Poboljšanje sjećanja na izumiranje farmakološkim i bihevioralnim intervencijama usmjerenim na njegovu reaktivaciju

Za više informacija:ali.ma@wecistanche.com

Poboljšanje izumiranjamemorijafarmakološkim i bihevioralnim intervencijama usmjerenim na njegovu reaktivaciju

Josué Haubrich, Adriano Machado, Flávia Zacouteguy Boos, Ana P. Crestani, Rodrigo O. Sierra, Lucas de Oliveira Alvares i Jorge A. Quillfeldt

Izumiranje je proces koji uključuje novo učenje koje inhibira izražavanje prethodno stečenih sjećanja. Iako je privremeno učinkovito, izumiranje ne briše izvornu asocijaciju straha. Budući da trag izumiranja s vremenom izblijedi, izvornikmemorijamože ponovno oživjeti. S druge strane, učinci jačanja opisani su u nekoliko studija rekonsolidacije uz korištenje različitih bihevioralnih i farmakoloških manipulacija. Kako bismo saznali može li se sjećanje na izumiranje ojačati intervencijama temeljenim na reaktivaciji u zadatku kontekstualnog uvjetovanja straha, započeli smo repliciranjem klasičnog fenomena spontanog oporavka kako bismo pokazali da kratke sesije ponovnog izlaganja mogu spriječiti propadanje traga izumiranja tijekom vremena u dugotrajan način. Pokazalo se da ovo slabljenje straha ovisi o kalcijevim kanalima tipa L i sintezi proteina, što sugerira proces rekonsolidacije iza učinka jačanja izazvanog reaktivacijom. Trag izumiranja također je bio osjetljiv na pojačanje post-reaktivacijskom infuzijommemorija-pojačavajući lijek (NaB), koji je također mogao spriječiti brzo ponovno stjecanje straha (ušteda). Ovi nalazi ukazuju na nove pristupe koji se temelje na reaktivaciji koji mogu ojačati sjećanje na izumiranje kako bi se potaknula njegova postojanost. Konstruktivne interakcije između izumiranja i rekonsolidacije mogu predstavljati obećavajući novi pristup u području liječenja poremećaja povezanih sa strahom.

Kliknite na Cistanche i Cistanches za uspomenu

Memorijavraćanje je dinamičan fenomen koji može, pod pravim uvjetima, pokrenuti dva različita procesa, ponovnu konsolidaciju ili izumiranje. Nakon kratke sesije vraćanja u istom kontekstu obuke, prethodno konsolidiranomemorijamože ući u labilno stanje koje zahtijeva de novo sintezu proteina da se ponovno stabilizira i ustraje, proces koji se naziva rekonsolidacija1. Međutim, dugotrajne, nepojačane sesije vraćanja mogu potaknuti izumiranje2. Iako je rekonsolidacija sjećanja na strah opsežno proučavana3, 4, vrlo je malo studija do sada istraživalo mogućnost da bi trag izumiranja bio podvrgnut rekonsolidaciji nakon pronalaženja5-7, a njegovi mogući ishodi i kliničke primjene trenutno su neistraženi8.

Izumiranje smanjuje uvjetovane reakcije kroz proces koji uključuje konsolidaciju novog inhibitornogmemorija; smatra se da se ne radi o odučavanju ili brisanju izvornog traga9, 10. Terapije temeljene na izumiranju obično se koriste za sprječavanje averzivnih odgovora kod pacijenata s poremećajima povezanim sa strahom kao što je posttraumatski stresni poremećaj11, 12. Unatoč tome što je učinkovita intervencija, recidiv često se izvješćuje o simptomima straha13 pokazujući da je, u usporedbi s jakim sjećanjima na strah, izumiranje manje izdržljivo i sklono propadanju. Reakcije na strah mogu se lako oporaviti zbog nekoliko procesa recidiva, kao što su spontani oporavak, ponovna uspostava, obnova i brzo ponovno stjecanje14, 15. U skladu s tim, od velike je važnosti pronaći bolje pristupe za povećanje snage i upornosti izumiranja.

Unatoč tome što su i ponovna konsolidacija i izumiranje potaknuti vraćanjem, oni su različiti procesi. U ponašanju, rekonsolidacija je obično uključena kratkim izlaganjem uvjetovanom podražaju (CS), dok su za izumiranje potrebna duža izlaganja. Osim toga, indukciju rekonsolidacije moduliraju drugi kontekstualni i kognitivni čimbenici zajednički poznati kao granični uvjeti16. Variranjem trajanja izloženosti CS-u, anamnestičko sredstvo će selektivno oštetiti ili ponovnu konsolidaciju izvornog traga ili konsolidaciju.

Laboratorij za psihobiologiju i neuroračunalstvo i neurobiologijuMemorijalaboratorija. Diplomski program neuroznanosti, Universidade Federal do Rio Grande do Sul, PortoAlegre, Brazil. Korespondenciju i zahtjeve za materijale treba uputiti na JH (e-pošta: biohaubrich@gmail.com) ili JAQ (e-pošta: quillfe@ufrgs.br) traga izumiranja17-23. Činjenica da se oba procesa ne odvijaju istovremeno ukazuje na učinak dominacije traga, u smislu da će dominantni trag biti prvi, ako ne i jedini, na kojeg će utjecati bilo kakva smetnja. Dominacija tragova također se događa kada prethodno konsolidirani tragovi straha i izumiranja koegzistiraju, što utječe na njihovo ponovno pronalaženje. U takvim uvjetima, ponovno izlaganje CS-u, koji potencijalno može aktivirati i strah i tragove izumiranja, rezultirat će izražavanjem dominantnog sjećanja i inhibicijom onog drugog2. Kao što je gore objašnjeno, u početku je izumiranje dominantno i lako potiskuje strah. Međutim, s vremenom izvorni trag straha prevladava inhibiciju gašenjem i ponovno postaje dominantno izražen14. Osim toga, postoji dvostruka disocijacija između dva procesa u vezi s molekularnim markerima kao što su Zif26824, kalcineurin19, 25 i BDNF26, što ukazuje da se oba procesa ne odvijaju paralelno.

Često se sugerira da je funkcionalna uloga procesa destabilizacije-restabilizacije iza rekonsolidacije omogućitimemorijaažurirati kako bi zadržao svoju prediktivnu i adaptivnu relevantnost3, 27–29. Na primjer,memorijasadržaj se može ažurirati ugradnjom novih informacija30-34. Osim toga, nekoliko je studija pokazalo da rekonsolidacija može posredovatimemorijapoboljšanje i jačanje30, 35-39 kao i slabljenje pamćenja (bez gašenja) averzivnih iskustava34, 40 . Zanimljivo je da postoje studije koje pokazuju da se u nekim zadacima rekonsolidacija događa samo kada pamćenje još nije na asimptotskoj razini41-43, dodatno naglašavajući njegovu ulogu u jačanju traga pamćenja. Međutim, do sada nije poznato može li se konsolidirani trag izumiranja modificirati ponovnom konsolidacijom.

Ponovna konsolidacija može otvoriti prozor koji omogućuje farmakološku modulaciju reaktiviranogmemorija. To bi bilo paralelno s klasičnim eksperimentima u kojima post-reaktivacijska infuzija amnestičkih sredstava pogoršava pamćenje1 ili barem učinkovito umanjuje reakcije straha kod fobija44. Također, intervencije nakon reaktivacije koje promiču rekonsolidaciju mogu dovesti do poboljšane učinkovitosti45-47. Stoga, specifični spojevi primijenjeni tijekom prozoramemorijalabilnost tijekom rekonsolidacije omogućuje pozitivnu ili negativnu modulacijumemorijasnaga.

S obzirom na njegovu kliničku važnost, postoji značajan interes za razvoj učinkovitijih pristupa koji se temelje na izumiranju48. Sjećanja na izumiranje učinkovita su u prolaznom suzbijanju odgovora na strah, ali se strah lako vraća2. Proizlazeći iz činjenice da proces ponovne konsolidacije vođen pronalaskom može dovesti domemorijajačanja, bilo bihevioralno30, 35-39 ili farmakološki45-47, pretpostavljamo da ako izumiranjememorijaponovno aktivira, može proći kroz proces rekonsolidacije i biti pozitivno moduliran bihevioralnim i farmakološkim intervencijama, što rezultira povećanom otpornošću na recidiv.

Kako bismo to potvrdili, procijenili smo učinak kratkotrajnog ponovnog izlaganja uvjetovanom kontekstu kod životinja koje su prethodno bile obučene za kontekstualno uvjetovanje strahom (CFC) i podvrgnute izumiranju. Otkrili smo da je spontani oporavak primijećen 2 tjedna nakon izumiranja, ali periodične sesije reaktivacije uspjele su odgoditi ponovno oživljavanje tragova straha za najmanje 4 tjedna. Pokazalo se da ovaj učinak ovisi o L-tipu naponski upravljanih kalcijevih kanala (L-VGCC), a ponovna aktivacija jedan dan nakon sesije ekstinkcije je pokazala da uzrokuje da trag ekstinkcije postane prolazno labilan na način ovisan o sintezi proteina. Sve zajedno, podaci snažno upućuju na proces rekonsolidacije koji djeluje na trag izumiranja. Također, u protokolu korištenom za istraživanje brzog ponovnog stjecanja straha - još jedan proces recidiva nakon izumiranja49 -, jedna post-reaktivacijska infuzija natrijevog butirata (NaB), inhibitora HDAC-a koji pozitivno regulira neuronsku plastičnost50, uspjela je poboljšati izumiranjememorijado točke otpora strahu oporavak. Dokazi pokazuju da se trag izumiranja može učinkovito ojačati intervencijama temeljenim na reaktivaciji.

Eksperiment 1: Izumiranjememorijasamo prolazno inhibira izražavanje straha. Izumiranje je novo učenje koje privremeno potiskuje prethodno stečenomemorija. Stoga, nakon izumiranja, dva suprotna sjećanja koegzistiraju i natječu se za izražavanje. U početku je sjećanje na izumiranje dominantno nad tragom straha i stoga može spriječiti njegovo izražavanje. Međutim, ovo potiskivanje nije trajno. Kako vrijeme prolazi, sjećanje na strah pobjeđuje inhibiciju gašenja i vraćaju se averzivni odgovori ponašanja. Taj se proces naziva spontani oporavak15. Prvo smo procijenili vremenski profil spontanog oporavka u našem CFC protokolu. U skladu s tim, životinje su uvjetovane strahom i 24 sata kasnije podvrgnute su obuci izumiranja. Sljedećeg dana provedena je testna sesija za procjenu zadržavanja izumiranja. Drugi test je proveden 7, 14, 21 ili 28 dana kasnije kako bi se procijenio spontani oporavak (slika 1A).

Tijekom sesije izumiranja, razine smrzavanja s vremenom su opadale u svim skupinama, što ukazuje na stjecanje izumiranja (ANOVA ponovljenih mjerenja, F(5,140)=13.625, P=0.001; Slika 1B) . U testu 1, životinje su pokazale niske razine smrzavanja, što ukazuje na zadržavanje izumiranja (slika 1C). Za procjenu spontanog oporavka, izvedba testa 1 i testa 2 uspoređena je s ANOVA-om ponovljenih mjerenja, koja je otkrila značajnu interakciju grupe x sesije (ANOVA ponovljenih mjerenja, F(3,27)=8.085, P { {18}}.0005). Tukeyev post-hoc je pokazao da je došlo do značajnog oporavka odgovora na strah samo u grupama gdje je test 2 proveden ili 21 (P=0.013) ili 28 dana (P=0.0002) nakon testa 1, ali ne ranije (7 dana: P=0.999; 14 dana: P=0.969; slika 1C).

Rezultati ilustriraju dobro opisan15 vremenski ovisan spontani oporavak od strahamemorijanakon izumiranja. U našem protokolu, sjećanje na izumiranje potiskuje reakcije straha najmanje 14 dana. Nakon 14 dana može doći do spontanog oporavka od straha. Stoga, iako u početku dominantno, sjećanje na izumiranje opada s vremenom dopuštajući ponovno oživljavanje izražavanja straha.

Eksperiment 2: Periodično ponovno aktiviranje traga izumiranja odgađa njegovo vremenski ovisno opadanje (spontani oporavak). U eksperimentu 1 otkrili smo da je u početku sjećanje na izumiranje dominantno nad averzivnimmemorijatrag, sprječavajući njegovo izražavanje. Ovaj učinak blijedi u kasnijim vremenskim točkama kada izumiranje više ne može potisnuti izražavanje straha. Zabilježeno je da sesije reaktivacije mogu dovesti domemorijajačanje30, 36, 39. Budući da se trag izumiranja s vremenom smanjuje, predvidjeli smo da bi njegovo ponovno aktiviranje vjerojatno rezultiralo njegovim jačanjem, čime bi se povećala njegova postojanost i sposobnost suzbijanja straha u udaljenim vremenskim točkama.

Slika 1. Izumiranjememorijane uspijeva trajno potisnuti strah. (A) Shematski prikaz eksperimentalnih postupaka. Štakori uvjetovani strahom podvrgnuti su 30-min sesiji izumiranja i testirani su 24 sata kasnije. Drugi test je proveden 7, 14, 21 ili 28 dana nakon testa 1 (N=6 /9 po skupini). (B) Razine smrzavanja tijekom sesija gašenja. (C) Razine smrzavanja tijekom ispitivanja. (*) Značajna razlika između testova 1 i 2 (str<0.05, repeated-measures="" anova="" followed="" by="" tukey="" post-hoc="">

U skladu s tim, štakori uvjetovani strahom prošli su trening izumiranja, testirani su 1 dan kasnije i ponovno testirani 28 dana kasnije radi spontanog oporavka. U intervalu između testa i ponovnog testa, skupina životinja prošla je 3-minutne sesije reaktivacije 7., 14. i 21. dana nakon testa 1 (skupina za reaktivaciju) ili je ostala u svojim kavezima (kontrolna skupina; slika 2A) . Dodatna grupa je podvrgnuta reaktivacijskim sesijama, ali ne i obuci za gašenje (skupina bez izumiranja i reaktivacije). Odabran je 7--dnevni interval između reaktivacija jer je u ovoj vremenskoj točki izumiranje još uvijek snažno izraženo (Eksperiment 1).

Tijekom treninga izumiranja, životinje su učinkovito pokazale smanjenje odgovora na strah ovisno o vremenu (F(5,110)=30.516, P=0.001; Slika 2B). U testu 1 postojala je značajna razlika između skupina (F(2,28)=8.11, P=0.002; slika 2C). Tukeyev post-hoc je pokazao da su kontrolna i reaktivacijska skupina pokazale slične razine smrzavanja (P=0.915) i obje su pokazale niže smrzavanje nego skupina bez izumiranja plus reaktivacija (P=0.007 i P { {21}}.001, odnosno). Tijekom sesija reaktivacije, ANOVA ponovljenih mjerenja pokazala je značajnu razliku između reaktivacije i grupe bez izumiranja plus reaktivacije (F(1,19)=46.63, P=0.0001) i bez učinka sesije (F (2,38)=2.28, P=0.116) niti interakcija sesije grupe x (F(2,38)=1.00, P=0.376 ; sl. 2D). Usporedba između testa 1 i testa 2 otkrila je značajnu interakciju sesije grupe x (ANOVA ponovljenih mjerenja, F(2,28)=3.89, P=0.03). Tukey´spost-hoc je pokazao da se strah u skupini s reaktivacijom i u skupini bez izumiranja plus reaktivacija nije promijenio od testa 1 do testa 2 (P=0.844), ali je došlo do značajnog oporavka straha u kontrolnoj skupini (P=0.02). Važno je da je smrzavanje grupe za reaktivaciju bilo niže od svih ostalih u testu 2 (reaktivacija x kontrola: P=0.007; reaktivacija x bez izumiranja plus reaktivacija: P=0.0001; slika 2E). To pokazuje da je reaktivacija pojačala izumiranjememorijai tako spriječio oporavak straha u udaljenoj vremenskoj točki. Značajno je da u ovom protokolu sesije reaktivacije per se nisu imale učinka na razine straha kada nije došlo do učenja izumiranja.

Eksperiment 3 - Jačanje izumiranja izazvano reaktivacijom ovisi o L-VGCC. Kako bi se izazvala ponovna konsolidacija,memorijamora se ponovno aktivirati i ući u labilno stanje. Prethodni radovi su pokazali da je za destabilizaciju potrebna aktivacija tipa naponskih kalcijevih kanala (L-VGCC) tijekom reaktivacije, a njihova blokada nimodipinom sprječava ponovnu konsolidaciju51. Kako bismo procijenili ulogu L-VGCC u jačanju ekstinkcije izazvanom reaktivacijom, ponovili smo eksperimentalni dizajn posljednjeg eksperimenta i dali nimodipin prije reaktivacije (slika 3A).

Tijekom treninga izumiranja, životinje su pokazale smanjenje odgovora na strah ovisno o vremenu (F(5,125)=13.55, P=0.001; Slika 3B). U testu 1, životinje iz skupina nositelja i nimodipina pokazale su jednako niske razine smrzavanja (Studentov t test; t(25)=0.510, P=0.615; slika 3C). Tijekom sesija reaktivacije, došlo je do značajne interakcije grupe x sesije (F(2,50)=7.863, P=0.001; Slika 3D) sa životinjama liječenim nimodipinom koje pokazuju povećan strah tijekom sesija (P=0.004), dok nije bilo promjene u izražavanju straha kod štakora tretiranih nosačem (P=0.983).

U drugom testu, štakori tretirani nimodipinom pokazali su više razine smrzavanja nego kontrole (t(25)=5.44, P=0.0001; Slika 3E). Uspoređujući izvedbu obje testne sesije, ANOVA ponovljenih mjerenja pronašla je značajnu interakciju grupe u odnosu na sesiju (F(1,20)=7.75, P=0.006). Tukey'spost-je otkrio da je učinak životinja liječenih nimodipinom u testu 2 bio viši od učinka svih ostalih skupina i sesija (P <0,001). to="" pokazuje="" da="" pojačanje="" izumiranja="" reaktivacijama="" zahtijeva="" aktivaciju="">

Eksperiment 4: Jedno ponovno aktiviranje traga izumiranja otvara prozor osjetljiv na sintezu proteina. Nakon reaktivacije,memorijamože proći kroz fazu koja zahtijeva da se de novo sinteza proteina ponovno konsolidira i ustraje. Stoga je u ovom labilnom stanju osjetljiv na poremećaje inhibitorima sinteze proteina1. U prethodnom radu je pokazano da izumiranjememorijapodložna je ponovnoj konsolidaciji

Slika 2. Periodične reaktivacije sprječavaju spontani oporavak od izumiranjamemorija. (A) Shematski prikaz eksperimentalnih postupaka. Štakori uvjetovani strahom bili su podvrgnuti 30-min sesijama istrebljenja ili su ostali u svojim kućnim kavezima (Bez istrebljenja plus grupa za reaktivaciju: N=7). Test je obavljen sljedećeg dana, a ponovni test 28 dana kasnije. U intervalu između testova, životinje su reaktivirane za 3- min 7., 14. i 21. dana nakon testa 1 ili su ostale u svojim kućnim kavezima (skupina za izumiranje plus bez reaktivacije: N=10; skupina za izumiranje i reaktivaciju: N=14). (B) Razine smrzavanja tijekom sesija gašenja. (C) Razine smrzavanja tijekom ispitivanja. (D) Razine smrzavanja tijekom ponovnih aktivacija. (E) Razine smrzavanja tijekom ponovnog ispitivanja. (*) Značajne razlike između skupina (str<0.05, two-way="" or="" repeated-measures="" anova="" followed="" by="" tukey="" post-hoc="">

poremećaj post-reaktivacijskim smetnjama u paradigmi izbjegavanja inhibicije5, 6. Nakon korištenja sesija ponovnog izlaganja u prethodnim eksperimentima, ovdje smo procijenili jesu li ta ponovna izlaganja zapravo sesije reaktivacije koje uključuju regrutiranje sinteze proteina. U skladu s tim, životinje su bile uvjetovane strahom i sljedeći dan je jedna skupina prošla obuku o izumiranju (skupina za izumiranje), dok su ostali ostali u svojim kavezima (skupina bez izumiranja). Drugog dana nakon treninga, sve životinje su prošle kratku sesiju reaktivacije od 3 minute i odmah nakon toga ubrizgan im je inhibitor sinteze proteina cikloheksimid (CHX) ili njegov vehikulum. Sljedeći dan, životinje su testirane (slika 4A).

Tijekom sesije ekstinkcije, ANOVA ponovljenih mjerenja otkrila je akviziciju ekstinkcije (F(5,75)=24.08, P=0.001; Slika 4B). Tijekom reaktivacije, dvosmjerna ANOVA pokazala je da su životinje koje su prethodno izumrle imale niže razine smrzavanja u usporedbi sa skupinom bez izumiranja (F(1,43)=23.32, P=0. 001; slika 4C). U testu je dvosmjerna ANOVA otkrila značajnu interakciju lijeka grupe x (F(1,43)=22.64, P=0.001). Tukey´spost-hoc je otkrio da su životinje tretirane cikloheksimidom u skupini bez izumiranja pokazale niže razine smrzavanja od onih tretiranih nosačem (P=0.01), što ukazuje na taj strahmemorijabio oštećen. U skupini izumiranja,

Slika 3. Jačanje izumiranja izazvano reaktivacijom oslanja se na L-tip naponski upravljanih kalcijevih kanala. (A) Shematski prikaz eksperimentalnih postupaka. Štakori uvjetovani strahom podvrgnuti su 30-min sesiji izumiranja. Test je obavljen sljedeći dan, a ponovni test 28 dana kasnije. U intervalu između testova, životinje su reaktivirane za 3- min 7., 14. i 21. dana nakon testa 1. Nimodipin (N=15) ili njegov nosač (N=12) su sc infuzijom 30 minuta prije svake reaktivacije (B) Razine smrzavanja tijekom sesije gašenja. (C) Razine smrzavanja tijekom ispitivanja. (D) Razine smrzavanja tijekom ponovnih aktivacija. (E) Razine smrzavanja tijekom ponovnog ispitivanja. (*) Značajne razlike između skupina (str<0.05, two-way="" or="" repeated-measures="" anova="" followed="" by="" tukey="" post-hoc="" test).="" chx-treated="" animals="" showed="" higher="" freezing="" levels="" than="" vehicle-treated="" ones="" (p="0.001)," indicating="" that="" extinction="">memorijabio poremećen.

U skladu s tim, kada nije proveden trening izumiranja, trag straha je destabiliziran reaktivacijom i prekinut CHX. Kada sjećanja na izumiranje i strah postoje istovremeno, dolazi do učinka dominacije tragova i izumiranjamemorijaje onaj koji trpi destabilizaciju, zahtijevajući de novo sintezu proteina da opstane. Ovo otkriće pokazuje da je trag izumiranja učinkovito reaktiviran, sugerirajući da je rekonsolidacija mehanizam koji posreduje u jačanju sjećanja na izumiranje.

Eksperiment 5 – Još jedan proces relapsa tragova izumiranja, Rapid Reacquisition, može se farmakološki zaustaviti tretmanom nakon reaktivacije. Zabilježeno je da se ponovna konsolidacija može poboljšati post-reaktivacijskom primjenom spojeva kao što su HDAC inhibitori, što rezultira dugoročnom povećanom učinkom nakon reaktivacijememorijatest45, 52–54. Ovdje smo pitali može li se ekstinkcija pozitivno modulirati tretmanom nakon reaktivacije HDAC inhibitorom natrij butiratom (NaB). Stoga smo upotrijebili protokol rekondicioniranja koji omogućuje otkrivanje relativnih promjena u snazi ​​straha i sjećanja na izumiranje prema omjeru ponovnog stjecanja straha. Na primjer, obično nakon standardnih postupaka izumiranja, ponovno dobivanje je brzo32, 34, ali može biti sporo u određenim okolnostima kao što je opsežno učenje izumiranja ili slabo početno uvjetovanje14.

Štakori uvjetovani strahom prošli su trening izumiranja i sesiju reaktivacije 24 sata kasnije. Neposredno nakon reaktivacije, NaB ili njegov vehikulum je dat infuzijom (ip). U sljedeća četiri dana, životinje su podvrgnute mješovitom testiranju i slabom postupku rekondicioniranja kako bi se procijenilo ponovno stjecanje straha. Svaka sesija sastojala se od testa od 4 minute praćenog slabim udarom stopala i dodatnih 30 sekundi u boksu (slika 5A). Tijekom treninga izumiranja, prikazane su životinje

Slika 4. Izumiranjememorijapotrebna je de novo sinteza proteina nakon njegove reaktivacije da bi opstala. (A) Shematski prikaz eksperimentalnih postupaka. Štakori uvjetovani strahom bili su podvrgnuti 30-min sesijama istrebljenja ili su ostali u svojim kavezima. Sesija reaktivacije provedena je 7 dana kasnije nakon čega je sljedeći dan uslijedio test. Odmah nakon reaktivacije, životinje su primile ip infuziju cikloheksimida (Skupina za izumiranje: N=10; Skupina bez izumiranja: N=14) ili njegovog nosača (Skupina za izumiranje: N=9; Bez izumiranja skupina: N=11). (B) Razine smrzavanja tijekom sesije gašenja. (C) Razine smrzavanja tijekom sesije reaktivacije. (D) Razine smrzavanja tijekom testnih sesija. (*) Značajne razlike između skupina (str<0.05, repeated-measures="" or="" two-way="" anova="" followed="" by="" tukey="" post-hoc="">

smanjenje odgovora na strah ovisno o vremenu (F(5,110)=32.89, P=0.001; slika 5B). Pri reaktivaciji nije bilo razlike između skupina koje su kasnije dobile infuziju NaB ili Veh (t(22)=0.59, P=0.56; Slika 5C). Tijekom 4 testne sesije (koje su završile sa slabim rekondicioniranjem čiji je učinak analiziran u sljedećem testu; slika 5D), ANOVA ponovljenih mjerenja pokazala je značajnu interakciju lijek x sesija (F(3,66)=4).82 , P=0.004). Tukeyjev post-hoc je otkrio da su tijekom prvog testa Veh i NaB grupe bile jednake u razini smrzavanja (P=0.99). Međutim, nakon jedne sesije rekondicioniranja, Veh-tretirani odmah su pokazali ponovno stjecanje straha (P=0.0002), dok NaB-liječeni nisu (P=0.99). Grupa tretirana NaB-om pokazala je značajnu reakviziciju samo nakon tri sesije rekondicioniranja, u testu 4 (P=0.002).

Ovi rezultati pokazuju da je tretman NaB nakon reaktivacije doveo do izumiranjamemorijaotporan na brzo ponovno preuzimanje. Životinje iz skupine nosača spremno su pokazale uštede nakon jedne slabe sesije ponovne obuke.

Slika 5. Postreaktivacijska infuzija, amemorija-pojačavajući lijek, također pojačava trag izumiranja sprječavajući brzo ponovno stjecanje straha. (A) Shematski prikaz eksperimentalnih postupaka.

Štakori uvjetovani strahom podvrgnuti su 30-min sesiji izumiranja. Reaktivacija je provedena 24 sata kasnije nakon čega je uslijedila neposredna primjena natrijevog butirata (NaB; N=12) ili njegovog nosača (N=12). U sljedeća 3 dana, životinje su bile podvrgnute testnim sesijama koje su završile isporukom slabog udarca stopala plus dodatnih 30 s kontekstualnog istraživanja (protokol brze ponovne akvizicije). Dan kasnije proveden je standardni test. (B) Razine smrzavanja tijekom sesije gašenja. (C) Razine smrzavanja tijekom reaktivacije. (D) Razine smrzavanja tijekom ispitivanja. (*) Značajne razlike između skupina (str<0.05, independent-samples="" t-test="" or="" repeated-measures="" anova="" followed="" by="" tukey="" post-hoc="">

Životinje tretirane NaB-om pokazale su uštede samo nakon 3 sesije rekondicioniranja. Ovo pokazuje da se trag izumiranja može ojačati farmakološkim intervencijama nakon reaktivacije.

Rasprava

U ovoj studiji pokazujemo da kontekstualni strah od izumiranjamemorijamože se poboljšati kratkim sesijama reaktivacije. Prvo smo pokazali da je nakon učenja izumiranja spontani oporavak straha vidljiv 21 dan nakon, ali ne 14 dana ili ranije (Eksperiment 1). Dalje, otkrili smo da kada izumiranjememorijabio povremeno reaktiviran, spriječeno je njegovo opadanje ovisno o vremenu i nije verificiran spontani oporavak straha tijekom najmanje 28 dana (Eksperiment 2), učinak za koji se također pokazalo da je posredovan L-VGCC (Eksperiment 3). Kako bismo provjerili je li sinteza proteina aktivirana sesijama ponovnog izlaganja, ubrizgali smo cikloheksimid nakon reaktivacije i promatrali pojavu novog prozora plastičnosti, podupirući ideju da je rekonsolidacija proces koji se odvija (Eksperiment 4). Naposljetku, primjenom drugačijeg protokola usmjerenog na drugi mehanizam povratka sjećanja na izumiranje – brzo ponovno stjecanje (ušteda) – potvrdili smo da je post-reaktivacijska farmakološka inhibicija HDAC-a također bila u stanju poboljšati trag izumiranja, što je dokazano opaženom otpornošću na brzo ponovno stjecanje odgovor na strah.

Poznato je da gubitak uvjetovanih odgovora nakon izumiranja nije trajan55 jer se izumiranje zapravo ne oslanja namemorijabrisanje. Umjesto toga, promiče novo učenje koje sprječava izražavanje prethodno pohranjenih asocijacija14. Stoga, sjećanja na izumiranje i strah koegzistiraju i natječu se za izražavanje. To dovodi do učinka dominacije u tragovima s izumiranjem koje inhibira izražavanje straha. Međutim, izumiranje lako propada i sjećanje na strah nadvladava svoju inhibiciju kroz nekoliko mehanizama povratka15, 20. Najočitiji od njih je povratak straha samim protokom vremena, nazvan spontanim oporavkom15. Osim toga, sjećanje na strah može se odvojiti od inhibicije izumiranja fenomenima ponašanja kao što su brzo ponovno stjecanje, ponovno uspostavljanje i obnova14. Propadanje izumiranjamemorijatijekom vremena prikazano je u eksperimentu 1. U početku, izumiranje potiskuje uvjetovane reakcije straha. Međutim, u udaljenim vremenskim točkama ovaj učinak nestaje, što rezultira spontanim oporavkom. U eksperimentu 5 opaženo je brzo ponovno stjecanje. Kontrolni štakori brzo pokazuju jak strah nakon jedne slabe sesije rekondicioniranja. Nove metode dizajnirane da zaobiđu slabu postojanost izumiranja povećanjem njegove snage potencijalno bi poboljšale psihijatrijsko liječenje poremećaja povezanih sa strahom48.

Od izumiranjamemorijas vremenom slabi i gubi sposobnost suzbijanja straha15, sprječavanje tog propadanja bilo bi korisno. U Eksperimentu 2 otkrili smo da se postojanost sjećanja na izumiranje može pozitivno modulirati njegovim jednostavnim ponovnim aktiviranjem. U skladu s tim, nije bilo znakova spontanog oporavka kada su životinje bile podvrgnute kratkim reaktivacijama, čak ni 4 tjedna nakon treninga izumiranja. Zanimljivo je da reaktivacija nije povećala reakcije straha kod životinja koje nisu podvrgnute obuci izumiranja kao što je ranije objavljeno30, vjerojatno zbog efekta plafona. Stoga su kratke sesije reaktivacije uspjele na dugotrajan način spriječiti propadanje ovisno o vremenu izumiranja.

Često se predlaže da se rekonsolidacija dogodi kako bi se omogućilomemorijasadržaj koji treba ažurirati, zadržavajući svoju prilagodljivu relevantnost za bolje usmjeravanje budućeg ponašanja. Izvješća o ažuriranju pamćenja potaknutom rekonsolidacijom pokazuju da se ono može dogoditi ugradnjom novih informacija32, 34 ili jačanjem postojećih asocijacija30, 35–39. Važno je istaknuti da čak i kada je jačanje rezultat dodatnog učenja iz identičnog drugog pokusa učenja, još uvijek je potreban proces destabilizacije-restabilizacije36. Stoga smo pretpostavili da učinak jačanja potaknut reaktivacijom opažen u eksperimentu 2 može biti posredovan procesom rekonsolidacije, koji obuhvaća fazu destabilizacije ovisnu o reaktivaciji nakon koje slijedi faza restabilizacije koja zahtijeva de novo sintezu proteina. Prethodni radovi su pokazali da blokator L-VGCC nimodipin sprječava destabilizaciju pamćenja, čime sprječava rekonsolidaciju51. U eksperimentu 3 otkrili smo da je učinak jačanja reaktivacije spriječen blokatorom L-VGCC nimodipinom, koji podupire uključenost rekonsolidacije u pojačavanje traga izumiranja. Nimodipin je također uključen u oštećenje stjecanja izumiranja, kao i konsolidacije56, 57. Međutim, u našem eksperimentalnom protokolu, nimodipin je ubrizgan nekoliko dana nakon sesije izumiranja, čineći njegove učinke različitim od onih dobivenih oko početnog učenja o izumiranju. Stoga, bez obzira na to koji se proces zapravo blokira – ponovna konsolidacija ili ekstinkcija – eksperiment 3 pokazuje da pojačanje ekstinkcije izazvano reaktivacijom zahtijeva aktivaciju -VGCC da se dogodi.

Rekonsolidacija je proces u kojem prethodno uspostavljenamemorijaponovno se aktivira i postaje labilan, zahtijevajući de novo sintezu proteina da bi opstala. Kako bismo dodatno odgovorili na pitanje izaziva li sesija reaktivacije rekonsolidaciju traga izumiranja, istražili smo učinak inhibicije sinteze proteina nakon reaktivacije kod životinja koje su prethodno bile podvrgnute treningu izumiranja (Eksperiment 4). Kod životinja koje nisu bile podvrgnute izumiranju, inhibicija sinteze proteina nakon reaktivacije poremetila je ponovnu konsolidaciju kontekstualnog strahamemorija, što rezultira niskim razinama smrzavanja. Suprotan ishod ponašanja dogodio se u skupini koja je bila podvrgnuta izumiranju: u testu su životinje tretirane CHX-om pokazale visoke razine smrzavanja, što ukazuje da je pamćenje izumiranja poremećeno. U ovom eksperimentu, budući da je ekstinkcija prekinuta inhibicijom sinteze proteina nakon jednog ponovnog izlaganja (što je potvrđeno testom sljedećeg dana), nisu istražene dodatne sesije ponovnog izlaganja. Rezultati ovog eksperimenta sugeriraju da je trag izumiranja bio spriječen do te mjere da više nije mogao suzbiti strah. Prethodni rad 5, 7 pokazuje da reaktivacija nije samo pospješila "dodatno učenje o izumiranju", već je potaknula trag izumiranja da uđe u labilno stanje koje je zahtijevalo ponovnu konsolidaciju da bi opstao. Mora se uočiti da je ili sjećanje na izumiranje ili sjećanje na strah bilo izraženo u vrijeme reaktivacije. Sukladno tome, trag koji je dominantno aktiviran reaktivacijom bio je onaj koji je destabiliziran i time oslabljen inhibicijom sinteze proteina.

Konačno, procijenili smo može li se trag izumiranja pozitivno modulirati tretmanom nakon reaktivacije smemorija- lijek za poboljšanje. Pokazalo se da nekoliko farmakoloških sredstava poboljšavamemorijakonsolidacije i rekonsolidacije, uključujući HDAC inhibitore kao što je natrijev butirat45, 52, 53. U eksperimentu 5, otkrili smo da je tretman NaB nakon reaktivacije pojačao trag izumiranja, dopuštajući mu da se odupre recidivu brzim protokolom ponovnog dobivanja. Životinje liječene NaB-om pokazale su izuzetnu otpornost na uštedu nakon brzog postupka ponovnog dobivanja. Životinje tretirane nosačem pokazale su uštede nakon jedne slabe sesije rekondicioniranja, dok su štakori tretirani NaB-om trebale 3 sesije rekondicioniranja da pokažu isti učinak oporavka. Ovo pokazuje da čak i kratka sesija reaktivacije čini trag izumiranja podložnim poboljšanju pozitivnom interferencijom. Poboljšanje izumiranja post-reaktivacijskom inhibicijom HDAC-a, kao što je ovdje navedeno, sugerira da bi se isti povoljan učinak mogao postići s drugim lijekovima za poboljšanje pamćenja za inhibiciju izražavanja straha tijekom vremena.

Mora se razmotriti mogućnost da je jačanje izumiranja ovisno o reaktivaciji moglo biti posredovano dodatnim izumiranjem umjesto ponovnom konsolidacijom. Zabilježeno je da čak i kratka ponovna izlaganja kontekstu mogu dovesti do izumiranja kada se provode u udaljenim vremenskim točkama35. Iako se eksperimentalni protokol tog rada razlikuje od našeg u značajnom broju aspekata, uključili smo dodatnu eksperimentalnu skupinu kako bismo kontrolirali ovu specifičnu zabrinutost: u eksperimentu 2, skupina "bez izumiranja plus reaktivacija" prošla je iste tri sesije reaktivacije, ali nije podvrgnut sesiji gašenja. Ova skupina nije pokazala smanjenje straha, niti tijekom reaktivacija niti testa, drugačije od onoga što bi se očekivalo u izumiranju. Dodatni dokaz dolazi iz eksperimenta 4. Ako je kratka izloženost izazvala dodatno izumiranje, tada bi tretman cikloheksimidom poremetio samo inkrementalno učenje te sesije, ostavljajući pošteđenim ono što je prethodno bilo pohranjeno. Međutim, cikloheksimid nakon reaktivacije poremetio je trag izumiranja, ukidajući inhibiciju straha u testu provedenom 24 sata kasnije. Prekid prethodno pohranjenog traga inhibicijom sinteze proteina nakon reaktivacije u skladu je s tumačenjem rekonsolidacije. Stoga, uzimajući u obzir konvergenciju svih bihevioralnih i farmakoloških dokaza dobivenih sadašnjim eksperimentalnim dizajnom, naši rezultati pokazuju da je ono što se dogodilo tijekom sesija reaktivacije bio proces rekonsolidacije koji je posredovao u jačanju izumiranjamemorija.

Oporavak od straha nakon pristupa koji se temelje na izumiranju ključan je za razumijevanje kako bi se poboljšali bihevioralni i farmakološki tretmani anksioznih poremećaja. Zapravo, pojačanje izumiranja moglo bi se smatrati zaštitnim znakom psihijatrijskih istraživanja. Ovdje smo otkrili da su kratke sesije reaktivacije bile učinkovite u sprječavanju spontanog oporavka izumrlog strahamemorija. Ovaj učinak je posredovan L-VGCC-ima i uključuje sintezu proteina, što snažno sugerira da je rekonsolidacija mehanizam iza ovog jačanja. Također smo otkrili da je pozitivna farmakološka modulacija nakon reaktivacije uspjela spriječiti brzo ponovno stjecanje straha. Zajedno, ovi nalazi pokazuju da izumiranje može imati koristi od intervencija temeljenih na reaktivaciji čiji je cilj povećati njegovu snagu i postojanost. To također pridonosi ideji da ponovna konsolidacija i izumiranje nisu potpuno odvojeni procesi kao što trenutne paradigme često sugeriraju58. Zbog istaknutosti kognitivno-bihevioralnih terapija koje se temelje na izumiranju, ova otkrića donose relevantne uvide u osnovna i klinička istraživanja.

metode

Predmeti. Korišteni su mužjaci Wistar štakora iz naše rasplodne kolonije težine 300-350 g, starosti 60-70 dana. Životinje su bile smještene u plastičnim kavezima, četiri do pet po kavezu, s vodom i hranom dostupnim ad libitum. Svi pokusi izvedeni su u skladu s nacionalnim zakonodavstvom i smjernicama za brigu o životinjama (Brazilski zakon 11794/2008) i odobreni od strane Etičkog odbora Sveučilišta.

Kontekstualno uvjetovanje straha. CFC komora sastojala se od osvijetljene kutije od pleksiglasa (25.0 ×25.0-cm rešetke od paralelnih 0.1-cm šipki od nehrđajućeg čelika razmaknute 1.{{ 7}} cm međusobno). U sesiji kondicioniranja, štakori su stavljeni u komoru na 3-min, a zatim su primili dva 2-s 0,7 mA šoka stopala odvojena intervalom od 30-s. Životinje su držane u kondicioniranom okruženju dodatnih 30 sekundi prije nego što su se vratile u svoje kaveze.

Memorijasesije gašenja, reaktivacije i testiranja. Korištena su kratka ili duga ponovna izlaganja kontekstu kako bi se potaknulo ponovno aktiviranje pamćenja ili učenje o izumiranju. Trening izumiranja sastojao se od 30- min ponovnog izlaganja uvjetovanom kontekstu i uvijek se odvijao 24 sata nakon CFC-a. Sesije reaktivacije pamćenja sastojale su se od 3-min ponovnog izlaganja uvjetovanom kontekstu. U eksperimentima 2 i 3, reaktivacije su provedene 7., 14. i 21. dana nakon testa 1. U eksperimentima 4 i 5 one su provedene 24 sata nakon treninga ekstinkcije.

Testne sesije sastojale su se od 4-min ponovnog izlaganja kontekstu. U eksperimentima 1, 2 i 3, prvi test je proveden 24 sata nakon treninga izumiranja, a drugi test je proveden 7, 14, 21 ili 28 dana kasnije, kako bi se procijenio strah od spontanog oporavka. U pokusima 4 i 5, test je proveden 24 sata nakon reaktivacije kako bi se procijenio učinak farmakoloških manipulacija nakon reaktivacije.

Kako bi se pozabavilo brzim ponovnim prikupljanjem (ili "uštedama"; Eksperiment 5), životinje su podvrgnute testu od 4- min nakon čega je uslijedio slabi udar stopala (jedna 2- s 0,4 mA). Nakon dodatnih 30 sekundi, vratili su se u svoje kaveze. Ovaj postupak je ponovljen dnevno tri puta, nakon čega je uslijedio dodatni test jedan dan kasnije. U ovom postupku, smrzavanje se uvijek ocjenjivalo prije šoka stopala (koji se sastojao od standardne testne sesije). To nam je omogućilo i mjerenje performansi i podvrgavanje životinja slaboj sesiji rekondicioniranja.

Droge. Inhibitor sinteze proteina cikloheksimid (CHX; Sigma) otopljen je u sterilnoj izotoničnoj fiziološkoj otopini s 1 posto dimetilsulfoksida do koncentracije od 2,2 mg/mL. Cikloheksimid ili njegov nosač ubrizgan je intraperitonealno (ip) odmah nakon reaktivacije. Ukupni ubrizgani volumen bio je 1 mL/kg.

Antagonist L-tipa naponskih kalcijevih kanala (LVGCCs) nimodipin (Sigma) otopljen je u sterilnoj izotoničnoj fiziološkoj otopini s 8 posto dimetilsulfoksida do koncentracije od 16 mg/mL. Nimodipin ili njegov prijenosnik ubrizgan je supkutano 30 minuta prije reaktivacije. Ukupni ubrizgani volumen bio je 1 mL/kg.

Natrijev butirat (NaB; Sigma), inhibitor histonske deacetilaze (HDAC), otopljen je u sterilnoj izotoničnoj fiziološkoj otopini do koncentracije od 0,6 g/mL. Ukupni ubrizgani volumen bio je 1 mL/kg ip, odmah nakon reaktivacije.

Analiza podataka.Memorijamjeren je kvantificiranjem ponašanja smrzavanja i izražen kao postotak ukupnog vremena sesije. Smrzavanje je ocjenjivao promatrač koji nije bio upoznat s eksperimentalnim uvjetima. Homoskedastičnost i normalnost distribucije podataka potvrđene su Leveneovim testom, odnosno Kolmogorov-Smirnovljevim testom. Sesije izumiranja analizirane su pomoću ANOVA ponovljenih mjerenja. Reaktivacijske sesije analizirane su pomoću Studentovog t-testa, dvosmjerne ANOVA-e ili ANOVA-e ponovljenih mjerenja, nakon čega je slijedio Tukeyev post-hoc test. Testne sesije analizirane su pomoću Studentovog t-testa, dvosmjerne ANOVA-e ili ANOVA-e ponovljenih mjerenja, nakon čega je slijedio Tukeyev post-hoc test.

Referenca

1. Nader, K., Schafe, GE & Le Doux, JE Sjećanja na strah zahtijevaju sintezu proteina u amigdali za ponovnu konsolidaciju nakon preuzimanja. Nature 406, 722–6 (2000).(2010).

3. Finnie, PSB & Nader, K. Uloga mehanizama metaplastičnosti u regulacijimemorijadestabilizacije i rekonsolidacije. Neurosci. Bioponašanje. Rev. 36, 1667–707 (2012).

5. Rossato, JI, Bevilaqua, LR, Izquierdo, I., Medina, JH & Cammarota, M. Retrieval inducira rekonsolidaciju izumiranja strahamemorija. Proc. Natl. Akad. Sci. USA 107, 21801-21805 (2010).

7. Eisenberg, M. & Dudai, Y. Rekonsolidacija svježeg, udaljenog i ugašenog sjećanja na strah u Medaki: stari strahovi ne umiru. Eur J Neurosci 20, 3397-3403 (2004).

8. Rosas-Vidal, L., Rodriguez-Romaguera, J., Do-Monte, F. & Anderson, R. Ciljanje na rekonsolidaciju sjećanja na izumiranje: nova potencijalna strategija za liječenje anksioznih poremećaja. Mol. Psihijatrija 20, 1264–1265 (2015).

9. Bouton, ME, Westbrook, RF, Corcoran, KA & Maren, S. Kontekstualna i vremenska modulacija izumiranja: bihevioralni i biološki mehanizmi. Biol. Psihijatrija 60, 352–60 (2006).

11. Furini, C., Myskiw, J. & Izquierdo, I. Učenje istrebljenja straha. Neurosci. Bioponašanje. Rev. 47, 670-683 (2014).

13. Vervliet, B., Craske, MG & Hermans, D. Istrebljenje i povratak straha: stanje tehnike. Annu. Rev. Clin. Psychol. 9, 215–48 (2013). (2002).

15. Rescorla, Ra Spontani oporavak. Naučiti. mem. 11, 501–9 (2004).

17. Pedreira, ME & Maldonado, H. Sinteza proteina podliježe ponovnoj konsolidaciji ili izumiranju, ovisno o trajanju podsjetnika. Neuron 38, 863–869 (2003).

18. Bustos, SG, Maldonado, H. & Molina, VA Ometajući učinak midazolama na rekonsolidaciju sjećanja na strah: odlučujući utjecaj vremenskog raspona reaktivacije i starosti pamćenja. Neuropsihofarmakologija 34, 446–57 (2009).

19. Merlo, E., Milton, AL, Goozée, ZY, Theobald, DE & Everitt, BJ. Ponovna konsolidacija i izumiranje su razdvojni i međusobno isključivi procesi: bihevioralni i molekularni dokazi. J. Neurosci. 34, 2422–31 (2014).

20. Eisenberg, M., Kobilo, T., Berman, DE & Dudai, Y. Stabilnost dohvaćene memorije: inverzna korelacija s dominacijom tragova. Znanost 301, 1102–1104 (2003).

21. Suzuki, A. et al. Rekonsolidacija i izumiranje pamćenja imaju jasne vremenske i biokemijske potpise.J. Neurosci. 24, 4787–95

(2004).

22. Lee, JLC, Milton, AL & Everitt, BJ Rekonsolidacija i izumiranje uvjetovanog straha: inhibicija i potenciranje. J. Neurosci. 26, 10051–6 (2006).

23. Flavell, CR & Lee, JL Rekonsolidacija i izumiranje apetitivne Pavlovljeve memorije. Neurobiol Learn Mem 104, 25–31

(2013).

24. Tedesco, V., Roquet, RF, DeMis, J., Chiamulera, C. i Monfils, M.-H. Ekstinkcija, primijenjena nakon vraćanja slušnog sjećanja na strah, selektivno povećava ekspresiju proteina cinkovog prsta 268 i fosforiliranog ribosomskog proteina S6 u prefrontalnom korteksu i lateralnoj amigdali. Neurobiol. Naučiti. mem. 115, 78–85 (2014).

25. de la Fuente, V., Freudenthal, R. & Romano, A. Ponovna konsolidacija ili izumiranje: promjena faktora transkripcije u određivanju tijeka pamćenja nakon vraćanja. J. Neurosci. 31, 5562–73 (2011).

27. Lee, JLC Rekonsolidacija: održavanje relevantnosti sjećanja. Trends Neurosci. 32, 413–20 (2009).

29. Nadel, L. & Hardt, O. Ažuriranje memorijskih sustava i procesa. Neuropsihofarmakologija 36, ​​251–73 (2011).

31. Forcato, C., Rodríguez, MLC, Pedreira, ME i Maldonado, H. Rekonsolidacija kod ljudi otvara deklarativno pamćenje za ulaz novih informacija. Neurobiol. Naučiti. mem. 93, 77–84 (2010).

32. Monfils, M.-H., Cowansage, KK, Klann, E. & LeDoux, JE Granice izumiranja-ponovne konsolidacije: ključ trajnog slabljenja sjećanja na strah. Znanost (80-.). 324, 951–955 (2009).

33. Hupbach, A., Gomez, R., Hardt, O. i Nadel, L. Rekonsolidacija epizodnih sjećanja: suptilni podsjetnik pokreće integraciju novih informacija. Naučiti. mem. 14, 47–53 (2007).

34. Haubrich, J. i sur. Ponovna konsolidacija omogućuje ažuriranje sjećanja na strah na manje averzivnu razinu kroz uključivanje apetitivnih informacija. Neuropsihofarmakologija 40, 315–326 (2015).

35. Inda, MC, Muravieva, EV & Alberini, CM Vraćanje sjećanja i protok vremena: od ponovne konsolidacije i jačanja do izumiranja. J. Neurosci. 31, 1635–43 (2011).

(2008).

37. Fukushima, H. et al. Poboljšanje pamćenja straha vraćanjem putem rekonsolidacije. Elife 2014, 1–19 (2014).

39. Forcato, C., Rodríguez, MLC & Pedreira, ME Ponovljeni procesi labilizacije-ponovne konsolidacije jačaju deklarativno pamćenje kod ljudi. PLoS One 6, e23305 (2011).

(2015).

41. Garcia-DeLaTorre, P., Rodriguez-Ortiz, CJ, Arreguin-Martinez, JL, Cruz-Castaneda, P. i Bermudez-Mattoni, F. Simultane ali ne neovisne infuzije anizomicina u inzularnom korteksu i amigdali ometaju stabilizaciju pamćenja okusa kada se ažurira. Naučiti. mem. 16, 514–519 (2009).

42. Lee, JLC Rekonsolidacija pamćenja posreduje u ažuriranju sadržaja pamćenja hipokampusa. Ispred. ponašaj se Neurosci. 4, 168 (2010).

44. Souter, M. & Kindt, M. Nagla transformacija fobičnog ponašanja nakon amnezijskog agensa nakon vraćanja. Biol Psychiatry, doi:10.1016/j.biopsych.2015.04.006 (2015).

45. Bredy, TW & Barad, M. Inhibitor histonske deacetilaze valproična kiselina pojačava stjecanje, izumiranje i rekonsolidaciju uvjetovanog straha. Naučiti. mem. 15, 39–45 (2008).

47. Tronson, NC, Wiseman, SL, Olausson, P. & Taylor, JR Dvosmjerna bihevioralna plastičnost rekonsolidacije pamćenja ovisi o amigdalarnoj protein kinazi A. Nat. Neurosci. 9, 167–9 (2006).

48. Fitzgerald, PJ, Seemann, JR & Maren, S. Može li se istrebljenje straha poboljšati? Pregled farmakoloških i bihevioralnih nalaza. Brain Res. Bik. 105, 46–60 (2014).

49. Bouton, ME, Winterbauer, NE & Todd, TP Procesi povratka nakon izumiranja instrumentalnog učenja: Obnova, ponovno oživljavanje i ponovno stjecanje. ponašaj se Procesi 90, 130–41 (2012).

50. Gräff, J., Kim, D., Dobbin, MM & Tsai, L. Epigenetska regulacija ekspresije gena u fiziološkim i patološkim procesima mozga. 603–649, doi:10.1152/physrev.00012.2010 (2011).

51. Suzuki, A., Mukawa, T., Tsukagoshi, A., Frankland, PW & Kida, S. Aktivacija LVGCC i CB1 receptora potrebnih za destabilizaciju reaktiviranih kontekstualnih sjećanja na strah. Naučiti. mem. 15, 426–33 (2008).

52. Federman, N., Fustinana, MS & Romano, A. Rekonsolidacija uključuje acetilaciju histona ovisno o snazi ​​sjećanja. Neuroznanost 219, 145–156 (2012).

53. Villain, H., Florian, C. & Roullet, P. Inhibicija HDAC-a potiče početnu konsolidaciju i ponovnu konsolidaciju prostorne memorije kod miševa. Sci. Rep. 6, 27015 (2016).

54. Stefanko, DP, Barrett, RM, Ly, AR, Reolon, GK & Wood, MA Modulacija dugotrajne memorije za prepoznavanje objekata putem HDAC inhibicije. Proc. Natl. Akad. Sci. Sad. 106, 9447–52 (2009).

56. Flavell, CR, Barber, DJ & Lee, JLC Rekonsolidacija bihevioralne memorije sjećanja na hranu i strah. Nat. Komun. 2, 504

(2011).

57. Cain, CK, Blouin, AM & Barad, M. L-Type Voltage-Gated Calcium Channels are Required for Extinction, but not for Acquisition or Expression, Conditional Fear in Mice. J. Neurosci. 22, 9113-9121 (2002).

58. Almeida-Correa, S. & Amaral, OB Labilizacija pamćenja u rekonsolidaciji i izumiranju – dokaz za zajednički sustav plastičnosti? J Physiol Paris 108, 292-306 (2014).

Priznanja

Zahvaljujemo gospođi Zelmi Regina V. de Almeida na ljubaznoj i stručnoj tehničkoj pomoći, te mr.sc. Jane Zhang za njezinu velikodušnu i kompetentnu reviziju jezika. Ovaj je rad podržan stipendijama i potporama CAPES (MEC), CNPq (MCT) i PROPESQ (UFRGS). Svi autori izjavljuju da nemaju drugog izvora naknade osim primarne institucije i federalnog financiranja.

Autorski doprinosi

JH je osmislio studiju, izveo pokuse, analizirao podatke i napisao rukopis. AM, FZB, APC i ROS pomogli su u eksperimentima i doprinijeli idejama. LOA i JAQ pomogli su u osmišljavanju studije i pisanju rukopisa. Svi autori recenzirali su rukopis.

dodatne informacije

Konkurentski interesi: Autori izjavljuju da nemaju konkurentskih interesa.

Napomena izdavača: Springer Nature ostaje neutralan u pogledu tvrdnji o nadležnosti u objavljenim kartama i institucionalnim vezama.

Otvoreni pristup Ovaj je članak licenciran pod licencom Creative Commons Attribution 4.0 International