Tumori plivaćeg mjehura u valovitoj medaki (Oryzias Latipes)

Sažetak:Tumori plivaćeg mjehura otkriveni su u tri od 28 valovitih medaka starih oko 2 godine, a svi su pokazivali abnormalne obrasce plivanja uzrokovane zakrivljenošću kralježnice. Thetumorinalazili su se u dorzalnoj trbušnoj šupljini. Lumen plivaćeg mjehura nije otkriven u području gdje se prvobitno pretpostavljalo da se nalazi i to je područje zamijenjeno smasnog tkiva. Tumori su bili neinvazivne, ekspanzivne i inkapsulirane čvrste mase sastavljene od homogene populacije dobro diferenciranih, gusto zbijenih,plinovite stanice slične žljezdanom epitelu. Tumorne mase bile su povezane s rete mirabile, ali se tumorske stanice nisu infiltrirale u njih. Histopatološki su ovi tumori dijagnosticirani kao adenomi koji potječu izplinoviti žljezdani epitel plivaćeg mjehura. Spontani tumori plivaćeg mjehura rijetki su u medaka, s učestalošću od 0,02%; međutim, u ovoj studiji valovitih medaka, incidencija je bila mnogo veća (10,7%). Dugoročni fizički učinci na plinsku žlijezdu uzrokovanu deformacijom plivaćeg mjehura koji se smatra sekundarnim učinkom zakrivljenosti kralježnice mogu biti važan čimbenik u proliferaciji plinovitog žlijezdanog epitela u valovitoj medaki, što rezultira većom učestalošću plivanja.tumori mokraćnog mjehura. (DOI: 10.1293/tox.2020-0058; J Toxicol Pathol 2021; 34: 107–111)

Ključne riječi:adenom, plinska žlijezda, spontana, plivaći mjehur, valovita medaka

KLIKNITE OVDJE DA DOBIJETE PRIRODNI ORGANSKI EKSTRAKT CISTANCHE S 25% EHINAKOSIDA I 9% AKTEOZIDA ZA FUNKCIJU BUBREGA

Usluga podrške Wecistanche-najvećeg izvoznika cistanche u Kini:

E-pošta:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp/telefon:+86 15292862950

Kupite za više pojedinosti o specifikacijama:

https://www.xjcistanche.com/cistanche-shop

Plivaći mjehur kod teleosta nastaje iz izdanka prednjeg dijela probavnog kanala i ne postoji kod sisavaca. To je primarni organ za kontrolu gustoće cijelog tijela, uzgona i proizvodnje zvuka1. Anatomski gledano, stijenka plivaćeg mjehura sastoji se od dva sloja: tunica interna sastavljena od jednostavnog ravnog epitela i tunica exteria sastavljena od vezivnog tkiva2, 3. Djelovanje i rete mirabile i plinske žlijezde kontrolira volumen plina u plivanju mjehur. Rete mirabile je gusti snop paralelnih arterijskih i venskih kapilara raspoređenih jedna pored druge i koristi protustrujni protok krvi unutar mreže da djeluje kao protustrujni izmjenjivač. Plinska žlijezda sastoji se od presavijenog kuboidnog ili stupastog epitela koji izlučuje plin u plivaći mjehur. U studijama toksičnosti i terenskim studijama prijavljene su ograničene patološke lezije plivaćeg mjehura4, jer se ovaj organ ne ispituje rutinski, iako je ponekad slučajno uključen tijekom sagitalnog ili poprečnog rezanja cijelog tijela manjih riba5. Osim toga, budući da se plivaći mjehur često probuši i ispuhne tijekom patološke pripreme, njegove se lezije obično zanemare.

Spontani tumori plivaćeg mjehura rijetki su kod teleosta, sa samo nekoliko slučajeva opisanih kod nekoliko vrsta6. Tumori plivaćeg mjehura mogu se grubo klasificirati u dvije vrste na temelju njihova podrijetla: mezenhimalni i epitelni tumori. Prvi potječu iz glatkih mišića i fibroblastičnih tkiva stijenke plivaćeg mjehura i dijagnosticiraju se kao leiomiosarkomi7 i fibrosarkomi8, 9. Ovi mezenhimalni tumori javljaju se kod lososa i često su povezani s retrovirusnom infekcijom10. Potonji potječu iz epitela plivaćeg mjehura i dijagnosticiraju se kao adenomi, papilarni adenomi i/ili adenokarcinomi. Većina spontanih i kemijski izazvanih tumora plivaćeg mjehura u kostima kategorizirana je kao epitelni tumori plinskih žlijezda. Epitelni tumori prijavljeni su kod medaka11, cipla12, gupija11,13, bakalara14, morskog konjica15 i ribe Nothobranchius16. U ovoj studiji naišli smo na tumore plivaćeg mjehura u tri valovite medake i opisali njihove detaljne histopatološke karakteristike.

Dvadeset osam valovitih medaka, starih oko 2 godine, dobiveno je iz malih zaliha valovitih medaka u Laboratoriju za biološka istraživanja, Nissan Chemical Corporation. Ove zalihe dobivene su kućnim uzgojem nekih valovitih medaka koji se prirodno nalaze u zalihama koje se održavaju u laboratoriju. Ribe su držane u dekloriranoj vodi iz slavine na 25 ± 1 stupanj u fotoperiodu od 16:8-satnog svjetla: tame. Valovita medaka i jedna normalna medaka žrtvovane su prekomjernom izloženošću plinu CO2 i fiksirane u Bouinovoj otopini preko noći prije ponovnog fiksiranja u formalinu s 10% neutralnim puferom. Fiksirane medake su odvojene u dvije sekcije srednjim sagitalnim rezom, a obje su sekcije umetnute u parafin, izrezane na debljinu od 4 µm, i rutinski obojene hematoksilinom i eozinom za histopatološki pregled. Ovo je istraživanje provedeno prema Smjernicama za pokuse na životinjama, Laboratorij za biološka istraživanja, Nissan Chemical Corporation.

Histopatologija plivaćeg mjehura u normalnom i valovitom medaku

Plivaći mjehur kod normalne medake bio je smješten posteriorno i inferiorno u odnosu na bubreg glave i tijela, u dorzalnoj trbušnoj šupljini koja je bila podijeljena dijafragmom iznad gastrointestinalnog trakta. Oblik plivaćih mjehura u sagitalnom presjeku bio je lateralni prolate sferoidni oblik (Sl. 1a). Valovite medake pokazivale su zakrivljenost kralježnice koju su karakterizirali dorzoventralno zakrivljeni kralješci, što je rezultiralo abnormalnim obrascima plivanja. Plivaći mjehuri kod valovitih medaka nalazili su se u dorzalnoj trbušnoj šupljini, kao i kod normalnih medaka; međutim, u sagitalnom presjeku imale su uzdužni ovalni oblik (slika 1b). Plinska žlijezda i rete mirabile bile su smještene na sličnim položajima i kod normalnih i kod valovitih medaka na kranijalnom polu plivaćeg mjehura. Plinska žlijezda bila je sastavljena od tri do četiri sloja blijedog eozinofilnog vakuoliziranog kuboidnog epitela (Slika 1c i d) i bila je povezana s rete mirabile koja je imala paralelno raspoređene krvne kapilare (Slika 1d).

Histopatologija tumora plivaćeg mjehura u valovitom medaku

Tumor ribe br. 1 (mužjak) nalazio se posteriorno od glavnog bubrega u dorzalnoj trbušnoj šupljini (slika 2a). Ostali tumori riba br. 2 i 3 (ženke) bili su smješteni ispod tjelesnog bubrega u dorzalnoj trbušnoj šupljini i bili su povezani s rete mirabile (sl. 3a i 4a). Rete mirabile ribe br. 2 bila je blago začepljena (Sl. 3b). U sve tri ribe, lumen plivaćeg mjehura nije otkriven u regiji gdje se prvobitno pretpostavljalo da se nalazi, te je ta regija zamijenjena masnim tkivom (sl. 2a, 3a i 4a). Tumorne mase u tim tkivima bile su neinvazivne, ekspanzivne i inkapsulirane čvrste mase proliferirajućih tumorskih stanica (sl. 2b, 3b i 4b). Nije došlo do infiltracije tumorskih stanica u rete mirabile (sl. 3c i 4b). Tumorske mase bile su sastavljene od homogene populacije dobro diferenciranih, gusto zbijenih stanica nalik plinovitom žljezdanom epitelu. Tumorske stanice bile su raspoređene u konopce, trabekule i čvrste uzorke, poduprte kapilarama i minimalnom stromom. Bili su različitih veličina i okruglog do poligonalnog oblika, s jasnim granicama stanica i blijedom eozinofilnom vakuoliziranom citoplazmom (slika 2c). Višejezgrene stanice i citomegalične stanice također su bile razbacane posvuda. Jezgre su pokazivale antimononukleozu, s nepravilnim oblikom i nejasnim jezgricama, iako nisu otkrivene mitotičke figure unutar tumorskih masa. Nekoliko žarišta adipocita bilo je razbacano po tumoru (slika 4c). Na temelju ovih značajki ovi su tumori dijagnosticirani kao adenomi koji potječu iz plinovitog žlijezdanog epitela plivaćeg mjehura. Dodatno, čini se da te tumorske stanice ne funkcioniraju kao plinski žljezdani epitel, budući da se lumen plivaćeg mjehura nije formirao u tim valovitim medakama. Što se tiče histopatoloških lezija u drugim organima, kod ribe br. 1 bile su velike krvne ciste u bubregu i višestruke ciste jetre s nekrozom i upalom, kod ribe br. 2 kalcifikacije u bubregu i višestruke ciste jetre, a kod ribe nije bilo lezija. broj 3.

Tumori plivaćeg mjehura mogu se inducirati u kostima izlaganjem zagađivačima iz okoliša i karcinogenima17, 18. Kemijski inducirani tumori plivaćeg mjehura prijavljeni su u medaka izloženih 4-kloranilinu19, anilinu19, Nmetil-N'-nitro-N- nitrozoguanidin (MNNG)20, ili bis (trin-butil kositar)oksid21; kod gupija izloženih metil živinom kloridu22; i kod kalifornijske pastrve izložene dietilnitrozaminu17, metilazoksimetanol acetatu17, Benz (a)pirenu17, MNNG17, N-metil nitrozourei, dimetilbenz[a]anthra cene17 ili 2,6-dimetilnltrozomorfolinu23. Suprotno tome, spontani tumori plivaćeg mjehura rijetki su u teleosta, s incidencijom od 0.02% (2/10,000) u medaka starijih od 24 tjedna i 0,14% (7/5,{ {33}}) kod gupija starijih od 13 tjedana, koji su korišteni u kontrolnim skupinama raznih testova karcinogeneze11. Nasuprot tome, mlade ribe s deformacijama kostura pokazuju visoku prevalenciju spontanih formacija. U sadašnjim slučajevima, incidencija spontanih tumora plivaćeg mjehura bila je mnogo veća na 10,7% (3/28) u valovitoj medaki, u usporedbi s normalnom varijantom. Valovita medaka razvija se zbog vertebralne abnormalnosti koju određuje autosomni recesivni gen (wavy; wy)25 i karakterizirana je valovitim dorzo-ventralnim zavojima u kralježničnom stupu26, 27. Nije bilo izvješća o povezanosti između valovitog gen i tumori plivaćeg mjehura. U ovoj studiji, deformacija plivaćeg mjehura uočena je kod valovitih medaka, a ta se promjena smatrala sekundarnim učinkom zakrivljenosti kralježnice. Dakle, dugoročni fizički učinci deformacije plivaćeg mjehura na plinsku žlijezdu mogu biti važan čimbenik u proliferaciji plinovitog žljezdanog epitela u valovitoj medaki, što rezultira većom incidencijom tumora plivaćeg mjehura. Nadalje, histološka ispitivanja plinovitog žljezdanog epitela potrebno je provesti tijekom procesa deformacije plivaćeg mjehura u valovitoj medaki.

Otkrivanje potencijalnih sukoba interesa: Autori izjavljuju da ne postoji sukob interesa.

Zahvale:

Autori bi željeli zahvaliti dr. Jeffreyu C. Wolfu iz Experimental Pathology Laboratories Inc. na nekim važnim sugestijama, kao i gđi Kaori Maeji ma, gđi Hiromi Asako, g. Atsushi Funakoshi, gđi Yukiko Sudo, g. Makoto Tsuchiya i g. Yoshinori Tanaka iz Nissan Chemical Co. za njihovu izvrsnu tehničku pomoć.

Reference

1. Smith FM, i Croll RP. Autonomna kontrola plivanjamjehur. Auton Neurosci. 165: 140–148. 2011.

2. Takashima F, i Hibiya T. Atlas histologije riba.Normalne i patološke značajke. 2. izd. Kodansha doo,Tokio. 1995. godine.

3. Teresa O, i Maciej K. Plivaći mjehur. U: HistologijaRibari. 1. izd. Kirschbaum F, i Gormicki K (ur.). CRCPress, Boca Raton. 117–120 (prikaz, stručni). 2020.

4. Hinton DE. Toksikološka histopatologija riba: sustavnapristup i pregled. U: Patobiologija mora i estuarijaOrganizmi, 1. izd. Couch JA, i Fournie JW (ur.).CRC Press, Boca Raton. 177–215 (prikaz, stručni). 1993. godine.

5. Lumsden JS. Gastrointestinalni trakt, plivaći mjehur, gušterača,i peritoneum. U: Sistemska patologija riba: tekst iAtlas odgovora normalnog tkiva u teleosta i njihovihOdgovori u bolesti, 2. Ferguson HW (ur.). škotskiPress, London. 187–192 (prikaz, stručni). 2006.

6. Roberyts RJ i Rodger HD. Patofiziologija isustavna patologija teleosta. U: Patologija riba, 4eds. Roberts RJ (ur.). Wiley Blackwell, New Delhi. 62–143 (prikaz, stručni).2016. 

7. Bowser PR, Casey JW, Casey RN, Quackenbush SL, Lof-ton L, Coll JA i Cipriano RC. Leiomyosar plivaćeg mjehurakoma kod atlantskog lososa (Salmo salar) u Sjevernoj Americi. JWildl Dis. 48: 795–798. 2012.

8. Duncan IB. Dokazi za onkovirus u plivaćem mjehuru fibrosarkom atlantskog lososa Salmo salar L. J Fish Dis. 1:127–131. 1978.