Ekstrakt latica ruže (Rosa Gallica) ima učinak izbjeljivanja kože i sprječavanja bora

Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-pošta:audrey.hu@wecistanche.com

Young-Ran Song,1,* Won-Chul Lim,1,* Ahram Han,1 Myung-hee Lee,1 Eun Ju Shin,1Kwang-Min Lee,1,2 Tae-Gyu Nam,1 i Tae-Gyu Lim1, 3

SAŽETAK

Nastojali smo istražiti učinak ekstrakata izLatice Rosa gallica(RPE) uključenizbjeljivanje kožeiprotiv boraaktivnost. Aktivnost tirozinaze oslabljena je RPE tretmanom, istodobno sa smanjenjem nakupljanja melanina u ljudskom B16F10 melanomu. Tretman kože lica dobrovoljaca u kliničkom ispitivanju s formulacijom koja sadrži RPE značajno je povećao svjetlinu kože (L* vrijednost). Utvrđeno je da je odgovorni mehanizam povezan s aktivacijom protein kinaze aktivirane mitogenom (MAPK). U Dodatku,RPEizloženoprotiv boraaktivnost stvaranja ljudskih dermalnih fibroblasta potiskivanjem razine matrične metaloproteinaze (MMP)-1. Studija in vivo, RPE je također inhibirao solarno ultraljubičasto stimuliranu razinu MMP-1 regulacijom c-Jun. Općenito, naši nalazi pokazuju da RPE izazivaizbjeljivanje kožei aktivnost protiv stvaranja bora reguliranjem unutarstanične signalizacije, podupirući njegovu korisnost kao sastojka za izbjeljivanje kože i kozmetičkih proizvoda protiv bora.

KLJUČNE RIJEČI: melanin, MMP-1, Rosa gallica, izbjeljivanje kože, stvaranje bora

Ekstrakt cistanke: izbjeljivanje kože

UVOD

Iako starenje kože ima genetski određenu osnovnu stopu, to je složen i višefaktorski proces koji mogu ubrzati različiti čimbenici iz okoliša.1Normalno starenje kože prirodan je kronološki proces tijekom vremena koji je pogoršan egzogenim starenjem, potaknutim vanjskim stresovima uslijed sunčeve svjetlosti, atmosferskih zagađivača i ekstremne temperature.2 Od toga, izlaganje solarnom ultraljubičastom zračenju (SUV) (osobito ultraljubičastom B [UVB]) primarni je uzrok fotostarenja kože, obilježenog hiperpigmentacijom (prekomjernom proizvodnjom melanina) istvaranje bora.3 SUV zračenje potiče stvaranje reaktivnih kisikovih vrsta (ROS)/reaktivnih dušikovih vrsta i oštećenja DNA, što dovodi do različitih procesa povezanih sa starenjem u stanicama kože kao što su upala, remodeliranje izvanstaničnog matriksa (ECM), stanična smrt i hiperpigmentacija.4Melanin (crna ili smeđa pigmentacija) štiti kožu od oštećenja izazvanih UV zračenjem.5 Međutim, neregulirana ili prekomjerna proizvodnja melanina u koži može rezultirati poremećajima hiperpigmentacije uključujući kloazmu, pjegice i senilni lentigin.6 Arbutin i kojična kiselina, koji su razvijeni za liječenje ovih bolesti, poznato je da predstavljaju rizik za rak crijeva odnosno rak jetre.7 Iz tog razloga postoji interes za korištenje prirodnih materijala koji su izvrsni u inhibiciji proizvodnje melanina bez ozbiljnih nuspojava. Melanogenezu stimulira tirozinaza, koja igra ključnu ulogu u početnom koraku biosintetskog puta melanina koji određuje brzinu, a ovaj enzim stabiliziraju i aktiviraju TRP-1 i TRP 2.8 Transkripcija ovih melanogenih proteina modulirana je transkripcijskim faktorom povezanim s mikroftalmijom (MITF). Izlaganje UV zračenju aktivira MITF promotor i inducira ekspresiju gena tirozinaze, što dovodi do nakupljanja melanina u melanocitima. Osim toga, mitogenom aktivirane proteinske kinaze (MAPK), koje se sastoje od kinaze regulirane izvanstaničnim signalom (ERK), c-Jun-N-terminalne kinaze (JNK) i p38, dovode do transkripcijske kontrole melanogeneze.8 Osobito, ERK i JNK poznato je da negativno reguliraju ekspresiju MITF,9 dok p38 MAPK inducira proteasomalnu razgradnju melanogenih enzima. Fosforilirani p38 MAPK, zauzvrat, aktivira ekspresiju MITF-a i melanogenih enzima.10

ECM proteini poput kolagena, elastina i proteoglikana prisutni su u dermalnom matriksu, što koži daje snagu i otpornost.11 Tijekom procesa starenja kože dolazi do promjena dermalnog matriksa uključujući promjene u proporcijama kolagena, što u konačnici dovodi do stvaranja bora. Nadalje, UV zračenje također pokreće razgradnju kolagenaze, tijekom koje stvoreni oksidativni stres olakšava ekspresiju proteolitičke matrične metaloproteinaze (MMP) koja smanjuje sintezu kolagena i ubrzava razgradnju kolagena.2 Oksidativni stres stimulira različite biološke putove povezane s fotostarijenjem, kao i citoplazmatske kinaze i MAPK.4 MAPK simuliraju aktivatorprotein 1 (AP-1; c-Fos/c-Jun), transkripcijski faktor koji dodatno regulira razinu MMP-a.12 Ovi proteini su primarno odgovorni za razgradnju kolagena.7 Od MMP-a, MMP-1 je poznat kao važan enzim uključen u razgradnju ECM-a razgradnjom kolagena tipa I, ključne komponente u dermisu.3 Stoga se inhibicija MMP-1 smatra održivom strategijom za terapiju protiv starenja kože.

Vrsta Rosa (R.) uključena je u obitelj Rosaceae, a rod Rosa jedna je od najrasprostranjenijih biljaka. To su važne komercijalne kulture koje se koriste za vrtlarstvo, ukrase i parfeme. Kao jestivo cvijeće, latice se također često koriste kao sastojci u funkcionalnoj hrani zbog svoje boje, bogatog okusa i povećane nutritivne vrijednosti.13 U međuvremenu, ruže su korištene kao biljni lijekovi za liječenje dismenoreje, proljeva i nefritisa, poboljšanje cirkulacije krvi, ublažavanje boli i hemostaza.13,14 Uočena fiziološka svojstva mogu se pripisati njihovoj količini fitokemikalija uključujući fenolne spojeve, flavonoide i antocijane.15 Doista, neke su studije pokazale biološke funkcionalnosti koje sadrže jaku antioksidacijsku, antimikrobnu, protuupalnu i antialergijsku .15–17 Nedavno smo izvijestili da etanolekstrakt ružinih latica izaziva protuupalni potencijal kože.18 Osim toga, istraženi su optimalni uvjeti ekstrakcije ružinih latica koje imaju učinak protiv starenja kože za industrijsku primjenu.19 Međutim, unatoč njihovoj široka dostupnost, potencijalna svojstva ekstrakata ružinih latica (RPE) protiv starenja incare ostaju slabo shvaćeni. U ovoj smo studiji procijenili potencijalne primjeneRPEu njezi kože i njihovi molekularni mehanizmi odgovorni.

dobrobit cistanche: protiv starenja

MATERIJALI I METODE

Reagensi

Ružine latice kupljene su iz Turske preko GN Bio (Gyeonggi-do, Koreja). MTS (CellTiter 96 Aqueous OneSolution Cell Proliferation Assay) otopina je kupljena od Promege (Madison, WI, USA). Poliklonska anti-tirozinaza, anti-b-aktin, anti-ERK, anti-MKK4 i anti-JNK kupljeni su od Santa Cruz Biotechnology (CA, SAD). Monoklonski anti-fosfo-MEK (Ser217/221), anti-MEK, anti-fosfo-MKK4, anti-fosfo-MKK3/6, anti-fosfo ERK, anti-fosfo-JNK, anti-MKK3, anti-fosfo-p38, anti-p38 i anti-fosfo-c-Jun kupljeni su CellSignaling Technology (Danvers, MA, SAD). Monoklonalni anti-MMP-1 i anti-tip I kolagen dobiveni su od R&D Systems (Minneapolis, MN, SAD) odnosno Ab cam (Cambridge, Ujedinjeno Kraljevstvo). Hormon koji stimulira alfa melanocite (a-MSH), tirozinaza gljiva i l-3,4-dihidroksifenilalanin (l-DOPA) dobiveni su od Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, SAD).

Priprema RPE

Ružine latice (10 g) su osušene na zraku, samljevene i pomiješane s 1000 mL 70 posto (v/v) etanola i ekstrahirane na 70 C tijekom 3 sata pomoću Soxhlet ekstraktora. Produkt je zatim filtriran kroz filter papir br. 2 (Whatman, Maidstone, Ujedinjeno Kraljevstvo). Otapalo je kontinuirano koncentrirano pod vakuumom, a ostatak je liofiliziran upotrebom sušilice za zamrzavanje.

In vitro ispitivanje aktivnosti tirozinaze gljiva

Enzimski test je proveden mjerenjem stvaranja DOPAkroma kao što je prethodno opisano.20 Ukratko, 40 lLofRPEuzorak (12,5, 25, 50 i 100 LG/mL) je razrijeđen u 20 lL PBS pufera. Nakon dodavanja 20 lL tirozinaze gljive (0,02 mg/mL), inkubacija je provedena 30 minuta. Supstrat 1-DOPA dodan je u smjesu koja je sadržavala enzim i zatim inkubiran 15 minuta. Dopa krom produkt je zatim izmjeren na 475 nm. Kao pozitivna kontrola korišteni su arbutin i vitamin C.

Ekstrakt cistanke smanjuje aktivnost tirozinaze

Kultura stanica

Stanice mišjeg melanoma B16F10 i primarni ljudski dermalfibroblasti (HDF) dobiveni su iz Korean Cell LineBank (Seul, Koreja) odnosno ScienCell Research Laboratories (Carlsbad, CA, SAD). Obje su stanice održavane u Dulbeccovom modificiranom Eagle mediju (DMEM) (GIBCO Invitrogen, Auckland, Novi Zeland) dopunjenom s 10 posto (v/v) fetalnog goveđeg seruma (FBS) i 1 posto streptomicina-penicilina (GIBCO Invitrogen) na 37 C i 5 postotni CO2 inkubator.

Test viabilnosti stanica

MTS test korišten je za mjerenje RPE-inducirane proliferacije stanica ljudskog melanoma B16F10. Ukratko, stanice su zasađene i uzgojene s DMEM-om koji je sadržavao 10 posto FBS-a i 1 posto antibiotika u 96-pločama s jažicama. Stanice su zatim izgladnjele serumom 12 h i dodane su saRPEuzoraka (50–1000 LG/mL) tijekom 24 h. Nakon toga, 10 postotna MTS otopina uključujući fenazin metosulfat tretirana je na stanice 1 h. Stupanj živih stanica mjeren je na 490 nm.

Test proizvodnje melanina

Stvaranje melanina u stanicama ljudskog melanoma B16F10 procijenjeno je kao što je prethodno objavljeno.20 Ukratko, stanice (8 · 103 stanica/jažici) su uzgajane u pločama sa šest jažica u 2 mL DMEM. Sljedeći dan, stanice su prethodno tretirane s RPE (100 i 200 lg/mL) 1 h prije nego što je dodan a-MSH 100 nM i zatim dalje inkubiran 72 h. Izvanstanični melanin je ispitivan na 495 nm.

Western blot analiza

Uzorci proteina iz B16F10 stanica, HDF-ova i ljudskog kožnog tkiva lizirani su RIPA puferom [20 mM Tris-HCl (pH 7,5) 150 mM NaCl, 1 mM Na2EDTA 1 mM EGTA 1 posto NP-40 1 posto natrij deoksikolat 2,5 mM natrij pirofosfat 1 mM b glicerofosfat 1 mM Na3VO4 1 lg/ml leupeptina] i kvantificiran Pierce BCA Protein Assay Kitom. Proteini su odvojeni 10 postotnim natrijevim dodecil sulfatnim akrilamidnim gelovima temeljeno na molekularnoj težini i zatim prebačeni na nitrocelulozne membrane. Membrane su blokirane otopinom albumina iz goveđeg seruma 1 h i inkubirane 12 h s naznačenim primarnim protutijelom na 4°C. Nakon reakcije sa sekundarnim protutijelom konjugiranim s peroksidazom hrena tijekom 1 sata, intenzitet ekspresije proteina vizualiziran je pomoću kemiluminiscencijskog čitača (UVITEC Cambridge).

Ispitanici i tretmani

SposobnostRPEza poboljšanje licaizbjeljivanje kože was assessed in a double-blind clinical trial in 10 women (>20godine). Osnovna formulacija pripremljena je korištenjem pročišćene vode, poliakrilne kiseline, 1,2-heksandiola i natrijevog hidroksida. RPE je dodan u koncentraciji od 0,05 posto (v/v). Tijekom 6-tjednog perioda suplementacije, ispitanici su primijenili RPE formulu na jednu stranu lica, a druga strana lica je tretirana jednom dnevno samo s osnovnom formulacijom kao kontrolom. Tijekom probnog razdoblja volonterkama je bilo zabranjeno korištenje druge kozmetike.

Procjena stanja kože

Stanje kože procijenjeno je prema standardnom operativnom protokolu Korejskog instituta za dermatološke znanosti (Seoul, Koreja) i obavljeno je na 22 C – 2 Cand 50 posto – 5 posto vlažnosti. Nakon pranja lica tijekom 30 minuta, ispitano je stanje kože svakog subjekta pomoću Skin ColorCatch (Delfin Technologies, Kuopio, Finska) i prikupljeni su komentari. Rezultati su određeni L* vrijednošću (svjetlina) i izmjereni neposredno prije testa te 3 i 6 tjedana kasnije.

SUV zračenje

Zračenje SUV-a provedeno je kombinacijom ultraljubičastih A (UVA) i UVB lampi (Q-Lab Corporation, Cleveland, OH, SAD); njihova svjetla emitiraju na 340 nm, što oponaša optimalnu sunčevu svjetlost emitiranu između 365 i 295 nm. Omjer UVA i UVB zraka koje proizvodi ova lampa bio je 94,5 posto, odnosno 5,5 posto. HDF-ovi i tkivo ekvivalentno ljudskoj koži u medijima bez seruma stimulirani su SUV zračenjem od 23 odnosno 46 kJ/m2 pomoću UVB lampe.

Priprema uzorka ljudske kože

Presjeci kože abdomena dobiveni su od pacijentice bijele rase (Biopredic International, Saint Gregoire, Francuska). Ukratko, uzorci tkiva su prikupljeni iz abdomena nakon plastične operacije u skladu s francuskim zakonom L.1245-2 CSP. Ova studija slijedila je sve principe iz Helsinške deklaracije. Tkivo kože je inkubirano u 10 postotnom FBS odgovarajućem mediju koji je osigurao Biopredic International na 37 C pod 5 posto CO2 tijekom 10 dana pri čemu je medij zamijenjen svaka 2 dana. Tijekom perioda izvođenja, tkivo je također bilo izloženo anRPEuzorak 1 h prije SUV zračenja od 46 kJ/m2 dva puta dnevno. Na kraju tretmana tkivo je korišteno za imunohistokemijsku (IHC) analizu ili imunoblot analizu.

IHC promatranje

IHC analizu provela je ugovorna istraživačka agencija ABION (Seul, Koreja). Tkivo kože je natopljeno u 10 posto formaldehida, dehidrirano kroz gradijent koncentracije etanola i uklopljeno u parafinski vosak. Endogena peroksidaza presjeka inaktivirana je s 0,3 posto H2O2 tijekom 15 minuta i zatim inkubirana s anti-MMP-1 protutijelom (R&D Systems, Inc., SAD, Kanada) tijekom jednog sata. Nakon petostrukog ispiranja, sekcije su inkubirane sa sekundarnim antitijelima 20 minuta. Sekcije su obojene DAB (3,30-diaminobenzidin) detekcijskim reagensom (K3468; DAKO, Glostrup, Danska) te promatrane i fotografirane svjetlosnim mikroskopom (BX40; Olympus, Tokyo, Japan).

Statistička analiza

Svi eksperimenti su izvedeni najmanje tri puta, a podaci su izraženi kao srednja vrijednost – standardna devijacija. Statistička značajnost procijenjena je korištenjem Studentovog t-testa u programu SPSS (Chicago, IL, SAD), a značajne razlike su izražene kao P <>

cistanche tubulosa

REZULTATI

RPE potiskuje proizvodnju melanina putem inhibicije tirozinaze

Tirozinaza je jedini enzim koji ograničava brzinu melanogeneze prisutan u stanicama ljudske kože.8 U melanocitima, DOPA se proizvodi iz tirozina pomoću tirozinaze, koja se dalje oksidira u dopakinon na putu sinteze melanina.7 U ovoj studiji korištena je analiza tirozinaze gljiva da se odredi antimelanogeno djelovanjeRPE. Kao što je prikazano na slici 1A, RPE je izazvao značajan inhibicijski učinak ovisan o dozi na aktivnost tirozinaze, a inhibicijski učinak pri 50-100 lM RPE bio je veći od učinka arbutina i vitamina C. Ti su rezultati dodatno potvrđeni procjenom učinka RPE na izlučivanje melanina i ekspresija tirozinaze u stanicama melanoma B16F10 tretiranih a-MSH. Keratinociti izlučuju a-MSH kako bi zaštitili kožu od pretjeranog izlaganja UV zračenju, što potiče aktivaciju melanocita za proizvodnju melanina.5 Potvrđeno je da liječenje a-MSH-om izaziva ekspresiju tirozinaze i proizvodnju melanina u melanocitima (Slika 1B, C). Međutim, ekspresija tirozinaze u a-MSH-induciranim B16H10 stanicama bila je potisnuta ovisno o dozi tretmanom RPE (Slika 1B), u skladu s prethodno opisanim rezultatima. Štoviše, RPE (100 i 200 LG/mL) značajno je smanjio sadržaj melanina koji je bio povećan u a-MSH-stimuliranim melanocitima (slika 1C). Osim toga, potvrdili smo da ekstrakt nije inducirao staničnu citotoksičnost pri koncentracijama od £1000 LG/mL u stanicama B16F10 (slika 1D).

RPE smanjuje ekspresiju MITF inducirajući aktivaciju MAPK u stanicama melanoma B16F10

Razni signalni putovi mogu posredovati u stvaranju pigmenta melanina. Melanogenezu kontroliraju MAPK-ovi koji su kategorizirani u tri podtipa koji se sastoje od ERK, JNK i p38 i uzvodnih aktivatora MEK, MKK4 ili MKK3/6, transkripcijskom regulacijom ekspresije MITF-a i tirozinaze.21 Fosforilacija p38 MAPK regulira melanogenezu stimulirajući proteasomalnu degradaciju melanogenih enzima.6 Poznato je da ERK snižava ekspresiju MITF-a i melanogenezu putem fosforilacije više od 160 proteina.10 Osim toga, JNK je uključen u proliferaciju i apoptozu stanica raka te također kontrolira melanogenezu regulacijom ekspresije MITF-a.

Kako bi se pojasnio mehanizam odgovoran za biološku aktivnostRPE, istražili smo učinak RPE na signalni put MAPK putem Western blot analize. Kao što je prikazano na slici 2, pokazalo se da tretman RPE fosforilira MEK-ERK, MKK4/7-JNK i MKK3/6- p38 MAPK putevi u stanicama B16F10. Uz to, fosforilacija MAPKKs-MAPKs bila je značajno pojačana s povećanjem koncentracija RPE. Nadalje, primijetili smo da je RPE smanjio ekspresiju MITF-a. Ovi rezultati sugeriraju da RPE inhibira MITF i ekspresiju tirozinaze aktiviranjem MAPK signalnih putova.

RPE izaziva učinak izbjeljivanja kože na ljudskoj koži

U ovoj studiji, učinak odRPEna svjetlinu ljudske kože dodatno je potvrđeno u dvostruko slijepom kliničkom ispitivanju. Svaki ispitanik primio je dvije različite formulacije, jednu s 0.05 posto (v/v) RPE i jednu bez RPEon svaku polovicu lica jednom dnevno tijekom 6 tjedana. Svjetlina kože procijenjena L* vrijednošću procijenjena je korištenjem SkinColorCatch (Delfin Technologies). Kao što je prikazano na slici 3, svjetlina kože u prisutnosti tretmana s formulacijom koja sadrži 0,05 posto (v/v) RPE značajno je povećana u usporedbi s kontrolama. Liječenje RPE-om tijekom 3 tjedna rezultiralo je značajnim povećanjem vrijednosti L*, a učinak se dodatno povećavao kako je trajanje liječenja trajalo.

RPE sprječava degradaciju kolagena inhibicijom MAPK-MMP-1 u HDF-ovima

UV zračenje stvara oksidativni stres i tako pokreće razgradnju kolagena inducirajući aktivaciju MMP-a.2 MMP-1 je važan čimbenik u procesu fotostarenja jer specifično cijepa kolagen tipa I.3 Ekspresija MMP-a-1 je posredovana MAPK kao što su ERK, p38 MAPK i JNK, naknadno povećavajući aktivaciju transkripcijskog faktora AP-1.22 Kao podjedinica AP-1, c-Jun se također inducira kao odgovor na aktivaciju MAPK stimuliranu UV zračenjem .23 Nastojali smo istražiti je lismanjenje boraučinak RPE određen je stupnjem supresije MMP-1 i MMP-1-posredovane uzvodne signalne transdukcije u HDF-ovima ozračenim SUV-om. Također je procijenjena razina ekspresije kolagena tipa I koja odražava količinu kolagena sintetiziranog u stanicama. Kao što je prikazano na slici 4A, B, SUV zračenje rezultiralo je smanjenom ekspresijom tipa Ikolagena i povećanom ekspresijom MMP-1 u HDF-ovima. Međutim, ekspresija razina kolagena tipa I smanjena SUV zračenjem dramatično je obnovljena RPE tretmanom, koji je također značajno oslabio povećane razine MMP-1 ekspresije inducirane SUV zračenjem. Uz to, ispitivan je učinak RPE na fosforilaciju AP-1 i MAPK izazvanu SUV-om kako bi se razjasnili signalni putovi uključeni u ekspresiju MMP-a posredovanu SUV-om-1. Rezultati su pokazali da povećana fosforilacija c-Jun u HDF-ovima izazvanim SUV-om bio je izrazito potisnut od straneRPEna način ovisan o dozi (slika 4C). Nadalje, RPE je inhibirao SUV-induciranu fosforilaciju MEK ERK, MKK4/7-JNK i MKK3/6-p38 (Slika 4D-F). Ovi rezultati sugeriraju da RPE ublažava razgradnju kolagena izazvanu SUV-om suzbijanjem ekspresije MMP-1 kroz regulaciju uzvodnog AP-1 i MAPKs signalnih putova u HDF-ovima.

RPE smanjuje ekspresiju MMP-1 izazvanu SUV-om smanjujući AP-1 i MAPKK-MAPK signalizaciju u tkivu ljudske kože

Kako bismo dodatno potvrdili svojstva RPE-a protiv fotostarenja in vivo, prethodno smo obradili uzorke tkiva ljudske kože 1 sat, nakon čega je uslijedilo 46 kJ/m2 SUV zračenja. Kao što je prikazano na slici 5A, ekspresija MMP-1 je značajno povećana izloženošću SUV-u, dokRPEliječenje je potisnulo razine ekspresije MMP-1 izazvane SUV-om. Uz to, analiza IHC bojenja otkrila je zaštitni učinak RPE na debljinu epiderme izloženošću SUV-u pokazujući razinu ekspresije MMP-1 u tkivu kože. Ekspresija MMP-1 u modelu ljudske kože tretiranom SUV-om bila je zamjetno povećana, dok je tretman RPE smanjio ekspresiju MMP-1 izazvanu SUV-om (Slika 5B). AP-1 stimulira ekspresiju MMP-1,24 a MAPK su glavni posrednici ekspresije MMP-1 izazvane UV zračenjem regulacijom transaktivacije AP-1.25 Kao što je prikazano na slici 5C, RPE je inhibirao SUV-induciranu fosforilaciju c-Jun u tkivu ljudske kože, što ukazuje na smanjenje transkripcijske aktivacije AP-1 pomoću RPE. Štoviše, RPE je potisnuo SUV-induciranu fosforilaciju MEK-ERK, MKK4/7-JNK i MKK3/6-p38 (Slika 6). Zajedno, ovi rezultati sugeriraju da RPE potiskuje SUV-induciranu proizvodnju kolagena u dermalnim stanicama i tkivu kože.

ekstrakt cistanche tubulosa

RASPRAVA

Mnogi kultivari ukrasnih ruža koji danas postoje odavno se koriste u prehrambene i medicinske svrhe. Doista, različiti bioaktivni spojevi od interesa prisutni su u biljci ruže, uključujući fenolne spojeve. 26 Prethodno smo izvijestili o protuupalnoj aktivnosti kožeRPEkoristeći mišje epidermalne stanice, u kojima je RPE smanjio ekspresiju COX-2 induciranu SUV-om inhibicijom MAPK signalnog puta.

Bliska veza između upale i procesa starenja dobro je utvrđena,28 te smo pokušali istražiti tu vezu u kontekstuizbjeljivanje kožeiprotiv boraformacijske aktivnosti. Kao što je prikazano na slici 1, RPE ovisno o dozi potiskuje in vitro aktivnost tirozinaze i njenu ekspresiju u stanicama B16F10. Nadalje, konačni ishod pigmentacije kože, proizvodnja melanina, bio je inhibiran tretmanom RPE u stanicama B16F10. RPE je također inducirao fosforilaciju MAPK-a i njegovog uzvodnog aktivatora MAPKK-a, nakon čega je uslijedilo smanjenje ekspresije MITF-a (slika 2). Poznato je da su MAPK ključni signalni čimbenici koji reguliraju melanogenezu u melanocitima.21 Putovi ERK i JNK uključeni su u brojne korake prijenosa signala, a također sudjeluju u regulaciji MITF-a, što sekvencijalno dovodi do inhibicije tirozinaze i melanogeneze.9 U međuvremenu, aktivacija p38 MAPK dovodi do inhibicije sinteze melanina induciranjem razgradnje proteina tirozinaze.6 Uzeti zajedno, ovi rezultati pokazuju da RPE inhibira melanogenezu u stanicama melanoma B16F10 putem inhibicije MITF-a i transkripcije tirozinaze, a učinak RPE-a javlja se zajedno s aktivacijom MAPKK-MAPK signalnih putova.

Da biste potvrdili je liizbjeljivanje kožei aktivnosti RPE-a protiv stvaranja bora vrijede za ljudsku kožu, liječili smo dobrovoljce RPE-om 6 tjedana kako bismo procijenili aktivnost izbjeljivanja kože. Također smo procijenili ex vivo tkivo ljudske kože 10 dana kako bismo procijeniliprotiv boraučinci formacije. Tretman formulacijom koja sadrži RPE značajno je povećao L* vrijednosti, mjernu jedinicu za bjelinu kože (slika 3). Nadalje, većina dobrovoljaca odgovorila je da je stanje njihove kože, uključujući bjelinu, poboljšano formulacijom koja sadržiRPE, na temelju anketnog upitnika (podaci nisu prikazani).

SUV zračenje smatra se primarnim čimbenikom u procesima povezanim sa starenjem kože.4 U ovoj studiji, RPE ne samo da je obnovio sintezu prokolagena, već je i potisnuo ekspresiju MMP-1 induciranu SUV-om u HDF-ovima (slika 4). Nadalje, IHC analiza bojenja pokazala je da RPE može oslabiti SUV-induciranu ekspresiju MMP1 u tkivu kože (slika 5B). Osim toga, istražili smo utječe li RPE na faktore transkripcije kao što su MAPK i AP-1. Otkrili smo da su razine proteina bile povišene u HDF-u ozračenom SUV-om i tkivu kože, dokRPEznačajno su inhibirali MAPKK-MAPK put i AP-1aktivaciju. Nakon izlaganja SUV-u, rezultirajući ROS može djelovati kao aktivator za nekoliko molekularnih putova, uključujući MAPK put koji aktivira AP-1 i nuklearni faktor-kappaB transkripciju.29 Ti putovi doprinose ekspresiji brojnih gena uključujući MMP, što dovodi do nedostatka kolagena i bora.12 U prethodnoj smo studiji također pokazali da RPE sadrži visoke koncentracije antioksidansa kao što su antocijanini, polifenoli i flavonoidi, čime se osigurava određena razina protuupalnog kapaciteta protiv izlaganja SUV-u.27 Stoga, zaštitni učinak RPE-a na oštećenje kože zračenjem SUV-a prikazano u ovoj studiji može se pripisati njegovom antioksidativnom kapacitetu.

Zaključno, primijetili smo daRPEpokazuje izbjeljivanje kože iprotiv boraučinci dok inhibiraju aktivnost tirozinaze i stvaranje melanina u melanocitima. Antimelanogena svojstva RPE mogu se izazvati aktivacijom MAPKK-MAPK signalnog puta. Osim toga, RPE ne samo da potiče sintezu prokolagena, već također inhibira ekspresiju MMP-a koja je inducirana izloženošću SUV-u u kožnim fibroblastima i tkivu, potiskivanjem puta MAPKK-MAPK i aktivacije AP-1. Štoviše, kod dobrovoljaca nisu otkriveni nikakvi negativni učinci povezani sa stabilnošću formulacije. Naša otkrića pokazuju da bi RPE mogao biti učinkovit biomaterijal za zaštitu kože, s primjenom u kliničkom i/ili kozmetičkom tretmanu pigmentacije kože i bora.

dodaci cistanche