Lanostan triterpenoidi u Poria Cocos imaju korisnu ulogu u imunoregulacijskoj aktivnosti

Molimo kontaktirajteoscar.xiao@wecistanche.comza više informacija

Sažetak:Poria cocos (Schwein) FA Wolf (sin. Wolfiporia cocos) osušeni sklerocij, koji se naziva folding, je jestiva, saprofitna gljiva koja se obično koristi kao tonik i tradicionalna kineska medicina protiv starenja. Tradicionalno se koristi u kombinaciji s drugim tradicionalnim kineskim lijekovima za jačanje imuniteta. Ovo je istraživanje pokazalo da ekstrakt P. cocos (Lipucan⑨) koji sadrži triterpenoide lanostana nema imunotoksičnost i pojačava nespecifični (urođeni) imunitet aktiviranjem prirodnih stanica ubojica i poticanjem lučenja interferona (IFN-y) stanicama tipa 1 T-pomagačima (Th1) imunološki odgovor. Osim toga, ekstrakt P. cocos značajno je smanjio lučenje interleukina (IL-4 i IL-5) putem imunološkog odgovora T-pomagačkih stanica tipa 2 (Th2), što je povezano s alergijskim odgovorom. Pročišćeni lanostan triterpenoidi prvi su put identificirani kao aktivni sastojci P. cocos s pojačanim nespecifičnim imunitetom promicanjem lučenja interferona （IFN-） u preliminarnoj studiji. Naša otkrića potvrđuju da ekstrakt P. cocos ima korisnu ulogu u imunoregulacijskoj aktivnosti.

Ključne riječi:Poria cocos; lanostan triterpenoidi; imunotoksičnost; Th1/Th2: imunoregulacija

1. Uvod

Virusne infekcije kao što su respiratorni virusi (uključujući virus gripe, rinovirus, adenovirus i koronavirus), herpes i virus humane imunodeficijencije (HIV) ozbiljno ugrožavaju ljudsko zdravlje. Ovi visoko zarazni respiratorni virusi zaraze svjetsku populaciju, postanu pandemija i uzrokuju mnogo smrti. Ova je prijetnja evoluirala u problem osobnog zdravlja, ali i u međunarodna ekonomska, sigurnosna i socijalna pitanja [1]. Cijepljenje je trenutno primarni način kontrole širenja infekcija virusom influence. Međutim, zbog zloglasne sposobnosti virusa da mutira, svake godine moraju se razvijati nova cjepiva. Postoji hitna potreba za razvojem učinkovitih antivirusnih lijekova ili terapijskih pristupa. Nažalost, mnoge godine i stotine milijuna dolara potrebne su za razvoj novih lijekova, često prekasno za borbu protiv iznenadne epidemije virusa. Nedavna izvješća pokazuju da su osobe starije od 50 godina uglavnom zaražene respiratornim virusima [2,3]. Starenje je jedan od razloga koji je usko povezan s nedostacima u imunološkom sustavu, uključujući funkciju i broj stanica [4-6]. Briga o sebi važan je pristup koji se koristi u većini zemalja za smanjenje osobnih medicinskih troškova i društvenog tereta zdravstvene skrbi |7,8]. Razvoj pojačivača imuniteta kako bi se povećala otpornost domaćina na virusnu infekciju i poboljšala njegova prilagodljivost važan je pristup koji je nedavno dobio mnogo pozornosti [9,10].

Prva linija obrane ljudskog tijela od patogena uključuje fiziološke barijere kao što su koža, potkožno tkivo i sluznica. Druga linija obrane je imunološki sustav, sastavljen od imunoloških organa, imunoloških stanica i imunoloških molekula. Imunološki sustav se dijeli na urođeni imunitet i adaptivni imunitet [11]. Urođeni imunološki sustav je nespecifični imunološki sustav. Može razlikovati sebe od sebe bez ponovnog izlaganja patogenima kao što su bakterije i virusi. Zbog svojih nespecifičnih svojstava ima široku sposobnost borbe protiv višestrukih infekcija [12]. Stanice prirodne ubojice (NK) i interferon (IFN ključne su antivirusne komponente urođenog imunološkog sustava u obrani domaćina od respiratorne virusne infekcije [13]. NK stanice imaju sposobnost brzog ubijanja stanica zaraženih virusima. Štoviše, NK stanice također pokreću druge imunološke stanice, stanice tipa 1 T-helper （Th1）, otpuštanjem IFN- 【14,15】. Interferoni imaju sposobnost ometati replikaciju virusa i mogu se podijeliti u tri tipa uključujući interferone I （IFN- , IFN- ） , II （IFN-y） i ⅢI （IFN-λ）【16,17】. Replikacija virusa važna je osnovna faza života virusa. Stanice igraju ključnu ulogu u obrani od virusne infekcije [18]. S druge strane sa strane, stanice tipa 2 T-helper (Th2) uglavnom izlučuju interleukine (IL), uključujući IL-4 i IL-5, i potiču B stanice na izlučivanje imunoglobulinskih E(IgE)antitijela za promicanje humoralne imunosti i izazvati alergijski odgovor [19].

Kliknite ovdje da saznate više

Filing (osušeni sklerocij Poria cocos(Schwein.)FAWolf(syn. Wolfiporia cocos)), dobro poznati tonik i tradicionalna kineska medicina protiv starenja, naširoko se koristi kao sedativ i diuretik više od dvije tisuće godina [ 20]. Dokazano je da P. cocos ima protuupalno, antitumorsko, antihiperglikemijsko, sedativno djelovanje i djelovanje protiv starenja s lanostan triterpenoidima koji su identificirani kao aktivne komponente [21-30]. Osim toga, pokazalo se da frakcija etil acetata i frakcija sirovog polisaharida P. cocos poboljšavaju imunitet u životinjskim modelima na temelju testa sadržaja hemolize u serumu, fagocitnog učinka mononuklearnih makrofaga i razine transformacije limfocita. Lanostan triterpenoidi smatraju se glavnim komponentama u frakciji etil acetata prema HPLC analizi [31]. Međutim, još uvijek je nejasno imaju li urođena i adaptivna imunost učinke na aktivnost NK stanica, IFN, imunološke stanice ili citokine P.cocos i pojašnjenje aktivnih spojeva. Ovo je istraživanje istraživalo učinak ekstrakata P. cocosa na imunološki sustav, patentiranog proizvoda konzistencije koji sadrži lanostan triterpenoide, koristeći životinjske modele. Najprije su identificirane aktivne komponente.

Cistanche može spriječiti starenje

2. Materijali i metode

2.1. Biljni materijali

Osušeni selerotij P. cocos(Schwein.)FAWolf ekstrahiran je pomoću 75 postotnog etanola da se dobije ekstrakt P. cocos (Lipucan). Ovaj ekstrakt proizvodi Sinphar Tian-Li Pharmaceutical Co., Ltd., Hangzhou Sinphar Group, Kina, a razvio ga je Sinphar R&D Center, Tajvan. Ekstrakt sadrži četiri glavna triterpenoida lanostana (Slika 1, spojevi 1-4) analizirana tekućinskom kromatografijom ultraučinkovitosti (UPLC) [32]. Sadržaj četiri glavna triterpenoida lanostana bio je 6,2 posto. Komercijalna kapsula (FL) koja sadrži 27.0 mg ekstrakta P. cocos korištena je za istraživanje učinka na imunoregulacijsku aktivnost.

2.2. Izolacija i pročišćavanje lanostan triterpenoida iz P. cocos

Osušeni P.cocos(10 kg) ekstrahiran je tri puta refluksiranjem sa 75 postotnim etanolom tijekom 3 sata [24]. Koncentrirani ekstrakt je kromatografiran na silika gelu (70-230 mesh) koristeći sve polarnije smjese CH2Cl i MeOH (CH2Cl:MeOH, 97:3; CH2Cl2:MeOH, 96:4; CH2Cl:MeOH, 90:10, i 100 posto MeOH). Prema tankoslojnoj kromatografiji (TLC), četiri frakcije (Fr.1-Fr.4) su sakupljene za daljnje odvajanje. Fr.1-Fr.3 podvrgnuti su preparativnoj tekućinskoj kromatografiji visoke učinkovitosti (HPLC) (Waters Prep 150 LCsystem, Milford, MA, SAD) na Waters XBridge RP-18koloni (250 mm× 19 mm, 5 um, Milford, MA, SAD) korištenjem 80 posto metanola kao sustava mobilne faze. Brzina protoka bila je 18 mL/min. Selektivno su prikupljena četiri glavna vrha interesa. Frakcije koje sadrže ciljane spojeve dalje su kondenzirane do suhog i proizvode tumuloznu kiselinu (1) (120,1 mg), polifonsku kiselinu C(2) (16,0 mg), 3-epi-dehidrotumuloznu kiselinu (3) (12,1 mg) , odnosno dehidrotumulozna kiselina (4) (6,8 mg). Njihove su strukture razjašnjene NMR (nuklearnom magnetskom rezonancijom) spektroskopskom analizom i elektrosprej ionizacijskim masenim spektrometrom (ESI-MS) te usporedbom s literaturnim podacima [32].

2.3. Preliminarna studija na životinjama s lanostan triterpenoidnim spojevima (1-3) za studiju analize IFN-r

Za ovu studiju, pročišćeni lanostan triterpenoidni spojevi, uključujući tumuloznu kiselinu (1), polifonsku kiselinu C(2) i 3-epidehidrotumuloznu kiselinu (3), pripremljeni su za preliminarnu studiju pomoću BALB/c (soj miševa od albino miševa) muški miševi. Nakon 4 dana oralne primjene spojeva 1-3 i sterilne destilirane vode (kontrolna skupina) (1 mL/miševima), miševi su žrtvovani petog dana i sakupljene su stanice slezene. Svježa slezena je prebačena na ploču kulture koja je sadržavala 10 mL medija kulture Roswell Park Memorial Institute (RPMI)-1640. Slezena je zatim samljevena preko fine mrežice kako bi se oslobodile stanice slezene. Stanice slezene suspendirane u mediju su zatim prebačene u konusnu epruvetu za centrifugiranje od 50 ml i centrifugirane na 1300 okretaja u minuti 10 minuta. Supernatant je odbačen i talog je resuspendiran u 1 ml hladnog pufera za lizu crvenih krvnih stanica (RBC) koji sadrži EDTA-NH4Cl. Stanice su inkubirane na sobnoj temperaturi 10 minuta, a zatim su isprane tri puta s medijem kulture centrifugiranjem. Suspenzija stanica slezene je zatim uzgajana u 24-ploči s jažicama pri gustoći od 1 × 10 stupnjeva stanica/mL u mediju koji je sadržavao RPMl 1640 s dodatkom 10 posto fetalnog goveđeg seruma (FBS), 2 mM L-glutamina, antibiotici i 1 ug/mL konkanavalina A（ConA） na 37 stupnjeva tijekom 3 dana. Sakupljeni su supernatanti kulture stanica slezene. Koncentracije IFN-a mjerene su korištenjem kita za imunoenzimski test (ELISA) (R&D Systems, Minneapolis, MN, SAD).

2.4. Životinjski model i raspored pokusa

Ženke BALB/c miševa kupljene su od National Taiwan University Animal Center. Životinje su smještene u pojedinačno ventiliranim kavezima bez specifičnih patogena na 22±2 stupnja, s temperaturom i vlagom od 40-60 posto s ciklusom 12 h/12 ​​h na svjetlo/tama i slobodnim pristupom hrani i vodi. Nakon tjedan dana aklimatizacije, miševi su nasumično grupirani prema tjelesnoj težini i korišteni za pokuse. Četiri različite doze, 26 mg/kg (FL200), 52 mg/kg (FL400), 104 mg/kg (FL800), 156 mg/kg (FL1200), redom su otopljene u sterilnoj destiliranoj vode (0,4 mL) i oralno primijenjen pet uzastopnih dana u tjednu tijekom 9 tjedana. Kontrolna skupina hranjena je sterilnom destiliranom vodom (0,4 mL). Miševima je intraperitonealno ubrizgan ovalbumin(OVA)-specifični antigen trećeg, petog i sedmog tjedna. OVA je alergen kokošjih bjelanjaka koji se uglavnom nalazi u bjelanjcima. Obično se koristi za izazivanje alergija u pokusnim životinjskim modelima. Stanice slezene su prikupljene za daljnje istraživanje. Miševi su žrtvovani eutanazijom ugljičnim dioksidom nakon 9 tjedana pokusa. Broj odobrenja za ovu studiju od strane institucionalnog odbora za skrb i korištenje životinja (IACUC) je A9647.

2.5. Prikupljanje uzoraka slezene

Sakupljena je slezena, tamnocrveni izduženi organ u gornjoj lijevoj strani abdomena miševa. Nakon što je vezivno tkivo pažljivo uklonjeno malim škarama i pincetom, slezene su stavljene u medij stanične kulture (RPMI 1640 medij s 10 posto fetalnog goveđeg seruma (HyClone)). Nakon vaganja, uzorci slezene su samljeveni pomoću čistog i sterilnog potiskivača štrcaljke od 5 mL. Suspenzija stanica slezene je aspirirana u novu epruvetu za centrifugiranje od 15 mL sa sterilnom plastičnom kapaljkom od 3 mL za jedno pakiranje. Suspendirane stanice su sakupljene nakon 5 minuta taloženja. Suspendirane stanice su centrifugirane na 1500 okretaja u minuti tijekom 7 minuta, a supernatant je odbačen da se dobiju stanične palete. Zatim je dodan 1 mL pufera za lizu eritrocita da se uklone crvene krvne stanice tijekom 1 minute. Devet mL 10-postotnog fetalnog goveđeg seruma brzo je dodano u medij kulture, ponovljen je korak centrifugiranja, a supernatant je odbačen. Kako bi se izbjeglo oštećenje integriteta stanica slezene zbog RBClysis pufera, uzorak je ispran tri puta s Hankovom uravnoteženom otopinom soli (HBSS) puferskom otopinom. Stanice slezene zatim su suspendirane s 10 postotnim medijem kulture fetalnog goveđeg seruma za analizu i pokuse.

2.6. Nespecifični imunološki odgovor

2.6.1. Analiza markera na površini stanica slezene

Analiza imunoloških stanica provedena je pomoću fluorescentnih monoklonskih protutijela koja se specifično vežu na različite vrste imunoloških stanica pomoću fluorescentnog protočnog citometra. Protočna citometrija (Epics XL-MCL Beckman Coulter, Brea, CA, SAD) koristi se za izračunavanje udjela specifične imunološke stanice kao što su glavni kompleksi histokompatibilnosti tipa I (MHC I), CD4 plus T stanica, CD8 plus T stanica, NK stanice i makrofagi.

2.6.2. Analiza aktivnosti prirodnih stanica ubojica

YAC-1 (stanična linija osjetljiva na aktivnost NK stanica) stanična linija mišjeg limfoma (ATCC) korištena je kao meta NK stanica u ovom eksperimentu. Kada su stanice slezene BALB/c ženki miševa bile uzgojene zajedno sa YAC-1 stanicama u istoj posudi, prirodne stanice ubojice će ubiti YAC-1 stanice. Nakon 3 sata reakcije citotoksičnosti, ubijene YAC-1 stanice obojene su bojom (LIVE/DEAD Cell-Mediated Cytotoxicity Kit, Molecular Probes, L-7010). Stoga je protočna citometrija korištena za otkrivanje i analizu intenziteta fluorescencije pomoću softvera WinMDI 2.8 (Cytometry Laboratories Sveučilišta Purdue, West Lafayette, IN, SAD). Omjer efektorske stanice (E) i ciljne stanice (T) je 100:1 i 200:1 (efektorska stanica su stanice slezene, a ciljna stanica su YAC-1 stanice).

2.6.3. Izlučivanje citokina pomoću analize stanica slezene

Nakon stimulacije stanica slezene s ConA（koncentracija 2,5 ug/mL） tijekom 48 h, supernatant stanične kulture je sakupljen i pohranjen na -20 stupnjeva za analizu citokina korištenjem OptEIA mišjeg IL-5 ELISA kita ( Pharmigen, 555236, Franklin Lake, NJ, SAD) i DouSet komplet miša IFN-ELISA （R&D Systems, DY485, Minneapolis, MN, SAD）. Pufer za oblaganje (pH:9,6) pripremljen je tako da sadrži odgovarajuću količinu anti-mišjih citokinskih protutijela (L-5 i IFN-y) na 96-ploči s jažicama (Nunc-Immuno ploča, MaxiSorp, Thermo Scientific, Roskilde, Danska). Nakon stajanja na 4°C preko noći, nevezana antitijela su isprana fosfatnom puferiranom fiziološkom otopinom s puferom Tween20（PBST）, a zatim je dodano 200 μL/jažici pufera za blokiranje (1 posto BSA u PBS). Nakon 2 sata na sobnoj temperaturi, uzorak je ispran s PBST puferom i uzorku je dodano 100 μL/jažici supernatanta stanične kulture ili standarda rekombinantnog citokina. Nakon 4 stupnja preko noći, uzorak je ispran s PBST puferom. Zatim je dodana odgovarajuća koncentracija vezanog biotina (biotin) anti-citokinskog sekundarnog protutijela (100 uL/jažici). Nakon 2 sata na sobnoj temperaturi, uzorak je ispran s PBST puferom. Zatim je dodana avidin-peroksidaza （100 μL/jažici） (Sigma, St. Louis, MO, SAD). Nakon 1 sata na sobnoj temperaturi, dodan je supstrat tetrametilbenzidina (TMB) (R&D Systems, Minneapolis, MN, SAD) za 5 minuta reakcije boje, a zatim je dodano 50 μL 2,5 posto H2SO4 da se zaustavi reakcija boje. Apsorbancija je mjerena na 450 nm.

2.7. Specifični imunološki odgovor kod miševa izazvanih ovalbuminom (OVA).

BALB/c ženkama miševa intraperitonealno je ubrizgan OVA kao antigen i CFA (potpuni Freundov adjuvant) kao adjuvans. Uvjeti kulture stanica slezene bili su isti kao gore. Citokini (L-4) su analizirani ELISA testom.

2.8. Statističke analize

Podaci su prijavljeni kao srednja vrijednost (SD) i analizirani korištenjem jednosmjerne ANOVA. Vrijednosti su smatrane statistički značajnim na str<0.05. dunnett's="" test="" was="" used="" to="" identify="" the="" differences="" between="">

3. Rezultati

3.1. Izolacija i identifikacija četiri lanostan triterpenoidna spoja 1-4 P.cocos

Osušeni P.Cistanche protiv starenjakokos (10 kg) je ekstrahiran tri puta refluksiranjem sa 75 postotnim etanolom tijekom 3 sata. Koncentrirani ekstrakt je kromatografiran na silika gelu i C18 koloni da bi se dobila četiri glavna lanostan triterpenoidna spoja: tumulozna kiselina (1), polifonska kiselina C (2), 3-epi-dehidrotumulozna kiselina (3) i dehidrotumulozna kiselina (4 ), odnosno (Slika 1). Njihove su strukture razjašnjene NMR spektroskopijom (tablica S1) i ESI-MS analizom (slike S2, S4, S6 i S8) i usporedbom s literaturnim podacima [32,33]. UPLC kromatogrami 1-4 prikazani su na slikama S1, S3, S5 i S7.

3.2. Preliminarna studija na BALB/c muškim miševima pomoću lanostan triterpenoidnih spojeva 1-3

Stanice slezene izolirane iz miševa tretiranih lanostan triterpenoidnim spojevima (1-3) uzgajane su pet dana u prisutnosti jedne. Mjerena je količina IFN-y koju izlučuju T limfociti slezene. Nakon što su miševi hranjeni s 2,5 mg/kg/dan ili višom dozom spoja 1, 5 i 10 mg/kg/dan od 2, odnosno 20 mg/kg/dan od 3, IFN-y koji luči ConA -stimulirane T stanice slezene bile su značajno povećane (tablice 1 i 2). Preliminarna studija pokazuje da je lanostan 1-3 povećao lučenje IFN-y stanica slezene stimuliranih ConA.

3.3. Procjena sigurnosti ekstrakta P. cocos iz ispitivanja na životinjama

Tablice 3 i 4 pokazuju da ekstrakt P. cocos nije utjecao na tjelesnu težinu i težinu slezene.cistanche benefíciosTablica 5 također pokazuje da su imunološke stanice kao što su ukupne T stanice, ukupne B stanice, MHC II (glavni kompleks histokompatibilnosti tipa II, CD4 plus T stanice, CD8 plus T stanice, NK stanice i makrofagi u skupini koja je primala ekstrakt P. cocos imale nema značajne razlike u usporedbi s kontrolnom skupinom Na temelju gornjih rezultata treba procijeniti da ne bi trebalo postojati rizik od imunotoksičnosti tijekom eksperimenta hranjenja ekstraktom P. cocos.

3.4. Procjena nespecifičnog imunološkog odgovora

Prirodne stanice ubojice (NK stanice) igraju ključnu ulogu u nespecifičnom imunitetu. Tablica 6 pokazuje da je skupina FL400 značajno inducirala povećanje aktivnosti NK stanica u usporedbi sa skupinom FL200. Radi se o tendenciji pojačanog djelovanja ekstrakta P.cocos na aktivnost NK stanica. Citokini su kemikalije uključujući interleukine (IL) i interferon (IFN) koje reguliraju imunološki odgovor ili rast stanica 【34】. Analizirali smo IFN- (Th1 imunološki odgovor) koncentraciju ConA i LPS-induciranih stanica slezene i IL-5 (Th2 imuni odgovor) koncentraciju ConA-induciranih stanica slezene izoliranih iz miševa tretiranih s FL200, FL400, FL800, i FL1200 (Tablice 7 i 8). Skupine FL800 i FL1200 značajno su stimulirale proizvodnju IFN-y u stanicama slezene miševa u prisutnosti ConA (Tablica 7). Tablica 7 također pokazuje da je koncentracija stanica slezene miševa IL-5 izolirana iz miševa tretiranih s FL200, FL400, FL800 i FL1200 imala značajno smanjeni učinak na način ovisan o dozi. Osim toga, skupine FL400, FL800 i FL1200 također su značajno stimulirale proizvodnju IFN-a u stanicama slezene miševa u prisutnosti LPS-a (Tablica 8).

4. Rasprava

Ljudski imunološki sustav odgovoran je za borbu protiv stranih patogena radi zaštite zdravlja.puritanski vitamin cNedovoljan imunitet obično čini tijelo osjetljivim na infekcije i stoga zahtijeva dovoljan imunitet, ali također zahtijeva stroge regulatorne mehanizme kako bi se izbjegla prekomjerna kolateralna šteta. Održavanje imunološke ravnoteže najvažnija je zadaća imunološkog sustava[35]. Mnogi dokazi pokazuju da je imunološka ravnoteža u visokoj korelaciji s odgovorom Th1/Th2 stanica36,37]. Stres i starenje mogu uzrokovati gubitak ravnoteže Th1/Th2 i naginjanje prema Th2, što može uzrokovati infekcije i alergijske bolesti [38-40]. Ova potraga za učinkovitom ravnotežom imuniteta hitno je potrebna. Osim toga, zadovoljstvo je što znanje stečeno desetljećima akumuliranih znanstvenih istraživanja o ljudskom imunološkom sustavu i njegovom odgovoru na zarazne bolesti pomaže u pružanju informacija o terapeutskom istraživanju i razvoju, a također ima preventivne strategije za širenje izbijanja virusa [41]. , A42]. Mnoge prethodne studije o farmakološkoj studiji P. cocos pristrane su prema proteinu P. cocos [43,44] ili polisaharidima [45,46]. Postoji nekoliko studija o učinkovitosti lanostan triterpenoida iz P. cocos kao što su hipoglikemija [25], antikancerogena [24] i sedativna funkcija [28].što je cistanchePrethodne studije su pokazale da frakcija etilnog acetata P. cocos sadrži glavnu komponentu triterpenoide i ima aktivnost jačanja imuniteta 31 Međutim, nije objavljeno daljnje dubinsko istraživanje. Naša studija procijenila je funkciju imuniteta P. cocos u dobro utvrđenom modelu miševa, uključujući preliminarnu probirnu studiju pročišćenog spoja lanostana triterpenoida. U ovoj smo studiji pokazali da ekstrakt P.cocos (Lipucan) koji sadrži 6,2 posto četiri lanostana triterpenoida ima višestruko korisnu ulogu u imunoregulacijskoj aktivnosti.

Prethodno istraživanje pokazalo je da su ljudske CD4 plus T-pomoćne (Th) stanice uključujući Th1 i Th2 podskupine definirane citokinima koje luče [36]. Th1 stanice uglavnom luče IFN-; Th2 stanice proizvode IL-4, IL-5, induciraju proizvodnju antitijela i dovode do alergijskih odgovora povećanjem proizvodnje IgE od strane B stanica i promicanjem rasta mastocita i diferencijacije eozinofila. Dobro je poznato da NK stanice i IFN- igraju važnu ulogu u imunološkoj obrani od virusnih infekcija. Urođeni imunološki sustav vrlo je važan za obranu od virusa koji su inicijalno napali tijelo i aktiviranje kasnijeg adaptivnog imuniteta. NK stanice su klasificirane kao nespecifična (urođena) imunost odgovorna za ubijanje stanica zaraženih virusom【14】. IFN- inhibira životni ciklus virusa i sprječava replikaciju virusa. IFN- također regulira imunološki odgovor aktiviranjem nespecifične imunosti posredovane stanicama i stimulacijom specifične imunosti [17]. Na temelju preliminarne studije na životinjama, glavni lanostan triterpenoidni spojevi ekstrakta P. cocos, tumulozna kiselina (1), polifonska kiselina C （2） i 3-epi-dehidrotumulozna kiselina （3）, značajno stimuliraju lučenje IFN-a stanicama slezene. Potvrda aktivne komponente ekstrakta kokosa Poria u ovoj preliminarnoj studiji bit će od velike važnosti za kontrolu kvalitete proizvoda i daljnje studije bioraspoloživosti i mehanizma. Nadalje, u ovoj smo studiji pokazali da ekstrakt P. cocos značajno stimulira aktivnost NK stanica i izlučivanje IFN-a bez imunotoksičnih svojstava. Ovi su rezultati pokazali značajne stimulativne učinke ekstrakta P. cocos i glavnih triterpenoida lanostana 1-3 na imunološki odgovor.

Štoviše, naši su nalazi pokazali da ekstrakt P. cocos potiskuje Th2 imunološki odgovor značajnom inhibicijom IL-5 (Tablica 7) u modelu nespecifičnog imunološkog odgovora i značajnom inhibicijom IL-4 (Tablica 9) u modelu specifičnog imunološkog odgovora izazvanog OVA. IL-4 i IL-5 doveli bi do alergijske reakcije.sistancheAlergije, koje se nazivaju i alergijske bolesti, uzrokovane su preosjetljivošću imunološkog sustava na tvari iz okoliša, poput alergijske astme. Imunološki odgovor pacijenta teži Th2. Ako se Th1/Th2 u tijelu može uravnotežiti, to bi trebalo poboljšati simptome alergije. Ova studija je dokazala da ekstrakt P. cocos može regulirati Th1/Th2 imunološki odgovor, može smanjiti pojavu alergijskih bolesti i može se razviti u potencijalnog kandidata za antialergijsku bolest.

5. Zaključci

Ova je studija prva koja je pokazala nespecifičnu i specifičnu regulaciju imuniteta djelovanja ekstrakta P. cocos koji sadrži lanostan triterpenoide u miševa. Ti imunološki odgovori uključuju aktivaciju NK stanica, povećano izlučivanje IFN-a i smanjenje IL-4 i IL-5. Naša otkrića podupiru da će ekstrakt P. cocos bez imunotoksičnosti, dodan u prehranu ili korišten sam, imati korisne imunoregulacijske uloge u poboljšanju imunodeficijencije i poboljšanju sposobnosti sprječavanja infekcija i alergijskih odgovora. Ovo je prva potvrda da su lanostan triterpenoidi učinkoviti sastojci i da se mogu koristiti kao sastojci za kontrolu kvalitete kako bi se održala postojanost učinkovitosti ekstrakta P. cocos.

Ovaj je članak izvađen iz Life 2021, 11, 111. https://doi.org/10.3390/life11020111 https://www.mdpi.com/journal/life