozadina
Jarebica je glavna vrsta ptica koja u posljednje vrijeme dobiva sve veći značaj kao alternativni izvor hrane i divljač u lovnom turizmu. Ovdje smo željeli ispitati histološku strukturu i stereološka svojstva bubrežnih i nadbubrežnih žlijezda crvenonoge jarebice.
Materijali i metode
U istraživanju je korišteno sedam zdravih odraslih crvenonogih jarebica (Alectoris chukar) oba spola. Alectoris chukari perfundirani su intrakardijalnom metodom i držani su u 10 postotnom formaldehidu 72 sata radi optimalne fiksacije. Tkiva su ugrađena u parafin nakon rutinskih postupaka svjetlosnog mikroskopa. Zatim su uzeti rezovi debljine 5-µm, koji su obojeni hematoksilinom i eozinom, fotografirani i ispitani u svjetlosnom mikroskopu. Modificirani Cavalierijev princip korišten je za izračun volumena kao stereološka analiza. Ukupni omjeri volumena tkiva izračunati su uz pomoć točkaste mreže koju pruža paketni program Shtereom 1.5. Mann Whitney U test korišten je za usporedbu među grupama. Razina značajnosti postavljena je na 5 posto SPSS (ver: 13) statistički softver korišten je za sve statističke analize.
Rezultati
Utvrđeno je da histološka struktura bubrega nalikuje onima drugih vrsta ptica i sadrži glomerularnu strukturu miješanog tipa (sisavac, gmaz). Također je utvrđeno da histologija nadbubrežne žlijezde nije bila u obliku zasebnih slojeva, već sastavljena od skupina stanica s različitim svojstvima. Stereološka procjena volumena bubrega pokazala je statistički sličnu veličinu desnog i lijevog bubrega (p > {{0}},05). U procjeni volumena nadbubrežne žlijezde volumen desne i lijeve nadbubrežne žlijezde također je bio statistički sličan (p > 0,05).
Zaključci
Smatra se da će dobiveni podaci u ovoj studiji pridonijeti razumijevanju stereološke, morfološke i histološke strukture bubrega i nadbubrežne žlijezde crvenonoge jarebice (Alectoris chukar). (Folia Morphol 2021; 80: 1: 210–214)

Kliknite ovdje za preuzimanjedobrobiti Cistanche
Ključne riječi
nadbubrežne žlijezde; bubreg; jarebica; stereologija;učinci Cistanche.
Uvod
Jarebica je zajednički naziv za pripadnost vrstama Alectoris i Perdix iz obitelji Phasianidae [4]. Jarebica je glavna vrsta ptica koja u posljednje vrijeme dobiva sve veći značaj kao alternativni izvor hrane i divljač u lovnom turizmu.
Bubrezi su smješteni s obje strane abdominalne aorte i donje šuplje vene u dorzalnom dijelu trbušne šupljine, a nadbubrežne žlijezde na kranijalnom polu oba bubrega [16]. Bubrezi vrsta ptica imaju srednju strukturu između sisavaca i gmazova. Ove vrste ptica nemaju bubrežnu zdjelicu, mokraćni mjehur ili uretru [14]. Histološki, njihovi bubrezi imaju multilobulirani uzorak i izoliranu koru i medulu koji su odvojeni finim vezivnim tkivom. Imaju dvije vrste strukture nefrona. Prvi je označen kao sisavski ili medularni tip i sastoji se od bubrežnog korpuskuluma, proksimalnog zavojitog tubula, distalnog zavojitog tubula, sabirnog tubula te tankih i debelih segmenata Henleove petlje. Drugi tip je reptilski tip koji se naziva i kortikalni tip, koji ima manje bubrežno tjelešce, ali nema Henleovu petlju; osim toga, postoji kratki dio između proksimalnog zavojitog tubula i distalnog zavojitog tubula, koji se naziva intermedijarni tubul [13]. Nadbubrežne žlijezde su anatomske strukture koje igraju važnu ulogu u prilagođavanju svim vrstama stresa, a hormonima koje proizvode pridonose mnogim metaboličkim procesima. Kod vrsta ptica, oblik nadbubrežnih žlijezda vrlo je varijabilan, s mogućim varijacijama među vrstama, pa čak i među jedinkama. Eksperimentalno uklanjanje nadbubrežnih žlijezda dovodi do uginuća ptica [16]. U pregledu literature pokazalo se da postoje anatomske studije crvenonoge jarebice, ali ne i specifično strukture njezinih bubrega i nadbubrežnih žlijezda. Cilj je bio provesti detaljnu histološku i stereološku studiju bubrežnih i nadbubrežnih žlijezdanih struktura crvenonoge jarebice.

Cistanche suplementi
Materijali i metode
U istraživanju je korišteno sedam zdravih odraslih crvenonogih jarebica (Alectoris chukar) oba spola. Životinje su dobivene iz Centra za zaštitu divljih životinja Sveučilišta Van Yuzuncu Yil. Odobrilo ga je lokalno etičko povjerenstvo Sveučilišta Van Yuzuncu Yil (27/06/2019/06) i u skladu je s procedurama studije. Jarebice su anestezirane s 10 mg/kg Xylazine HCL (Rompun 2 posto, 50 mL, Bayer) i s 40 mg/kg im Ketamin HCL (Ketalar 50 mg/mL, 10 mL bočica, Pfizer). Životinje su perfundirane intrakardijalnom metodom, a secirana tkiva su držana u 10 postotnom formaldehidu 72 sata za optimalnu fiksaciju [18]. Tkiva su ugrađena u parafin nakon završetka rutinskih postupaka histološke svjetlosne mikroskopije. Zatim su dobiveni rezovi debljine 5- µm. Prvi dio je nasumično odabran, a zatim je snimljen 40. dio. Sekcije su obojene hematoksilinom i eozinom, fotografirane i pregledane u svjetlosnom mikroskopu.
Stereološka analiza
Stereologija, nasumično i sustavno uzorkovanje koristi se za dobivanje nepristranih i kvantitativnih informacija. Od stereoloških analiza, za izračun volumena korišten je modificirani Cavalierijev princip. Zatim su izračunati ukupni omjeri volumena tkiva pomoću mreže s točkama dobivene paketnim programom Shtereom 1.5 (slika 1). Izračun volumena proveden je pomoću sljedeće formule: V(obj)=t × a/p × ∑P. V(obj) je volumen objektiva, t je debljina presjeka, a/p predstavlja površinu svake točke na mreži za brojanje točaka, a Sp je ukupan broj točaka koje pogađaju bubrežna i nadbubrežna područja [9, 10] . Koeficijent pogreške (CE) i koeficijent varijacije (CV) korišteni su za određivanje optimalne veličine uzorka u svakoj skupini u standardnom stereološkom pristupu [8]. Vrijednosti CE i CV u našem istraživanju bile su prema literaturnim podacima.

Statistička analiza
Deskriptivna statistika uključivala je medijan, srednju vrijednost, standardnu devijaciju, minimum i maksimum. Međuskupinske razlike analizirane su Mann-Whitney U testom. Razina značajnosti postavljena je na 5 posto. Sve statističke analize provedene su pomoću SPSS (ver.13) statističkog programskog paketa.
Rezultati

Stereološka analiza pokazala je da su lijevi i desni bubreg slične veličine. Stereološki izračun volumena pokazao je volumen desnog bubrega od 2,28 mm3 i volumen lijevog bubrega od 3.02 mm3. Usporedba oba bubrežna volumena otkrila je malu, ali statistički neznačajnu razliku između oba bubrega (p > 0,05) (Tablica 1). Mikroskopski pregled histoloških presjeka pokazao je da je bubreg sastavljen od režnjića, od kojih je svaki sastavljen od kortikalnog i medularnog dijela i inkapsuliran vezivnim tkivom koje sadrži krvne žile. Struktura bubrega bila je sastavljena od 60 posto korteksa i 40 posto medule na desnoj strani i 80 posto korteksa i 20 posto medule na lijevom bubregu. Nefroni su imali strukturu dva tipa nefrona gmazova i nefrona sisavaca (slika 2). Broj reptilskih nefrona bio je veći od nefrona sisavaca. Dvije vrste nefrona također su imale različite distribucije tako da su bile brojnije u korteksu, ali su postojale samo cjevovodne strukture u meduli. Nefroni sisavskog tipa bili su smješteni u dubokom korteksu, blizu medularnog konusa, dok su gmazovski nefroni bili smješteni u perifernim i srednjim dijelovima korteksa, poredani u obliku potkove oko središnje vene (slika 3).

Ispitivanje strukture nadbubrežne žlijezde pokazalo je da lijeva i desna nadbubrežna žlijezda imaju neke razlike u obliku, ali ne iu veličini, a stereološka procjena volumena otkrila je da je volumen obje nadbubrežne žlijezde {{0}},02 mm3 (p > 0,05) (Tablica 1). Opći histološki pregled pokazao je da nadbubrežna žlijezda nema tri različita različita sloja, već samo staničnu diferencijaciju (tamnu, svijetlu; ima različite nuklearne strukture); žlijezde su bile obavijene kapsulom vezivnog tkiva koja sadrži krvne žile koja ih odvaja od bubrega. Nadbubrežna žlijezda imala je odvojenu vaskularnu opskrbu (slika 4).

Rasprava
Pokazalo se da je struktura bubrega crvenonoge jarebice bila slična onoj kod drugih vrsta ptica u ovom istraživanju. Crvenonoga jarebica imala je dva bubrega inkapsulirana vezivnim tkivom s ovojnicama krvnih žila i sastavljena od više režnjeva koji sadrže kortikalni i medularni dio. Stereološka procjena volumena pokazala je da su veličine desnog i lijevog bubrega statistički slične. Prethodne studije o veličini desnog i lijevog bubrega ptičjih vrsta otkrile su različite rezultate. Jedna je studija izvijestila da nema razlike između veličine desnog i lijevog bubrega [6], dok je druga studija izvijestila o razlici između veličine lijevog i desnog bubrega [17]. Slično tome, studije koje su procjenjivale kortikalne i medularne volumene vrsta ptica dale su različite rezultate. Studija je objavila da se 90 posto ukupnog volumena ptičjih bubrega sastoji od kore i 2 posto od medule [3]; drugi je izvijestio o odgovarajućim brojkama od 77 posto odnosno 10 posto [19]. Utvrđeno je da je kortikalni omjer bio sličan podacima iz literature, ali je medularni omjer bio nešto viši u ovoj studiji. Casotti i Braun [5] su izvijestili da bubrežni volumen varira ovisno o životnom okruženju vrste ptica. Literaturni podaci pokazuju da se oblik, veličina i struktura bubrega kod ptica mijenjaju ovisno o prehrani, filogeniji i čimbenicima okoliša [17]. Sve su životinje bile u istom području i klimatskim uvjetima (maksimalna temperatura 30–33 stupnja). Osnovnu strukturu bubrega čine nefroni. Ptičji bubreg razlikuje se od bubrega sisavaca jer se sastoji od dvije vrste nefrona koji nalikuju nefronima sisavaca i gmazova [2, 12]. Slično tome, u našem su istraživanju uočene dvije vrste nefrona. Prethodne studije pokazale su da su brojniji nefroni gmazova smješteni na periferiji lobula, malog bubrežnog tjelešca i bez Henleove petlje. Zabilježeno je da su nefroni sisavaca veći i da imaju složenije bubrežno tjelešce te da su smješteni duboko u korteksu u susjedstvu medule; osim toga, sadrže Henleovu petlju i manje ih je [1]. Ovdje je prikazan sličan broj i raspodjela nefrona. Nefroni su odgovorni za filtraciju, reapsorpciju i sekreciju, čime se stvara urin. Ptičji nefroni sastoje se od glomerula, proksimalnog tubula, distalnog tubula i sabirnih kanalića [14]. Ova je studija također pokazala slične rezultate.
Ova studija je pokazala da su nadbubrežne žlijezde smještene na kranijalnom polu bubrega i medijalno od njih, kako Nickel et al. [15] su prijavili. Utvrđeno je da histologija nadbubrežne žlijezde nije bila u obliku zasebnih slojeva, već sastavljena od skupina stanica s različitim svojstvima (tamne ili svijetle boje i različite strukture jezgre). Također se pokazalo da desna i lijeva nadbubrežna žlijezda imaju različite oblike, a postoje i interindividualne razlike. Nadbubrežna žlijezda je vezivnotkivnom ovojnicom odvojena od bubrežnog tkiva i imala je odvojenu vaskularnu opskrbu. Rezultati ove studije su jednaki prethodnim studijama o vrstama ptica [16]. Među studijama o veličini nadbubrežne žlijezde, Humayun i sur. [11] te Wells i Wight [20] izvijestili su da je lijeva nadbubrežna žlijezda bila veća od desne kod pilića oba spola, dok su Ozudogru i sur. [16] kao i Elbajory [7] izvijestili su da je desna nadbubrežna žlijezda bila veća od lijeve. Težina, duljina, širina i debljina nadbubrežnih žlijezda variraju ovisno o nekoliko čimbenika, kao što su vrsta, pasmina, dob, zdravstveni status i okoliš [11]. U ovoj studiji otkriveno je da ne postoji razlika između stereološki izračunatih volumena između desne i lijeve nadbubrežne žlijezde.

Cistanche pilule
Zaključci
Smatra se da će dobiveni podaci u ovoj studiji pridonijeti razumijevanju stereološke, morfološke i histološke strukture bubrega i nadbubrežne žlijezde crvenonoge jarebice (Alectoris chukar). Mislimo da će to biti vodič za proučavanje crvenonoge jarebice (Alectoris chukar).
Kako ekstrakt Cistanche može pomoći u poboljšanju bolesti bubrega?
Ekstrakt cistanče popularan je biljni dodatak koji se stoljećima tradicionalno koristi u kineskoj medicini za poboljšanje cjelokupnog zdravlja i dobrobiti. Nedavno su znanstvene studije pokazale da ekstrakt Cistanche također može pomoći u poboljšanju bolesti bubrega.
Bolest bubrega ozbiljno je zdravstveno stanje koje pogađa otprilike 10 posto svjetske populacije. Bubrezi su vitalni organi odgovorni za filtriranje otpadnih tvari iz krvi i regulaciju ravnoteže tekućine, elektrolita i acidobazne ravnoteže. Kada su bubrezi oštećeni ili rade loše, to može dovesti do niza komplikacija uključujući visoki krvni tlak, anemiju, bolesti kostiju, pa čak i kardiovaskularne bolesti.
Istraživanja sugeriraju da ekstrakt Cistanche može ponuditi nekoliko potencijalnih prednosti za osobe s bolestima bubrega. Jedan od glavnih načina na koji ekstrakt Cistanche može pomoći u poboljšanju bolesti bubrega je smanjenje upale. Kroničnu bubrežnu bolest (CKD) često karakterizira dugotrajna upala unutar bubrega, koja s vremenom može prouzročiti daljnja oštećenja. Dokazano je da ekstrakt cistanke sadrži protuupalne spojeve koji mogu pomoći u smanjenju upale u bubrezima i poboljšati njihovu cjelokupnu funkciju.
Još jedan način na koji ekstrakt Cistanche može pomoći u poboljšanju bolesti bubrega je smanjenje oksidativnog stresa. Oksidativni stres nastaje kada postoji višak reaktivnih kisikovih vrsta (ROS) u tijelu, što dovodi do staničnih oštećenja i disfunkcije. Istraživanja sugeriraju da ekstrakt Cistanche može smanjiti oksidativni stres u bubrezima povećanjem antioksidativne aktivnosti, pomažući u sprječavanju daljnjih oštećenja i potičući zacjeljivanje.
Ekstrakt cistanke također može pomoći u poboljšanju bolesti bubrega promicanjem regeneracije bubrežnih stanica. Stanice bubrega odgovorne su za održavanje zdrave funkcije bubrega i popravak svih nastalih oštećenja. Dokazano je da ekstrakt cistanke sadrži bioaktivne tvari koje mogu povećati proliferaciju bubrežnih stanica, potičući samoizlječenje i obnavljajući cjelokupnu funkciju bubrega.

Cistanche prah
Konačno, ekstrakt Cistanche također može biti učinkovit u sprječavanju ili smanjenju progresije kronične bubrežne bolesti promicanjem vazodilatacije i poboljšavanjem protoka krvi u bubrege. Ovaj povećani protok krvi može opskrbiti bubrege kisikom i hranjivim tvarima koje su im potrebne za pravilno funkcioniranje i popravak oštećenja.
Sveukupno, ekstrakt Cistanche je obećavajući prirodni lijek za pojedince koji žele poboljšati zdravlje svojih bubrega. Njegova sposobnost smanjenja upale, poboljšanja antioksidativne aktivnosti, promicanja samoizlječenja i povećanja protoka krvi može pomoći spriječiti ili usporiti napredovanje kronične bubrežne bolesti i poboljšati cjelokupnu funkciju bubrega. Međutim, kao i kod svih biljnih dodataka prehrani, važno je posavjetovati se s liječnikom prije nego što uključite ekstrakt Cistanche u svoju rutinu kako biste osigurali njegovu sigurnost i prikladnost za vaše individualne potrebe.
Reference
1. Akaydın Y, Ozcan Z. Hindi (Meleagris gallopavo) böbreğinin yapısı üzerinde ışık ve elektron mikroskobik çalışmalar. Ankara Üniv Vet Fak Derg. 2005; 52 (1): 149–155.
2. Aslan S. Üriner sistem. U, Aslan S (ur.): Kanatlı Histolojisi. Dora Basım Yayın Dağıtım, Bursa, Turska. 2018: 85–98.
3. Batah AL. Morfološka i histološka studija bubrega liske (Fulica atra). Bas J Vet Res. 2012.; 11 (1): 128–136.
4. Can M, Ozdemir D. Kaya kekliği (Alectoris graeca) plexus sacralis'i üzerinde makro-anatomski araştırmalar. Kafkas Univ Vet Fak Derg. 2012.; 18(1): 141–146.
5. Casotti G, Braun E. Anatomija bubrega u vrabaca iz različitih okoliša. J Morphol. 2000; 243(3): 283–291.
6. Dhyaa AA, Ali FR, Azhar SK, et al. Usporedna anatomska i histološka obilježja bubrega eje (Circus aeruginous), kokoši (Gallus domesticus) i patke patke (Anas platyrhynchos). Irački J Vet Sci. 2014.; 38 (1): 107–113.
7. Elbajory SIA. Morfometrijska studija nadbubrežne žlijezde odrasle sudanske kokoši (Gallus domesticus) i patke (Anas platyrhynchos). Curr Res J Biol Sci. 2012.; 4: 239–241.
8. Gundersen HJ, Jensen EB. Učinkovitost sustavnog uzorkovanja u stereologiji i njegovo predviđanje. J Microsc. 1987; 147 (Pt 3): 229–263.
9. Gundersen HJ, Bendtsen TF, Korbo L, et al. Neke nove, jednostavne i učinkovite stereološke metode i njihova primjena u patološkim istraživanjima i dijagnostici. APMIS. 1988; 96 (5): 379–394.
10. Howard CV, Reed MG. Nepristrana stereologija, trodimenzionalna mjerenja u mikroskopiji. BIOS Scientific Publishers, Oxford, UK 1998: 39–68.
11. Humayun K, Aoyama M, Sugita S. Morfološka i histološka istraživanja nadbubrežne žlijezde kokoši (Gallus domesticus). J Poult Sci. 2012.; 49(1): 39–45.
12. Kocamıs H, Aslan S, Deprem T. Kazların böbrek yapısı üzerine histolojik i histometrik inceleme. Kafkas Univ Vet Fak Derg. 2003.; 9(2): 157–160.
13. Koral Tasci S, Gulmez N, Aslan S, et al. Imunohistokemijska lokalizacija katalaze u bubregu guske (Anser anser). Kafkas Univ Vet Fak Derg. 2020.; 26(1): 41–46.
14. Mutus R. Tavuk ve bıldırcında böbrek arterleri. İstanbul Üniv Vet Fak Derg. 1995; 21 (1): 59–67.
15. Nickel R, Schummer A, Seiferle E. Anatomija domaćih ptica. 1. izd. Verlag Paul Parley, Berlin, Njemačka 1977: 40–61.
16. Ozudogru Z, Özdemir D, Balkaya H, et al. Civcivlerde Adrenal Bezin Gelişimi Üzerine Farklı Fotoperiyotların Etkisi. Ataturk Univ Vet Bil Derg. 2017.; 12 (3): 250–258.
17. Richardson KC, Wooller RD, Casotti G. Relativne veličine i asimetrija bubrega u ptica vrapčica iz Australije i Sjeverne Amerike. J Anat. 1991.; 175: 181–185, indeksirano u Pubmedu: 2050563.
18. Romeis B. Mikroskopska tehnika. R.Oldenburg, München, Njemačka 1948: 51–52.
19. Warui CN. Svjetlosna mikroskopska morfometrija bubrega četrnaest vrsta ptica. J Anat. 1989; 162: 19–31, indeksirano u Pubmedu: 2808116.
20. Wells JW, Wight PAL. Nadbubrežne žlijezde, U Fiziologija i biokemija domaće peradi. Ur. Bell DJ i Freeman GM. Academic Press, London 1971: 489–520.
N. Colcimen 1, G. Čakmak 2
1. Zavod za histologiju i embriologiju, Medicinski fakultet, Sveučilište Van Yuzuncu Yil, Van, Turska.
2. Zavod za anatomiju, Fakultet veterinarske medicine, Sveučilište Van Yuzuncu Yil, Van, Turska.






