Napredak istraživanja prirodnih proizvoda tradicionalne kineske medicine u liječenju Alzheimerove bolesti
Mar 02, 2022
Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-pošta:audrey.hu@wecistanche.com
Jianjun Gao, Yoshinori Inagaki, Xuan Li, Norihiro Kokudo, Wei Tang
Sažetak
Alzheimerova bolest(AD) je teško stanje u društvima koja stare. Iako istraživanja ove bolesti brzo napreduju, do sada je malo vrlo učinkovitih lijekova dostupno za AD(Alzheimerova bolest)pacijenata. Trenutno naširoko korišteni lijekovi poput donepezila i galantamina prolazno poboljšavaju simptome bolesnika s blagim do umjerenim AD-om(Alzheimerova bolest). Teško da su sposobni spriječiti, zaustaviti ili preokrenuti napredovanje ove bolesti. U dugoj povijesti razvoja tradicionalne kineske medicine, mnoge su biljke otkrivene i korištene za liječenje bolesti demencije u klinikama u Kini. Posljednjih desetljeća izolirano je nekoliko tvari iz ovih biljaka i njihove učinkovitosti protiv AD-a(Alzheimerova bolest)bili testirani. Nekiflavonoidi, alkaloide, fenilpropanoide, triterpenoidne saponine ipolisaharidipokazalo se da imaju potencijalnu učinkovitost protiv AD (Alzheimerova bolest)putem ciljanja višestrukih patoloških promjena ove bolesti. U ovom smo članku pregledali napredak istraživanja o učinkovitosti i temeljnim mehanizmima tih sredstava.
Ključne riječi: flavonoidi, alkaloidi, fenilpropanoidi, triterpenoidni saponini, polisaharidi
1. Uvod
Alzheimerova bolest(AD) karakterizira progresivno pogoršanje intelekta uključujući pamćenje i kognitivne funkcije. To je najčešća vrsta demencije među starijim osobama, koja čini 50-75 posto svih slučajeva demencije (1). Broj AD(Alzheimerova bolest)broj pacijenata procijenjen je na 36 milijuna u 2010. i utrostručit će se u svijetu do 2050. (2). U Kini se ta brojka trenutno procjenjuje na 9 milijuna i stopa prevalencije AD(Alzheimerova bolest)u populaciji starijoj od 60 godina je 2,43 posto (3,4). Proporcionalno povećanje u sljedećih četrdeset godina u broju ljudi s AD-om(Alzheimerova bolest)bit će mnogo strmiji u Kini jer je ona svjedok starenja društva u kojem će stanovništvo starije od 60 godina činiti otprilike 31 posto (oko 400 milijuna izračunato na osnovu trenutne populacije) cjelokupnog stanovništva do godine 2050 (5). Ovi epidemiološki podaci oslikali su manje optimistične izglede u prevenciji i liječenju ove bolesti u svijetu, posebno u zemljama u kojima društvo ubrzano stari, poput Kine.
Trenutno odobreni lijekovi za liječenje AD(Alzheimerova bolest), npr. donepezil, rivastigmin, galantamin i memantin, imaju za cilj ili inhibirati acetilkolin esterazu kako bi se povećala razina neurotransmitera acetilkolina ili antagonizirati receptore glutamata tipa N-metil-D-asparaginske kiseline (NMDA) kako bi se spriječila nenormalna stimulacija neurona (6, 7). Ti lijekovi, međutim, pokazuju skromne i prolazne učinke u poboljšanju manifestacije bolesti i teško da bi mogli spriječiti, zaustaviti ili poništiti bolest (2). Tipičan tijek AD(Alzheimerova bolest)traje desetak godina, od najblaže faze kada se pojavljuju simptomi poput problema s pamćenjem do najteže faze kada pacijenti moraju ovisiti o drugima za osnovne aktivnosti svakodnevnog života i na kraju umiru u potpuno bespomoćnom stanju. Dugo trajanje AD(Alzheimerova bolest)i nedostatak učinkovitih ili ljekovitih tretmana donose ogroman emocionalni i financijski teret pacijentima, njihovim obiteljima i društvu.
Istraživanje prirodnih djelatnih tvari iz ljekovitog bilja za liječenje AD(Alzheimerova bolest)privukla je veliku pozornost u cijelom svijetu. Do sada su lijekovi, uključujući galantamin i huperzin A koji potječu iz tradicionalnih kineskih biljaka, razvijeni i korišteni u klinikama za liječenje blage do umjerene AD(Alzheimerova bolest)(8,9). Osim toga, različita prirodna sredstva izolirana iz tradicionalnih kineskih lijekova navodno imaju anti-AD(Alzheimerova bolest)učinkovitost kroz različite mehanizme i zahtijevaju daljnja istraživanja. U ovom članku dajemo retrospektivni pogled na napredak istraživanja prirodnih proizvoda izoliranih iz tradicionalne kineske medicine u liječenju AD-a.(Alzheimerova bolest)i njihove temeljne mehanizme.
Cistanche ima anti-Alzheimerova bolest
2. Etiologija AD(Alzheimerova bolest)
OGLAS(Alzheimerova bolest)povezan je s normalnim starenjem, ali pokazuje intrinzične razlike (2). Temeljni mehanizmi nastanka ove bolesti do sada nisu u potpunosti razjašnjeni. Postmortem AD(Alzheimerova bolest)bolesnici su pokazali atrofiju cerebralnog tkiva, posebice gubitak neurona u hipokampusu i bazi prednjeg mozga (2). Najočitije karakteristike patoloških promjena u mozgu AD(Alzheimerova bolest)pacijenata su izvanstanične naslage amiloidnog proteina (A) i unutarstanična prisutnost neurofibrilarnih čvorova (NFT). Analize gena u obiteljskoj AD(Alzheimerova bolest)bolesnika, što vjerojatno čini manje od 1 posto AD(Alzheimerova bolest)slučajeva, donijeli su važan napredak u istraživanju mehanizama nastanka ove bolesti (10). Studije su pokazale da su naslage A povezane s genskim varijacijama proteina prekursora amiloida (APP) i/ili abnormalnim procesom transformacije (2). APP je kodiran genom APP koji se nalazi na kromosomu 21 i transformira se u A cijepanjem s -sekretazom. Rušenje gena koji kodira -sekretazu, tj. APP cijepajući enzim 1 (BACE1), dovodi do smanjenja proizvodnje A (11). Agregacija i nakupljanje A može biti rezultat povećane proizvodnje A, smanjene razgradnje enzimima koji razgrađuju A ili smanjenog prolaska kroz krvno-moždanu barijeru. Neurotoksične aktivnosti A se ispoljavaju kroz mehanizme stanične apoptoze i/ili upale u moždanom tkivu. Ovi rezultati istraživanja sugeriraju obećavajuće ciljeve za dizajn lijekova. Međutim, od početka obiteljske AD(Alzheimerova bolest)nije prevladavajući, druge hipoteze patogeneze, uključujući hiperfosforilaciju Tau proteina, cerebralnu ishemiju, ekscitotoksičnost glutamata, oksidativni stres, oštećenje mitohondrija i neravnotežu homeostaze kalcija također su privukle pozornost i postale prihvatljive mete (12-16).
3. Prirodni aktivni sastojci protiv AD(Alzheimerova bolest)
U posljednjih nekoliko desetljeća provedeno je mnogo istraživanja kako bi se procijenio anti-AD(Alzheimerova bolest)učinci prirodnih agenasa izoliranih iz tradicionalne kineske medicine iz perspektive kao što su uklanjanje slobodnih radikala, inhibicija peroksidacije lipida, suzbijanje apoptoze neurona, poboljšanje funkcije kolinergičkih neurona i/ili poboljšanje abnormalnosti u ponašanju u eksperimentalnim životinjskim modelima. Pokazalo se da neki flavonoidi, alkaloidi, fenilpropanoidi, triterpenoidni saponini i polisaharidi imaju potencijalnu učinkovitost protiv AD-a(Alzheimerova bolest).
3.1. Flavonoidi
Flavonoidi su niz spojeva koji su široko rasprostranjeni u višim biljkama i paprati te su privukli veliku pozornost zbog svojih različitih bioloških djelovanja (17). Karakteristična kemijska struktura ovih spojeva su dva benzenska prstena s hidroksilnim skupinama povezani lancem od tri ugljika. Najčešće poznato biološko djelovanje flavonoida je njihovo antioksidativno djelovanje, što se može razumjeti iz redukcijskih svojstava fenolnih hidroksila u kemijskim strukturama. Ipak, spojevi ove vrste pokazuju različite farmakološke učinke i kliničke učinkovitosti koje ne moraju biti isključivo povezane s njihovim antioksidativnim djelovanjem, kao što su učinci na krvožilni sustav, upalni odgovor i učinci slični estrogenu (17). Ova djelovanja flavonoida čine temeljnu osnovu za njihovu anti-AD(Alzheimerova bolest)učinci. Do sada je prijavljeno da flavonoidi, uključujući flavonoide ginka, sojine izoflavone, puerarin, ukupne flavonoide stabljike i lista Baical Skullcap-a, apigenin, rodopsin, hiperozid i likvidnost, imaju snažne učinke protiv AD-a.(Alzheimerova bolest)(Stol 1).
Flavonoidi su glavna djelotvorna tvar u cistanci
3.1.1. Flavonoidi ginka:Flavonoidi ginka glavni su sastojci ekstrakta ginka bilobe (EGB). Flavonoidi ginka sastoje se uglavnom od flavonola kao što su kvercetin, kemferol i izorhamnetin te biflavonoida kao što su ginkgetin, izoginkgetin i amentoffl avon (18,19). Ovi flavonoidi ginka imaju učinak hvatanja slobodnih radikala i mogu inhibirati peroksidaciju lipida. Studije su pokazale da je mitohondrijska DNA iz mozga starih štakora pokazala oksidativno oštećenje koje je znatno veće nego kod mladih štakora (20). Osim toga, mitohondrijski glutation bio je više oksidiran, a stvaranje peroksida u mitohondrijima bilo je veće u starih nego u mladih štakora (20). Liječenje EGB-om moglo bi djelomično spriječiti indekse oksidativnog oštećenja u mozgu starih životinja (20). Druge studije pokazale su da flavonoidi ginka pokazuju neuroprotektivne učinke putem antioksidativne aktivnosti kod miševa s oštećenjem mozga uzrokovanog ishemijom-reperfuzijom (21). Jedno randomizirano, dvostruko slijepo, placebom kontrolirano i multicentrično kliničko ispitivanje pokazalo je da je EGB siguran i sposoban stabilizirati i poboljšati kognitivnu izvedbu i društveno funkcioniranje AD-a.(Alzheimerova bolest)pacijenata od 6 mjeseci do 1 godine (22). Trenutno se EGB koristi u klinikama kao medicinski lijek za liječenje AD(Alzheimerova bolest)u Kini, Francuskoj i Njemačkoj.
3.1.2. Izoflavoni soje: izoflavoni soje uključujući daidzin, daidzein, genistein, genistein, glicerin i glicitein (23,24) privukli su veliko zanimanje posljednjih godina zbog svojih učinaka sličnih estrogenu i uloge u utjecaju na metabolizam spolnih hormona. Estrogen djeluje anti-AD(Alzheimerova bolest)učinke kroz nekoliko mehanizama kao što je smanjenje proizvodnje A (25), antagoniziranje toksičnosti A (26), promicanje sinaptičkog rasta i ekspresije faktora rasta živaca (NGF) i njegovog receptora (27), itd. Iako estrogen pokazuje različite gore navedene potencijale djelovanja, njegova primjena u klinikama za liječenje AD(Alzheimerova bolest)je tužan jer također uzrokuje nuspojave na ne-neuronske stanice, kao što je povećanje incidencije raka dojke i endometrija (28-30). Studije su pokazale da fitoestrogeni poput genisteina, jednog od glavnih sastojaka sojinih izoflavona, imaju farmakološke učinke na tkivno specifičan način (31). Oni do određenog stupnja selektivno djeluju na nereproduktivna tkiva i time smanjuju rizik od nuspojava.
Studije na životinjama pokazale su da izoflavoni soje mogu poboljšati sposobnost učenja i pamćenja utječući na kolinergički sustav mozga i smanjujući gubitak neurona povezan sa starenjem, posebno kod ženki štakora (32-34). Klinička studija pokazala je da su žene u postmenopauzi koje su poduzele nadomjesnu terapiju estrogenom imale značajno manji rizik od pojave AD(Alzheimerova bolest)nego žene koje nisu (35). Drugo randomizirano, dvostruko slijepo, križno i placebom kontrolirano ispitivanje otkrilo je da su sojini izoflavoni sigurni i da imaju pozitivne učinke na kognitivnu funkciju, osobito verbalnu memoriju, kod žena u postmenopauzi (36). Smatralo se da su temeljni mehanizmi povoljnih učinaka sojinih izoflavona na kognitivnu funkciju povezani s njihovim potencijalom oponašanja djelovanja i funkcija estrogena u mozgu (37) i promicanja sinteze acetilkolina i neurotrofnih čimbenika kao što je neurotrofni čimbenik koji potječe iz mozga (37). BDNF) i faktor rasta živaca (NGF) u hipokampusu i frontalnom korteksu (38,39). Ove su studije pružile dokaze o potencijalnoj korisnosti sojinih izoflavona u liječenju AD-a(Alzheimerova bolest)pacijenata.
3.1.3. Puerarin:Puerarin je izoflavonski glikozid ekstrahiran iz vrsta iz obitelji Leguminosae kao što je Radix Pueraria i trenutno se koristi za liječenje ishemijske cerebrovaskularne bolesti i drugih vaskularnih disfunkcija u Kini (40). Istraživanja su pokazala da puerarin ima snažne učinke u poboljšanju poremećaja učenja i pamćenja izazvanih skopolaminom ili D-galaktozom na mišjem modelu (41). Yan i sur. objavili su da puerarin štiti neurone od apoptoze u korteksu i hipokampusu AD(Alzheimerova bolest)štakora uzrokovane A 25-35 putem regulacije A 1-40 i ekspresije Baxa u moždanim tkivima, čime se ublažava prostorno učenje i oštećenje pamćenja oboljelih životinja (42). Anti-AD(Alzheimerova bolest)Također je sugerirano da su učinci puerarina povezani s njegovim sposobnostima da smanji razine lipidne peroksidaze i poveća razine superoksid dismutaze u moždanom tkivu, pojačavajući cerebralni protok krvi i poboljšavajući mikrocirkulaciju mozga (43,44).
3.1.4. Ukupni flavonoidi stabljike i lista Baical Skullcap:Baical Skullcap je često korištena tradicionalna kineska medicina. Studije njegovih aktivnih sastojaka otkrile su da ukupni flavonoidi ekstrahirani iz stabljike i lista, uglavnom uključujući scutellarin, baicalin i chrysin, pokazuju niz farmakoloških učinaka kao što su protuupalni učinak, prevencija oštećenja miokarda uzrokovanog ishemijom-reperfuzijom i poboljšani cerebralna ishemija (45,46). Što se tiče njegovih učinaka protiv AD(Alzheimerova bolest), Zuo i sur. otkrili su da su ukupni flavonoidi stabljike i lista Baical Skullcap sposobni zaštititi hipokampalne neurone od oštećenja izazvanih injekcijom A 25-35 u hipokampus štakora (47). Temeljni mehanizmi bili su povezani s njegovim djelovanjem na smanjenje nakupljanja lipidnog peroksida i proliferacije glijalnih stanica izazvanih A 25-35 (47). Druga studija koju su proveli Ye i sur. pokazalo je da ukupni flavonoidi ublažavaju povrede pamćenja i učenja te štite neurone hipokampusa od morfoloških promjena u AD-u(Alzheimerova bolest)štakora izazvane injekcijom A 25-35 (48). Ove su studije ukazale na potencijalnu učinkovitost ukupnih flavonoida stabljike i lista baicalske klobučevine protiv AD(Alzheimerova bolest).
3.1.5. Likviritin:Liquiritin je ekstrakt korijena Glycyrrhizauralensis Fisch. (49). Yang i sur. istraživali su zaštitne učinke likviritina na primarno uzgojene hipokampalne neurone štakora (50). Otkrili su da je prethodna obrada liquirtinom tijekom 6 sati smanjila povišene razine intracelularne koncentracije Ca2 plus i apoptozu neurona uzrokovanu A 25-35. Liquirtin je također sposoban pojačati učinke faktora rasta živaca u proširenju neuroaksonala (50). Vrijedno je napomenuti da liquirtin također može specifično inhibirati aktivnost acetilkolinesteraze i pospješiti diferencijaciju neuronskih matičnih stanica u kolinergičke neurone (50,51). Neuroprotektivni i neurotrofični učinci čine likvirtin obećavajućim sredstvom protiv AD(Alzheimerova bolest).
3.1.6. Apigenin:Apigenin je flavon koji se obično dobiva iz Apium graveolens (52). To je snažno kelirajuće sredstvo koje može smanjiti metalne ione koji sudjeluju u reakcijama radikala i stoga smanjiti stvaranje slobodnih radikala (53). Osim toga, apigenin bi mogao poslužiti kao antioksidans za uklanjanje slobodnih radikala kao što su kisik, dušikov oksid (NO) i superoksidni anion. S druge strane, apigenin ima učinke slične estrogenu koji su slični djelovanju estradiola (54). Zbog ovih bioloških djelovanja, objavljeno je da apigenin štiti ljudske stanice neuroblastoma SH-SY5Y od apoptoze inducirane oksidativnim stresom in vitro (55). In vivo, utvrđeno je da apigenin poboljšava pamćenje i poremećaje učenja starenja miševa izazvane D-galaktozom (56).
3.1.7. Ostali flavonoidi:Hiperozid je flavonol izoliran iz vrste Hypericum (57). U mišjem modelu ishemijsko-reperfuzijske ozljede, hiperozid se pokazao sposobnim za inhibiciju opadanja aktivnosti laktat dehidrogenaze u moždanom tkivu i poboljšanje pamćenja i poremećaja učenja modelnih miševa (58). Rhodopsin je također flavonol dobiven iz korijena Rhodiola Rosea (59). Rodopsin djeluje kao antioksidans koji hvata slobodne radikale, smanjuje sadržaj lipidnog peroksida i inhibira degeneraciju mitohondrija u stanicama velikog mozga i hipokampalnih piramidalnih stanica (44). Zabilježeno je da je primjena rodopsina sposobna poboljšati pamćenje i sposobnosti učenja starenja ili AD(Alzheimerova bolest)miševi (60).
3.2. Alkaloidi
Alkaloidi su skupina prirodnih cikličkih spojeva s nekoliko bioaktivnosti koji sadrže atome dušika u negativnom oksidacijskom stanju. Spojevi u ovoj kategoriji djeluju anti-AD(Alzheimerova bolest)učinci uglavnom kroz povećanje aktivnosti kolinergičkog sustava, suzbijanje upale i/ili pobuđivanje središnjeg živčanog sustava. Galantamin, alkaloid izoliran iz biljaka vrste Lycoris, široko je prihvaćen kao učinkovit lijek za liječenje AD(Alzheimerova bolest)diljem svijeta. Ostali alkaloidi uključujući huperzin A, sofokarpidin, klauzulum, arekolin i sekurinin koriste se lokalno kao anti-AD(Alzheimerova bolest)agent u klinikama ili još uvijek u fazi studija (Tablica 2).
Cistanche sadrži bogatAlkaloidi
3.2.1. Huperzin A:Huperzin A je reverzibilni i selektivni inhibitor kolinesteraze izoliran iz kineske biljke Huperzia serrate (61). Također je antagonist NMDA receptora koji može smanjiti oštećenje mozga izazvano glutamatom (62). Visoko je topiv u lipidima i stoga lako prolazi kroz krvno-moždanu barijeru i distribuira se u mozak nakon oralne primjene. Studije na životinjama otkrile su da je sposoban poboljšati funkcije pamćenja štakora (63). Klinička ispitivanja u Kini pokazala su da je podjednako učinkovit u usporedbi s galantaminom i donepezilom, a možda čak i sigurniji u pogledu nuspojava (62). Odobren je i naširoko se koristi za liječenje dismnezije starijih osoba, amnezije ili AD-a(Alzheimerova bolest)pacijenata u Kini od 1994. Posljednjih je godina huperzin A privukao sve veću pozornost u SAD-u i europskim zemljama zbog svog potencijala protiv AD(Alzheimerova bolest)učinkovitosti. Multicentrično, dvostruko slijepo, placebom kontrolirano ispitivanje faze II, koje je uključilo 177 sudionika s blagim do umjerenim AD-om(Alzheimerova bolest), dovršen je u SAD-u u studenom 2007. (64). Rezultati ovog ispitivanja pokazali su da su spoznaja i dnevne aktivnosti bile blago poboljšane kod pacijenata koji su primali 400 ug huperzina A dva puta dnevno tijekom 16 tjedana. Međutim, nisu primijećene značajne promjene u ukupnoj promjeni bolesti ili psihijatrijskih ocjena prema AD-u(Alzheimerova bolest)Ljestvica procjene – kognitivna (ADAS-Cog) ljestvica. Trenutno se huperzin A koristi kao dodatak prehrani za podršku pamćenju u SAD-u. Unatoč tome, pregled Cochrane baze podataka iz 2009. godine, uključujući četiri randomizirana, kontrolirana ispitivanja u Kini koja su uključivala 474 pacijenata koji su primali 300-500 ug huperzina A dnevno tijekom 8-24 tjedana, izvijestio je da se huperzin A dobro podnosi lijek koji bi mogao značajno poboljšati kognitivne performanse i aktivnosti u svakodnevnom životu pacijenata s AD-om(Alzheimerova bolest)(62). S obzirom na ovu razliku, daljnja pojašnjenja o učinkovitosti huperzina A protiv AD(Alzheimerova bolest)su još uvijek potrebni.
3.2.2. Sofokarpidin:Sofokarpidin je izoliran iz korijena Sophora flavescens (65). Studije su otkrile da je sofokarpidin smanjio razinu ekspresije interleukina-1 u cerebralnom korteksu i hipokampusu i ublažio oštećenje mitohondrija neuronskih stanica hipokampusa u AD-u(Alzheimerova bolest)štakorski model koji je uspostavljen injekcijom ibotenske kiseline u hipokampus (66). Stoga, anti-AD(Alzheimerova bolest)učinci sofokarpidina mogu se pripisati njegovom djelovanju u ublažavanju upale suzbijanjem otpuštanja upalnih citokina u mozgu, čime se poboljšava status ozlijeđenih neuronskih stanica i smanjuje apoptoza neurona.
3.2.3. Klauzenamid:Klauzenamid je izoliran iz lišća Clausena lansium (lour) Skeels iz obitelji Rutaceae [67]. Studije na životinjama pokazale su da je L-klauzula amid sposobna poboljšati poremećaje prostorne diskriminacije štakora izazvane A putem pojačavanja aktivnosti holin acetiltransferaze korteksa (68). Nadalje, L-klauzula je pospješila otpuštanje glutaminske kiseline iz sinaptosoma malog mozga, povećala amplitudu dugotrajne potenciranosti (LTP) u CA1 zoni hipokampusa i povećala debljinu moždane kore, čime se poboljšala sposobnost učenja i pamćenja štakora ( 68). Dokazano je da je nootropni učinak L-clause amida snažniji od onog piracetama (44).
3.2.4. Ostali alkaloidi:Spoj MA9701 sintetiziran je na temelju strukture arekolina koji je alkaloid izoliran iz sjemena Areca catechu. Poboljšao je poremećaj učenja i pamćenja kod miševa izazvan primjenom etanola ili skopolamina (69). Smatralo se da su ovi učinci MA9701 povezani s njegovim aktivnostima u agoniziranju M acetilkolinskog receptora u korteksu i hipokampusu. Securinine je alkaloid izoliran iz lišća Securinega suffruticosa (70). Dokazano je da je sekurinin sposoban pobuditi središnji živčani sustav i antagonizirati receptor -aminomaslačne kiseline (GABA). Davanje sekurinina značajno je poboljšalo hiporeproduktivnost pamćenja kod miševa uzrokovanu 40-postotnim alkoholom (71).
3.3. Fenilpropanoidi
Fenilpropanoidi su raznolika obitelj organskih spojeva koje sintetiziraju biljke iz aminokiseline fenilalanina. Karakteristike kemijske strukture ovih spojeva su da se sastoje od jedne ili više strukturnih jedinica C6-C3. Spojevi u ovoj kategoriji koji imaju anti-AD(Alzheimerova bolest)potencijali uključuju salvianolnu kiselinu B (SAB), kurkumin, šisandru, šizanhenol i ostiol (tablica 3).
3.3.1. SAB:SAB, izoliran iz korijena Salvia miltiorrhiza, reprezentativan je spoj u ovoj kategoriji (72). Njegov anti-AD(Alzheimerova bolest)učinke i mehanizme opširno su istraživali Zhang i njegovi kolege (73). Pokazali su niz rezultata koji potvrđuju da je SAB obećavajući agens u liječenju neurodegenerativnih bolesti. Prvo, SAB je snažan prirodni antioksidans, koji može ukloniti superoksidne anione i hidroksilne radikale i inhibirati peroksidaciju lipida. Studije su pokazale da je značajno smanjio razine malondialdehida (MDA), produkta lipidne peroksidacije, u tkivu mozga štakora koji su bili tretirani FeSO4-cisteinom ili vitaminom C-NADPH (74). Drugo, SAB štiti mitohondrije neurona od oštećenja i potiskuje apoptozu neurona uzrokovanu cerebralnom ishemijom-reperfuzijom. Istraživači su ukazali da je došlo do apoptoze stanica u ishemijskom području nakon okluzije cerebralne arterije tijekom 1 sata ishemije nakon koje je uslijedila 24 sata reperfuzije (73,75). Daljnje studije su otkrile da je ova cerebralna ishemija-reperfuzija oštetila strukturu mitohondrijske membrane i smanjila membranski potencijal, potičući otpuštanje citokroma c i uzrokujući povećanu ekspresiju kaspaze{{10}} (73,75). Prethodni tretman štakora s 10 mg/kg SAB učinkovito je spriječio te izmjene mitohondrija i blokirao apoptozu moždanih stanica (73). Treće, SAB potiskuje nakupljanje A 1-40, sprječava mitohondrije neuronske stanične linije PC12 da budu ozlijeđeni A 1-40, čime se smanjuje neuronska apoptoza. Pod mikroskopom je uočeno da se A 1-40 u koncentraciji od 100 mg/L počeo okupljati i formirati fibrile kada je inkubiran na 25 stupnjeva tijekom 30 sati (73). SAB u koncentraciji od 10 nmol/L gotovo je potpuno potisnuo stvaranje fibrila A 1-40 (73). Daljnje studije otkrile su da SAB u rasponu koncentracija od 0.01-1 × 10‒6 M inhibira apoptozu PC12 stanica uzrokovanu A 1-40 (73). Osim toga, utvrđeno je da je skupljeni A 25-35 toksičan za stanice PC12 nakon 48 h tretmana, što se može značajno ublažiti s 1 μmol/L SAB (73). Četvrto, SAB je sposoban suzbiti porast intracelularnog kalcija i reaktivnih kisikovih vrsta (ROS) uzrokovanih A 1-40. Studije su pokazale da se intracelularna koncentracija kalcija povećala sa 188 na 326 mmol/L u neuronskim stanicama PC12PS2N1411 nakon 24 sata tretmana s A 1-40 (73). Razine intracelularnog kalcija smanjene su na 249 odnosno 233 mmol/L kada su inkubirane s 0,1 × 10‒6 odnosno 1 × 10‒6 mmol/L SAB. A 1-40 koji uzrokuje povišene razine ROS-a u mitohondrijima također je značajno smanjen istim koncentracijama SAB-a (73). Ove su studije ukazale na potencijalnu vrijednost SAB-a u liječenju AD-a(Alzheimerova bolest). Međutim, i dalje su potrebna klinička ispitivanja kako bi se ispitala njegova sigurnost i anti-AD(Alzheimerova bolest)efikasnost.
3.3.2. Kurkumin:Kurkumin, izoliran iz korijena Curcuma longa L., još je jedan reprezentativni spoj u ovoj kategoriji (76). Studije posljednjih godina pokazale su da ima niz bioaktivnosti kao što je anti-AD(Alzheimerova bolest), antitumorsko, protuupalno, antioksidativno i anti-HIV djelovanje. Temeljni mehanizmi anti-AD(Alzheimerova bolest)otkriveno je da učinci kurkumina uključuju sljedeće aspekte. Prvo, kurkumin suzbija stvaranje amiloidnih naslaga. Utvrđeno je da je kurkumin sposoban ne samo ometati agregaciju A koja dovodi do stvaranja A fibrila, već i destabilizirati prethodno oblikovane A fibrile (77). Osim toga, objavljeno je da kurkumin potiskuje povišenu regulaciju mRNA APP i -sekretaze uzrokovanu ionima bakra ili mangana na način ovisan o vremenu i dozi (78). Drugo, kurkumin inhibira upalu izazvanu A. Giri i sur. pokazalo je da kurkumin u rasponu koncentracija od 12.5-25 μM smanjuje ekspresiju citokina TNF i IL-1 i kemokina MIP-1, MCP-1 i IL{{11 }} u monocitima potiskivanjem interakcije odgovora ranog rasta-1 (Egr-1) s A 1-40 ili fibrilarnim A 1-42 (79). Treće, kurkumin ima snažno antioksidativno djelovanje. Kim i sur. pokazalo je da kurkumin štiti neuronske stanice PC12 i endotelne stanice ljudske pupčane vene od ozljeda A 42 zbog svojih jakih antioksidativnih svojstava (80). Drugo istraživanje pokazalo je da je prethodna obrada PC12 stanica s 10 ug/mL kurkumina smanjila razinu antioksidativnog enzima i oštećenja DNK uzrokovana A 25-35 (81). Četvrto, kurkumin inhibira aktivnost acetilkolinesteraze. U in vitro studiji, kurkumin je inhibirao aktivnost acetilkolinesteraze s IC50 vrijednošću od 67,69 μM (82). S obzirom na gore navedene aktivnosti kurkumina, do sada je provedeno najmanje 6 kliničkih ispitivanja za procjenu učinkovitosti kurkumina samog ili u kombinaciji s drugim lijekovima u liječenju AD-a.(Alzheimerova bolest)ili bolesti s kognitivnim poremećajima (83). Od tih studija dva su završena, jedan je prekinut iz različitih razloga, a tri su u tijeku. Objavljeni rezultati ne pokazuju značajne razlike u kognitivnoj funkciji između placebo i kurkumin skupine. Rezultati kliničkih ispitivanja koja se trenutno provode očekuju se i zahtijevaju da dodatno svjedoče o učinkovitosti kurkumina u liječenju AD-a(Alzheimerova bolest).
3.3.3. Šisandron i šisanhenol:Schisandrone je lignan izoliran iz ploda Schisandra Chinensis (84). Studije su otkrile da je šisandra sposobna ukloniti radikale bez aniona superoksida i druge ROS uključujući H2O2 i ∙OH koje stvara sustav ksantin-ksantin oksidaze i smanjiti proizvodnju MDA u procesu peroksidacije lipida (44). Osim toga, Schisandra je značajno potisnula oksidativni stres i upalni odgovor izazvan A. Nadalje, šisandra je potisnula povećanje intracelularnog kalcija izazvano A, čime je održavala ravnotežu unutarstanične homeostaze kalcija i štitila neurone od apoptoze (85). Schisanhenol je još jedan aktivni sastojak izoliran iz ploda S. Chinensis. Utvrđeno je da ima učinke u zaštiti sinapsi i mitohondrija mozga štakora od ROS insulta (44). Potrebne su daljnje studije na životinjama kako bi se ispitao anti-AD(Alzheimerova bolest)djelovanje šisandre i šizanhenola.
3.3.4. Osthole:Osthole je kumarin izoliran iz biljaka iz obitelji Umbelliferae kao što je Cnidium Monnier (86). Studije su pokazale da značajno poboljšava prostornu diskriminaciju miševa i poremećaje pamćenja (87). Smatra se da je ovaj učinak ostiola povezan s njegovim svojstvima suzbijanja peroksidacije lipida i aktivnosti acetilkolinesteraze u moždanom tkivu štakora. Također je objavljeno da je osthole poboljšao poremećaje pamćenja kod miševa s ubrzanim starenjem izazvanim AlCl3-, što se pripisuje njegovom djelovanju pojačavanja aktivnosti glutation peroksidaze (GSH-Px) i superoksid dismutaze (SOD) i tako ublažava ROS- izazvana ozljeda neurona (88). Prethodne studije o ostholu uglavnom su bile usredotočene na njegove učinke u antihipertenziji, antiaritmicima, imunojačanju i liječenju infekcija. Njegova potencijalna primjena u liječenju bolesti povezanih s dismnezijom kao što je AD(Alzheimerova bolest)zahtijeva dodatna istraživanja u budućnosti.
3.4. Triterpenoidni saponini
Triterpenoidni saponin se sastoji od triterpen sapogenina i saharida. Triterpeni uključuju veliku skupinu spojeva većinom raspoređenih u konfiguraciji četiri ili pet prstena od 30 atoma ugljika s nekoliko vezanih kisika. Utvrđeno je da spojevi u ovoj kategoriji, uključujući Panax notoginseng saponine (PNS), ginsenoside i gipenozide, pokazuju potencijalne anti-AD(Alzheimerova bolest)aktivnosti (tablica 4).
3.4.1. PNS:Ovi saponini koji pripadaju tipu dammarane glavne su učinkovite komponente Panax notoginseng (89). PNS pokazuje široku biološku aktivnost uključujući protuupalno, antifibrozno, uklanjanje slobodnih radikala, usporavanje starenja, itd. Guo et al. izvijestili su da je PNS povećao sposobnost učenja i pamćenja kod demencije štakora uzrokovane injekcijom ibotenske kiseline u nucleus basalis Meynerta (NBM) (90). Utvrđeno je da je PNS ublažio ozljedu neurona pomoću A 25-35, čime se smanjila apoptoza neurona (44). Osim toga, PNS je štitio živčane stanice NG108-15 od apoptoze uzrokovane A putem stabilizacije membrane živčanih stanica (44). Nadalje, PNS je također pospješio rast živčanih stanica, produljio duljinu aksona i poboljšao sinaptičku plastičnost (44). Osim tih učinaka, PNS je spriječio smanjenje kolin acetiltransferaze i tako pojačao funkcije kolinergičkih neurona u AD-u.(Alzheimerova bolest)model štakora koji su uspostavljeni intraperitonealnom injekcijom D-galaktoze u kombinaciji s injekcijom ekscitatornog neurotoksina ibotenske kiseline u bilateralni NBM (91). Ove aktivnosti PNS-a mogu predstavljati farmakološku osnovu odgovornu za njegovo djelovanje protiv AD-a(Alzheimerova bolest).
3.4.2. Ginsenozidi:Ginsenozidi, izolirani iz Panax ginsenga CA Mey., saponini su širokih bioloških svojstava (92). Wang i sur. izvijestio je da ginsenoside Rg1 poboljšava poremećaje učenja i pamćenja kod AD(Alzheimerova bolest)model miševa induciran s A (93). Mehanizmi na kojima se temelji anti-AD(Alzheimerova bolest)učinci ginsenozida uključuju povećanje razine acetilkolina u sinaptičkoj pukotini, povećanje broja kolinergičkih receptora i poticanje sinteze nukleinskih kiselina i proteina. Studije in vitro pokazale su da ginsenoside Rg1 ublažava ROS ozljede na živčanim stanicama i potiskuje apoptozu živčanih stanica štakora (94). Studije na životinjama pokazale su da ginsenosid Rg1 potiče razvoj kranijalnih živaca i povećava broj sinapsi i gustoću muskarinskih receptora kod miševa (94). Trenutno se Radix Ginseng, kao tradicionalna kineska medicina, naširoko koristi za liječenje bolesti demencije, uključujući AD(Alzheimerova bolest)u Kini. Gore navedene studije pružaju znanstvene dokaze za korištenje Radix Ginseng kao lijeka protiv AD(Alzheimerova bolest)lijek.
3.4.3. Gipenozidi:Gipenozidi su niz saponina izoliranih iz Gynostemme pentaphyllum (95). Pokazuju jaka antioksidativna svojstva koja se očituju kao hvatanje slobodnih radikala i povećanje razine SOD-a u moždanim tkivima. Osim toga, gipenozidi su sposobni stabilizirati membranu neurona. Studije in vivo pokazale su da su gipenozidi preokrenuli degeneraciju sposobnosti učenja i pamćenja izazvanu A, što se može pripisati njihovim učincima u suzbijanju abnormalne ekspresije ciklina i ispravljanju neravnoteže homeostaze kalcija u neuronima hipokampusa (96). Ovi dokazi podupiru korištenje Herba Gynostemmatis Pentaphylli u liječenju AD-a(Alzheimerova bolest)pacijenata u klinikama.
3.5. polisaharidi
Trenutno se provode studije o anti-AD(Alzheimerova bolest)učinci polisaharida uglavnom su usmjereni na njihove aktivnosti u imunoregulaciji, antioksidaciji i produljenju života. Na primjer, polisaharidi spiruline mogu poboljšati simptome starenja miševa uzrokovane D-galaktozom (97). Polisaharidi iz Cistanche deserticola povećali su toleranciju na hipoksiju i antioksidacijsko djelovanje starih miševa (98). Polisaharidi iz Ganoderme lucidum smanjili su razinu MDA povećanjem aktivnosti SOD u hipokampusu štakora i suzbijanjem aktivacije astrocita uzrokovane A 25-35 putem imunoregulacijskih mehanizama (99). Rehmannia glutinosa oligosaharidi (NGO) ovisno o dozi poboljšali su sposobnost učenja i pamćenja kod štakora povrijeđenih cerebralnom ishemijom-reperfuzijom smanjenjem razine glutaminske kiseline u hipokampusu i povećanjem razine fosforilirane ekstracelularne kinaze regulirane signalom (ERK) i acetilkolina (100). Osim toga, NVO-i su štitili hipokampalne neurone od ozljeda glutaminskom kiselinom, što je povezano s njihovim učincima na suzbijanje pretjeranog unosa glukoze od strane neurocita (100).
4. Zaključak i izgledi
U dugoj povijesti razvoja tradicionalne kineske medicine, mnoge su biljke otkrivene i korištene za liječenje bolesti demencije u Kini. Posljednjih desetljeća, s napretkom kromatografskih i spektroskopskih tehnika, iz ovih je biljaka izolirano nekoliko tvari i njihova učinkovitost protiv AD-a(Alzheimerova bolest)testirani su i in vitro i in vivo. Nastojanja su, s jedne strane, ilustrirala načelo medicine utemeljene na dokazima za kliničku upotrebu ovih lijekova za liječenje AD(Alzheimerova bolest), a s druge strane, otkrio je mnoge monomerne sastave kao obećavajuće lijekove ili vodeće spojeve za dizajn lijekova u liječenju AD.
Trenutno korišteni lijekovi za liječenje AD(Alzheimerova bolest)uglavnom su lijekovi za liječenje simptoma. Iako poboljšavaju simptome kao što su poremećaji pamćenja i igraju ključnu ulogu u liječenju AD-a(Alzheimerova bolest)trenutno, ovi lijekovi nisu sposobni preokrenuti napredovanje AD. U svjetlu patogene složenosti AD, vjerojatno je malo vjerojatno da će jednociljani lijekovi postići zadovoljavajuće kurativne učinke. Neki agensi u kategorijama flavonoida i fenilpropanoida pokazuju višestruka biološka svojstva kojima je cilj iskorijeniti temeljne uzroke pojave AD i mogu predstavljati budući smjer razvoja novih lijekova.
Neki problemi također postoje u istraživanju i razvoju prirodnih sredstava kao anti-AD(Alzheimerova bolest)lijekovi. Rezultate pokusa ponekad je teško ponoviti ili usporediti jer se razlikuju za istu biljku u metodama izolacije ili pročišćavanja i sadržaju učinkovitih sastojaka u različitim studijama. Osim toga, djelotvornost je teško definirati zbog nedostatka lijekova pozitivne kontrole u nekim slučajevima. Istraživanje prirodnih proizvoda u prevenciji i liječenju AD(Alzheimerova bolest)započela je kasno i trenutačno je uglavnom ostala u fazi in vitro i studija na životinjama. Dugoročno, potrebno je uložiti napore u probir i odabir optimalnih sirovih lijekova, uspostaviti regulatorne standarde i normalizirati načela evaluacije učinkovitosti lijekova kako bi se otvorili novi putevi za AD(Alzheimerova bolest)istraživanje i razvoj lijekova.
Anti-Alzheimerova bolest (AD) lijek: trava cistanča
Reference
1. Svjetsko izvješće o Alzheimeru 2009. Alzheimerova bolest International. http://www.alz.co.uk/research/files/ WorldAlzheimerReport.pdf
2. Huang Y, Mucke L. Alzheimerovi mehanizmi i terapijske strategije. Ćelija. 2012.; 148:1204-1222.
3. Vijesti. Alzheimerova bolest kineski (ADC). HTTP:// www.adc.org.cn/html/news/qqzx_1268.shtml (pristupljeno 21. rujna 2012.).
4. Chen CF, He CL, Chen HX, Sun YF, Pan X. Sažetak studija o demenciji u Kini. Časopis Sveučilišta Ningbo (Edicija za obrazovne znanosti). 2012.; 34:45- 50.
5. Vijesti. http://news.xinhuanet.com/life/2010-08/20/ c_12465497.htm (pristupljeno 21. rujna 2012.).
6. Cummings JL. Alzheimerova bolest. N Engl J Med. 2004.; 351:56-67.
7. Sun XT, Jin L, Ling PX. Pregled lijekova za Alzheimerovu bolest. Drug Discov Ther. 2012.; 6:285-290.
8. Wang R, Yan H, Tang XC. Napredak u studijama huperzina A, prirodnog inhibitora kolinesteraze iz kineske biljne medicine. Acta Pharmacol Sin. 2006.; 27:1-26.
9. Takata K, Kitamura Y, Saeki M, et al. Galantaminom inducirano čišćenje amiloida-{beta} posredovano stimulacijom mikroglijalnih nikotinskih acetilkolinskih receptora. J Biol Chem. 2010.; 285:40180-40191.
10. Bertram L, Lill CM, Tanzi RE. Genetika Alzheimerove bolesti: Povratak u budućnost. Neuron. 2010.; 68:270-281.
11. Chen JG. Lijekovi u liječenju Alzheimerove bolesti. U: Farmakologija: svezak 17, Lijekovi u liječenju neurodegenerativnih bolesti središnjeg živčanog sustava (Yang BF, Su DF, ur.). 6. izdanje, People's Medical Publishing House, Peking, Kina, 2007.; str. 151-155.
12. Behl C, Davis JB, Lesley R, Schubert D. Vodikov peroksid posreduje u toksičnosti amiloidnog beta proteina. Ćelija. 1994.; 77:817-827.
13. Mark RJ, Lovell MA, Markesbery WR, Uchida K, Mattson MP. Uloga 4-hidroksinonenala, aldehidnog produkta peroksidacije lipida, u poremećaju ionske homeostaze i smrti neurona izazvane amiloidnim beta-peptidom. J Neurochem. 1997.; 68:255-264.
14. Rottkamp CA, Raina AK, Zhu X, et al. Redoks-aktivno željezo posreduje amiloid-beta toksičnost. Free Radic Biol Med. 2001.; 30:447-450.
15. Wei W, Wang X, Kusiak JW. Signalni događaji u neuronskoj smrti izazvanoj amiloidnim beta-peptidom i zaštita faktora rasta I inzulinu sličnog. J Biol Chem. 2002; 277:17649-17656.
16. Mattson MP, Cheng B, Davis D, Bryant K, Lieberburg I, Rydel RE. beta-amiloidni peptidi destabiliziraju homeostazu kalcija i čine ljudske kortikalne neurone ranjivima na ekscitotoksičnost. J Neurosci. 1992; 12:376-389.
17. Wu LJ. Flavonoidi. U: Kemija prirodne medicine (Wu LJ, ur.). 4. izdanje, People's Medical Publishing House, Peking, Kina, 2003.; str. 173.
18. Wang Y, Cao J, Weng JH, Zeng S. Istodobno određivanje kvercetina, kemferola i izorhamnetina akumuliranih ljudskih stanica raka dojke tekućinskom kromatografijom visoke učinkovitosti. J Pharm Biomed Anal. 2005; 39:328-333.
19. Hyun SK, Kang SS, Son KH, Chung HY, Choi JS. Biflavonski glukozidi iz žutog lišća Ginkgo biloba. Chem Pharm Bull (Tokio). 2005; 53:1200-1201.
20. Sastre J, Millan A, Garcia de la Asuncion J, et al. Ekstrakt Ginkgo biloba (EGb 761) sprječava starenje mitohondrija štiteći od oksidativnog stresa. Free Radic Biol Med. 1998.; 24:298-304.
21. Zhu JT, Choi RC, Chu GK, Cheung AW, Gao QT, Li J. Flavonoidi posjeduju neuroprotektivne učinke na kultivirane stanice feokromocitoma PC12: usporedba različitih flavonoida u aktiviranju estrogenskog učinka i u sprječavanju stanične smrti izazvane beta-amiloidom. J Agric Food Chem. 2007.; 55:2438-2445.
22. Le Bars PL, Katz MM, Berman N, Itil TM, Freedman AM, Schatzberg AF. Placebom kontrolirano, dvostruko slijepo, randomizirano ispitivanje ekstrakta Ginkgo bilobe za demenciju. Sjevernoamerička EGb studijska grupa. JAMA. 1997.; 278:1327-1332.
23. Manjanatha MG, Shelton S, Bishop ME, Lyn-Cook LE, Aidoo A. Dijetalni učinci sojinih izoflavona daidzeina i genisteina na 7,12-dimetilbenz[a]antracenom induciranu mutagenezu i karcinogenezu dojke u transgenici Big Blue jajnika štakori. Karcinogeneza. 2006.; 27:2555-2564.
24. Wang CE, Liu SY. Sastav, sadržaj i karakteristike izoflavona soje. Znanost o hrani. 1998.; 19:39-43.
25. Yue X, Lu M, Lancaster T, Cao P, Honda S, Staufenbiel M, Harada N, Zhong Z, Shen Y, Li R. Nedostatak estrogena u mozgu ubrzava stvaranje Abeta plaka u životinjskom modelu Alzheimerove bolesti. Proc Natl Acad Sci US A. 2005; 102:19198-19203.
26. Yao M, Nguyen TV, Pike CJ. Estrogen regulira ekspresiju Bcl-w i Bim: uloga u zaštiti od neuronske smrti izazvane beta-amiloidnim peptidom. J Neurosci. 2007.;
27:1422-1433. 27. Heldring N, Pike A, Andersson S, Matthews J, Cheng G, Hartman J, Tujague M, Strom A, Treuter E, Warner M, Gustafsson JA. Estrogenski receptori: Kako signaliziraju i koje su im mete. Physiol Rev. 2007; 87:905-931.
28. Rak dojke i hormonska nadomjesna terapija: Zajednička ponovna analiza podataka iz 51 epidemiološke studije 52 705 žena s rakom dojke i 108 411 žena bez raka dojke. Suradnička skupina o hormonskim čimbenicima u raku dojke. Lanceta. 1997.; 350:1047-1059.
29. Beresford SA, Weiss NS, Voigt LF, McKnight B. Rizik od raka endometrija o upotrebi estrogena u kombinaciji s terapijom cikličkim progestagenom u žena u postmenopauzi. Lanceta. 1997.; 349:458-461.
30. Ravnikar VA. Sukladnost s hormonskom nadomjesnom terapijom: primaju li žene puni učinak hormonske nadomjesne terapije preventivne zdravstvene dobrobiti? Zdravstvena pitanja žena. 1992; 2:75-80; rasprava -2.
31. Escande A, Pillon A, Servant N, Cravedi JP, Larrea F, Muhn P, Nicolas JC, Cavailles V, Balaguer P. Procjena selektivnosti liganda korištenjem reporterskih staničnih linija koje stabilno eksprimiraju estrogenski receptor alfa ili beta. Biochem Pharmacol. 2006.; 71:1459-1469.
32. Lee YB, Lee HJ, Won MH, Hwang IK, Kang TC, Lee JY, Nam SY, Kim KS, Kim E, Cheon SH, Sohn HS. Izoflavoni soje poboljšavaju prostorno odgođeno usklađivanje s mjestom i smanjuju gubitak kolinergičkih neurona kod starijih mužjaka štakora. J Nutr. 2004.; 134:1827-1831.
33. Lund TD, West TW, Tian LY, Bu LH, Simmons DL, Setchell KD, Adlercreutz H, Lephart ED. Vizualno-prostorno pamćenje pojačano je kod ženki štakora (ali inhibirano kod mužjaka) fitoestrogenima soje u prehrani. BMC Neurosci. 2001.; 2:20.
34. Pan Y, Anthony M, Watson S, Clarkson TB. Fitoestrogeni soje poboljšavaju izvedbu labirinta radijalnog kraka kod ovariektomiranih umirovljenih rasplodnih štakora i ne umanjuju dobrobiti liječenja 17beta-estradiolom. Menopauza. 2000; 7:230-235.
35. Henderson VW. Hormonska terapija koja sadrži estrogen i rizik od Alzheimerove bolesti: Razumijevanje proturječnih zaključaka iz promatračkih i eksperimentalnih istraživanja. Neuroznanost. 2006.; 138:1031-1039.
36. Casini ML, Marelli G, Papaleo E, Ferrari A, D'Ambrosio F, Unfer V. Psihološka procjena učinaka liječenja fitoestrogenima na žene u postmenopauzi: randomizirana, dvostruko slijepa, unakrsna, placebom kontrolirana studija. Fertil Steril. 2006.; 85:972-978.
37. Birge SJ. Postoji li uloga nadomjesne estrogenske terapije u prevenciji i liječenju demencije? J Am Geriatr Soc. 1996.; 44:865-870.
38. Pan Y, Anthony M, Clarkson TB. Učinak estradiola i fitoestrogena soje na kolin acetiltransferazu i mRNA faktora rasta živaca u frontalnom korteksu i hipokampusu ženki štakora. Proc Soc Exp Biol Med. 1999; 221:118-125.
39. Pan Y, Anthony M, Clarkson TB. Dokazi za pojačanu regulaciju mRNA neurotrofnog čimbenika izvedenog iz mozga sojinim fitoestrogenima u frontalnom korteksu umirovljenih rasplodnih ženki štakora. Neurosci Lett. 1999; 261:17-20.
40. Yeung DK, Leung SW, Xu YC, Vanhoutte PM, Man RY. Puerarin, izoflavonoid izveden iz Radix Pueraria, potencira relaksaciju neovisnu o endotelu putem cikličkog AMP puta u svinjskoj koronarnoj arteriji. Eur J Pharmacol. 2006.; 552:105-111.
41. Xu XH. Učinci puerarina na masni superoksid kod starih miševa inducirani D-galaktozom. China Journal of Chinese Materia Medica. 2003.; 28:66-69.
42. Yan FL, Lu G, Wang YQ, Hong Z. Učinak puerarina na ekspresiju A 1-40 i Bax u mozgu AD(Alzheimerova bolest)štakora izazvane A 25-35. Chin J Neuromed. 2006.; 5:158-161.
43. Jiang B, Liu JH, Bao YM, An LJ. Apoptoza izazvana vodikovim peroksidom u pc12 stanicama i zaštitni učinak puerarina. Cell Biol Int. 2003.; 27:1025-1031.
44. Zhang JJ, Zhong XM. Prirodni lijek u liječenju senilne demencije: napredak istraživanja. Časopis Sveučilišta Liaoning TCM. 2009.; 11:47-49. 45. Li XL, Tong L. Napredak istraživanja kemijskih komponenti i farmakoloških učinaka stabljike i lista Baical Skullcap. Časopis Chengde Medical Collegea. 2006.; 23:284-286.
46. Zhao SM, Liu S, Yang HG, Kong XY, Song CJ, Liu YP. Zaštitni učinak ukupnog flavonoida stabljike Scutellaria baicalensis na peroksidaciju lipida izazvanu reperfuzijom ishemije miokarda u štakora. Kineski časopis za anatomiju. 2006.; 29:450-452.
47. Zuo YZ, Guan LH, Wang RT. Zaštitni učinci SSTF-a na ozljedu neurona hipokampusa izazvanu injekcijom A 25-35. Časopis Chengde Medical Collegea. 2009.; 26:5-7.
48. Ye H, Wang RT, Zuo YZ, Guan LH, Shen XB. Učinak ukupnog flavonoida lista stabljike Scutellaria Baicalensis na nedostatak učenja i pamćenja izazvan injekcijom Abeta25-35 u hipokampusu štakora. Lishizhen medicina i Materia Medica istraživanje. 2009.; 20:879- 880.
49. Sun YX, Tang Y, Wu AL, Liu T, Dai XL, Zheng QS, Wang ZB. Neuroprotektivni učinak tekućine protiv žarišne cerebralne ishemije/reperfuzije u miševa putem svojih antioksidativnih i anti-apoptoznih svojstava. J Asian Nat Prod Res. 2010.; 12:1051-1060.
50. Yang Y, Bian GX, Lv QJ. Neuroprotekcija i neurotrofni učinci likvidnosti na primarno kultivirane stanice hipokampusa. China Journal of Chinese Materia Medica. 2008.; 33:931-935.
51. Liu RT, Bian GX, Zou LB, Huang XW, Lv QJ. Neuroprotektivni učinci likvidnosti i njezino inhibitorno djelovanje na aktivnost kolinesteraze. Kineski časopis o novim lijekovima. 2008.; 17:574-581.
52. Ko FN, Huang TF, Teng CM. Mehanizmi vazodilatacijskog djelovanja apigenina izoliranog iz Apium graveolens u torakalnoj aorti štakora. Biochim Biophys Acta. 1991.; 1115:69-74.
53. Sugihara N, Arakawa T, Ohnishi M, Furuno K. Anti i prooksidativni učinci flavonoida na lipidnu peroksidaciju ovisnu o lipidnom hidroperoksidu induciranu metalima u kultiviranim hepatocitima napunjenim alfa-linolenskom kiselinom. Free Radic Biol Med. 1999; 27:1313-1323.
54. Zhao YH, Chen WQ, Luo SH, Yang H. Učinak apigenina na ponašanje učenja i pamćenja kod miševa s Alzheimerovom bolešću izazvanom D-galaktozom. Journal of Guangdong College of Pharmacy. 2005; 21:292-294.
55. Kang SS, Lee JY, Choi YK, Kim GS, Han BH. Neuroprotektivni učinci flavona na apoptozu izazvanu vodikovim peroksidom u stanicama neuroblastoma SH-SY5Y. Bioorg Med Chem Lett. 2004.; 14:2261-2264.
56. Zhou MM, Xie HS, Zhang J, Zhang Q. Učinak apigenina protiv starenja na starenje miševa izazvan D-galaktozom. Acad J Sec Mil Med Univ. 2007.; 28:452-453.
57. Wu Y, Zhou SD, Li P. Određivanje flavonoida u Hypericum perforatum HPLC analizom. Yao Xue Xue Bao. 2002; 37:280-282.
58. Liu XH, Lou HX. Prirodna sredstva u liječenju demencije. Qilu Pharmaceutical Affairs. 2004.; 23:42-43.
59. Wu L, Cheng SY, Wang Q, Chen YB. Napredak u studiji o farmakološkim učincima aktivnih komponenti kineskog bilja na Alzheimerovu bolest. Zhongguo Zhong Yao Za Zhi. 2004.; 29:387-389.
60. Zhu AQ, Li QX, Zhang XS, Teng CQ, Chu YD, Masters CL, George A, Cardamone T, Evin G. Učinci Rhodiole na Alzheimerovu patologiju i aktivnost otvorenog polja kod APP-C100 transgenih miševa. Kineski časopis za gerontologiju. 2004.; 24:530-533.
