Dio 2. Feniletanol glikozidni liposom inhibira PDGF-induciranu HSC aktivaciju putem regulacije FAKPI3KAkt signalnog puta
Mar 06, 2022
Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-pošta:audrey.hu@wecistanche.com
4. Materijali i metode
4.1. Materijali
CPhGs (feniletanoidni glikozid iz cistanhe)kupljeni su od Hetian Di Chen Medical Biotechnology Co., Ltd. (Xinjiang, Kina). Sadržajehinacejabio je veći od 35 posto, a akteozida više od 16 posto. Lecitin je kupljen od Shanghai Lanji Technology Co., Ltd. (Šangaj, Kina). 1,2-Dipalmitoil-sn-glicerol-3-fosfokolin (DPPC) i kolesterol isporučuje Avanti Polar Lipid Inc. (Birmingham, AL, SAD). Besmrtnu zvjezdastu stanicu jetre štakora osigurao je Shanghai Zhongqiaoxinzhou Biotech (Šangaj, Kina). Dulbeccov modificirani Eagleov medij (DMEM) kupljen je od Thermo Fisher Scientific, Inc. (Waltham, MA, SAD). Fetalni goveđi serum (FBS) kupljen je od Gibco Life Technologies (Waltham, MA, SAD). Penicilin (100 µg/mL) i streptomicin (100 µg/mL) bili su proizvodi tvrtke Thermo Fisher Scientific, Inc. MTT [3-(4,5-dimetiltiazol-2-il){ {13}},5-difeniltetrazolij bromid] (5 mg/mL) kupljen je od Sigme (Oakville, ON, Kanada). Aktivnost LDH procijenjena je korištenjem pribora za ispitivanje LDH tvrtke Beijing Solar Science & Technology Co., Ltd. (Peking, Kina). Komplet I za otkrivanje apoptoze aneksina V FITC i pufer za bojenje propidij jodida (PI)/RNaze kupljeni su od BD Biosciences (San Diego, CA, SAD), a rrPDGF-BB osigurao je R&D Systems (Minneapolis, MN, SAD). TRIzol reagens je kupljen od Thermo Fisher Scientific, Inc. RevertAid First Strand cDNA Synthesis kit bio je proizvod Thermo Fisher Scientific, Inc. (Vilnius, Litva). TB Green Premix Ex Taq TM II kupljen je od Takara (Dalian, Kina). Otopinu za pirolizu Ripa osigurao je Thermo Fisher Scientific, Inc. Inhibitor proteaze fenilmetilsulfonil fluorid i mješavina inhibitora fosfataze širokog spektra kupljeni su od Boster Biological Technology Co., Ltd. (Wuhan, Kina). Proteinske trake vizualizirane su Pierce™ ECL Western Blotting supstratom, koji je osigurao Invitrogen (Carlsbad, CA, SAD). Enzim hrena za označavanje kozjih anti-zečjih IgG kupljen je od Zhongshan JinQiao Shanghai Co., Ltd. (Šangaj, Kina). Super Signal West Femto Trial Kit isporučio je Thermo Fisher Scientific, Inc. Zečji anti-p-aktin, a-SMA, kolagen-1, FAK, PI3K, fosfo-PI3K, Akt i fosfo-Akt antitijela svi su kupljeni od Beijing Bioss Antibodies Biological Co., Ltd. (Peking, Kina). X-3-FAK i X-3-NC kupljeni su od Shanghai GenePharma Co., Ltd. (Šangaj, Kina). Lipofectamine 2000 osigurao je Invitrogen.
4.2. Priprema CPhG liposoma
Lecitin, DPPC i kolesterol (1:2:2, m/m/m) otopljeni su u smjesi kloroforma i metanola (2:1 v/v), rotirani da se formira film na 49-50 stupnjeva, iCPhGs(feniletanoidni glikozid iz cistanke)(250 卩g/mL) su naknadno dodani. Reaktivna otopina je kontinuirano rotirana i hidrirana, a fosfolipidna membrana je prebačena u vodu da se formiraju CPG liposomi. Proces inkapsuliranog liposoma ponovljen je u skladu s gornjim metodama. Da bi se dobio ujednačen liposom, inkapsulirani liposom je ekstrudiran 5 puta s mikroporoznom membranom od 0.45 µm i filtriran 18-20 puta s membranom od 0,22 µm. CPG liposomi su pohranjeni na 4 stupnja. Raspodjela veličine čestica mjerena je laserskim analizatorom veličine čestica, oblik čestica promatran je transmisijskom elektronskom mikroskopijom, a punjenje lijekom i učinkovitost inkapsulacije određeni su HPLC-om.
4.3. In vitro oslobađanje iz CPG liposoma i CPhGs(feniletanoidni glikozid iz cistanke)
In vitro profil oslobađanja CPG liposoma iCPhGs(feniletanoidni glikozid iz cistanke) provedena je metodom dijalizne membrane. Ukupno 5 mL svakog uzorka prebačeno je u vrećicu za dijalizu s rezom molekularne težine 14,000 Da任 Vrećica za dijalizu je uronjena u 20{{10 }} mL PBS puferske otopine (pH=6.0) vibrirano na 37 stupnjeva. Medij za otpuštanje (3 mL) je izvađen i zamijenjen s izopikničkom PBS puferskom otopinom (pH=6.0) u planiranim vremenskim intervalima (0,5, 1, 2, 4, 8, 12, 16, 24 i 48 h). Koncentracije ehinakozida u CPG liposomima iCPhGsu mediju za otpuštanje određivali su
HPLC. Kumulativno oslobađanje (postotak) CPG liposoma iCPhGs(feniletanoidni glikozid iz cistanke) izračunat je pomoću sljedeće jednadžbe (1):
gdje je Cn koncentracija lijeka u mediju za oslobađanje na n-toj točki uzorkovanja, V je volumen oslobođenog medija, a W je ukupna doza.
Da bismo bolje razumjeli vitro oslobađanje karakteristično zaCPhG(feniletanoidni glikozid iz cistanke) liposom iCPhGs, primijenjena su tri različita modela za uklapanje dobivenih podataka o ispuštanju: (a) kinetički model nultog reda, (b) kinetički model prvog reda i (c) Higuchijev model dan u jednadžbama (2)-(4) :
gdje je Mt/Mo udio kurkumina koji se oslobađa iz uzorka u vremenu t, a k je konstanta otpuštanja različitih modela. Koeficijent korelacije izračunava se kako bi se ilustrirao stupanj uklapanja između modela izdanja i podataka.
4.4. Citotoksičnost
Za HSC, gustoća od 1 x 105 stanica/mL je stavljena u 96-pločice s jažicama i ostavljena da rastu preko noći na 37 stupnjeva u inkubatoru s 5 posto CO2. Vitalnost stanica testirana je na širokom rasponuCPhGkoncentracije liposoma (117,79, 58,90, 29,45, 14,72, 7,36, 3,68, 1,84, 0,92 i 0,46 卩g/mL) za otkrivanje vitalnosti ispitnih stanica i izračunavanje vrijednosti IC50. Zatim su stanice inkubirane na 37 stupnjeva 4 sata s 20 µL MTT (5 mg/mL u PBS otopini). Ljubičasti produkt MTT-Produkt je otopljen u 150 µL DMSO, a Multiskan Spectrum Absorbance Reader (Fisher Scientific, Inc., Waltham, MA, USA) je korišten za mjerenje apsorbera na 490 nm. Sljedeća formula (jednadžba (5)) upotrijebljena je za izračunavanje postotka održivosti stanica:
4.5. Stanična toksičnost CPhG liposoma na HSC
Stanice su nasađene u 6-pločice s jažicama, a toksičnost HSC-a izmjerena je pomoću kompleta za otkrivanje LDH. Stanice su nasađene u gustoći od 2 x 105 stanica/jažici u 6-pločice s jažicama na 37 stupnjeva u inkubatoru s 5 posto CO2. Nakon rasta preko noći, stanice su tretirane saCPhGliposomi (29,45, 14,72 i 7,36 卩g/mL). Istodobno je održavana prazna (DEME media) kontrola. Nakon 24 sata, stanice su sakupljene tripsinom i centrifugiranjem. Svaka skupina stanica primijenjena je strogo u skladu s uputama kita. Zatim je izračunata stopa istjecanja LDH tekućine stanične kulture.
4.6. Analiza apoptoze
Stanice su uzgojene u 6-pločice s jažicama s gustoćom od 2 x 105 stanica/jažici na 37 stupnjeva u inkubatoru s 5 posto CO2. Nakon rasta preko noći, stanice su tretirane saCPhGliposoma (29,45, 14,72 i 7,36 卩g/mL), a zatim je izmjerena apoptoza HSC-a korištenjem FITC Annexin V Apoptosis Detection Kit. Koncentracije su se temeljile na IC50 određenom iz testa citotoksičnosti. Istodobno je održavana prazna (DEME media) kontrola. Nakon 24 sata, stanice su sakupljene tripsinom i centrifugiranjem i isprane s PBS-om i suspendirane u puferu za vezanje od 500 µL. Zatim su stanice obojene s 5 µL Annexin V-FITC i 5 µL PE. Stanice su inkubirane na sobnoj temperaturi 30 minuta u mraku, a brzina apoptoze je mjerena pomoću FACSCalibur citometra (Becton Dickinson, San Jose, CA, SAD).
4.7. Analiza zaustavljanja staničnog ciklusa
HSC (2 X 105 stanica/2 mL/jažici) tretirani su 24 h sCPhGliposoma na 29,45, 14,72 i 7,36 ^g/mL u 6-pločama s jažicama. Istodobno je održavana prazna (DEME media) kontrola. Stanice su sakupljene i isprane s 1 mL PBS-a i fiksirane sa 75 postotnim etanolom preko noći na 4 stupnja. Stanice su zatim centrifugirane i resuspendirane u 500 otopinama propidijevog jodida (PI)/pufera za bojenje RNaze na 37 stupnjeva 30 minuta u mraku. Konačno, stanice su izmjerene pomoću FACSCalibur citometra (Becton Dickinson). Omjeri stanica u G0/G1, S i G2/M fazama staničnog ciklusa analizirani su softverom FACS Diva (Becton Dickinson).
4.8. UčinakCPhG(feniletanoidni glikozid iz cistanke) Liposom na PDGF posredovanom FAK i PI3K/Akt signalnom putu
4.8.1. Test proliferacije
Linije HSC (1 X 105 stanica/mL) su postavljene u 96-pločice s jažicama i ostavljene da rastu preko noći na 37 stupnjeva u inkubatoru s 5 posto CO2. Nakon 24 sata kulture stanica, stanice su nasumično podijeljene u sljedećih pet skupina: slijepa kontrola (uzgajana u DMEM-u koji sadrži samo 10 posto FBS-a), PDGF-BB (uzgajana u DMEM-u koji sadrži 50 卩g/L PDGF-BB), aCPhGintervencija liposoma (stimulirana s medijem koji sadrži 50 昭/mL PDGF-BB 24 h). Zatim su stanice tretirane s 29,45, 14,72 i 7,36 ug/mL CPhG liposoma. Stanice su kontinuirano uzgajane 24 h, 48 h i 72 h u inkubatoru na 37 stupnjeva 4 h s 20 rL MTT (5 mg/mL u PBS otopini). Ljubičasti MTT-formazan produkt je otopljen u 150 mL DMSO i procijenjen mjerenjem apsorbancije na 490 nm u Multiskan Spectrum Absorbance Reader (Thermo Fisher Scientific, Inc.), te je izračunat IC50. Četverostruki uzorci su korišteni za svaku koncentraciju u četiri neovisna eksperimenta. Sljedeća formula (jednadžba (6)) izračunava postotak održivosti stanica:
4.8.2. Kvantitativna lančana reakcija polimeraze u stvarnom vremenu (qRT-PCR)
Stanice su nasađene u {{0}}pločice s jažicama s gustoćom od 1 X 105 stanica/mL. Ova metoda grupiranja je ista kao i prethodna. Nakon 24 sata, ukupna RNA ekstrahirana je iz uzgojenih stanica pomoću TRIzol reagensa. Koncentracija i čistoća RNA izmjerene su na 260/280 nm pomoću ultraljubičastog spektrofotometra prema standardnom omjeru OD260/OD280 od 1.8-2.0. Reakcije obrnute transkripcije su obrnuto prepisane iz RNA korištenjem kompleta RevertAid First Strand cDNA Synthesis. Za mjerenje ekspresije gena korišten je TB Green Premix Ex TaqTM II. QRT-PCR je izveden korištenjem ABI QuantStudio™6 Flex Real-Time PCR sustava (Applied Biosystems, Foster City, CA, SAD). Slijedove primera sintetizirao je Sangon Biotech (Šangaj, Kina) (Tablica 4).
4.8.3. Western Blot analiza
Ukupni proteini ekstrahirani iz HSC u različitim skupinama pripremljeni su kako je prethodno opisano. Ukratko, slični proteini su razdvojeni elektroforezom u 10 postotnom natrijevom dodecil sulfat-poliakrilamidnom gelu (SDS-PAGE) i zatim prebačeni na membrane od poliviniliden fluorida (PVDF) (Roche Diagnostics GmbH, Mannheim, Baden-Wuerttemberg, Njemačka). Zatim su PVDF membrane blokirane u 3 posto BSA i inkubirane preko noći na 4 ◦C s primarnim antitijelima. Sljedećeg dana dodan je kozji anti-zečji IgG obilježen HRP-om (1:25, 000 razrjeđenje; 1 h). Proteinske trake vizualizirane su pomoću Pierce™ ECL Western Blotting supstrata i snimljene pomoću FluorChem E Imaging System (Protein Simple, San Francisco, CA, SAD), koje su normalizirane s -aktinom kao internom kontrolom.
4.8.4. Eksperimenti prekomjerne ekspresije FAK-a
Stanice su podijeljene u kontrolnu skupinu s normalnim medijem, skupinu stimulaciju PDGF-BB, skupinu stimulaciju PDGF-BB plus X-3-FAK skupinu, skupinu stimulaciju PDGF-BB plus X-3-NC, skupinu PDGF -BB stimulacija plus X-3-FAK plusCPhGskupinu liposoma i rrPDGF-BB stimulaciju plus X-3-NC plusCPhGskupinu liposoma. Linije HSC (1 × 105 stanica/mL) stavljene su u 6-pločice s jažicama i ostavljene da rastu preko noći na 37 ◦C u inkubatoru s 5 posto CO2. Sljedećeg dana dodane su i uzgojene stanice PDGF-BB (uzgajane u DMEM koji sadrži 50 µg/L PDGF-BB). Trećeg dana, pEX-3-FAK i X-3-NC razrijeđeni su u mediju bez antibiotika, dobro pomiješani s lipofektaminom 2000 i ostavljeni stajati na 37 ◦C 20 minuta prije dodavanja u svaku jažicu stanica na 37 ◦C. Nakon inkubacije od 5 sati, medij koji je sadržavao 10 posto seruma zamijenjen je 48 sati, a petog dana medij je zamijenjen koncentracijom od 29,45 µg/mL CPhG liposoma tijekom 24 sata. Zatim je svaka jažica sakupljena drugog, trećeg, petog i šestog dana i detektirana je ekspresija genskih proteina FAK, PI3K, Akt, p-PI3K i p-Akt.
4.9. Statistička analiza
Podaci su izraženi kao srednja vrijednost ± standardna devijacija (SD). Za statističke analize korišten je softver SPSS 16.0 (IBM, New York, NY, USA). Značajnost razlike izračunata je jednosmjernim ANOVA testom i praćen LSD testom. Jednadžbu otapanja lijeka prilagodio je Origin 8.5 (OriginLab, Northampton, MA, SAD).
5. Zaključci
Zaključno, naši rezultati to pokazujuCPhG(feniletanoidni glikozid iz cistanke) liposomi značajno inhibiraju aktivaciju HSC-a, značajno smanjujući razvoj fibroze jetre povećanjem apoptoze i reguliranjem staničnog ciklusa u HSC-ima. Inhibicija aktivacije FAK/PI3K/Akt signalnih putova može biti temeljni mehanizam kojimCPhGliposomi štite od kronične bolesti jetre povezane s fibrozom. Ova otkrića pružaju nove uvide u mehanizme ove nove formulacije lijeka kao antifibrogenog kandidata za buduće liječenje fibroze jetre. Međutim, temeljni mehanizmi složeniji su od onoga što je ovdje opisano, a naši rezultati ne isključuju moguću uključenost drugih uređaja uzrokovanihCPhGliposomi za liječenje fibroze jetre.
Doprinosi autora:TL, JZ, S.-PY, LM i S.-LZ osmislili su i dizajnirali eksperimente. S.-LZ, S.-PY, TL, JZ, X.-TM i X.-YY analizirali su podatke. S.-LZ i JZ napisali rukopis. TL, LM i JZ pregledali su rukopis. Svi su autori pročitali i odobrili konačni rukopis.
Financiranje:Ovo istraživanje financirala je Nacionalna zaklada za prirodne znanosti Kine, potpora broj 81560628.
Zahvale:Ovaj je rad financijski poduprla Nacionalna zaklada za prirodne znanosti Kine (br. 8156140127). Autori bi željeli izraziti svoju iskrenu zahvalnost Jun Zhao i Xin Wang za njihov napredak u pisanju ovog rada.
Sukob interesa:Autori ne prijavljuju izjave interesa.
Reference
1. Zhang, H.; Sunce, D.; Wang, G.; Cui, S.; Field, RA; Li, J.; Zang, Y. Alogliptin ublažava fibrozu jetre putem supresije aktiviranih jetrenih zvjezdastih stanica. Biochem. Biophys. Res. Komun. 2019.511, 387-393. [CrossRef]
2. Parola, M.; Pinzani, M. Fibroza jetre: Patofiziologija, patogenetski ciljevi i klinička pitanja. Mol. Aspects Med. 2019, 65, 37-55. [CrossRef] [PubMed]
3. Wu, YJ; Wu, YC; Chen, IF; Wu, YL; Chuang, CW; Huang, HH; Kuo, SM Reparativni učinci nanoagregata astaksantin-hijaluronana protiv fibroze i nekroze jetre izazvane retrorsinom-CCl(4). Molecules 2018, 23, 726. [CrossRef] [PubMed]
4. Wang, Y.; Sun, Y.; Zuo, L.; Wang, Y.; Huang, Y. ASICla potiče aktivaciju zvjezdastih stanica izazvanu visokim sadržajem glukoze i PDGF-om inducirajući autofagiju kroz CaMKKp/ERK signalni put. Toxicol. Lett. 2019, 300,1-9. [CrossRef] [PubMed]
5. Gupta, G.; Khadem, F.; Uzonna, JE Uloga citokina izvedenih iz jetrenih zvjezdastih stanica (HSC) u upali jetre i imunitetu. Cytokine 2018. [CrossRef] [PubMed]
6. Fu, C.; Li, J.; Aspire, A.; Xia, L.; Yang, Y; Chen, Q.; Lv, J.; Wang, X.; Li, J.Cistanche tubulosafeniletanoidni glikozidi induciraju apoptozu u Eca-109 stanicama putem puta koji ovisi o mitohondrijima. Oncol. Lett. 17. 2019. 303-313. [CrossRef] [PubMed]
7. Vi, SP; Ma, L.; Zhao, J.; Zhang, SL; Liu, T. Phenylethanol Glycosides izCistanche tubulosaSuzbijanje aktivacije jetrenih zvjezdastih stanica i blokiranje provođenja signalnih putova u TGF-beta1/smad kao potencijalni agensi protiv hepatičke fibroze. Molekule 2016,21,102. [CrossRef] [PubMed]
8. Vi, SP; Zhao, J.; Ma, L.; Tudimat, M.; Zhang, SL; Liu, T. Preventivni učinci feniletanoidnih glikozida izCistanche tubulosana fibrozu jetre izazvanu albuminom u goveđem serumu kod štakora. DARU J. Pharm. Sci. 2015, 23, 52. [CrossRef] [PubMed]
9. Gao, XL; Wang, M.; Liu, L. Učinkovitost zamke i apsorpcija četiriju vrsta proliposoma. J. Xin Jiang Med. Sveuč. 2007, 8, 787-790.
10. Li, PY; Du, SY; Lu, Y.; Chen, XN Bio-adhezivni sustav za isporuku lijekova i njegova primjena u tradicionalnoj kineskoj medicini. Brada. J. Mater. Medica 2017, 42, 4687-4693.
11. Li, Y.; Lu, A.; Dugi, M.; Cui, L.; Chen, Z.; Zhu, L. Ugrađeni liposomi derivata nitroimidazola za isporuku lijeka izazvanu hipoksijom i poboljšanu terapijsku učinkovitost kod ksenografta tumora dobivenih od pacijenata. Acta Biomater. 2019, 83, 334-348. [CrossRef] [PubMed]
12. Tang, H.-X.; Zhao, T.-W.; Zheng, T.; Sheng, Y.-J.; Zheng, H.-S.; Zhang, Y.-S. Liposomski sustav za isporuku lijekova usmjeren na jetru i njegov napredak u istraživanju bolesti jetre. Svjetska brada. J. Digest. 2016, 24,4238. [CrossRef]
13. Zhou, BiH; Tan, PP; Jia, LS; Zhao, WP; Wang, JC; Wang, HW Uključivanje signalnog puta PI3K/AKT u apoptozu izazvanu fluorom u stanicama C2C12. Chemosphere 2018, 199, 297-302. [CrossRef] [PubMed]
14. Jia, Y.; Guan, Q.; Guo, Y.; Du, C. Ehinakozid stimulira proliferaciju stanica i sprječava apoptozu stanica u crijevnim epitelnim MODE-K stanicama pojačanom regulacijom ekspresije transformirajućeg faktora rasta-p1. J. Pharm. Sci. 2012, 118, 99-108. [CrossRef]
15. Lin, L.-W.; Hsieh, M.-T.; Tsai, F.-H.; Wang, W.-H.; Wu, C.-R. Antinociceptivno i protuupalno djelovanje uzrokovanoCistanche deserticolakod glodavaca. J. Ethnopharmacol. 2002, 83, 177-182. [CrossRef]
16. Li, T.-M.; Huang, H.-C.; Su, C.-M.; Ho, T.-Y.; Wu, C.-M.; Chen, W.-C.; Fong, Y.-C.; Tang, C.-H.Cistanche deserticolaekstrakt povećava stvaranje kosti u osteoblastima. J. Pharm. Pharmacol. 2012, 64, 897-907. [CrossRef] [PubMed]
17. Liang, H.; Yu, F.; Tong, Z.; Huang, Z. UčinakCistanches HerbaVodeni ekstrakt na gubitak koštane mase kod štakora s ovarijektomijom. Int. J. Mol. Sci. 2011, 12, 5060-5069. [CrossRef]
18. Lu, M.-C. Studije o sedativnom učinkuCistanche deserticola.J. Ethnopharmacol. 1998, 59, 161-165. [CrossRef]
19. Cai, R.-L.; Yang, M.-H.; Shi, Y.; Chen, J.; Li, Y.-C.; Qi, Y. Djelovanje protiv umora ekstrakta bogatog feniletanoidomCistanche deserticola. fitoter. Res. 2010, 24, 313-315. [CrossRef]
20. Geng, X.; Tian, X.; Tu, P.; Pu, X. Neuroprotektivni učinci ehinakozida u mišjem MPTP modelu Parkinsonove bolesti. Eur. J. Pharmacol. 2007, 564, 66-74. [CrossRef]
21. Morikawa, T.; Pan, Y.; Ninomiya, K.; Imura, K.; Matsuda, H.; Yoshikawa, M.; Yuan, D.; Muraoka, O. Acilirani feniletanoidni aminoglikozidi s hepatoprotektivnim djelovanjem iz pustinjske biljke Cistanche tubulosa1. Bioorg. Med. Chem. 2010, 18, 1882-1890. [CrossRef] [PubMed]
22. Yang, F.-R.; Wen, D.-S.; Fang, B.-W.; Lou, J.-S.; Meng, L. Prevencija ekstrakta Cistanche salsa na jetrenu fibrozu izazvanu ugljikovim tetrakloridom u štakora. Brada. Herbal Med. 2013, 5,199—204.
23. Li, M.; Li, Y.; Liu, W.; Li, R.; Qin, C.; Liu, N.; Han, J. Priprema tekućih prolipo soma Cistanche phenylethanoid glicosides: Optimizirana formulacija, karakterizacija i prolipo neke pilule za kapanje in vitro i in vivo procjena. Eur. J. Pharm. Sci. 2016, 93, 224-232. [CrossRef] [PubMed]
24. Ergen, C.; Niemietz, PM; Heymann, F.; Bauer, M.; Gremse, F.; Pola, R.; van Bloois, L.; Storm, G.; Kiessling, F.; Trautwein, C.; et al. Fibroza jetre utječe na svojstva ciljanja sustava za isporuku lijeka na podskupine makrofaga in vivo. Biomaterijali 2019, 206, 49-60. [CrossRef] [PubMed]
25. Li, M.; Du, C.; Guo, N.; Teng, Y.; Meng, X.; Sun, H.; Li, S.; Yu, P.; Gallons, H. Dizajn sastava i medicinska primjena liposoma. Eur. J. Med. Chem. 2019.164, 640-653. [CrossRef]
26. Paliwal, S.; Tilak, A.; Sharma, J.; Dave, V.; Sharma, S.; Verma, K.; Tak, K.; Reddy, KR; Sadhu, V. Flurbiprofenom napunjene etanolske liposomske čestice za biomedicinsku primjenu. J. Microbiol. Metode 2019,161, 18-27. [CrossRef] [PubMed]
28. Sakai-Kato, K.; Yoshida, K.; Izutsu, K.-I. Učinak površinskog naboja na staničnu internalizaciju liposoma ovisnu o veličini. Chem. Phys. Lipidi 2019. [CrossRef] [PubMed]
28. Zhu, J.; Wang, Q.; Li, H.; Zhang, H.; Zhu, Y.; Omari-Siaw, E.; Sun, C.; Wei, Q.; Deng, W.; Yu, J.; et al. Liposomi puni galangina, ciljani na jetru: Optimizacija i hepatoprotektivna učinkovitost. J. Drug Deliv. Sci. Technol. 2018, 46, 339-347. [CrossRef]
30. Ezhilarasan, D.; Sokal, E.; Najimi, M. Jetrena fibroza: Vrijeme je da krenemo s terapijskim ciljevima specifičnim za jetrene zvjezdaste stanice. Hepatobilijarna pankreasna dis. Int. 2018, 17, 192-197. [CrossRef]
30. Moehrle, BM; Nattamai, K.; Brown, A.; Florijan, MC; Ryan, M.; Vogel, M.; Bliederhaeuser, C.; Soller, K.; Prows, DR; Abdollahi, A. Mehanizmi specifični za matične stanice osiguravaju genomsku vjernost unutar HSC-a i nakon starenja HSC-a. Cell Rep. 2015, 13, 2412-2424. [CrossRef]
32. Brea, R.; Kretanje, O.; Frances, D.; Garcia-Monzon, C.; Vargas, J.; Fernandez-Velasco, M.; Bosca, L.; Casado, M.; Martin-Sanz, P; Agra, N. PGE2 inducira apoptozu zvjezdastih stanica jetre i smanjuje fibrozu jetre kod miševa snižavanjem miR-23a-5p i miR-28a-5p. Biochim. Biophys. Acta Biophys. uklj. Photosynth. 2018, 1864, 325-337. [CrossRef] [PubMed]
33. Lauridsen, FKB; Jensen, TL; Rapin, N.; Aslan, D.; Wilhelmson, AS; Pundhir, S.; Rehn, M.; Paul, F.; Giladi, A.; Hasemann, MS; et al. Razlike u statusu staničnog ciklusa leže u pozadini transkripcijske heterogenosti u odjeljku HSC. Cell Rep. 2018, 24, 766-780. [CrossRef] [PubMed]
33. El-Lakkany, NM; El-Maadawy, WH; Seif El-Din, SH; Hammam, OA; Mohamed, SH; Ezzat, SM; Safar, MM; Saleh, S. Ružmarinska kiselina smanjuje jetrenu fibrogenezu putem supresije aktivacije/proliferacije zvjezdastih stanica jetre i indukcije apoptoze. azijski pak. J. Trop. Med. 10. 2017. 444-453. [CrossRef] [PubMed]
34. Chen, XX.; Zhang, XY; Ding, YZ; Li, X.; Guan, XM; Li, H.; Cheng, M.; Cui, XD Učinci endotelnih progenitorskih stanica na proliferaciju i biološku funkciju jetrenih zvjezdastih stanica pod stresom smicanja. Brada. J. Appl. Physiol. 2018, 34, 404-407.
35. Zhang, R.; Lin, XH; Liu, HH; Ma, M.; Chen, J.; Chen, J.; Gao, DM; Cui, JF; Chen, RX Aktivirane zvjezdaste stanice jetre potiču progresiju rezidualnog hepatocelularnog karcinoma nakon zagrijavanja od autofagijskog preživljavanja do proliferacije. Int. J. Hipertermija 2019, 36, 253-263. [CrossRef] [PubMed]
36. Park, SY; Le, CT; Sung, KY; Choi, DH; Cho, EH sukcinat potiče jetrenu fibrogenezu promicanjem aktivacije, proliferacije i migracije, te inhibicijom apoptoze jetrenih zvjezdastih stanica. Biochem. Biophys. Res. Komun. 2018, 496, 673-678. [CrossRef] [PubMed]
38. Tsukada, S.; Parsons, CJ; Rippe, RA Mehanizmi fibroze jetre. Clin. Chim. Acta 2006, 364, 33-60. [CrossRef]
38. Copple, BL; Roth, K. 2.16一Mehanizmi fibroze jetre. In Comprehensive Toxicology, 3rd ed.; McQueen, CA, ur.; Elsevier: Oxford, UK, 2018.; str. 397^08.
39. Breitkopf, K.; Roeyen, CV; Sawitza, I.; Wickert, L.; Floege, J.; Gressner, AM Obrasci ekspresije PDGF-A, -B, -C i -D i PDGF-receptora a i |3 u aktiviranim zvjezdastim stanicama jetre štakora (HSC). Cytokine 2005, 31, 349-357. [CrossRef]
