Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-pošta:audrey.hu@wecistanche.com

YANG Jian-hua1' 2 , HU Jun-ping2, RENA • Kasimu2 ,〔DU Nian-sheng

(1. Affiliated Tumor Hospital, Xinjiang Medical University, Urumqi 830011, Kina; 2. College of Pharmacy, Xinjiang Medical University, Urumqi 830054, Kina)

Sažetak:Cilj: Proučiti odnos strukture i aktivnosti feniletanoidnih glikozida u biljkama Cistanche salsa na antioksidativno djelovanje. Metode: Sustavima ispitivanja DPPH • antioksidativno djelovanje šest feniletanoidnih glikozida iz biljakaCistanchesalsa je bila određena za istraživanje odnosa između antioksidativnih aktivnosti i strukturnih karakteristika feniletanoidnih glikozida. Rezultati: Antioksidativna aktivnost feniletanoidnih glikozida bila je varijanta s učinkom ovisnim o dozi. Slijed jačine antioksidativnog djelovanja šest komponenti pokazao se2 ^Acetilakteozid > Akteozid Tubulozid BN Izoakteozid > Ehinakozid > Cistanozid A. Zaključak: Antioksidativna aktivnost feniletanoidnih glikozida povezana je s brojem fenolnih hidroksila, steričkom zaprekom, 2-acetilom na srednjoj glukopiranozi i lokacijom fenolnog hidroksila. Osim toga, može biti povezan s j3-nezasićenim ketonom fenol-2-propenila.

Ključne riječi: Cistanche salsa ( CA Mey. ) G, Beck; Feniletanoidni glikozidi; Antioksidativno djelovanje; Struktura-aktivnost; DPPH

Ehinakozid

Tradicionalna kineska medicinaCistancheje Cistanche salsa (CA Mey.) G. Beck, osušena mesnata stabljika s ljuskama i listovima. Prvi put je objavljen u "Shen Nong's Materia Medica". Učestalost pojavljivanja je najveća, odmah iza ginsenga u receptima protiv starenja i kineske medicine, a ima reputaciju "pustinjskog ginsenga". Feniletanoil glikozidi su karakteristične komponenteCistancherod biljaka. Trenutno je iz ovog roda izolirano više od 30 takvih spojeva. Farmakološke studije su u osnovi razjasnile da su ti spojevi glavna materijalna osnova zaCistanchevršiti farmakološke aktivnosti).

Dibenzopikrilni radikal (DPPH •) je relativno stabilan slobodni radikal sa slobodnim elektronom na svom N. Metanolna otopina DPPH-a je ljubičasta s maksimalnim apsorpcijskim vrhom na 517 nm. Kada postoji hvatač slobodnih radikala, njegova apsorpcija postupno nestaje zbog sparivanja jednog elektrona. Njegov stupanj obezbojenosti kvantitativno je povezan s brojem elektrona koje prihvaća. Stoga se upotreba spektrofotometrije za otkrivanje promjene apsorbancije DPPH nakon reakcije s otopinom uzorka može koristiti za ispitivanje sposobnosti uzorka da ukloni slobodne radikale i odoli oksidaciji (3). Trenutačno postoje izvješća o antioksidativnim istraživanjima glikozida fenetilnog alkohola u pireu od patlidžana u hvatanju slobodnih radikala, ali ne postoji analiza odnosa strukture i aktivnosti između njegovih antioksidativnih svojstava i aktivnih tvari. U ovom radu, DPPH • metoda analize slobodnih radikala se prvi put koristi za ispitivanje antioksidativne aktivnosti 6 monomera glikozida fenetil alkohola u Rouhuanrongu. Na temelju strukturnih karakteristika i rezultata određivanja aktivnosti ovih spojeva, preliminarno se zaključuje o komponentama glikozida fenetilnog alkohola. Odnos strukture i aktivnosti antioksidativnog djelovanja.

1 Uređaji i materijali

Ehinakozid, cistanski glikozid A,verbaskozid, isoverbasin glikozid, 2,-acetil verbaskozid, epruveta antocijanin B referentna tvar (izolirana i pripremljena iz Cistanche salsa, UV, IR, EI-ms/h -nmrJ3c-nmr podaci u skladu su s literaturnom vrijednošću, sadržaj je određen HPLC područjem metoda normalizacije, čistoća je veća od 95 posto, strukturna formula je prikazana na slici 1 i tablici 1); Difenil pikrilni radikal (DPPH •) je kupljen od Sigme; ostali reagensi Svi su domaći čisti.

SpectraMax M5 višenamjenski detektor biološke aktivnosti pune valne duljine (Anthos Co. Austria), 96-ploča za kulturu jažica (Costar), AB104-N elektronička vaga]Mettler-Toledo Instr. (Shang Hai) Ltd.]

Slika 1. Strukturne formule šest fenetanol glikozida u Cistanche

Tablica 1 Supstituenti u 6 spojeva fenetanol glikozida u Cistanche

Napomena: Ac je acetil, Cf je trans-kafeoil, Glc * pD-gluviolanoza, a Rha je aL-ramnoza

2. Priprema ispitne otopine

DPPH • Pripremite temeljnu otopinu koncentracije 1,3 x 10'2mol/L s etanolom, pohranite u hladnjak, razrijedite temeljnu otopinu etanolom do 1-3 xl{{7} }^mol/L neposredno prije upotrebe; 6 vrsta glikozida fenetilnog alkohola Referentna tvar i vitamin C formuliraju se u otopinu s koncentracijom 0.05-50.0 ptg/mL s etanolom.

Akteozid

3 metode i rezultati

3. 1 Metoda Prvo dodajte 10 |xL uzorka u jažice s uzorkom, dodajte 10|jlL etanola u slijepe jažice, a zatim dodajte 190 jiL DPPH • s koncentracijom od 1,3 xlO^mol/L, i stavite ih u mraku na sobnoj temperaturi 30 minuta. Koristite SpectraMax M5 višenamjenski detektor biološke aktivnosti pune valne duljine za mjerenje apsorbancije (A) na 517 nm. Svaka apsorbancija je mjerena 3 puta paralelno, te je uzeta prosječna vrijednost. Stopa uklanjanja izračunava se na sljedeći način: stopa uklanjanja ( postoci )=(prazna proba-uzorak A)/prazna proba x 100 posto

3.2 Rezultati Rezultati određivanja prikazani su u tablici 2. Iz tablice 2 može se vidjeti da šest glikozida fenetilnog alkohola u različitim koncentracijama imaju različite stupnjeve učinaka hvatanja na DPPH •, a njihova sposobnost hvatanja slobodnih radikala ima značajnu dozu- učinak odnos s koncentracijom. Glikozid na DP PH • Veličina učinka čišćenja raste s povećanjem koncentracije.

Tablica 2 Stopa uklanjanja uzoraka s različitim koncentracijama na DPPH • («=3)

Napomena: Pozitivna kontrola je askorbinska kiselina (vitamin C), broj uzorka je 7

According to the IC5 of each sample. According to the value, the scavenging ability of 6 kinds of phenylethanoid glycosides on DPPH • is in order: 2'-acetyl verbascoside> verbascoside BN isophorbasin glycoside> echinacoside>cistanche glikozid A. Učinci šest glikozida fenetilnog alkohola u istoj koncentraciji kao vitamin C pozitivne kontrole nešto su niži od onih vitamina C.

verbaskozid

4 Rasprava

Rezultati ove studije dodatno su potvrdili da glikozidi fenetilnog alkohola općenito imaju antioksidativno djelovanje. Analizirajući i uspoređujući njihove kemijske strukture, verbaskozid, izo-verbazin glikozid, 2'-acetil verbazin glikozid i cijev anortozit B su svi glikozidi, dok su ehinakozid icistancheA su trigliceridi, s velikom steričkom zaprekom. Povećani učinak steričke smetnje čini ehinakozid i solanakozid A teškim pristupom slobodnim radikalima, tako da je njihov antioksidativni kapacitet relativno slab; strukturna razlika između ehinakozida i striata: ehinakozid A je samo R5 prvog je fenolna hidroksilna skupina, a potonjeg je metoksi skupina. O-fenolna hidroksilna skupina smatra se važnom funkcionalnom skupinom za antioksidativno djelovanje. Difenol hidroksilna skupina nestaje, a antioksidativno djelovanje je značajno smanjeno. Analizom strukture spoja i kombiniranjem rezultata mjerenja, zaključuje se da je antioksidacijska aktivnost fenetil glikozida u tijestu od patlidžana povezana s brojem aglikona i fenolnih hidroksilnih skupina na fenilakriloilnoj skupini, položaju veze fenolne kiseline. hidroksilnu skupinu, veličinu prostorne smetnje spoja i središnju glukozu 2. Postoji određeni odnos između supstitucije acetilne skupine na položaju, što također može biti povezano s fragmentom strukture a,/3 nezasićenog ketona na stiren acilnu skupinu, ali ima malo veze sa supstitucijskim položajem fenilakriloilne skupine.

DPPH • je relativno stabilan slobodni radikal sa središtem na N, sa jakom apsorpcijom na 517 nm. Nakon dodavanja ispitivane tvari, otkrivanjem promjene apsorbancije na 517 nm nakon • reakcije DPPH radikala s otopinom uzorka, može se provjeriti sposobnost uzorka da hvata slobodne radikale i antioksidaciju. Eksperimenti pokazuju da korištenje DPPH • za uspostavljanje in vitro modela oštećenja od slobodnih radikala ne zahtijeva kompliciranu opremu i skupe reagense. Jednostavan je i lak za korištenje, osjetljiv, pouzdan i ponovljiv. To je dobra metoda za provjeru hvatača slobodnih radikala.

Vitamin C trenutno je prepoznat kao vrlo aktivan i široko korišten antioksidans. Stoga je ovaj eksperiment odabrao vitamin C kao pozitivnu kontrolu za antioksidativni kapacitet glikozida fenetilnog alkohola u hvatanju slobodnih radikala.

reference

[1] Lei Li, Song Zhihong, Tu Pengfei. Istraživanje kemijskih sastojaka Cistanche Napredak istraživanja[J].Chinese Herbal Medicine, 2003,34(5):473476.

[2] Song Zhihong, Lei Li, Tu Pengfei. Napredak u istraživanju farmakoloških aktivnosti biljaka Cistanche [J]. Kineska biljna medicina, 2003., 34(9): U prilogu 16-18.

[3] Xu Shenhong, Hang Hu. Jednostavna metoda za ispitivanje hvatača slobodnih radikala [J]. Kineska biljna medicina, 2000., 31(2): 96-97.

[4] Fu Rong, Zhu Jiuwei. Određivanje antioksidativne aktivnosti Chuanlinga, Rhodiola Rosea i Huang Zhi spektrofotometrijom difenil piracy radikala [J]. Journal of Dalian University of Light Industry, 2004, 23 (2)): 114-117.