Feniletanoidni glikozidi Cistanche na modelu menopauzalnog sindroma kod miševa

Kontakt:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

ShuoTian, ​​Mingsan Miao, MingBai, Zhenzhen Wei

Odjel za farmakologiju, Sveučilište kineske medicine Henan, Zhengzhou 450008, Kina Dostupno online 10. svibnja 2017.

Sažetak

Cistanche je tradicionalna i dragocjena kineska biljka, s dvije tisuće godina povijesti upotrebe u Kini. Ima učinak toniziranja bubrega, snažan dodatak jetri i bubrezima, obnavljanje esencije i krvi, poznat kao "pustinjski ginseng". Ovdje smo istražili mehanizamFeniletanoidni glikozidi Cistanche(PGC) modelu miševamenopauzalni sindrom, kao i terapijski učinak i karakteristike PGC-amenopauzalni sindrom. U ovoj studiji, KM miševi su reproducirani potpunom resekcijom jajnika s obje strane leđa kako bi se uspostavio model miševamenopauzalni sindrom(MPS), te primali destiliranu vodu, odnosno lijekove. Modelni miševi dobivali su destiliranu vodu. Miševi su primili visoke doze od 200 mg/(kg na dan).Feniletanoidni glikozidi Cistanche(HPGC), 100 mg/(kg dan) srednje doze odFeniletanoidni glikozidi Cistanche(MPGC), i 50 mg/(kg dan) niske dozeFeniletanoidni glikozidi Cistanche(LPGC). Nakon 21 dana mogao je odrediti broj samostalnih aktivnosti i broj stajanja, latentno razdoblje prvog ulaska u tamnu komoru te električni broj. Također je izračunao visceralni indeks maternice, timusa, slezene, izmjerio razine estradiola (E2), testosterona (T), luteinizirajućeg hormona (LH) i folikulostimulirajućeg hormona (FSH) u serumu. Nadalje, promatrao je patološke promjene maternice, timusa, slezene i hipofize miševa. Rezultati su pokazali da pokazatelji ponašanja: U usporedbi s modelnom skupinom (MG), HPGC, MPGC, LPGC mogu povećati nezavisne aktivnosti (P ​​< 0.01);="" hpgc,="" mpgc="" bi="" mogli="" povećati="" broj="" stajanja,="" latentno="" razdoblje="" prvog="" ulaska="" u="" tamnu="" komoru="" i="" smanjiti="" električni="" broj="" (p="">< 0.01);="" lpgc="" bi="" mogao="" povećati="" broj="" stajanja="" (p="">< 0.05);="" indeks="" unutarnjih="" organa:="" u="" usporedbi="" s="" mg,="" hpgc,="" mpgc="" bi="" mogao="" povećati="" indeks="" unutarnjih="" organa="" maternice,="" timusa,="" slezene="" (p="">< 0.01);="" lpgc="" bi="" mogao="" povećati="" visceralni="" indeks="" maternice="" (p="">< 0,05);="" serumski="" indeks:="" u="" usporedbi="" s="" mg,="" sve="" skupine="" mogle="" su="" smanjiti="" razine="" lh="" u="" serumu="" (p="">< 0,01);="" hpgc,="" mpgc="" bi="" mogli="" poboljšati="" razine="" e2,="" t="" i="" smanjiti="" razine="" lh,="" fsh="" u="" serumu="" (p="">< 0,01);="" lpgc="" bi="" mogao="" poboljšati="" razine="" e2="" i="" smanjiti="" razine="" fsh="" u="" serumu="" (p="">< 0,05).="" u="" međuvremenu,="" imao="" je="" trend="" poboljšanja="" razine="" t="" u="" serumu.="" patološke="" promjene:="" u="" usporedbi="" s="" mg,="" hpgc="" bi="" mogao="" značajno="" poboljšati="" patološke="" promjene="" maternice,="" timusa,="" slezene="" i="" hipofize="" miševa;="" i="" druge="" skupine="" imaju="" određeni="" učinak.="" rezultati="" su="" pokazali="" da="" bi="" pgc="" mogao="" poboljšati="" poremećaj="" spolnih="" hormona="" mps-a="" i="" obnoviti="" funkciju="" maternice,="" timusa="" i="" slezene,="" s="" boljim="" terapijskim="" učinkom="" na="">

Grafički sažetak

Ključne riječi: PGC;Menopauzalni sindrom; Miševi

Kratice

MPSmenopauzalni sindromPGCPolietilen glikozidi CistancheHPGC visoke dozeFeniletanoidni glikozidi CistancheMPGCsrednje doze feniletanoidnih glikozida CistancheLPGCmale dozeFeniletanoidni glikozidi CistancheTtestosteronE2EstradiolLHluteinizirajući hormoni folikulostimulirajući hormon

Phenylethanoid Glycosides of Cistanche on menopausal syndrome

1. Uvod

Cistanche, osušene mesnate stabljike s ljuskastim listovima Cistanche deserticola YC Ma i C. tubulosa (Schrenk) Wight (Chen et al., 2013.), poznata je droga koja se široko koristi tisućama godina. Potječe iz "Shen Nong's Herbal Classic" (Liu et al., 2013), slanog je okusa i tople prirode. Ima učinak toniziranja bubrega, snažan dodatak jetri i bubrezima, obnavljanje esencije i krvi, vlaženje crijeva za ublažavanje zatvora i druge djelotvornosti. Uglavnom se koristi za liječenje nedostatka bubrežnog yanga (što dovodi do impotencije), prospermije, hladne sperme i steriliteta zbog hladnoće u maternici, zatvora, enureze, učestalosti mokrenja i drugih bolesti. Suvremena istraživanja pokazuju da može poboljšati ljudski imunitet, pamćenje i sposobnost učenja s učinkom protiv starenja, protuupalnim djelovanjem, umorom i drugim učincima (Li i sur., 2010., Rashid i sur., 2017.).

MPS je sindrom poremećaja disfunkcije autonomnog živčanog sustava uzrokovan poremećajem lučenja estrogena i praćen neuropsihijatrijskim simptomima. Ima različite stupnjeve valunga, razdražljivosti, vrtoglavice, tinitusa, lupanja srca, nesanice itd., s vidljivom osteoporozom, gubitkom pamćenja, kognitivnim oštećenjem, kardiovaskularnim i cerebrovaskularnim bolestima u kasnom razdoblju. Glavni razlog je postupno slabljenje i nestanak funkcije jajnika (Ia, 2016). Trenutno, glavna upotreba hormonske nadomjesne terapije (HNL) za liječenje MPS-a, direktni dodatak estrogena, dugotrajna HNL može uzrokovati vaginalno krvarenje, osjetljivost dojki, rak endometrija, rak dojke i druge štetne učinke. Osim toga, učinak još nije zadovoljavajući – doza estrogena na imunološki sustav još uvijek ima inhibirani učinak (Ma i sur., 2016., Nawaz i sur., 2017.). Posebno nedavno otkriće pokazuje da može povećati rizik od kardiovaskularnih i cerebrovaskularnih bolesti i drugih ozbiljnih nuspojava koje značajno ograničavaju kliničku primjenu. U hitnoj tržišnoj potražnji, tradicionalna kineska (TCM) medicina sve više pozornosti posvećuje traženju lijekova za liječenje MPS-a (Halim i Phang, 2017., Mustafa et al., 2017.). TCM liječi MPS s dugom poviješću (Zhang i Miao, 2011.), reguliranjem osi hipotalamus-hipofiza-jajnici (HPOA), oporavkom funkcije jajnika i odgodom starenja jajnika. Utvrđeno je da većina lijekova bubrežnog janga ima bolji terapeutski učinak na MPS (Wei i Miao, 2013.).

Cistancheje najveća učestalost lijekova koji obnavljaju bubrežni yang u prošlim dinastijama (Tu et al., 2011.). Glavne učinkovite komponenteCistanchesu feniletanoidni glikozidi, s androgenim učinkom. To je utjelovljenje moderne medicine bubrežnog janga (Zhao i Pan, 2013), s najvećim brojem aktivnih sastojaka u Cistanche (Yan i sur., 2012). To je uglavnom kroz dva načina funkcioniranja (Wumaierjiang i Yao, 2016). Prvo, ima funkciju jačanja funkcije hipotalamus-hipofiza-nadbubrežne žlijezde, te potiče otpuštanje neurotransmitera i hormona u tijelu; drugo, ima funkciju protiv umora, poboljšavajući rad tijela. Učinak Cistanche za obnavljanje bubrega razlikuje se od uobičajenih lijekova za bubrege kao što su Epimedium brevicornum Maxim, Morinda officinalis How.Cistanchene šteti yinu nego obnavlja bubrege. Ne pojavljuje se uz pravednost, suha usta i druge simptome za dugotrajnu upotrebu.

2. Materijal i metode

2.1. Materijal i reagensi

Cistanche(Broj serije 20130501) kupljen je od Anhui, Dechang Pharmaceutical Pieces Co., Ltd. Uzorke je identificirao profesor Chen Suiqing (Sveučilište kineske medicine Henan, identifikacija kineske discipline lijekova) kao osušene mesnate stabljike s ljuskavim lišćemCistanchedeserticolaY. C. Ma, kao i osušene mesnate stabljike s ljuskastim listovima C. tubulosa (Schrenk) Wight, odn. GC (serija br. 120303) isporučila je Shanxi star Pharmaceutical Co., Ltd.; Referentnu tvar echinacoside (serija br. 111670-200503) isporučio je Nacionalni institut za kontrolu farmaceutskih i bioloških proizvoda; AB-8 makroporoznu apsorpcijsku smolu (serijski br. 20130618) isporučio je Tianjin Guangfu Instituta za superfinu kemijsku industriju; Natrijeva karboksimetil celuloza (serija br. 20120418, Tianjin Hengxing Chemical Reagent Co., Ltd.), benzilpenicilin natrij za injekcije (serija br. c1206807, North China Pharmaceutical Co., Ltd., specifikacija: 4 milijuna jedinica), 0,9 posto natrija Injekcija klorida (serija br. 1301265303, Chen Xin Pharmaceutical Co., Ltd; specifikacije: 250 ml), kloral hidrat (serija br. 20120827, Tianjin Institute of Fine Chemical Industry), komplet E2 ELISA testa (serija br. 20131001A, R&D Systems Kina), set za T ELISA test (serija br. 20131001A, R&D Systems Kina), komplet za LH ELISA test (serija br. 20131001A, R&D Systems Kina), komplet za FSH ELISA test (serija br. 20131001A, R&D Systems Kina).

2.2. Priprema uzorka

2.2.1. Metode pripreme

Procedura za pripremu uzorka bila je sljedeća: Prema literaturnim metodama (Gu et al., 2011.), bili smo pod vodstvom Feng Suxianga (disciplina tečaja farmaceutske analize, Sveučilište kineske medicine Henan). TheCistancheusitnjeno u obrok, metodama refluks ekstrakcije ekstrahirati 2 puta količinom etilnog alkohola (sadržaj etilnog alkohola 70 posto ). Vrijeme refluksne ekstrakcije bilo je 1,5 h jednom, a zatim je 2 puta spojena tekućina za ekstrakciju alkoholom. Tekućina za ekstrakciju je dekomprimirana i obogaćena bez arome alkohola, a destilirana voda je korištena za disperziju (koncentracija je 0,5 g/ml, kao otopina uzorka. Otopina uzorka je ugrađena u AB-8 smolu s protokom (omjer otopine uzorka i smole bio je 1:10), nakon stajanja 5 h dok se otopina uzorka u potpunosti ne adsorbira. A zatim, prvo s 10 puta većim volumenom kolone destilirane vode za ispiranje AB{{12} } smole s otopinom uzorka, prepuštena je vodi; Drugo, s 10 puta većim volumenom stupca etilnog alkohola (sadržaj etilnog alkohola je 10 posto), nečistoće su uklonjene; ​​Treće, sa 7 puta volumen stupca etilnog alkohola (sadržaj etilnog alkohola bio je 60 posto) do eluiranja, prikupili smo eluat i osušili eluat, to jest prahFeniletanoidni glikozidi Cistanche.

Phenylethanoid Glycosides of Cistanche on menopausal syndrome

2.2.2. Izbor određivanja valne duljine

Odaberite {{0}}.5 mL kontrolne otopine proizvoda i dodajte 5 posto otopine natrijeva nitrita 1 mL u kontrolni proizvod. Zatim protresite i ostavite na tihom mjestu 6 minuta. Nakon toga gornjoj smjesi dodajte 10 postotnu otopinu aluminijevog nitrata. Zatim protresite i ostavite na tihom mjestu 6 minuta. Dodati 10 posto natrijevog hidroksida 10 mL gornjoj smjesi, volumen smjese je fiksiran na 25 mL s vodom. Protresite i ostavite na miru 18 minuta, kao otopinu kontrolnog proizvoda. Odaberite 0,5 mLFeniletanoidni glikozidi Cistancherješenje, kao gornja konfiguracija metode, kao test rješenje. Slijepa proba bila je otopina slijepe probe osim otopine kontrolnog proizvoda i otopine uzorka, poput gornje konfiguracije metode. U UV spektrofotometru s rasponom valne duljine od 200-800 nm, korištena je puna valna duljina za skeniranje gornje 3 otopine. Otopina kontrolnog produkta i otopina uzorka imale su maksimalni vrh apsorpcije na 507 nm, pa je valna duljina od 507 nm određena kao valna duljina apsorpcije.

Nakon štoFeniletanoidni glikozidi Cistancheotopine (1) i referentne tvari Echinacoside (2) (superpozicijski kontrast), pojavila se boja (Pogledajte sljedeću sliku)

2.2.3. Metoda detekcije sadržaja

Precizno izvažite 1 mL čekajući određivanje otopine, dodajte 1 mL 5 postotne otopine natrijevog nitrita kontrolnom proizvodu, protresite i ostavite na tihom mjestu 6 minuta. Zatim dodajte 10 postotnu otopinu aluminijevog nitrata u gornju smjesu. Protresite i mirno ostavite 6 minuta. Doda se 10 mL 10 postotnog natrijevog hidroksida u gornju smjesu, a volumen smjese se fiksira na 25 mL s vodom. Protresite i ostavite na tihom mjestu 18 minuta; slijepa proba pripremljena je istom metodom sa slijepom probom bez otopine uzorka. UV spektrofotometrijom odrediti na spektrofotometriji od 507 nm.

2.2.4. Ispitivanje metodologije

2.2.4.1. Priprema kontrolne otopine i otopine uzorka

Priprema kontrolne otopine: Precizno odvažite 3.06 mg ehinakozida uz sušenje do konstantne težine kao referentne tvari i stavite u mjernu tikvicu od 25 ml. Zatim upotrijebite 70 postotnu otopinu etanola razrijeđenu na ljestvicu i protresite smjesu kao kontrolnu otopinu. Sadržaj kontrolne otopine bio je 0,1224 mg/ml.

Priprema otopine uzorka: Precizna vaga 5 mgFeniletanoidni glikozidi Cistanchei staviti u mjernu tikvicu od 10 mL. Zatim upotrijebite 70 postotnu otopinu etanola razrijeđenu na ljestvicu i protresite smjesu kao otopinu uzorka.

2.2.4.2. Priprema standardne krivulje

Točno nacrtaj kontrolnu otopinu {{0}}, 1.0, 2.0, 3.0, 4.{{10 }}, 5.0 i 6,0 mL, prema "Odabiru određivanja valne duljine", te izmjerili apsorbanciju. Regresijska jednadžba dobivena je korištenjem koncentracije prema apsorbanciji: Y=20.296X − 0.0015 (r=0.9994), a linearni raspon bio je 4.90-29.4 ug/ml.

2.2.4.3. Test preciznosti

Paralelno je određivana apsorbancija otopine uzorka 6 puta prema točki "Metoda detekcije sadržaja". Nakon izračuna relativne standardne devijacije apsorbancije, apsorbancija je bila 0.299, 0.299, 0.298, 0.297, 0 .297 i 0.297, a prosječna apsorbancija bila je 0.298, s RSD=0.330 posto (n=6).

2.2.4.4. Test stabilnosti

Odredite apsorbanciju otopine uzorka nakon što je otopina bila potpuno obojena {{0}}, 15, 30, 50 i 60 min prema stavka "Metoda detekcije sadržaja". Nakon izračuna relativne standardne devijacije apsorbancije, apsorbancija je bila 0.300, 0.296, 0.295 i 0.295, a prosječna apsorbancija bila je 0.299, s RSD=1.362 posto (n {{17 }}).

Phenylethanoid Glycosides of Cistanche on menopausal syndrome

2.2.4.5. Ponavljajuće testiranje

Pripremite 6 otopina uzorka prema točki "Priprema otopine uzorka", a apsorbanciju i sadržaj izračunajte prema točki "Metoda određivanja sadržaja". Sadržaj je bio 65,2 posto, 65,6 posto, 66,7 posto, 67,2 posto, odnosno 66,5 posto, a prosječni sadržaj bio je 66,2 posto, s RSD=1.142 posto (n=6).

2.2.4.6. Test oporavka uzorka

Precizno izvažite 9 komada otopine uzorka tako da je sadržaj bio poznat, a svaki je komad bio 0.5 mL. Dodajte 200, 250, odnosno 300 ul standardne otopine u otopinu uzorka. Izračunajte stopu oporavka i relativnu standardnu ​​devijacijuFeniletanoidni glikozidi Cistanche, a stope oporavka bile su 101,45 posto , 99,26 posto , 98,94 posto , 101,83 posto , 99,05 posto , 99,47 posto , 98,72 posto , 99,17 posto i 100,64 posto . Prosječna stopa oporavka bila je 99,84 posto, s RSD=1.164 posto (n=9).

2.2.5. Određivanje sadržaja uzorka

Pripremite 3 otopine uzorka prema točki "Priprema otopine uzorka". Zatim izračunati apsorbanciju prema točki "Metoda detekcije sadržaja" na spektrofotometriji od 507 nm, te izračunati sadržaj. Tablica 1 prikazuje rezultate.

Tablica 1. Rezultat odFeniletanoidni glikozidi Cistanchesadržaj.

2.3. Pokusne životinje

KM ženke miševa (20-25 g) kupljene su od Wuhan instituta za biološke proizvode. Broj dozvole za životinje: 42000400000611, potvrda laboratorija br. SYXK (Henan) 2010-001.

2.4. Eksperimentalni instrument

Stolna centrifuga velike brzine, Shanghai Anting tvornica znanstvenih instrumenata, Model: TGL-168; Elektronska analitička vaga, Ohaus (Šangaj), model: AR1140/C; Instrument za ispitivanje autonomnih aktivnosti miševa, Chengdu Taming Science and Technology Limited Company, Model: ZZ-6; Miš tamni instrument, Chengdu Taming Technology Co., Ltd., Model: BA-200; Instrument za označavanje enzima, SAD BIO-RAD, Model: 680; Električni mikroskop, japanska tvrtka OLYMPUS, model: BX61.

2.5. Eksperimentalni životinjski model

100 KM miševi (23-25 ​​g) su izvagani i intraperitonealna injekcija 10 posto hidrata klor aldehida (0,03 mL/10 g), abdominalna fiksacija nakon anestezije. 12 miševa nasumično je odabrano kao prazna kontrolna skupina (BC), s lažnom operacijom; drugi su provedeni s MPS modelom. Ispod stražnjeg dijela zadnjeg rebra miša ošišajte dlaku miša na sjecištu srednje aksilarne linije i udaljenosti od bočne kralježnice oko 1 cm. Nakon dezinfekcije, otvorili kožu i leđni mišić oko 0,5–1 cm, pronašli smo mliječnobijelu masnu masu u vidnom polju reza, a jajnik je bio usađen u mast. Lagano pincetom izvucite mast iz reza i odvojite mast, može se naći tanka nit nepravilnog žuto-crvenog jajnika. Prvo su jajnici ispod jajovoda (uključujući masno tkivo) podvezani tankom žicom, a zatim su jajnici uklonjeni. Nakon operacije maternica je vraćena u trbušnu šupljinu. Zašijte mišiće i kožu, a obostrani jajnici su uklonjeni istom metodom. Pažljivo hranjenje nakon operacije, intramuskularna injekcija penicilina 200 tisuća U/kg, u slučaju inficiranih, jednom dnevno tijekom 3 dana. Nakon operacije tijekom 5 dana, testirani su vaginalni brisevi miševa, jednom dnevno tijekom 5 dana, kako bi se utvrdilo jesu li jajnici potpuno uklonjeni.

2.6. Eksperimentalno grupiranje

Miševi su imali razdoblje estrusa tako što su vaginalni brisevi napušteni, a 72 miša s potpunom kastracijom nasumično su podijeljena u pet skupina (n=12 po skupini), odnosno modelna skupina (MG), GC, HPGC, MPGC i LPGC.

2.7. Način doziranja

{{0}}.5 posto CMC: natrijeva karboksimetil celuloza 4 g, s destiliranom vodom kao 800 ml. Doze lijeka HPGC, MPGC i LPGC bile su 200, 100, odnosno 50 mg/kg (volumen doziranja: 0,1 ml/10 g). Izvažite PGC od 2000 mg, 1000 mg i 500 mg, otopljen s malom količinom od 0,5 posto CMC. Zatim namjestite volumen na 100 ml i promiješajte suspenziju. Doza lijeka GC bila je 675 mg/kg, s 9 pilula GC otopljenih s malom količinom 0,5 posto CMC. Zatim namjestite volumen na 40 ml i promiješajte suspenziju.

2.8. Primjena lijekova

Životinjama u svakoj skupini primijenjeni su odgovarajući lijekovi 10. dan nakon operacije. GC skupini primijenjena je GC suspenzija u dozi od 675 mg/kg, a skupinama HPGC, MPGC i LPGC primijenjena je suspenzija HPGC, MPGC, LPGC u dozi od 200 mg/kg, 100 mg/kg i 50 mg/kg. BC i MG skupinama davan je isti volumen 0,5 postotne CMC otopine, jednom dnevno tijekom 21 dana.

2.9. Utvrđivanje samostalnih aktivnosti i broja stajanja

Miševi u svakoj skupini kojima je primijenjeno 18 dana stavljeni su u instrument neovisne aktivnosti, prilagođavaju se okolišu 1 minutu. Zatim odredite broj samostalnih aktivnosti i stajanja unutar 5 min.

2.10. Određivanje latentnog razdoblja prvog ulaska u tamnu komoru i električnog broja

Miševima u svakoj skupini davano je 19 dana, tako da su miševi repom bili okrenuti prema malim vratima u tamnu komoru u kutiju za određivanje. Nakon 24 h (primijenjeno 20 dana), odredite latentno razdoblje prvog ulaska u tamnu komoru i električni broj unutar 5 min.

2.11. Izračun visceralnog indeksa

Miševi nakon posljednje primjene od 2 h (natašte 12 h). Nakon uzimanja krvi, miševi su žrtvovani i secirani. Uklonite timus, slezenu i maternicu i izvažite mokru težinu organa. Zatim izračunajte indeks unutarnjih organa (Indeks unutarnjih organa=Vlažna težina organa mg/tjelesna težina g).

2.12. Mjerenje sadržaja E2, T, LH, FSH

Miševi su, nakon zadnje primjene od 2 sata (natašte 12 sati), izvagani i zatim im je uzeta krv. Odvojite serum i odredite sadržaj E2, T, LH i FSH u serumu kao specifikaciju.

2.13. Promatranje morfoloških promjena maternice

Prema promjenama pokusnih miševa endometrija, žlijezda i mišićnog sloja korišteni su polukvantitativni kriteriji za mjerenje maternice. Morfologija patološke organizacije može se podijeliti u četiri razine: razina "−" znači da su epitelne stanice endometrija, žlijezde i mišićni sloj normalni; razina "plus" mali dio endometrijskih epitelnih stanica i žlijezda bili su atrofirani, a mišićni sloj je bio normalan; razina "plus plus" znači da je dio endometrijskih epitelnih stanica i žlijezda atrofiran, a sloj mišića ima malu atrofiju; razina "plus plus plus" znači da su endometrijske epitelne stanice i žlijezde značajno atrofirale, a mišićni sloj je atrofirao.

2.14. Mjerenje debljine korteksa timusa

Mikrometrom je izmjerena srednja debljina korteksa timusa na miševima.

2.15. Mjerenje debljine slezenskog nodusa

Debljina slezenskog nodusa s obje strane izmjerena je mikrometrom sa središnjom arterijom kao središtem. Zatim izračunajte prosjek kao debljinu slezenskog nodula.

2.16. Izračunavanje broja bazofilnih stanica i stanica prednje hipofize

Izračunajte broj bazofilnih stanica i stanica prednjeg režnja hipofize u području od 10,000 μm2 kvadratnih pravokutnih okvira pod velikim vidnim poljem.

2.17. Statistička analiza

Svi podaci analizirani su statističkim paketom SPSS 17.0 za statističku analizu medicinskih podataka. Podaci mjerenja korišteni su kao srednja vrijednost zbrajanja i oduzimanja standardne devijacije. (^-x± s). Grupe su uspoređene korištenjem jednofaktorske analize (ANOVA) varijance, a za homogenost varijance korištene su LSD metode analize, heterogenost varijance korištena je Games-Howell, a datum za podatke o ocjeni korišten je Riditov test .

3. Rezultati

3.1. Učinak samostalnih aktivnosti i broja stajanja kod miševa

Na sl. 1, sl. 2 prikazani su podaci o samostalnim aktivnostima i broju stajanja. To pokazuje da su MG miševi značajno smanjeni u usporedbi s BC (P < 0.01),="" odražavajući="" smanjenu="" znatiželju="" prema="" svježem="" okolišu.="" miševi="" u="" gc,="" hpgc,="" mpgc="" i="" lpgc="" mogu="" značajno="" poboljšati="" nezavisne="" aktivnosti="" u="" usporedbi="" s="" mg="" (p="">< 0.01);="" oni="" u="" gc,="" hpgc="" i="" mpgc="" mogu="" poboljšati="" samostalne="" aktivnosti="" u="" usporedbi="" s="" mg="" (p="">< 0,01);="" oni="" u="" lpgc-u="" mogu="" malo="" poboljšati="" broj="" stajanja="" u="" usporedbi="" s="" mg-om="" (p=""><>

Slika 1. Učinci GC, HPGC, MPGC i LPGC na nezavisne aktivnosti kod miševa. Neovisne aktivnosti bilježe se kao srednja vrijednost ± SD za svaku skupinu. U usporedbi s skupinom modela^☆P < 0.05 i^☆☆P < 0.01, korištena je ANOVA s metodama analize LSD-a.

Slika 2. Učinci GC, HPGC, MPGC i LPGC na broj stajanja kod miševa. Broj stajanja se bilježi kao srednja vrijednost ± SD za svaku grupu. U usporedbi s skupinom modela^☆P < 0.05 i^☆☆P < 0.01, korištena je ANOVA s metodama analize LSD-a.

3.2. Učinak latentnog razdoblja prvog ulaska u tamnu sobu i električni broj

Kao što je prikazano na sl. 3, sl. 4, podaci o latentnom razdoblju prvog ulaska u tamnu sobu i električni broj pokazali su da su MG miševi značajno smanjeni u usporedbi s BC miševima (P < 0.{{4="" }}1),="" odražavajući="" pad="" pamćenja="" kod="" mps="" miševa.="" miševi="" u="" gc,="" hpgc="" i="" mpgc="" mogu="" značajno="" povećati="" latentno="" razdoblje="" prvog="" ulaska="" u="" tamnu="" sobu="" i="" smanjiti="" električni="" broj="" u="" usporedbi="" s="" mg="" (p="">< 0,01),="" kao="" i="" poboljšati="" pamćenje.="" 3.2.="" učinak="" latentnog="" razdoblja="" prvog="" ulaska="" u="" tamnu="" sobu="" i="" električni="">

Kao što je prikazano na sl. 3, sl. 4, podaci o latentnom razdoblju prvog ulaska u tamnu sobu i električni broj pokazali su da su MG miševi značajno smanjeni u usporedbi s BC miševima (P < 0.{{4="" }}1),="" odražavajući="" pad="" pamćenja="" kod="" mps="" miševa.="" miševi="" u="" gc,="" hpgc="" i="" mpgc="" mogu="" značajno="" povećati="" latentno="" razdoblje="" prvog="" ulaska="" u="" mračnu="" sobu="" i="" smanjiti="" električni="" broj="" u="" usporedbi="" s="" mg="" (p="">< 0,01),="" kao="" i="" poboljšati="">

Slika 3. Učinci GC, HPGC, MPGC i LPGC na latentno razdoblje prvog ulaska u mračnu sobu kod miševa. Latentno razdoblje prvog ulaska u mračnu sobu bilježi se kao srednja vrijednost ± SD za svaku skupinu. U usporedbi s skupinom modela^☆P < 0.05 i^☆☆P < 0.01, korištena je ANOVA s metodama analize LSD-a.

Slika 4. Učinci GC, HPGC, MPGC i LPGC na električni broj u miševa. Električni broj prijavljen je kao srednja vrijednost ± SE Za svaku skupinu,^☆P < 0.05 i^☆☆P < 0.01 u usporedbi s modelnom skupinom, koristeći ANOVA s LSD analizom.

3.3. Učinak visceralnog indeksa

Kao što je prikazano na slici 5, podaci o indeksu unutarnjih organa maternice, timusa i slezene pokazuju da je MG miševa značajno smanjena u usporedbi s BC (P < 0.01),="" odražavajući="" maternicu="" i="" imunološki="" organ="" mps="" miševa="" su="" atrofirani.="" miševi="" u="" gc,="" hpgc="" i="" mpgc="" mogu="" značajno="" poboljšati="" indeks="" unutarnjih="" organa="" maternice,="" timusa="" i="" slezene="" u="" usporedbi="" s="" mg="" (p="">< 0.01).="" miševi="" u="" lpgc-u="" malo="" su="" poboljšali="" indeks="" unutarnjih="" organa="" maternice="" u="" usporedbi="" s="" mg-om="" (p=""><>

Slika 5. Učinci GC, HPGC, MPGC i LPGC na indeks unutrašnjih organa u miševa. Indeksi unutrašnjih organa bilježe se kao srednja vrijednost ± SD za svaku skupinu. U usporedbi s skupinom modela^☆P < 0.05 i^☆☆P < 0.01, korištena je ANOVA s metodama analize LSD-a.

3.4. Učinak sadržaja E2, T, LH i FSH

Kao što je prikazano na slici 6, podaci o razini E2 i T pokazuju da su MG miševi značajno smanjeni, a podaci o razini LH i FSH pokazuju da su MG miševi značajno povećani u usporedbi s BC (P < 0.01),="" odražavalo="" je="" da="" su="" razine="" spolnih="" hormona="" u="" serumu="" poremećene="" u="" mps="" miševa.="" sve="" skupine="" miševa="" imaju="" značajno="" smanjenu="" razinu="" lh="" u="" serumu="" u="" usporedbi="" s="" bc="" (p="">< 0.01).="" miševi="" u="" gc,="" hpgc="" i="" mpgc="" mogu="" značajno="" poboljšati="" e2,="" t="" i="" smanjiti="" razinu="" lh,="" fsh="" u="" serumu="" u="" usporedbi="" s="" mg="" (p=""><0,01). miševi="" u="" lpgc="" mogu="" malo="" poboljšati="" e2="" i="" smanjiti="" razinu="" fsh="" u="" serumu="" u="" usporedbi="" s="" mg="" (p=""><>

Slika 6. Učinci GC, HPGC, MPGC i LPGC na E2, T, LH, FSH u miševa. Razina E2, T, LH i FSH zabilježena je kao srednja vrijednost ± SD za svaku skupinu. U usporedbi s skupinom modela^☆P < 0.05 i^☆☆P < 0.01, korištena je ANOVA s metodama analize LSD-a.

3.5. Promatranje patoloških morfoloških promjena maternice

Kao što je prikazano na sl. 7, sl. 8, s mikrometarskom ljestvicom, morfološke promjene maternice pokazuju da MG miševi imaju značajne patološke promjene u maternici u usporedbi s BC (P < 0.0="" 1).="" miševi="" u="" gc,="" hpgc="" mogu="" značajno="" poboljšati="" patološke="" morfološke="" promjene="" u="" usporedbi="" s="" mg="" (p="">< 0.01).="" miševi="" u="" mpgc="" mogu="" poboljšati="" patološke="" morfološke="" promjene="" u="" usporedbi="" s="" mg="" (p=""><>

Slika 7. Učinci GC, HPGC, MPGC i LPGC na patološke morfološke promjene maternice u miševa. Promjene patološke morfologije prikazane su kao fotografije za svaku skupinu.

Slika 8. Učinci GC, HPGC, MPGC i LPGC na patološke morfološke promjene kod miševa. Promjene patološke morfologije prijavljene su kao polukvantitativni kriteriji za mjerenje maternice, a morfologija patološke organizacije može se podijeliti u četiri razine za svaku skupinu i izračunati broj miševa.

Promjene patološke morfologije prijavljene su kao polukvantitativni kriteriji za mjerenje maternice, a morfologija patološke organizacije može se podijeliti u četiri razine za svaku skupinu i izračunati broj miševa.

3.6. Mjerenje debljine korteksa timusa

Kao što je prikazano na sl. 9, sl. 10, s mikrometarskom skalom, datum debljine korteksa timusa pokazuje da su MG miševi značajno smanjeni u usporedbi s BC (P < 0.="" 01),="" što="" ukazuje="" da="" je="" volumen="" timusa="" smanjen="" nakon="" uspostavljanja="" mps="" modela="" miševa.="" miševi="" u="" hpgc-u="" mogu="" značajno="" povećati="" debljinu="" korteksa="" timusa="" u="" usporedbi="" s="" mg-om="" (p=""><0,01). miševi="" u="" mpgc="" mogu="" povećati="" debljinu="" korteksa="" timusa="" u="" usporedbi="" s="" mg="" (p=""><>

Slika 9. Učinci GC, HPGC, MPGC i LPGC na patološke morfološke promjene timusa u miševa. Promjene patološke morfologije prikazane su kao fotografije za svaku skupinu.

Slika 10. Učinci GC, HPGC, MPGC i LPGC na debljinu korteksa timusa kod miševa. Debljina korteksa timusa bilježi se kao srednja vrijednost ± SD za svaku skupinu. U usporedbi s skupinom modela^☆P < 0.05 i^☆☆P < 0.01, korištena je ANOVA s metodama analize LSD-a.

3.7. Mjerenje debljine slezenskog nodusa

Kao što je prikazano na sl. 11, sl. 12, na mikrometarskoj skali, datum debljine slezenskog nodula pokazuje da su MG miševi značajno smanjeni u usporedbi s BC (P < 0.01="" ),="" što="" ukazuje="" da="" je="" volumen="" slezene="" smanjen="" nakon="" uspostavljanja="" mps="" modela="" miševa.="" miševi="" u="" hpgc-u="" mogu="" značajno="" povećati="" debljinu="" slezenskog="" nodula="" u="" usporedbi="" s="" mg-om="" (p="">< 0.01).="" miševi="" u="" mpgc-u="" mogu="" povećati="" debljinu="" slezenskog="" nodula="" u="" usporedbi="" s="" mg-om="" (p=""><>

Slika 11. Učinci GC, HPGC, MPGC i LPGC na patološke morfološke promjene slezene u miševa. Promjene patološke morfologije prikazane su kao fotografije za svaku skupinu.

Slika 12. Učinci GC, HPGC, MPGC i LPGC na debljinu slezenskih nodula u miševa. Debljina slezenskog nodula bilježi se kao srednja vrijednost ± SD za svaku skupinu. U usporedbi s skupinom modela^☆P < 0.05 i^☆☆P < 0.01, korištena je ANOVA s metodama analize LSD-a.

3.8. Izračunavanje broja bazofilnih stanica i stanica prednje hipofize

Kao što je prikazano na sl. 13, sl. 14, datum broja bazofilnih stanica i stanica prednje hipofize pokazuje da su MG miševi značajno smanjeni u usporedbi s BC (P < 0.0="" 1),="" što="" ukazuje="" da="" je="" broj="" stanica="" izvora="" sekretornog="" gonadotropina="" smanjen="" nakon="" uspostavljanja="" mps="" modela="" miševa.="" sve="" primljene="" skupine="" lijekova="" mogu="" značajno="" povećati="" broj="" bazofilnih="" stanica="" u="" usporedbi="" s="" mg="" (p="">< 0.01).="" miševi="" u="" gc,="" hpgc="" i="" mpgc="" mogu="" značajno="" povećati="" broj="" stanica="" prednje="" hipofize="" u="" usporedbi="" s="" mg="" (p=""><>

Slika 13. Učinci GC, HPGC, MPGC i LPGC na patološke morfološke promjene hipofize u miševa. Promjene patološke morfologije prikazane su kao fotografije za svaku skupinu.

Slika 14. Učinci GC, HPGC, MPGC i LPGC na broj bazofilnih stanica i stanice prednje hipofize u miševa. Broj bazofilnih stanica i stanica prednje hipofize bilježi se kao srednja vrijednost ± SD za svaku skupinu. U usporedbi s skupinom modela^☆P < 0.05 i^☆☆P < 0.01, korištena je ANOVA s metodama analize LSD-a.

4. Rasprava

Zapisi omenopauzalni sindromu starim knjigama uglavnom su raštrkani u opisima "bolesti ljiljana", "cik-cak" sindroma, "melankolije", "abnormalne menstruacije" i drugih (Chen i sur., 2015., Ma i Chen, 2015.). Za žene starije od četrdeset godina, Yin Qi je prepolovljen; Tiangui je presušio; Qi bubrega postupno je opao; Yin Jing je bio manjkav; izgubljena je ravnoteža Yina i Yanga. Njegov glavni učinak bio je kada se pojave menstrualni poremećaji ili menopauza, poput plimne groznice i znojenja, emocionalne razdražljivosti, nemira, lupanja srca i nesanice, bolova u leđima, edema lica i udova, vrtoglavice, tinitusa i osjećaja kože poput bolesti mrava. Snažan pad Qi-ja bubrega je intrinzični razlog za dolazak ili prekid menstruacije. Nedostatak bubrega glavni je razlog zamenopauzalni sindrom(Tan i sur., 2013.), a bubreg je ishodište ljudskog života, nazvan "kongenitalni temelj". Uspon i pad esencije bubrega dominiraju rastom i reproduktivnom funkcijom zrelih i opadaju (Wang i Huang, 2011). Studije su pokazale da je pad funkcije jajnika bit sindroma nedostatka bubrega, a neravnoteža Yina i Yanga bubrega usko je povezana s poremećajem endokrinog lučenja i disfunkcijom autonomnog živčanog sustava. Promjena E2, FSH i LH izraz je nedostatka bubrega i Yin i Yang neravnoteže bubrega (Shi et al., 2007). Lijekovi za toniziranje bubrega koriste se za regulaciju razine hormona u osovini jajnika hipotalamus-hipofiza ili imaju izravnu ulogu u regulaciji funkcije jajnika. Suvremena kineska medicina vjeruje da su etiologija i patogenezamenopauzalni sindromje nedostatak bubrega (Razali i Said, 2017).

U studiji je korištena potpuna resekcija jajnika s obje strane leđa kako bi se reproducirao MPS mišji model. Jajnik je lučio 90 posto estrogena ženki, a jajnik je uklonjen. Umjetno je uzrokovao naglo smanjenu razinu estrogena, a zatim simulirao MPS. Ovaj model je bio klasični model, s visokom stopom uspješnosti, stabilnošću i pouzdanošću, i tako dalje. Samostalnim aktivnostima i brojem stajanja, latentnim razdobljem prvog ulaska u tamnu komoru i električnim brojem promatrali smo poboljšanje funkcije učenja i pamćenja te zanimljivosti svježe okoline lijekom. Funkcija jajnika je oslabila uz smanjeno lučenje spolnih hormona. Nadalje, gonadotropin je povećan kod pacijenata s MPS-om. Razine E2, T u serumu bile su niže nego kod osobe bez simptoma MPS-a, dok su razine LH, FSH bile značajno više nego kod osobe bez simptoma MPS-a. Stoga se mjerenjem razina E2, T, FSH i LH u serumu mogu koristiti vizualni indikatori za identifikaciju MPS-a, odražavajući učinak lijekova na bolest MPS-a. Istraživanje je pokazalo da je pad funkcije jajnika konotacija nedostatka bubrega, a promjena E2, T, FSH i LH svojevrsni izraz nedostatka bubrega (Li i sur., 2014., Cheng i Tian, ​​2012.).Cistanchebio je kroz učinak obnavljanja bubrega za jačanje imuniteta (Zhang i sur., 2009., Shareef i sur., 2017.).

Koristili smo lijek za obnavljanje bubrega za liječenje MPS-a, što je bilo inovativno. Rezultati su također pokazali da PGC može poboljšati razinu hormona poremećaja MPS miševa i povećati razine E2, T, LH i FSH u serumu. U međuvremenu, mogao bi poboljšati patološke promjene maternice, timusa, slezene i hipofize miševa, u skladu s literaturom da je nedostatak bubrega temeljni kod MPS-a.

5. Zaključak

Rezultati naše studije pokazali su da je PGC imao dobar terapeutski učinak za MPS — mogao je povećati samostalne aktivnosti i broj stajanja, latentno razdoblje prvog ulaska u mračnu komoru, utrobu timusa, slezene i maternice, E2, T kao kao i smanjiti električni broj, LH i FSH. Feniletanoidni glikozidi odabrani su uCistancheza visoku učinkovitost i praktičnost MPS istraživanja za poboljšanje liječenjaperimenopauzalni sindrom. Njegove standarde kvalitete lako je kontrolirati, što pogoduje inovativnom istraživanju i industrijalizaciji razvoja lijekova. Nudi novi način razmišljanja za liječenje MPS-a.

Sukob interesa

Autori nemaju sukob interesa za prijavu.

Priznanja

Ovo istraživanje poduprla je Nacionalna zaklada za prirodne znanosti Kine (81274154); Henan tim za znanstvene i tehnološke inovacije (2012IRTSTHN011); tim za znanstvene i tehnološke inovacije grada Zhengzhou (131PCXTD612); ključni medicinski laboratorij za transformaciju kineske medicine u gradu Zhengzhou (121PYFZX1820).

Reference

Chen et al., 2013. F. Chen, Z. Chen, XF Xing, SX Liu, TJ Zhang, CQ Chen Proces istraživanja uCistancheHerba Drug Eval. Res., 6 (2013), str. 469-475

Pogledajte zapis u ScopusGoogle Scholar

Chen i dr., 2015. ZF Chen, XX Zhang, YY Zhao, X. Wang, YL Ren, HQ Liao, Y. Li, L. Zhao Istraživanje podataka o odabiru akutočaka u liječenjuperimenopauzalni sindromSvjetska brada. Med., 4 (2015), str. 482-489

Pogledajte zapis u ScopusGoogle Scholar

Cheng i Tian, ​​2012. K. Cheng, SL Tian Učinci preventivne elektroakupunkture "Guanyuan" (CV4) i "Sanyinjiao" (SP6) na osovinu hipotalamus - hipofiza - jajnik kod akupunkture štakora s ovarijetomijom. Res., 1 (2012), str. 15-19

Pogledajte zapis u ScopusGoogle Scholar

Gu et al., 2011. JH Gu, XH Yu, R. Wu, XK Zhao, L. Zhao Optimizacija tehnologije izolacije i pročišćavanja feniletanoidnih glikozida izCistancheTubulosa od makroporozne adsorpcijske smole Kina Acad. J. Electron. Publ. Kuća, 11 (2011.), str. 1007-1009

Pogledajte zapis u ScopusGoogle Scholar

Halim i Phang, 2017. ANI Halim, IC Phang Salicilna kiselina ublažava pb stres u Nicotiana tabacum Galeri Warisan Sains, 1 (1) (2017), str. 16-19

Pogledajte zapis u ScopusGoogle Scholar

Ia, 2016 YM Ia Čimbenici utjecaja na kvalitetu života žena u perimenopauzi i protumjere Chin. J. Clin. Racionalna uporaba droga, 2B (2016.), str. 154-155

Pogledajte zapis u ScopusGoogle Scholar

Li et al., 2010. Y. Li, YY Song, HQ Zhang Napredak u istraživanju kemijskih sastojaka i medicinskog djelovanjaCistancheBrada. Divlji biljni resursi, 1 (2010.), str. 7-11

Pogledajte zapis u ScopusGoogle Scholar

Li et al., 2014. Y. Li, L. Xu, Z. Qian, K. Cheng Učinci elektroakupunkturne stimulacije "Sanyinjiao" (SP6) na os hipotalamus-hipofiza - jajnici kod akupunkture štakora u perimenopauzi. Res., 3 (2014), str. 198-201

Pogledajte zapis u ScopusGoogle Scholar

Liu et al., 2013. X. Liu, CM Li, JD Gao, R. Wu Napredak istraživanjaCistancheBrada. J. Tradicija. Med. Sci. Technol., 5 (2013), str. 575-577

Pogledajte zapis u ScopusGoogle Scholar

Ma et al., 2016. XZ Ma, QY Li, QF Chen, SN Li Napredak istraživanja TCM liječenjaperimenopauzalni sindromSvijet J. Integr. Tradicija. Western Med., 9 (2016), str. 1329-1332

Pogledajte zapis u ScopusGoogle Scholar

Ma i Chen, 2015. K. Ma, YX Chen Rasprava o strategiji liječenjaperimenopauzalni sindroms kineskom i zapadnom medicinom, Kina J. Chin. Građa, 2 (2015), str. 3899-3906

Pogledajte zapis u ScopusGoogle Scholar

Mustafa et al., 2017 G. Mustafa, R. Arif1, A. Atta, S. Sharif, A. Jamil Bioaktivni spojevi iz ljekovitog bilja i njihova važnost u otkrivanju lijekova u Pakistanu Matrix Sci. Pharma, 1 (1) (2017), str. 17-26

CrossRefView zapis u ScopusGoogle Scholar

Nawaz et al., 2017. S. Nawaz, M. Shareef, H. Shahid, M. Mushtaq, M. Sarfraz Pregled antihiperlipidemijskog učinka sintetskih fenolnih spojeva Matrix Sci. Medica, 1 (1) (2017), str. 22-26

CrossRefView zapis u ScopusGoogle Scholar

Rashid i dr., 2017. M. Rashid, MI Saleem, F. Deeba, MS Khan, SA Mahfooz, AA Butt, MW Abbas Učinak sezone na pojavu kozjeg mastitisa u buba u Faisalabad premisi Matrix Sci. Medica, 1 (1) (2017), str. 19-21

CrossRefView zapis u ScopusGoogle Scholar

Razali i Said, 2017 MAA Razali, FM Said Proizvodnja crvenog pigmenta monascus purpureus u bioreaktoru s miješalicom Galeri Warisan Sains, 1 (1) (2017), str. 13-15

Pogledajte zapis u ScopusGoogle Scholar

Shareef et al., 2017. M. Shareef, M. Jamal, M. Sarfraz Pregled antibakterijske aktivnosti Nigella sativa u crijevima brojlerskih pilića Matrix Sci. Pharma, 1 (1) (2017), str. 27-32

CrossRefView zapis u ScopusGoogle Scholar

Shi et al., 2007 HB Shi, YB Miao, SL Zhong, W. Wang, LP Wang Učinak Fuchun granula na neuroendokrini sustav u štakora s menopauzalnim nedostatkom yina Chin. J. Tradicija. Med. Sci. Technol., 1 (2007), str. 16-17

Pogledajte zapis u ScopusGoogle Scholar

Tan et al., 2013. XJ Tan, WH Li, YQ Zeng, SL Xu, J. Qin, JM Cui, NG Shi Raspravljajte o održavanjuperimenopauzalni sindromiz patogeneze bubrežne deficijencije Lishizhen Med. Materia Medica Res., 9 (2013), str. 2212-2213

Pogledajte zapis u ScopusGoogle Scholar

Tu et al., 2011 PF Tu, Y. Jiang, YH Guo, XB Li, YZ Tian Studija oCistanchedeserticola i njezin razvoj industrije Chin. J. Pharmacol., 12 (2011.), str. 882-886

Pogledajte zapis u ScopusGoogle Scholar

Wang i Huang, 2011 J. Wang, H. Huang Tradicionalna kineska medicina i tradicionalna kineska kultura Clin. J. Tradicija. Brada. Med., 2 (2011), str. 95-105

CrossRefView zapis u ScopusGoogle Scholar

Wei i Miao, 2013. ZZ Wei, MS Miao Analiza karakteristika jačanja bubrega tradicionalne kineske medicine u liječenjuperimenopauzalni sindromKina J. Chin. Med., 11 (2013), str. 1688-1691

Pogledajte zapis u ScopusGoogle Scholar

Wumaierjiang i Yao, 2016 YHF Wumaierjiang, G. Yao napreduje u eksperimentalnoj studiji o učinkovitostiCistancheHunan J. Tradit. Brada. Med., 4 (2016), str. 193-195

Pogledajte zapis u ScopusGoogle Scholar

Yan et al., 2012. GH Yan, JH Tian, ​​BW Long, N. Li Napredak u feniletanoidnim glikozidima izCistancheCentral South Pharm., 9 (2012), str. 692-695

Pogledajte zapis u ScopusGoogle Scholar

Zhao i Pan, 2013. W. Zhao, YN Pan Napredak u istraživanju farmakološke aktivnosti feniletanoidnih glikozida uCistancheAzijsko-pacifička tradicija. Med., 5 (2013), str. 77-79

Pogledajte zapis u ScopusGoogle Scholar

Zhang i Miao, 2011. Y. Zhang, MS Miao Studija često korištene tradicionalne kineske medicine koja tonizira bubrežni yang u liječenju klimakteričnog sindroma Kina J. Chin. Med., 9 (2011), str. 1084-1087

Pogledajte zapis u ScopusGoogle Scholar

Zhang et al., 2009 YZ Zhang, LL Yang, HF Song, Du. Yimin Antistresno farmakološko djelovanje odCistanchedeserticola i mehanizam: napredak istraživanja J. Int. Pharmaceut. Res., 5 (2009), str. 344-347

CrossRefView zapis u ScopusGoogle Scholar

Iz: Saudi Pharmaceutical Journal

Svezak 25, broj 4, svibanj 2017., stranice 537-547