Male GTPaze iz obitelji Rab i Arf: ključni regulatori unutarstaničnog prometa u neurodegeneracijiⅡ

2. Rab GTPaze u neurodegeneraciji

Male GTPaze obitelji Rab odgovorne su za kontrolu vezikularnog transporta i prometa kroz membranu. Oni reguliraju sve korake ovog prijevoza; biogeneza nositelja, njihovo kretanje po citoskeletu i njihovo vezivanje u ciljnim membranama [38,39]. Kao i kod ostalih članova superobitelji Ras, aktivnost Rab GTPaza regulirana je GEF-ovima, GAP-ovima i GDI-jima. Opisane su dvije glavne obitelji RabGEF-a. Prva je obitelj GEF-ova koja sadrži DENN domenu, a koja može aktivirati različite Rab GTPaze [40]. DENN je katalitička domena koja izravno komunicira s Rab GTPazama [40]. Druga je obitelj GEF-ova koja sadrži Vps9 domenu, a koji su specifični za Rab5 GTPaze [41].

   click to jade cistanche za Alzheimerovu bolest i Parkinsonovu bolest

Osim ove dvije obitelji, pokazalo se da drugi proteini djeluju kao GEF-ovi za Rab GTPaze, poput kompleksa TRAPP I i Mon1/Ccz1, koji su GEF-ovi za Rab1, odnosno Rab7 [41]. S druge strane, dok GEF-ovi među sobom dijele nisku homologiju sekvenci, Rab GAP-ovi su klasificirani u jedinstvenu obitelj, Tre-2/Bub2/Cdc16 (TBC)-domena GAP-ova. Kod ljudi postoji jedan GAP koji ne sadrži ovu TBC domenu, Rab3GAP kompleks [41]. Nažalost, GEF i GAP za nekoliko Rab GTPaza još nisu opisani [41,42]. Osim što su regulirane svojim stanjem aktivacije (vezano za GDP/vezano za GTP), Rab GTPaze se mogu naći u svom aktivnom i neaktivnom stanju u citosolu ili membranama.

Ova lokalizacija je kontrolirana prenilacijom C-terminalnih cisteinskih ostataka. Nakon što je vezikularni transport završen, Rab GTPaze se moraju reciklirati i transportirati iz membrana natrag u citosol. GDI se vežu na prenilirane i neaktivne (vezane za GDP) Rab GTPaze i zatim se GTPaze uklanjaju iz membrane. Stoga se recikliranje Rab GTPaze postiže tek kada je vezikularni transport završen i GTP-aza je inaktivirana GAP-om [41]. Unatoč tome, prenilacija nije jedinstvena posttranslacijska modifikacija koja regulira Rab GTPaze. Neki Rabs mogu biti fosforilirani kinazama kao što je p34cdc2 ili PD-srodna kinaza LRRK2 [41,43]. Patogene varijante LRRK2 povezane s PD rezultiraju povećanjem takve fosforilacije. Ova post-translacijska modifikacija događa se u domeni switch II, koja je ključna za interakciju GTPaze s njezinim regulatorima. Točnije, fosforilacija smanjuje interakciju GTPaze s njezinim regulatorima [43,44].

Kao što je ranije spomenuto, Rab GTPaze kontroliraju sve ključne korake vezikularnog transporta i prometa kroz membranu, zbog svoje sposobnosti interakcije s različitim efektorskim molekulama [45]. Za odabir tereta, pupanje i formiranje dlake, Rab GTPaze stupaju u interakciju s proteinima kao što su TIP47 ili retromer. Na primjer, Rab9-GTP stupa u interakciju s TIP47 u kasnim endosomima, povećavajući afinitet TIP47 prema teretu koji se mora transportirati [46]. TIP47 prepoznaje citoplazmatske domene receptora za manozu 6-fosfat (MPR), aktivirajući transport od endosoma do Golgijevog kompleksa [46]. Drugi primjer je interakcija Rab7 s retromer kompleksom za posredovanje u prijenosu endosoma u Golgijev kompleks [47]. Što se tiče regulacije vezikularnog transporta, Rab GTPaze stupaju u interakciju s motornim proteinima kao što su kinezini i dineini. Kinezini i dineini su ATPaze koje koriste hidrolizu ATP-a za induciranje konformacijskih promjena koje stvaraju pokretačku silu za pomicanje tereta prema plus-kraju, odnosno minus-kraju mikrotubula [48].

Rab GTPaze kao što su Rab3A, 6, 8A, 10, 11A, 14, 27A i 39B stupaju u interakciju s miozinom tipa V za prijenos organela i vezikula kroz aktinske filamente [49]. Na primjer, Rab27A stupa u interakciju s miozinom tipa V i melanofilinom, tvoreći ternarni kompleks za prijenos melanosoma prema aktinskim filamentima [50]. Za kontrolu skidanja ovojnice i vezanja vezikula, Rab GTPaze se povezuju s proteinima kao što su TRAPP, Exocyst ili p115/Golgins. Jedan primjer je interakcija Rab1 s p115, koji je povezujući protein koji inducira stvaranje SNARE kompleksa i stimulira pristajanje vezikula obloženih COP I u Golgijeve membrane [51]. Štoviše, Rab1 također stupa u interakciju s drugim faktorima vezivanja kao što su GM130 i GRASP65 kako bi se olakšalo spajanje vezikula Golgijeve membrane [52].

GM130 je tada odgovoran za održavanje Golgijeve strukture [52]. Poznato je da Rab GTPaze stupaju u interakciju s proteinima kao što su Sro7 i Rabenosin-5 [45]. Na primjer, Rab8 stupa u interakciju sa Sro7, regulirajući funkcije SNARE proteina u spajanju vezikula sa staničnim membranama, dok Rabenosyn-5 služi kao veza između Raba i hVPS45 [53,54] spajajući Rab4 i/ili Rab5 i hVPS45-povezao je Rabenosyn-5, koji zatim veže SNARE. Zaključno, Rab GTPaze su glavni regulatori odabira tereta, formiranja, transporta, spajanja i fuzije vezikula s ciljnim membranama. Uzimajući u obzir važnost membranskog prometa u živčanom sustavu, neuroni su razvili specifične mehanizme za kontrolu transporta proteina, organela i receptora na velike udaljenosti u aksonima i dendritima. Rab GTPaze reguliraju recikliranje, egzocitozu i endocitozu sinaptičkih vezikula; oslobađanje neurotransmitera; promet receptora; te anterogradni i retrogradni aksonski transport [15].

Štoviše, oni su također uključeni u grananje i morfogenezu dendrita, rast neurita i migraciju neurona tijekom razvoja. S obzirom na važnost takvih procesa, disregulacija Rab GTPaze povezana je s raznim neurodegenerativnim bolestima kao što su AD, PD, amiotrofična lateralna skleroza (ALS) i Charcot-Marie-Tooth (CMT) [8,15]. U AD-u su različite Rab GTPaze uključene u transport proteina povezanih s patologijom, kao što su Tau, APP, BACE1, -sekretaza, -sekretaza i A peptidi. Nadalje, ekspresija ovih GTPaza je promijenjena u postmortalnom AD mozgu [55]. Što se tiče PD-a, ove GTPaze kontroliraju transport -syn [56]. Uz to, Rab GTPaze mogle bi posredovati u toksičnosti uzrokovanoj LRRK2 kinazom u PD [57]. Kao što je gore spomenuto, neke Rab GTPaze su supstrati LRRK2 i opisano je da disregulacija u ovoj fosforilaciji inducira neurotoksičnost i degeneraciju dopaminergičkih neurona in vivo [57,58]. U nastavku opisujemo specifične uloge glavnih Rab GTPaza u nastanku i progresiji AD i PD (Slika 2).

2.1. Rab1

Rab1 GTPaze kontroliraju dvosmjerni transport između endoplazmatskog retikuluma (ER) i GA, kao i formiranje, cjelovitost i recikliranje Golgijevih membrana [38,59]. Obitelj Rab1 sastoji se od dvije izoforme: Rab1A i Rab1B. GEF za obje izoforme je TRAPP I. TRAPP I je kompleks proteina koji aktivira Rab1 i uključen je u ER-Golgijev transport [41,60]. S druge strane, molekula odgovorna za inaktivaciju Rab1 je TBC1D20 GAP [41,61]. Mnoge studije naglašavaju važnost Rab1, kao i njegovih regulatora, u održavanju integriteta Golgijevih membrana.

Prekomjerna ekspresija dominantno negativnih oblika Rab1A i Rab1B, smanjenje obje GTPaze i prekomjerna ekspresija TBC1D20 GAP induciraju fragmentaciju GA [38]. 2.1.1. Rab1 i ER-Golgijev promet Rab1 kontrolira transport između ER-a i GA-a, budući da može komunicirati s p115 i GM130-GRASP65 kako bi pogodovao fuziji ER-vezikula u GA-u [62-64]. Svojom interakcijom s tim efektorskim molekulama, Rab1 upravlja stvaranjem, cjelovitošću i recikliranjem GA membrana. S jedne strane, Rab1 stupa u interakciju s proteinom p115, koji je faktor vezivanja vezikula, kako bi kontrolirao ovaj ER-GA promet [65]. S druge strane, kada se Rab1 poveže s kompleksom GM130-GRASP65 u GA, on regulira slaganje GA i vezivanje vezikula [66,67].

GM130 je odgovoran za integritet Golgijevih membrana [52]. Štoviše, vjeruje se da p115 može komunicirati s GM130-GRASP65 za fuziju ER-vezikula u GA [62,64]. Nadalje, Rab1 također kontrolira retrogradni transport između GA i ER. Da bi to učinila, GTPaza stupa u interakciju s GBF1, GEF za Arf1 GTPazu koja je uključena u biogenezu COP I vezikula [68,69]. Iako uloga Rab1 u ER-GA prometu u patogenezi AD-a još nije jasna, opisano je da ova GTPaza može spriječiti gubitak dopaminergičkih neurona u PD-u [19]. U PD-u, jedan od mogućih mehanizama pomoću kojih bi -syn mogao inducirati neurodegeneraciju je inhibicija ER-GA prometa [19].

Opisano je da divlji tip (WT) -syn, kao i mutant -synA53T koji uzrokuje ranu pojavu PD-a, blokiraju ER-GA promet, iako -synA53T pokreće ovu blokadu brže nego WT. Cooper i suradnici pokazali su da se ta toksičnost izazvana -syn-om sprječava u prisutnosti Rab1 [19]. Zapravo, u Drosophila melanogaster (D. melanogaster), Caenorhabditis elegans (C. elegans) i primarnim kulturama štakorskih neurona koji izražavaju WT -syn ili -synA53T, ekspresija Rab1 spasila je gubitak dopaminergičkih neurona [19]. Ovi podaci sugeriraju da bi Rab1 mogao igrati zaštitnu ulogu u kontroli ER-GA prometa i, prema tome, mogao spriječiti neurodegeneraciju kod PD-a. Rab1 i njegova funkcija u kontroli ER-GA prometa također su povezani s ALS-om. Mutacije u SOD1, TDP-43 ili FUS proteinima koje uzrokuju ovu neurodegenerativnu bolest rezultiraju pogrešnom lokalizacijom Rab1, kao i oštećenjem ER-GA transporta i povećanim ER stresom [8]. Prekomjerna ekspresija Rab1, naprotiv, ima zaštitnu ulogu protiv ovog stresa [8,21].

2.1.2. Rab1 i cjelovitost GA

Osim klasičnih obilježja patologija AD i PD, opisano je da neuroni predstavljaju fragmentirani GA u oba slučaja [70]. Ta se fragmentacija pripisuje različitim uzrocima, poput prisutnosti nakupina proteina u citoplazmi, promjenama u citoskeletu ili neispravnom unutarstaničnom prometu. S tim u vezi, Martínez-Menárguez et al. navode da su glavni razlog fragmentacije GA u neurodegenerativnim bolestima promjene u unutarstaničnom transportu [70]. Nekoliko je studija pokazalo da u neurodegenerativnim patologijama, Rab1- posredovana prometna disregulacija uzrokuje fragmentaciju GA [16,17,70]. U slučaju AD-a, te su promjene GA povezane s razinama pTau [71,72].

Godine 2014. studija Jianga i suradnika otkrila je da je fragmentacija GA prethodila Tau hiperfosforilaciji [71]. Prema njima, GA fragmentacija potiče fosforilaciju Tau putem aktivacije kinaze ovisne o ciklinu-5 (cdk5) i ERK. Štoviše, u pacijenata s AD-om, neuroni izloženi NFT-u imaju veće defekte na Golgiju u usporedbi s neuronima bez NFT-a [72]. Neuroni koji su akumulirali srednje razine igre prije formiranja NFT-a pokazali su srednje nedostatke u GA [72]. To potvrđuje da je progresivna akumulacija igre povezana sa strukturnim promjenama u GA. Prema Antón-Fernándezu i suradnicima, te bi promjene mogle utjecati na obradu i promet proteina, pa bi stoga mogle pridonijeti neuronskoj disfunkciji u AD [72]. Nadalje, prekomjerna ekspresija Rab1A u stanicama HeLa koje eksprimiraju ljudski Tau i primarnim neuronima korteksa štakora spriječila je fragmentaciju GA, dok je utišavanje GTPaze pomoću siRNA izazvalo njezinu fragmentaciju [16,17].

Primijetili su da se Rab1A ko-lokalizira s GM130 u primarnim kulturama neurona iz korteksa štakora [16]. Još jedan učinak utišavanja Rab1A bio je pojačana regulacija lučenja Tau. Stoga su autori predložili da bi Rab1 mogao biti terapijski cilj za modulaciju Golgijeve dinamike i lučenja Tau u AD [16]. Ukratko, frakcioniranje GA povezano je s fosforilacijom Tau [71], nakupljanjem pTau u NFT [72] i lučenjem Tau [16]. Stoga bi regulacija Rab1 GTPaze mogla modulirati takve neurodegenerativne procese. Što se tiče PD-a, dopaminergički neuroni također pokazuju GA fragmentaciju. Točnije, dopaminergički neuroni iz substantia nigra par compacta koji prekomjerno eksprimiraju ljudski -syn pokazuju GA fragmentaciju, koja se smanjuje kod prekomjerne ekspresije Rab1A [17].

Osim toga, osim spašavanja fragmentacije GA, prekomjerna ekspresija Rab1A u dopaminergičkim neuronima izazvala je poboljšanja motoričkih funkcija. Suprotno tome, prekomjerna ekspresija Rab1A (Rab1A-∆CC) koja se ne može ispisati nije uspjela spasiti GA od fragmentacije. Ovo je pokazalo važnost Rab1A u održavanju integriteta GA, a posljedično iu kontroli motoričkih funkcija [17]. Ovi podaci sugeriraju da bi prekomjerna ekspresija Rab1A GTPaze mogla biti terapijski pristup za ovu patologiju. Nedavna studija analizirala je dopaminergičke neurone iz substancije nigre pacijenata s PD-om i pokazala je da je GA fragmentiran i da preživjeli neuroni pokazuju visoku prekomjernu ekspresiju Rab1 GTPaze [18].

Autori sugeriraju da bi ova prekomjerna ekspresija Rab1 mogla inducirati fragmentaciju GA pomoću dva predložena teorijska mehanizma: (1) prekomjerno izražen Rab1 bi mogao promijeniti ER-Golgijev transport, uzrokujući stoga neravnotežu u GA; (2) Rab1 bi mogao biti u interakciji s Golgin-84, što bi induciralo fragmentaciju [18]. Sveukupno, postoje razlike u vezi s ulogom Rab1 u induciranju ili sprječavanju fragmentacije GA kod PD-a. Osim AD i PD, ALS je još jedna neurodegenerativna bolest koja predstavlja fragmentaciju GA. Čini se da su glavni uzrok tome poremećaji u sekretornom putu koji ovisi o Rab1 [70]. Stoga su Rab1 i njegova uloga u održavanju integriteta GA uključeni u različite neurodegenerativne bolesti.

2.1.3. Rab1 i kontrola autofagosoma

Rab1 GTPaza, zajedno s drugim Rab GTPazama kao što su Rab5, Rab7, Rab9A, Rab11, Rab23, Rab32 i Rab33B, sudjeluje u formiranju autofagosoma [73] na njegovom početku regrutiranjem proteina 9 povezanog s autofagijom (Atg9), transmembranski protein odgovoran za transport membrana do fagofora, što je struktura koja prethodi formiranju autofagosoma [74,75]. Kao što je ranije spomenuto, prekomjerna ekspresija -syn uzrokuje fragmentaciju GA. To dovodi do disregulacije autofagije u staničnoj liniji humanog neuroblastoma SKNSH, HeLa, HEK293 i M7- -syn miševa [20]. Winslow i kolege opisali su da -syn mijenja aktivnost Rab1A/Atg9 osi. Prilikom utišavanja Rab1A i prekomjerne ekspresije -syn, protein Atg9 prestao se lokalizirati na perinuklearnom položaju i prešao na difuznu distribuciju, što je rezultiralo smanjenjem stvaranja autofagosoma [20]. Stoga bi povećanje aktivnosti Rab1A moglo pogodovati autofagiji i stoga smanjiti ozbiljnost bolesti, jer bi se ovaj mehanizam mogao koristiti za recikliranje i eliminaciju proteinskih agregata.

2.2. Rab5

Rab5 igra važnu ulogu u endocitozi, odgovoran je za fuziju endocitnih vezikula koje dolaze iz plazma membrane kako bi se formirali rani endosomi. Ovim mehanizmom Rab5 regulira internalizaciju i promet membranskih receptora [76]. Dva GEF-a opisana za Rab5 su Ras/Rab Interactor 3 (RIN3) i Rabex5. RIN3 je član RIN obitelji GEF-ova, zajedno s RIN1 i RIN2. Sve tri imaju Vps9 domenu, koja je Rab5-specifična GEF katalitička domena [77]. Što se tiče Rabex5, on je najbolje shvaćen član GEF-ova koji sadrže Vps9 domenu. Osim svoje katalitičke domene, Rabex5 sadrži vezno mjesto Rabaptin5, što je Rab5 efektorska molekula. Stoga se Rabex5 čvrsto veže za Rab5-regulirani Rabaptin5, koji zauzvrat regulira aktivnost Rabex5 GEF, tvoreći povratnu petlju [78]. Rab5 regrutira Rabaptin5 u ranim endosomima, a potonji je odgovoran za spajanje i fuziju membrana [79].

Nakon što se aktivira, kompleks Rabex5/Rab5/Rabaptin5 lokaliziran je u endocitnim vezikulama i ranim endosomima [79-81]. Tri molekule rade na stabilizaciji aktivnog Rab5 nakon što dosegne svoju ciljanu lokalizaciju, tvoreći petlju pozitivne povratne sprege koja potencira ovaj put [38]. Kao što je gore opisano signaliziranje Rab5 prema Rabaptinu5 [79], Rab5 može signalizirati putem kompleksa PI3K hVPS34-p150, koji povećava razine PI3P u ranim endosomima [25,82,83]. Ovaj PI3P dopušta regrutiranje EEA1, druge Rab5 efektorske molekule koja regulira pristajanje endocitnih vezikula prije njihove fuzije s ranim endosomima [84]. Štoviše, hVPS34-p150 može aktivirati petlju negativne povratne sprege aktiviranjem TBC1D2 GAP-ova, što rezultira inaktivacijom Rab5 GTPaze [85].

GAP-ovi TBC1D3, RUTBC3 i USP6NL koji sadrže TBC domenu opisani su kao Rab5 GAP-ovi [12,41]. Uloga Rab5 u neurodegenerativnim bolestima ograničena je na endosomsku trgovinu. S tim u vezi, različite studije otkrile su povećanje aktivnosti Rab5 u AD [12,22,86–91], kao i u mišjim modelima PD [12,92,93]. U Huntingtonovoj bolesti (HD), Rab5 također kontrolira pokretljivost ranih endosoma. HD je uzrokovan mutacijama u proteinu huntingtin (Htt), koji se nalazi na GA i vezikulama. Htt tvori kompleks s Htt-povezanim proteinom 40 (HAP40) i služi kao efektorska molekula Rab5 [94]. U HD-u, HAP40 je reguliran na gore i kompleks Htt-HAP40 je poremećen. Posljedično, pokretljivost ranih endosoma je smanjena [94]. Stoga bi Rab5 mogao biti terapijski cilj za poboljšanje endosomske pokretljivosti kod HD-a.

2.2.1. Rab5 i APP Processing

Anomalije u endocitnom prometu jedna su od glavnih karakteristika AD, a prema Cataldu i suradnicima prethode depozitima A [95]. Kasnija studija pokazala je da prekomjerna ekspresija Rab5 može reproducirati takve endocitne anomalije povećanjem visoko aktivne obrade APP-a u endosomima [22]. Prekomjerna ekspresija Rab5 u mišjim stanicama izazvala je endocitne promjene povezane s AD-om, poput prisutnosti velikih endosoma sličnih onima uočenim u neuronima iz mozgova AD [22]. Nadalje, prekomjerna ekspresija Rab5 povećala se 2,5 puta u odnosu na razine izlučivanja A 1-40 i A 1-42 [22].

Autori su također primijetili povećanje razine CTF-a. Ti se CTF-ovi kolokaliziraju s ranim endosomima, što ukazuje na izravan odnos između endosomskog puta, stvaranja CTF-a i proizvodnje A. Stoga bi endosomske anomalije uočene kod AD mogle biti povezane s nedostacima u proteolizi APP [22]. Ovo sugerira da bi Rab5 mogao biti terapeutski cilj zbog svoje važnosti u kontroli obrade APP-a i posljedično, u A 1-40 i A 1-42 generaciji. Također je opisana uloga CTF-a u regrutiranju homologije plekstrina i adaptorskog proteina koji sadrži fosfotirozin veznu domenu i motiv patentnog zatvarača leucina (APPL1) [91]. U endosomima, APPL1 stabilizira aktivni Rab5-GTP, što dovodi do patološke disregulirane endocitoze [91].

Uzimajući u obzir ulogu Rab5 u endosomskom putu, Grbovic i suradnici tvrde da disregulacije u endosomima dovode do povećanja CTF [22], a Kim i suradnici tvrde da CTF induciraju te endosomske disregulacije [91]. Dodatno, utišavanje shRNA BACE1 vratilo je endocitne defekte, sugerirajući da bi proteoliza APP mogla biti uzrok endocitnih defekata [96]. U zaključku, ove studije ukazuju na pozitivnu povratnu spregu u kojoj obrada APP-a može dovesti do disregulacije endosomalnog puta, a defekti u endocitnom putu mogu zauzvrat povećati procesiranje APP-a

2.2.2. Rab5 i Sjekiraonalni

Transport U normalnim bazalnim kolinergičkim neuronima prednjeg mozga (BFCN), čimbenik rasta živaca (NGF) veže se i aktivira receptor TrkA na krajevima aksona. Kompleks NGF-TrkA zatim se internalizira endocitozom posredovanom Rab5. Endosomi se transportiraju u retrogradnom smjeru kroz mikrotubule do tijela stanice, gdje se signali rasta i diferencijacije šire do jezgre [12]. U patološkim stanjima dolazi do prekomjerne aktivacije Rab5 u BFCN neuronima, što rezultira većim ranim endosomima. Ovi endosomi ometaju retrogradni aksonski transport NGF signala. Dodatno, povećanje aktivnosti Rab5 također može utjecati na motoričke proteine, mijenjajući aksonalni transport, a defekti u transportu trofičnih signala do tijela stanice dovode do atrofije neurona [12].

U tom smislu, GEF RIN3 je povezan s prekomjernom aktivacijom Rab5 u transportu trofičkih signala [77,97]. Štoviše, studije povezanosti genoma (GWAS) povezale su RIN3 s rizikom razvoja AD [12,98-100]. Međutim, još treba razjasniti jesu li funkcija i ekspresija RIN3 promijenjeni u AD-u i jesu li drugi Rab5 GEF-ovi u osnovi prekomjerne aktivacije Rab5 u AD-u [12]. Unatoč tome, postoji još jedan mogući mehanizam koji bi mogao objasniti prekomjernu aktivaciju Rab5. Kao što je prethodno spomenuto, CTF regrutira APPL1 u endosome, što stabilizira Rab5-GTP. Ovaj kompleks dovodi do nereguliranih endocitnih putova, kao i do promijenjenog aksonskog transporta [12,91]. Što se tiče PD-a, mišji modeli koji konstitutivno eksprimiraju humani -syn pokazali su aktivaciju Rab5 ovisnu o -syn-u koja dovodi do disregulacije u Rab5 i dynein kompleksu što rezultira endosomskom disfunkcijom. To bi mogao biti temeljni mehanizam koji bi objasnio disregulaciju u retrogradnom aksonskom transportu i posljedičnu atrofiju neurona u PD [12,93].

2.3. Rab7

Rab7 GTPaza regulira vezikularni transport, posebno kasni endocitni put [101]. Predstavlja temeljnu ulogu u sazrijevanju endosoma, u transportu endosoma i lizosoma, u spajanju kasnih endosoma i lizosoma te u lizosomskoj biogenezi [26,101,102]. Rab7 također sudjeluje u prometu autofagosoma [103]. Uzimajući u obzir važnost svih ovih procesa, Rab7 je predložen kao terapeutska meta za rak [26] i neurodegeneraciju [104]. Aktivaciju Rab7 posreduje GEF Mon1-Ccz1 [27,105,106]. Mehanizam kojim Mon1-Ccz1 posreduje u aktivaciji Rab7 sastoji se od njegove sposobnosti da bude efektorska molekula Rab5 i stupa u interakciju s PI3P u ranim endosomima [102,107].

Na taj način dolazi do razmjene između Rab5 i Rab7 i endosom prelazi iz ranog endosoma u kasni endosom [105,107]. S druge strane, GAP-ovi opisani za Rab7 su TBC1D2A, TBC1D5, TBC1D15 i EVI5-L [41]. Rab7-GTP u kasnim endosomima i lizosomima može signalizirati preko svoje efektorske molekule Rab-interagirajući lizosomalni protein (RILP) [108]. RILP regrutira motoričke komplekse dinein-dinaktin i posljedično, endosomi se transportiraju prema minus kraju mikrotubula [109]. Protein 1 koji sadrži FYVE i coiled-coil domenu (FYCO1) još je jedna efektorska molekula Rab7 koja posreduje u vezikularnom transportu prema plus kraju mikrotubula [110]. Štoviše, FYCO1 tvori kompleks s Rab7 i proteinom LC3, koji je zadužen za sazrijevanje autofagosoma [111].

Nakon što se ovaj kompleks formira, autofagne vezikule transportiraju se prema plus kraju mikrotubula [110]. Što se tiče živčanog sustava, i autofagija i endolizosomski promet kojim upravlja Rab7 povezani su s patologijama kao što su AD, PD, HD ili Charcot-Marie-Tooth tip 2B (CMT2B) [104,112]. Rab7 je uključen u promet toksičnih peptida kao što su A vezikule [23] ili izlučivanje Tau u AD [29] i klirens -syn u PD [30].

2.3.1. Rab7 i Tralučenje toksičnih peptida

Kod AD, nakupljanje A može biti posljedica disregulacije u procesuiranju APP-a, kao i defekta u eliminaciji toksičnih oligomera [113]. Stoga je endolizosomski promet pod kontrolom Rab5 i Rab7- važan za uklanjanje toksičnih peptida kao što je A. S tim u vezi, studije na N2a staničnim linijama neuroblastoma miša, kao i na primarnim neuronskim kulturama miševa, pokazale su da je A 1-42 internaliziran u Rab5-pozitivne rane endosome u početnim stanjima i kasnije, kod Rab7-pozitivnih kasnih endosoma [23]. Ovi podaci sugeriraju da je endocitni put aktivno uključen u klirens i/ili eliminaciju A.

Prekomjerna ekspresija dominantno-negativnih oblika Rab5 i Rab7, nesposobnih za vezanje i prijenos signala kroz svoje efektorske molekule, inhibirala je kolokalizaciju ovih GTPaza s A 1-42 monomerima i oligomerima u endosomima [23]. Ovo podupire uključenost ovih GTPaza i endocitoze u klirens A. Neka istraživanja sugeriraju da neregulirani endolizosomalni put posredovan Rab5- i Rab7-ima toksične učinke [24,87,88]. Postmortem AD mozgovi su pokazali povećane razine Rab5 i Rab7 proteina [87,88]. Štoviše, studija na primarnim neuronima iz korteksa štakora pokazala je da Rab5- i Rab7-posredovana aktivna internalizacija A 1-42 dovodi do smrti neurona [24], i dodaje da opći inhibitor endocitoze fenil arzin oksid (PAO) smanjio je toksičnost.

Ovi rezultati sugeriraju da bi blokiranje Rab5- i Rab7-posredovane endocitoze moglo biti terapijska strategija za sprječavanje smrti neurona u AD [24]. Što se tiče Tau, mozgovi pacijenata s brzo progresivnom AD i 5XFAD miševima pokazali su povećane razine proteina Rab7A kolokaliziranog s pTau [28]. Štoviše, prekomjerna ekspresija Rab7A u primarnim kortikalnim neuronima i HeLa stanicama inducirala je lučenje Tau [29]. Nasuprot tome, utišavanje Rab7A, kao i prekomjerna ekspresija njegovog dominantno-negativnog oblika, djelomično je blokiralo izlučivanje Tau [29]. Svi ovi podaci mogu značiti da bi disregulacija Rab7 mogla pridonijeti nakupljanju Tau, kao i širenju njegovih toksičnih učinaka u AD [114].

2.3.2. Rab7 i endolizosomski promet membranskih receptoratorovi

Disfunkcija endolizosomskog puta povezana je s PD-om, a geni koji sudjeluju u tom putu povezani su s ovom patogenezom [115]. Lrrk, homolog LRRK2 kinaze u D. melanogaster, stupa u interakciju s Rab7 u membranama kasnih endosoma i lizosoma i pokazalo se da inhibira perinuklearnu lokalizaciju lizosoma ovisnu o Rab7- [116]. Nasuprot tome, mutirani oblik Lrrk, analog patogenog LRRK2G2019S, potiče perinuklearno grupiranje lizosoma. Prema tome, Rab7 i LRRK2G2019S mogli bi biti u podlozi disfunkcionalnog endolizosomskog puta u PD [116].

Opisano je da LRRK2 regulira Rab7-ovisan endocitni promet receptora epidermalnog faktora rasta (EGFR) [31]. Ekspresija mutantnog LRRK2G2019S uzrokovala je odgodu ranog do kasnog endosomalnog prometa EGFR-a i posljedičnu odgodu u razgradnji EGFR-a. Ti su nedostaci poništeni prekomjernom ekspresijom konstitutivno aktivnog oblika Rab7 [31]. Sposobnost Rab7 da regulira trgovinu receptorima već je korištena u terapijskim pristupima za multiplu sklerozu (MS) [33]. Prekomjerna ekspresija Rab7 može regulirati prisutnost receptora sličnih Tollu (TLR) i stoga kontrolirati upalni odgovor [33]. Međutim, Rab7 nije jedina Rab GTPaza koja regulira promet receptora.

Rab11, na primjer, kontrolira promet TLR-a putem endosoma [117]. U tom smislu, prisutnost specifičnih polimorfizama jednog nukleotida (SNP) u Evi5, Rab11GAP, povezana je s većom osjetljivošću za razvoj MS [118]. Ovo sugerira da bi Rab11 mogao reciklirati TLR receptore, utječući na urođeni imunitet. Nedavno je Evi5 povezivan s MS [119] i korišten je kao marker za bolest [120]. Ovi podaci pozivaju na istraživanje regulacije signalizacije Rab GTPase kao pristupa promicanju recikliranja receptora u neurodegenerativnim bolestima.

2.3.3. Parkin/Rab7/RILP

Parkin je ubikvitin E3 ligaza povezana s PD-om, jer su mutacije u ovom enzimu drugi najčešći genetski čimbenik rizika za razvoj bolesti [121]. Rab7 K38 ubikvitinacija rezidua održava Rab7 u aktivnom obliku i posljedično utječe na endocitni promet [32]. Eksperimenti s primarnim kulturama fibroblasta pacijenata s PD-om s nedostatkom funkcionalnog Parkina i u stanicama s prekomjernom ekspresijom Rab7K38R mutanta koji se ne može sveprisutnošću pokazati da je u tim situacijama sposobnost vezanja Rab7 na njegovu efektorsku molekulu Rab7-Interacting Lysosomal Protein (RILP) je smanjen [32]. RILP je Rab7 efektorska molekula uključena u transdukciju signalizacije osi Parkin/Rab7.

Konkretno, RILP regrutira motoričke komplekse dinein-dinaktin tako da se vezikule mogu transportirati prema minus kraju mikrotubula [108,109]. Prema Songu i suradnicima, disregulacija Rab7 mogla bi biti glavni uzrok endocitnih promjena u Parkin-/- stanicama. Štoviše, ove disregulacije osi Parkin/Rab7/endocitoza mogle bi pridonijeti progresiji patologije PD [32].

2.3.4. Rab7 i Autofagija

Rab7 u svom aktivnom obliku može regulirati stvaranje autofagosoma, kao i njegovo sazrijevanje i transport prema mikrotubulima [104]. Proučavanje Rab7 i njegove uloge u autofagiji moglo bi olakšati razvoj strategija za liječenje neurodegenerativnih bolesti [104]. Rab7 je povezan s autofagijom kod CMT2B neurodegenerativne bolesti. Ova patologija je uzrokovana različitim missense mutacijama u Rab7 koje dovode do smanjene lokalizacije Rab7 u autofagičnim odjeljcima i smanjene autofagije [8,34]. Opisano je da je CMT2B izravna posljedica disfunkcije Rab7, iako još treba razjasniti je li patologija posljedica smanjenja autofagijskog puta zbog gubitka funkcije Rab7 [8].

Što se tiče PD-a, studije s HEK293 i D. melanogaster -synA53T pokazale su da prekomjerna ekspresija Rab7 pogoduje uklanjanju -syn agregata [30]. Štoviše, autori su identificirali da je Rab7 lokaliziran u granulama neuromelanina u ljudskoj substanciji nigra [30]. Granule Rab7/neuromelanina su zaštitne organele slične autofagosomima. Rab7 sudjeluje u biogenezi ovih granula i uklanjanju -syn agregata [30]. Uz to, prekomjerna ekspresija Rab7 u D. melanogaster spasila je fenotip i poboljšala lokomotorne nedostatke [30]. Unatoč tome, Rab7 nije jedina Rab GTPaza za koju je opisano da kontrolira klirens -syn putem autofagije. Nedavno je pokazano da Rab27b kontrolira endolizosomski promet, a time i izlučivanje i uklanjanje -syn putem autofagije [122].

Sukladno tome, utišavanje Rab27b pomoću shRNA povećalo je unutarstanične razine netopljivog -syn. Dodatno, post mortem mozgovi pacijenata s PD-om pokazali su povećane razine proteina Rab27b [122]. Iako nisu povezane s autofagijskim procesima, druge Rab GTPaze također sudjeluju u homeostazi -syn; dok neki od njih pogoduju čišćenju agregata, drugi favoriziraju njihovo stvaranje. Na primjer, Rab39B klasično regulira transport između GA i postsinaptičke membrane. U PD-u, mutacije u Rab39B rezultirale su gubitkom funkcije GTPaze i, posljedično, disregulacijom -syn homeostaze [123,124].

Suprotno tome, pacijenti s PD-om pokazali su povećane razine Rab35, koji potiče povećanu agregaciju i izlučivanje -synA53T [125]. Osim toga, primarne stanične kulture i in vivo eksperimenti pokazali su da LRRK2-posredovana Rab5 disregulacija izaziva tešku neurotoksičnost i gubitak dopaminergičkih neurona [57,58].

zašto jedenje cistanche može spriječiti Alzheimerovu bolest i Parkinsonovu bolest

Cistanche sadrži nekoliko aktivnih spojeva za koje se pokazalo da imaju neuroprotektivne učinke, što može pomoći u sprječavanju ili usporavanju napredovanja Alzheimerove bolesti i Parkinsonove bolesti. Ovi spojevi uključuju ehinakozid, akteozid i verbaskozid, za koje je utvrđeno da imaju protuupalna i antioksidativna svojstva koja mogu zaštititi neurone od oštećenja i smanjiti upalu u mozgu. Osim toga, pokazalo se da cistanche povećava razinu acetilkolina, neurotransmitera koji je važan za učenje i pamćenje, a koji se može smanjiti kod Alzheimerove bolesti. Iako je potrebno više istraživanja kako bi se u potpunosti razumjeli potencijalni dobrobiti cistanche za prevenciju ovih bolesti, ovi početni nalazi su obećavajući.

Referenca

19. Cooper, AA; Gitler, AD; Cashikar, A.; Haynes, CM; Hill, KJ; Bhullar, B.; Liu, K.; Xu, K.; Strathearn, KE; Liu, F.; et al. Alfa-sinuklein blokira ER-Golgijev promet, a Rab1 spašava gubitak neurona u Parkinsonovim modelima. Znanost 2006, 313, 324–328. [CrossRef]

20. Winslow, AR; Chen, C.-W.; Corrochano, S.; Acevedo-Arozena, A.; Gordon, DE; Peden, AA; Lichtenberg, M.; Menzies, FM; Ravikumar, B.; Imarisio, S.; et al. -Sinuklein narušava makroautofagiju: implikacije za Parkinsonovu bolest. J. Cell Biol. 2010, 190, 1023–1037. [CrossRef] [PubMed] 21. Soo, KY; Halloran, M.; Sundaramoorthy, V.; Parakh, S.; Toth, RP; Southam, KA; McLean, CA; Lock, P.; Kralj, A.; Farg, MA; et al. Rab1-ovisna ER-Golgijeva transportna disfunkcija čest je patogeni mehanizam kod SOD1, TDP-43 i ALS-a povezanog s FUS-om. Acta Neuropathol. 2015, 130, 679–697. [CrossRef] [PubMed]

22. Grbović, OM; Mathews, PM; Jiang, Y.; Schmidt, SD; Dinakar, R.; Summers-Terio, NB; Ceresa, BP; Nixon, RA; Cataldo, AM Rab5-stimulirana pojačana regulacija endocitnog puta povećava unutarstanične razine beta-cijepanog amiloidnog prekursora proteina karboksil-terminalnog fragmenta i proizvodnju Abeta. J. Biol. Chem. 2003, 278, 31261-31268. [CrossRef] [PubMed]

23. Li, J.; Kanekiyo, T.; Shinohara, M.; Zhang, Y.; Liu, MJ; Xu, H.; Bu, G. Diferencijalna regulacija amiloidno-endocitnog prometa i lizosomske razgradnje izoformama apolipoproteina E. J. Biol. Chem. 2012, 287, 44593–44601. [CrossRef]

24. Pjesma, MS; Baker, GB; Todd, KG; Kar, S. Inhibicija internalizacije -amiloida1-42 smanjuje neuronsku smrt stabiliziranjem endosomalno-lizosomalnog sustava u kortikalnim kultiviranim neuronima štakora. Neuroznanost 2011, 178, 181–188. [CrossRef] [PubMed]

25. Gillooly, DJ; Raiborg, C.; Stenmark, H. Fosfatidilinozitol 3-fosfat se nalazi u mikrodomenama ranih endosoma. Histochem. Cell Biol. 2003, 120, 445–453. [CrossRef] [PubMed]

26. Guerra, F.; Bucci, C. Uloga proteina RAB7 u progresiji tumora i kemorezistenciji na cisplatin. Cancers 2019, 11, 1096. [CrossRef] 27. Nordmann, M.; Cabrera, M.; Perz, A.; Bröcker, C.; Ostrowicz, C.; Engelbrecht-Vandré, S.; Ungermann, C. Mon1-Ccz1 kompleks je GEF kasnog endosomskog Rab7 homologa Ypt7. Curr. Biol. 2010, 20, 1654–1659. [CrossRef] [PubMed]

29. Zafar, S.; Younas, N.; Correia, S.; Shafiq, M.; Tahir, W.; Schmitz, M.; Ferrer, I.; Andréoletti, O.; Zerr, I. Promijenjeni regulatorni odgovor Rab7a i Tau specifičan za soj u Creutzfeldt-Jakobovoj bolesti i Alzheimerovoj bolesti. Mol. Neurobiol. 2017, 54, 697–709. [CrossRef] 29. Rodriguez, L.; Mohamed, N.; Desjardins, A.; Lippé, R.; Fon, EA; Leclerc, N. Rab7A regulira lučenje tau. J. Neurochem. 2017, 141, 592–605. [CrossRef]

30. Dinter, E.; Saridaki, T.; Nippold, M.; Šljiva, S.; Diederichs, L.; Komnig, D.; Fensky, L.; svibanj, C.; Marcus, K.; Voigt, A.; et al. Rab7 inducira čišćenje -sinukleinskih agregata. J. Neurochem. 2016, 138, 758–774. [CrossRef]

31. Gómez-Suaga, P.; Rivero-Ríos, P.; Fdez, E.; Blanca Ramírez, M.; Ferrer, I.; Aiastui, A.; López De Munain, A.; Hilfiker, S. LRRK2 odgađa promet degradativnih receptora sprječavanjem kasnog endosomskog pupanja kroz smanjenje aktivnosti Rab7. Pjevušiti. Mol. Genet. 2014, 23, 6779–6796. [CrossRef] [PubMed]

32. Song, P.; Trajković, K.; Tsunemi, T.; Krainc, D. Parkin modulira endosomsku organizaciju i funkciju endo-lizosomskog puta. J. Neurosci. 2016, 36, 2425–37. [CrossRef] [PubMed]

34. Klaver, EJ; van der Pouw Kraan, TCTM; Laan, LC; Kringel, H.; Cummings, RD; Bouma, G.; Kraal, G.; van Die, I. Trichuris suis topljivi proizvodi induciraju Rab7b ekspresiju i ograničavaju TLR4 odgovore u ljudskim dendritskim stanicama. Genes Immun. 2015, 16, 378–387. [CrossRef] [PubMed]

34. Colecchia, D.; Stasi, M.; Leonardi, M.; Manganelli, F.; Nolano, M.; Veneziani, BM; Santoro, L.; Eskelinen, E.-L.; Chiariello, M.; Bucci, C. Promjene autofagije u perifernoj neuropatiji Charcot-Marie-Tooth tipa 2B. Autofagija 2018, 14, 930–941. [CrossRef] [PubMed]

35. Hill, K.; Li, Y.; Bennett, M.; McKay, M.; Zhu, X.; Shern, J.; Torre, E.; Lah, JJ; Levey, AI; Kahn, RA Munc18 Interacting Proteins: proteini ovojnice ovisni o faktoru ADP-ribozilacije koji reguliraju promet Alzheimerovog prekursorskog proteina. J. Biol. Chem. 2003, 278, 36032–36040. [CrossRef] 36. Bansal, A.; Kirschner, M.; Zu, L.; Cai, D.; Zhang, L. Kokosovo ulje smanjuje ekspresiju amiloidnog prekursora proteina (APP) i izlučivanje amiloidnih peptida inhibicijom ADP-ribozilacijskog faktora 1 (ARF1). Brain Res. 2019, 1704, 78–84. [CrossRef]

37. Griffin, EF; Yan, X.; Caldwell, KA; Caldwell, GA Različite funkcionalne uloge neuroprotekcije posredovane Vps41-u modelima neurodegeneracije Alzheimerove i Parkinsonove bolesti. Pjevušiti. Mol. Genet. 2018, 27, 4176–4193. [CrossRef] [PubMed]

38. Goud, B.; Liu, S.; Storrie, B. Rab proteini kao glavne determinante strukture Golgijevog kompleksa. Male GTPaze 2018, 9, 66–75. [CrossRef] [PubMed]

39. Homma, Y.; Hiragi, S.; Fukuda, M. Rab obitelj malih GTPaza: Ažurirani pogled na njihovu regulaciju i funkcije. FEBS J. 2021, 288, 36–55. [CrossRef]

40. Marat, AL; Dokainish, H.; McPherson, PS DENN domena proteina: Regulatori Rab GTPases. J. Biol. Chem. 2011, 286, 13791-13800. [CrossRef]

41. Müller, MP; Goody, RS Molekularna kontrola aktivnosti Raba pomoću GEF-ova, GAP-ova i GDI-ja. Male GTPaze 2018, 9, 5–21. [CrossRef] [PubMed]

43. Koch, D.; Rai, A.; Ali, I.; Bleimling, N.; Friese, T.; Brockmeyer, A.; Janning, P.; Goud, B.; Itzen, A.; Müller, zastupnik; et al. Padajući postupak za identifikaciju nepoznatih GEF-ova za male GTPaze. Male GTPaze 2016, 7, 93–106. [CrossRef]

43. Steger, M.; Tonelli, F.; Ito, G.; Davies, P.; Trost, M.; Vetter, M.; Wachter, S.; Lorentzen, E.; Duddy, G.; Wilson, S.; et al. Fosfoproteomika otkriva da kinaza LRRK2 Parkinsonove bolesti regulira podskup Rab GTPaza. Elife 2016, 5, e12813. [CrossRef] [PubMed]

44. Madero-Pérez, J.; Fdez, E.; Fernández, B.; Ordóñez, AJL; Ramírez, MB; Gómez-Suaga, P.; Waschbüsch, D.; Lobbestael, E.; Baekelandt, V.; Nairn, AC; et al. Mutacije povezane s Parkinsonovom bolešću u LRRK2 uzrokuju centrosomalne defekte preko Rab8a fosforilacije. Mol. Neurodegener. 2018, 13, 3. [CrossRef] 45. Hutagalung, AH; Novick, PJ Uloga Rab GTPases u membranskom prometu i fiziologiji stanice. Physiol. Rev. 2011, 91, 119–149. [CrossRef]

46. ​​Carroll, KS; Hanna, J.; Simon, I.; Krise, J.; Barbero, P.; Pfeffer, SR Uloga Rab9 GTPaze u olakšavanju regrutiranja receptora putem TIP47. Znanost 2001, 292, 1373–1376. [CrossRef] [PubMed]

47. Liu, T.-T.; Gomez, TS; Sackey, BK; Billadeau, DD; Burd, CG Rab GTPazna regulacija izvoza tereta posredovanog retromerom tijekom sazrijevanja endosoma. Mol. Biol. Cell 2012, 23, 2505–2515. [CrossRef]

48. Horgan, CP; Mccaffrey, MW Rab GTPases i motori mikrotubula. Biochem. Soc. Trans. 2011, 39, 1202–1206. [CrossRef]

49. Lindsay, AJ; Jollivet, F.; Horgan, CP; Khan, AR; Raposo, G.; McCaffrey, MW; Goud, B. Identifikacija i karakterizacija višestrukih novih Rab-miozin Va interakcija. Mol. Biol. Cell 2013, 24, 3420–3434. [CrossRef] [PubMed]

50. Nagashima, K.; Torii, S.; Yi, Z.; Igarashi, M.; Okamoto, K.; Takeuchi, T.; Izumi, T. Melanophilin izravno povezuje Rab27a i miozin Va kroz svoje različite namotane regije. FEBS Lett. 2002., 517, 233–238. [CrossRef]

51. Guo, Y.; Linstedt, AD Vezanje proteina p115 za spajanje vezikula na GTPazu Rab1b regulira membransko regrutiranje ovojnice COPI vezikula. Ćelija. Logist. 2013, 3, e27687. [CrossRef] [PubMed]

52. Nakamura, N. Nove uloge GM130, cis-Golgijevog matričnog proteina, u staničnim funkcijama višeg reda. J. Pharmacol. Sci. 2010., 112, 255–264. [CrossRef]

53. Nielsen, E.; Christoforidis, S.; Uttenweiler-Joseph, S.; Miaczynska, M.; Dewitte, F.; Wilm, M.; Hoflack, B.; Zerial, M. Rabenosyn-5, novi efektor Rab5, kompleksiran je s hVPS45 i regrutiran u endosome preko prstne domene FYVE. J. Cell Biol. 2000, 151, 601–612. [CrossRef]

54. Rahajeng, J.; Caplan, S.; Naslavsky, N. Zajedničke i različite uloge vezanih partnera Rabenosyna-5 i Vps45 u regulaciji endocitnog prometa u stanicama sisavaca. Exp. Cell Res. 2010, 316, 859–874. [CrossRef]

55. Zhang, X.; Huang, TY; Yancey, J.; Luo, H.; Zhang, Y.-W. Uloga Rab GTPaze u Alzheimerovoj bolesti. ACS Chem. Neurosci. 2019, 10, 828–838. [CrossRef]

56. Shi, M.; Shi, C.; Xu, Y. Rab GTPases: Ključni igrači u molekularnom putu Parkinsonove bolesti. Ispred. Ćelija. Neurosci. 2017, 11, 81. [CrossRef] [PubMed]

57. Jeong, GR; Jang, E.-H.; Bae, JR; Jun, S.; Kang, HC; Park, C.-H.; Shin, J.-H.; Yamamoto, Y.; Tanaka-Yamamoto, K.; Dawson, VL; et al. Disregulirana fosforilacija Rab GTPaza pomoću LRRK2 inducira neurodegeneraciju. Mol. Neurodegener. 2018, 13, 8. [CrossRef]

59. Steger, M.; Diez, F.; Dhekne, HS; Lis, P.; Nirujogi, RS; Karayel, O.; Tonelli, F.; Martinez, TN; Lorentzen, E.; Pfeffer, SR; et al. Sustavna proteomska analiza fosforilacije rabove GTPaze posredovane LRRK2- uspostavlja vezu s ciliogenezom. Elife 2017, 6, e31012. [CrossRef][PubMed]

60. Liu, S.; Storrie, B. Kako Rab proteini određuju Golgijevu strukturu. Int. Rev. Cell Mol. Biol. 2015, 315, 1–22. [PubMed]

60. Ishida, M.; Oguchi, ME; Fukuda, M. Višestruki tipovi čimbenika izmjene guanin nukleotida (GEF) za Rab male GTPaze. Struktura stanice. funkcija 2016, 41, 61–79. [CrossRef] [PubMed]

61. Fukuda, M. TBC proteini: GAP-ovi za malu GTPazu sisavaca Rab? Biosci. Rep. 2011, 31, 159–168. [CrossRef] [PubMed]

63. Sztul, E.; Lupashin, V. Uloga čimbenika vezivanja u prometu sekretorne membrane. Am. J. Physiol. Cell Physiol. 2006, 290, C11-C26. [CrossRef]

63. Sztul, E.; Lupashin, V. Uloga faktora vezanja vezikula u prometu ER-Golgijeve membrane. FEBS Lett. 2009, 583, 3770–3783. [CrossRef]

64. Grosshans, BL; Ortiz, D.; Novick, P. Rabs i njihovi efektori: Postizanje specifičnosti u membranskom prometu. Proc. Natl. Akad. Sci. SAD 2006, 103, 11821–11827. [CrossRef] [PubMed]

66. Grabski, R.; Hay, J.; Sztul, E. Tethering faktor P115: Novi model za tether-SNARE interakcije. Bioarhitektura 2012, 2, 175–180. [CrossRef] [PubMed]

66. Hu, F.; Shi, X.; Li, B.; Huang, X.; Morelli, X.; Shi, N. Strukturna osnova za interakciju između Golgijevog proteina GRASP65 ponovnog sastavljanja i slaganja i Golgijevog matričnog proteina GM130. J. Biol. Chem. 2015, 290, 26373–26382. [CrossRef] [PubMed]

67. Zhang, X.; Wang, Y. SHVAĆANJA u Golgi strukturi i funkciji. Ispred. Cell Dev. Biol. 2015, 3, 84. [CrossRef] 68. Alvarez, C.; Garcia-Mata, R.; Brandon, E.; Sztul, E. COPI regrutiranje je modulirano mehanizmom ovisnim o Rab1b. Mol. Biol. Cell 2003, 14, 2116–2127. [CrossRef] [PubMed]

70. Monetta, P.; Slavin, I.; Romero, N.; Alvarez, C. Rab1b je u interakciji s GBF1 i modulira dinamiku ARF1 i povezanost COPI. Mol. Biol. Cell 2007, 18, 2400–2410. [CrossRef] [PubMed]

70. Martínez-Menárguez, J.Á.; Tomás, M.; Martínez-Martínez, N.; Martínez-Alonso, E. Golgi Fragmentacija u neurodegenerativnim bolestima: postoji li zajednički uzrok? Ćelije 2019, 8, 748. [CrossRef]

nastavit će se

Alazne Arrazola Sastre 1,2, Miriam Luque Montoro 1 , Hadriano M. Lacerda 3 , Francisco Llavero 1,4,* i José L. Zugaza 1,2,5,

1 Baskijski centar za neuroznanost Achucarro, znanstveni park UPV/EHU, 48940 Leioa, Španjolska; alazne.arrazola@ehu.eus (AAS); miriamluquem@gmail.com (MLM)

2 Odjel za genetiku, fizičku antropologiju i fiziologiju životinja, Sveučilište Baskijske zemlje UPV/EHU, 48940 Leioa, Španjolska

3 Three R Labs, Science Park of the UPV/EHU, 48940 Leioa, Spain; hadrilac@gmail.com 

4 Hospital 12 de Octubre Research Institute (i plus 12), 28041 Madrid, Španjolska 5 IKERBASQUE, Baskijska zaklada za znanost, 48013 Bilbao, Španjolska * Korespondencija: fcollavero.imas12@h12o.es (FL); joseluis.zugaza@ehu.es (JLZ)