Za više informacija kontaktirajte:Joanna.jia@wecistanche.com

KLIKNITE OVDJE ZA PRVI DIO

Kako ehinakozid stimulira estrogen i povećava broj spermija?

Cistanche deserticola ima mnoge učinke, kliknite ovdje da biste saznali više

Rasprava

Etnofarmakološki zapisi i naše prethodno istraživanje13 to su potvrdiliCistanche tubuloza ekstrakti učinkovito povećavaju razinu spolnih hormona i poboljšavaju kvalitetu sperme. ECH kao jedan od glavnih spojeva uCistanchetubuloza19,20, može povećati broj spermija i povećati lučenje LH i T (slika 1). U ovoj smo studiji pokazali da je ECH distribuiran u hipotalamus umjesto u testise, što ukazuje na neizravni učinak ECH na testise. Doista, ECH je izravno inhibirao aktivnost AR hipotalamusa, translokaciju AR u jezgru i ekspresiju gena povezanu s HPG osi, a također je pružio zaštitu od reproduktivnog oštećenja izazvanog BPA.

U studijama proizvodnje ljudskog gonadotropina, razine spolnih hormona su čvrsto regulirane HPG-osi i petljom negativne povratne sprege21. Naime, izlučivanje T je značajno povećano kao odgovor na dosljedno i trajno povećanje razine LH u krvi kao odgovor na nedostatak negativne androgene povratne sprege hipofize i hipotalamusa. U ovoj studiji, ECH je povećao lučenje LH u encefalonu plus hipofizi i proizvodnju testosterona u testisima i razine mRNA LHR i Gnrhr u encefalonu plus hipofizi (Slika 1 i Slika 4), što sugerira da ECH može utjecati na negativnu povratnu spregu HPG osi . Nije iznenađujuće da sam AR igra važnu ulogu u povratnoj regulaciji razina T i LH22,23. Paradigma muške HPG osi usredotočena je na testosteron koji osigurava represiju negativne povratne sprege na razini hipotalamusa i hipofize24,25. Prethodne studije koristile su Foxg1-Cre za uklanjanje gena od interesa u hipofizi, ali ne i hipotalamusu kako bi se odredila relativna važnost dviju regija. Rezultati su pokazali da je AR signalizacija u hipofizi muškog miša nezamjenjiva u pogledu regulacije lučenja LH ovisne o testosteronu26. Iz tog razloga, odlučili smo se usredotočiti na AR hipotalamusa za daljnje istraživanje.

Ehinakoziducistanchemože zaštititi jetru

Kao steroidni nuklearni hormonski receptor, aktivnost AR je regulirana steroidnim ligandom T, čije vezanje inicira nuklearnu translokaciju i transkripcijsku regulatornu funkciju AR27. U ovoj smo studiji pokazali da ECH tretman inhibira translokaciju AR iz citoplazme u jezgre u hipotalamusu (Sl.3). Štoviše, PK studija je pokazala da ECH može značajno prodrijeti do hipotalamusa, a ne do testisa, što sugerira da više ECH prelazi krvno-moždanu barijeru, vjerojatno putem endocitoze, umjesto krvne barijere testisa. Nadalje, indirektnom ELISA-om pokazali smo sposobnost kombiniranja ECH i AR što sugerira da se ECH može izravno vezati na AR. Ovo je dodatno potkrijepljeno rezultatima testa spajanja molekula koji je pokazao da pretpostavljena mjesta vezivanja za ECH postoje na Met-894 i Val-713 u AR džepu (Slika 5D). Ovo podupire nalaze drugih da AR sudjeluje u regulaciji negativne petlje hranjenja i da smanjenje AR-T interakcija u mozgu rezultira povećanim lučenjem LH23,28,29.

Steroidogeneza je strogo kontroliran, bitan proces za razvoj spermatogeneze uz sudjelovanje steroidogenih proteina (StAR)30 i steroidogenih enzima kao što su CYP11A1, CYP17A1, 3 -hidroksisteroid dehidrogenaza (HSD3) i 17 -hidroksisteroid dehidrogenaza (HSD17 ) koja pretvara kolesterol u testosteron31. Pokazali smo da su se razine mRNA gena koji kodiraju te enzime značajno povećale s ECH tretmanom, dok se ekspresija StAR mRNA nije promijenila. Ovo sugerira da ECH nije imao nikakav učinak na prijenos kolesterola do unutarnje membrane mitohondrija, dok bi mogao igrati ulogu u promicanju pretvorbe kolesterola u testosteron. Iz toga se može zaključiti da liječenje ECH značajno povećava broj spermija povećanjem sinteze i izlučivanja testosterona.

Kako bi se istražio zaštitni učinak ECH na ozljede spermija, bisfenol A (BPA), tipični egzogeni endokrini disruptor, korišten je kao model muškog reproduktivnog oštećenja kod miševa32. Tretman ECH učinkovito je obnovio broj spermija, pokretljivost spermija, razine T i LH smanjene BPA (Slika 6A, B), što sugerira da ECH može ublažiti ozljedu spermija.

U usporedbi s umjetno sintetiziranim kemikalijama za hormonsku nadomjesnu terapiju, ECH je prirodni nehormonski spoj koji utječe na negativnu povratnu spregu na HPG osi čime se povećava lučenje LH, T i kvaliteta sperme. Ovaj mehanički put može zaštititi muški reproduktivni sustav i stoga se ECH može smatrati potencijalnim prirodnim reproduktivnim zaštitnim sredstvom. Međutim, hormonske regulacije su složene i često dovode do sistemskih učinaka. Kao što je prikazano na slici 7, ECH je povećao izlučivanje T i LH i inhibirao aktivaciju AR, što također može dovesti do posljedica na drugim putevima povezanim sa zdravljem ili bolešću, kao što su osteoporoza33 i depresija kod muškaraca34, stoga bi sveobuhvatni učinci ECH-a trebali biti daljnji. istraživali. Uzeti zajedno, naši rezultati pokazuju da se ECH veže za AR u hipotalamusu i inhibira prijenos AR iz citoplazme u jezgru. Naši podaci sugeriraju da se ECH veže na mjesta u AR džepu na aminokiselinama Met-894 i Val-713. Ovo može objasniti povećanje razina T i AR kao sustavni odgovor na uravnoteženje razina hormona promicanjem lučenja LH i naknadnog povećanja proizvodnje T i broja spermija (slika 8).

Ehinakoziducistanchemože protiv oksidacije

Izjava o etici metoda.

Ova je studija provedena u strogom skladu sa Smjernicama za pokusne životinje koje je utvrdilo Ministarstvo znanosti i tehnologije (Peking, Kina). Sve eksperimentalne protokole pregledao je i odobrio Etički odbor Instituta za tehnologiju Anyang. Pokusne životinje. Četiri tjedna stari inbred Kunming miševi (22 g–25 g) dobiveni su iz životinjskog centra četvrtog vojnog medicinskog sveučilišta (Xi'an, Kina). Životinje su držane u kontroliranim uvjetima na temperaturi od 22 stupnja ± 2 stupnja, 70 posto ± 4 posto vlažnosti uz 12 h ciklusa svjetlo-tama i slobodan pristup hrani i vodi. 6

Eksperimentalni tretman.

Eksperiment 1. Miševi su nasumično podijeljeni u šest skupina, po sedam miševa u svakoj skupini (n=7). ECH (CAS: 82854-37-3; Chengdu Preferred Biotechnology Co., Ltd, Sichuan, Kina) primijenjen je pomoću intragastrične sonde, a testosteron propionat (TP, CAS: 57-85-2; KingYork, Tianjin, Kina) je primijenjen daje se intramuskularnom injekcijom jednom dnevno tijekom 14 dana prema sljedećem eksperimentalnom planu: Kontrolna skupina: fiziološka otopina (10mL/kg), ECH(L) skupina (5mg/kg), ECH(M) skupina ( 20 mg/kg), ECH(H) skupina (80 mg/kg), TP (15 mg/kg) i enzalutamid (inhibitor AR, jednom dnevno svaki drugi dan tijekom 14 dana; 20 mg/kg; CAS: 915087-33-1; Aladdin , Šangaj, Kina). Nakon 2 tjedna tretmana, miševi su anestezirani dietil eterom kako bi se prikupili uzorci krvi za analizu razine hormona. Miševi su zatim secirani kako bi se odvojili hipotalamus, encefalon plus hipofiza, testis i kauda epididimis. Uzorci kaude epididimisa stavljeni su u fiziološku otopinu s 5 posto BSA za procjenu kvalitete sperme, a hipotalamus, encefalon plus hipofiza i testisi zamrznuti su u tekućem dušiku i pohranjeni na -80 stupnjeva za daljnja ispitivanja. Eksperiment 2. Miševi su nasumično podijeljeni u 10 skupina, pet životinja po skupini. ECH (20 mg/kg) primijenjen je oralno, a miševi u svakoj skupini anestezirani su dietil eterom u vremenskim točkama 0,5 h, 1 h, 1,5 h, 2 h, 2,5 h, 3 h, 4 h, 6 h, 9 h i 12 h nakon primjene tijekom zbirka uzoraka. Plazma je sakupljena i srce je izloženo. Perfuzija normalne fiziološke otopine u lijeve klijetke provedena je pomoću aparata za infuziju sve dok jetra i pluća nisu izblijedjeli. Deset hipotalusa i testisa je sakupljeno da se odrede koncentracije ECH u tkivu. Eksperiment 3. Miševi su nasumično podijeljeni u 4 skupine, po sedam u svakoj skupini. ECH i BPA (CAS: 80-05-7; Aladdin, Šangaj, Kina) primjenjivani su pomoću intragastrične sonde jednom dnevno tijekom 6 tjedana prema sljedećem eksperimentalnom dizajnu: normalna skupina (kukuruzno ulje, 10 mL/kg, t.m./ d), modelna skupina: BPA skupina (BPA 200 mg/kg, t.t./d, kukuruzno ulje) i eksperimentalna skupina: BPA plus ECH skupina (BPA 200 mg/kg; ECH 20 mg/kg). Nakon 42 dana tretmana, miševi su anestezirani dietil eterom i uzorci krvi su prikupljeni za analizu razine hormona. Testis i kauda epididimis su odvojeni i sakupljeni. Kauda epididimis korišten je za procjenu kvalitete sperme, a testis je zamrznut u tekućem dušiku i pohranjen na -80 stupnjeva za daljnje ispitivanje.

Odlučnost od sperma kvaliteta. Sperma suspenzija priprema. Kauda epididimidi su usitnjeni u 5 mL fiziološke otopine s 5 posto BSA i inkubirani 5 minuta na 37 stupnjeva kako bi se njihov sadržaj proširio u medij.

Broj spermija: prema metodi koju je opisao Yokoi (2003.), razrijeđena suspenzija sperme (1:10; v/v; suspenzija sperme/10 posto metanola) prebačena je u svaku komoru za brojanje hemocitometra i ostavljena da stoji 5 min i zatim izbrojano pod svjetlosnim mikroskopom (Nikon, Instruments Inc., Japan) pri povećanju od X200.

Preživljavanje spermija: Ukupno 20 μL suspenzije sperme miješano je s jednakim volumenom boje eozin-nigrozin 2 minute; neobojeni spermiji su izbrojani pod svjetlosnim mikroskopom pri povećanju od 200x.

Pokretljivost spermija: Ukupno 10 μL suspenzije spermija stavljeno je na predmetno stakalce i zabilježeno je bilo da su pokretni ili nepokretni pod svjetlosnim mikroskopom pri povećanju od 200x.

Odlučnost od hormon razine. Razine testosterona (T) i LH kvantificirane su u serumu, encefalonu plus hipofizi i homogenatima testisa korištenjem pribora za radioimunotest (RIA) (Beijing Sino-UK Institute of Biological Technology, Beijing, Kina). Ukratko, anti-testosteron ili anti-LH IgG antitijelo (100 μL) i 125-I-konjugirano anti-mišje antitijelo dodani su uzorcima ili standardu (100 μL) i miješani na klackalici preko noći na 4 stupnja. Nakon tri puta ispiranja s PBS-Tween 20 (500 µL), smjese su centrifugirane (3500 rpm/min) na 4 stupnja tijekom 15 minuta. CPM vrijednosti precipitata procijenjene su instrumentom za radioimunotest (Beijing Sino-western Technology Co. Ltd, CN202M/KZ4GC-1200, Peking, Kina), a koncentracije T i LH izračunate su prema formuli standarda zavoj. T i LH koeficijent varijacije je 2,8 posto i 3,2 posto u uzorcima, odnosno 2,1 posto i 2,8 posto u standardnim skupinama.

Odlučnost od gen izrazi po stvarno vrijeme kvantitativni PCR. Ukupna RNA izolirana je iz smrznutog tkiva testisa i encefalona te hipofize korištenjem kompleta RNA Simple Total RNA (Tiangen, Peking, Kina). Kvantitativni PCR u stvarnom vremenu (q RT-PCR) proveden je za umnožavanje cDNA pomoću 2 × SYBR Green I PCR Master Mix (Vazyme, Nanjing, Kina). PCR postupak sastojao se od 95 stupnjeva tijekom 30 sekundi nakon čega je slijedilo 35 ciklusa od 95 stupnjeva tijekom 15 sekundi, 58 stupnjeva tijekom 30 sekundi i 72 stupnja tijekom 30 sekundi. Analiza krivulje taljenja provedena je na PCR produktima kako bi se potvrdila specifičnost primera i čistoća proizvoda. Krivulja disocijacije je napravljena za svaku ploču da se potvrdi proizvodnja jednog proizvoda. Izračunata je relativna zastupljenost svake mRNA. PCR početnice korištene za studiju prikazane su u tablici 2.

Zapadni mrlja. Za analizu ekspresije AR, ekstrakcija i izolacija citoplazmatskih i jezgrinih proteina provedena je korištenjem kompleta za ekstrakciju citoplazmatskih i nuklearnih proteina (Beyotime, Nanjing, Kina) prema uputama proizvođača. Koncentracije citoplazmatskih i nuklearnih proteina procijenjene su korištenjem Bradford Protein Assay Kit (Beyotime, Jiangsu, Kina). Uzorci proteina (80 ug) su testirani na 12 posto i 5 posto SDS-PAGE gelu i preneseni na PVDF membrane. Nakon blokiranja, membrane su inkubirane s anti-AR IgG protutijelima (1:1,000; Bioss; Peking Kina) i mišjim poliklonalnim anti-GAPDH protutijelima (1:1,000; Wuhan Boster Biološki

Technology, Wuhan, Kina) ili mišja poliklonska anti-Lamin b1 protutijela tijekom 2 sata. Membrana je isprana tri puta s TBST i inkubirana s HRP-konjugiranim zečjim anti-mišjim IgG protutijelom (1:5, 000; Bioss; Peking Kina). Signal je vizualiziran korištenjem ChemiDoc Imaging System (Tanon-3,500, Šangaj, Kina).

Visoke performanseTekućina Kromatografija (HPLC) analiza. Krv je sakupljena u heparinizirane staklene epruvete. Plazma je odvojena trenutnim centrifugiranjem na 6,000 okretaja u minuti tijekom 10 minuta i pohranjena na -20 stupnjeva za daljnji eksperiment. Uzorci hipotalamusa i testisa iz svake vremenske točke skupljeni su i homogenizirani s metanolom. Nakon centrifugiranja na 10,000 okretaja u minuti na 4 stupnja tijekom 10 minuta, supernatant je koncentriran s N₂i ostatak je otopljen u 50 μL metanola i filtriran kroz filter od 0,45 μm. Deset μL filtrirane tekućine uzorka ubrizgano je u HPLC sustav za analizu.

Standardna krivulja sastojala se od uzoraka koji su sadržavali 50, 100, 250, 500 i 750 ng/mL ECH (Chengdu Pufei De Biotech Co., Ltd, Sichuan, Kina). Uzorci za kontrolu kvalitete plazme obogaćeni ECH-om od 75 ng/mL (nisko), 150 ng/mL (srednje) i 300 ng/mL (visoko) pripremljeni su u skladu s tim za mjerenje točnosti i preciznosti metode.

Kromatografija je provedena s HPLC sustavom (D2{{10}}00 Elite serija, Hitachi, Japan) spojenim s UV detektorom (L-2400, Hitachi, Japan). Odvajanje je provedeno na koloni Thermo-C18 (250 mm × 4,6 mm id, 4,6 μm čestice) koja je držana na 25 stupnjeva. Mobilna faza je gradijent pripravljen od 0,1 posto fosforne kiseline koja sadrži 0,04 posto trimetilamina (komponenta A) i metanol (komponenta B). Linearni gradijent bio je sljedeći: 70-90 posto A tijekom 0-2 min, 60-70 posto A tijekom 2-6 minuta, 55-60 posto B tijekom 6-8 minuta, a zatim se vratio na 90 posto A na 8 min odmah. Brzina protoka bila je 0,8 mL/min. UV detektor je radio na 332 nm. Kao analitičko mjerenje procijenjeno je područje vrha.

Farmakokinetika studije u miševi. Prodor ECH do hipotalamusa i testisa podvrgnut je farmakokinetičkoj analizi pomoću softvera za lijekove i statistiku (Drug and Statistics, Mathematical Pharmacology Professional Committee of China). Farmakokinetički parametri određeni su metodom bez odjeljaka koja se temelji na teoriji statističkog momenta. Preliminarni farmakokinetički parametri uključujući vrijeme do vršne konstante (T_max), vršna koncentracija (C_max), konstanta brzine eliminacije (Ke), poluvrijeme eliminacije (T_0.5), površina ispod krivulje (AUC_0–12), prividni volumen distribucije (Vc), i klirens (CL) su dobiveni za daljnju analizu. Omjeri mozak/plazma izračunati su na temelju AUC_0-tvrijednosti za plazmu i mozak.

ECH-Ovalbumin (ECH-OVA) sinteza i identifikacija. Ukupno 9,8 mg ECH i 1.0 mg butandiol anhidrida otopljeno je u 2 mL piridina, miješano 12 h uz miješanje na sobnoj temperaturi. Smjesa je koncentrirana pomoću N₂i ostatak se pomiješa s 10,8 mgN-hidroksisukcinimida (NHS) i 19,3 mg dicikloheksil karbodiimida (DCC) i otopljenih u 4 mLN, N-dimetilformamid (DMF) 12 h uz miješanje na sobnoj temperaturi. Nakon centrifugiranja na 2,000 g tijekom 5 minuta na 4 stupnja, supernatant je dodan u 5 mL PBS-a u kojem je otopljeno 14,4 mg ovalbumina (OVA). Nova smjesa je miješana 24 sata na 4 stupnja. Reakcijska otopina je zatim dijalizirana protiv PBS-a tijekom tri dana. Prisutnost ECH-OVA potvrđena je UV spektrom (Shimadzu Scientifc Instruments, Inc. Columbia, MD USA) na valnim duljinama u rasponu od 190 do 400 nm kao i denaturirajućim PAGE.

Neizravno ELISA (iELISA). Mikrotitarska ploča obložena je ECH-OVA (2 ug/100 µL) i inkubirana preko noći na 4 stupnja. Ploča je isprana tri puta s PBST i dva puta s PBS, te je dodan 5 posto PBSM (PBS koji sadrži 5 posto obranog mlijeka) da blokira nevezana mjesta na 37 stupnjeva tijekom 2 sata. Nakon što su ploče isprane s PBST i PBS, jažice su podijeljene u 4 skupine; eksperimentalna skupina, 1 ug AR ukupnog proteina/100 μL; pozitivna skupina, zečje anti-OVA protutijelo (1:1, 000); negativna skupina, 1 ug goveđeg serumskog albumina; i prazna skupina koja sadrži PBS. Nakon inkubacije od 1,5 h, ploče su isprane i pozitivnoj skupini dodano je 100 μL/jažici zečjeg HRP-konjugiranog IgG (1:1,000), dodano je 100 μL/jažici anti-AR (1:1,000) drugim grupama. Nakon inkubacije od 1,5 h, zečji HRP-konjugirani IgG (1:5, 000) razrjeđenje je dodano na ploče. Nakon inkubacije na 37 stupnjeva tijekom 1 h, ploče su isprane tri puta s PBST i dva puta s PBS. Zatim je dodan TMB i inkubiran 10 minuta u mraku na sobnoj temperaturi i 2 MH₂TAKO₄je dodan da zaustavi reakciju. Apsorbancija je očitana na valnoj duljini od 450 nm.

Molekularni pristajanje. Provedena je studija molekularnog spajanja kako bi se istražio način vezivanja spoja ECH na ljudski androgeni receptor (AR) pomoću programa Autodock vina 1.1.2. Trodimenzionalna (3D) struktura AR (PDB ID: 2YHD) preuzeta je iz Protein Data Bank. 3D struktura ECH dobivena je softverom ChemBioDraw Ultra 14.0 i ChemBio 3D Ultra 14.0. Paket AutoDockTools 1.5.6 korišten je za generiranje ulaznih datoteka za spajanje. Mreža pretraživanja AR-a identificirana je kao središte x: 36,141, središte y: 8,513 i središte z:

21.304 s dimenzijama veličina x: 15, veličina y: 15 i veličina z: 15. Vrijednost iscrpnosti postavljena je na 20. Za Vina docking korišteni su zadani parametri ako to nije navedeno. Izabrana je poza s najboljim rezultatom prema Vina docking rezultatu i vizualno analizirana pomoću softvera PyMOL 1.7.6

Podaci analiza i statistički metode. Podaci su analizirani korištenjem statističkog softvera SPSS 19.0 (SPSS Inc., Chicago, IL, SAD). Za usporedbu među skupinama korištena je jednosmjerna ANOVA. Utvrđeni su Tukeyevi usporedni testovi značajnih razlika među skupinama. Rezultati su izraženi kao srednja vrijednost ± standardna devijacija (SD) pomoću softvera Graph Pad Prism v.7 (GraphPad Software, Inc, Kalifornija, SAD).

Etika odobrenje i pristanak do sudjelovati. Etičko odobrenje za ovu studiju dobiveno je od Etičkog odbora Instituta za tehnologiju Anyang.

Ehinakoziducistanchemože liječitibolest bubrega

Reference

1. Cano, SN, Misra, M. & Ackerman, KE Vježbe, trening i osovina hipotalamus-hipofiza-gonade kod muškaraca i žena.

Ispred. Horm. Res.47, 27–43 (2016).

2. Papadopoulos, V. & Miller, WL Uloga mitohondrija u steroidogenezi.Najbolje Vježbajte. Res. Cl. En. 26, 771–790 (2012).

3. Rone, MBet al. Identifikacija dinamičkog mitohondrijskog proteinskog kompleksa koji pokreće uvoz, trgovinu i metabolizam kolesterola u steroidni hormon.Mol. Endocrinol. 26, 1868–1882 (2012).

4. Shibari, S., Ylonen, H. & Palme, R. Izlučivanje i mjerenje metabolita kortikosterona i testosterona u voluharicama (Myodes glareolus).Gen. Comp. Endocrinol. 243, 39–50 (2017).

5. O'Hara, L.et al. Signalizacija androgenih receptora hipofize regulira prolaktin, ali ne i gonadotropine kod muških miševa.PloS jedan. 10, e0121657 (2015).

6. Amador, AG, Parkening, TA, Beamer, WG, Bartke, A. & Collins, TJ Testikularni LH receptori i razine cirkulirajućih hormona u tri mišja modela za nasljedne bolesti (Tfm/y, lit/lit i hyt/hyt).Endocrinol. Exp. 20, 349–58 (1986).

7. Bulldan, A., Dietze, R., Shihan, M. & Scheiner-Bobis, G. Neklasično testosteronsko signaliziranje posredovano putem ZIP9 stimulira ekspresiju klaudina i stvaranje čvrstih spojeva u Sertolijevim stanicama.Ćelija. Signal. 28, 1075–85 (2016).

8. Walker, WH Testosteronska signalizacija i regulacija spermatogeneze.Spermatogeneza. 1, 116–20 (2011).

9. Cao, C. i Kindscher, K. Medicinska kemija vrsta ehinaceje (ur. Kindscher, K.) 127–145 (Springer, 2016.).

10. Jiang, ZH, Jian, W., Li, XP & Zhang, XY Echinacoside i Cistanchetubulosa (Schenk) R. Wight poboljšavaju oštećenja testisa i sperme izazvana bisfenolom A kod štakora putem steroidogenih enzima reguliranih osovinom gonada.J. Etnofarmakol. 193, 321–328 (2016).

11. Chiou, SY, Sung, JM, Huang, PW & Lin, SD Antioksidativna, antidijabetička i antihipertenzivna svojstva ekstrakta cvijeta Echinacea purpurea i derivata kofeinske kiseline korištenjemu vitro modeli.J. Med. Hrana. 20, 171–179 (2017).

12. Ross, SM Echinacea purpura: Vlasnički ekstrakt echinacea purpura pokazao se sigurnim i učinkovitim u prevenciji obične prehlade.Holist. Nurs. Vježbajte. 30, 54–57 (2016).

13. Wang, T.et al. Cistanche tubulosaetanolni ekstrakt posreduje u razini spolnih hormona štakora indukcijom steroidogenih enzima testisa.

Pharma. Biol.54, 1–7 (2015).

14. Hotaling, JMet al. Demografske i socioekonomske razlike između muškaraca koji traže procjenu neplodnosti i onih koji traže kiruršku sterilizaciju: iz Nacionalnog istraživanja rasta obitelji.BJU. Int. 116, 288–292 (2015).

15. Jodar, M., Solerventura, A. & Oliva, R. Proteomika sjemena i muška neplodnost.J. Proteomika. org/

16. Rahman, MSet al. Bisfenol-A utječe na mušku plodnost preko proteina povezanih s plodnošću u spermatozoidima.Sci. Rep. 5, 9169 (2015).

17. Xi, W.et al. Učinak perinatalne i postnatalne izloženosti bisfenolu A na regulatorne krugove na osi hipotalamus-hipofiza-gonade CD-1 miševa.Reprod. Toxicol. 31, 409–17 (2011).

18. Wisniewski, P.et al. Izloženost odraslih bisfenolu A (BPA) kod Wistar štakora smanjuje kvalitetu sperme uz poremećaj osovine hipotalamus-hipofiza-testisi.Toksikologija. 329, 1–9 (2015).

19. Wang, T., Zhang, X. i Xie, W.Cistanche deserticolaYC Ma, "Pustinjski ginseng": recenzija.Am. J. Brada. Med. 40, 1123–1141 (2012).

20. Li, Y., Zhou, G., Peng, Y., Tu, P. & Li, X. Probir i identifikacija tri tipična metabolita feniletanoidnih glikozida iz Cistanches Herba ljudskim crijevnim bakterijama korištenjem UPLC/Q-TOF-MS .J. Pharmaceut Biome. 118, 167–176 (2016).

21. Matsumoto, AM Andropauza kliničke implikacije pada razine testosterona u serumu sa starenjem kod muškaraca.J. Gerontol. A. Biol. Sci. Med. Sci. 57, M76–M99 (2002).

22. Aluja, A.et al. Interakcije između impulzivnosti, testosterona, globulina koji veže spolne hormone i duljine ponavljanja gena CAG androgenog receptora.Physiol. ponašaj se 147, 91–96 (2015).

23. Walters, KA, Simanainen, U. & Handelsman, DJ Molekularni uvidi u djelovanje androgena u muškoj i ženskoj reproduktivnoj funkciji iz modela nokauta androgenih receptora.Pjevušiti. Reprod. Ažuriraj. 16, 543–558 (2010).

24. Sar, M., Lubahn, DB, French, FS & Wilson, EM Imunohistokemijska lokalizacija androgenog receptora u tkivima štakora i ljudi.Endokrinologija. 127, 3180–3186 (1990).

25. Liang, YQet al. Učinci progesterona na profile ekspresije transkripcije gena povezanih s hipotalamo-hipofizno-gonadnom i hipotalamo-hipofizno-nadbubrežnom osovinom tijekom ranog razvoja zebrice (Daniorerio).Kemosfera. 128, 199–206 (2015).

26. O'Hara, L. & Smith, LB Uloge androgenih receptora u spermatogenezi i neplodnosti.Najbolje. Vježbajte. Res. Cl. En. 29, 595–605 (2015).

27. Lindzey, J., Kumar, MV, Grossman, M., Young, C. & Tindall, DI Molekularni mehanizmi djelovanja androgena.Vitam. Horm. 49, 383–432 (1994).

28. Holdcraft, RW & Braun, RE Funkcija androgenog receptora potrebna je u Sertolijevim stanicama za terminalnu diferencijaciju haploidnih spermatida.Razvoj. 131, 459–467 (2004).

29. Holdcraft, RW & Braun, RE Hormonska regulacija spermatogeneze.Int. J. Androl. 27, 335–342 (2004).

30. Luu-The, V. Procjena steroidogeneze i funkcija steroidogenih enzima.J. Steroid. Biochem. Mol. Biol. 137, 176–182 (2013).

31. Ye, L., Su, ZL & Ge, RS Inhibitori biosintetskih i metaboličkih aktivacijskih enzima testosterona.Molekule 16, 9983–10001 (2011).

32. Khan, D. & Ahmed, SA Epigenetska regulacija ne-limfoidnih stanica bisfenolom A, modelom endokrinog poremećaja: potencijalne implikacije za imunoregulaciju.Ispred. Endocrinol. 6, 91 (2015).

33. Mohamad, NV, Soelaiman, IN & Chin, KY Sažeti pregled testosterona i zdravlja kostiju.Clin. Interv Starenje. 11, 1317 (2016).

34. Akerman, J. Kovac, JR & Lipshultz, LI Terapija testosteronom poboljšava dobrobit i psihičko zdravlje.Curr. Opin. Urology. (2017).

Priznanja

Ovaj rad je podržan od strane Programa za talente za znanstvene i tehnološke inovacije na sveučilištima provincije Henan (18HASTIT035) HASTIE, Programa izgradnje Instituta za istraživanje moderne biološke tehnologije Tehnološkog instituta Anyang i Programa ključnih konstrukcija (2015SD0018) Baze za međunarodnu suradnju u S&T, provincija Shaanxi, Kina.

Autorski doprinosi

Zhi-hui Jiang i Bo Zhou osmislili su istraživanje, proveli istraživanja, analizirali podatke i napisali rad; Xin-ping Li i Gordon M. Kirby osmislili su istraživanje i analizirali podatke; Xiao-Ying Zhang osmislio je istraživanje.

dodatne informacije

Suprotstavljeni interesi:Autori izjavljuju da nema suprotstavljenih interesa.

Izdavača Bilješka: Springer Nature ostaje neutralan u pogledu tvrdnji o nadležnosti u objavljenim kartama i institucionalnim vezama.