Dio 2 Učinci feniletanozida Cistanche Deserticola na ekspresiju -amiloidnog proteina u hipokampusu APP/PS1 transgenih miševa

Dio 2 Djelotvorni sastojci Cistanche: terapeutski učinak totalfeniletanoidni glikozidii Acteosides na Alzheimerovu bolest

Kliknite ovdje za 1. dio

Za više informacija kontaktirajte ali.ma@wecistanche.com

Kliknite na Cistanche DHT za Alzheimerovu bolest

4 . Zaključak

Alzheimerova bolestuglavnom se javlja u središnjem živčanom sustavu i izazvan je višestrukim čimbenicima. Do sada je njegova patogeneza još uvijek nejasna, ali srž istraživanja je još uvijek oko A . Kao glavne peptide koje izlučuje APP u mozgu, abnormalno taloženje A 1-42 i A 1-40 ne može izravno uzrokovati degeneraciju neurona. Iz perspektive etiologije, topljivi oligomeri ADDL-i koje proizvodi A 1-42 uzrokuju moždani pravi uzrok degeneracije neurona. Međutim, istraživanje ekspresije ova dva proteina također može odražavati opseg moždanih lezija AD u stvarnom vremenu, neizravno pokazati ekspresiju topljivih oligomera ADDL-ova, a zatim dinamički pratiti oštećenje neurona u mozgu iz izvora, pružajući referenca za prevenciju i liječenje bolesti. S obzirom na to, A 1-42 i A 1-40 postali su ključne mete u proučavanju patogeneze AD. Hipokampus je glavni dio mozga za procjenu sposobnosti učenja i pamćenja. Oštećenje njegovih neurona vodeći je uzrok kognitivne disfunkcije kod AD. Područje CA1 hipokampusa jedan je od glavnih dijelova patološkog oštećenja AD. Ovaj dio eksperimenta koristi HE. Metoda bojenja pokazala je da su neuroni u području CA1 hipokampusa normalne skupine bili uredno i tijesno raspoređeni, ravnomjernije raspoređeni i imali jasne slojeve. U modelnoj skupini hipokampalno područje CA1 miša pokazalo je degenerativne promjene kao što je apoptoza neuronskih stanica uslijed ozljede. Nakon intervencije različitih doza glikozidnih skupina fenetilnog alkohola Cistanche, morfologija stanica hipokampalnog područja CA1

Svi imaju različite stupnjeve poboljšanja, što sugerira daCistanche feniletanoidni glikozidimože imati učinak zaštite neurona i inhibicije njihove apoptoze, ali budući da HE bojenje nije specifično za staničnu apoptozu i gubitak neurona, još uvijek je potrebno ciljati molekule specifične za apoptozu u kasnijoj fazi. Relevantna detekcija markera.

Prethodni tretman tkiva koje se testira izravno je povezan s rezultatom bojenja. U eksperimentu je autor otkrio da je hipokampus transgenih miševa smješten u dubokom unutarnjem dijelu temporalnog režnja telencefalona, ​​male veličine i teško je odvojiti tkivo. Mala nepažnja uzrokovat će mehaničko oštećenje tako da se patološke promjene ne mogu učinkovito uočiti. U isto vrijeme, budući da su genetski modificirani miševi skupi, a eksperimentalni ciklus doziranja dug, gubitak uzoraka može utjecati na ukupni napredak istraživanja. Stoga, kada miš dovrši srčanu perfuziju, cijeli se mozak izvadi i fiksira paraformaldehidom, oštricom skalpela se ukloni olfaktorni bulbus, a ostatak moždanog tkiva se dehidrira i ugrađuje. Debljina reza se kontrolira na 3 do 5 μm kako bi se osiguralo da je hipokampus netaknut. Pod pretpostavkom optimizacije procesa rada, poboljšava se učinkovitost istraživanja. U Western-blot detekciji, autor je otkrio da zbog male molekularne težine A 1-42 i A 1-40 proteina, ekspresijske trake nije lako blotirati, pa je potrebno pregledati njihov SDS -PAGE koncentracija gela, vrijeme elektroforeze i vrijeme prijenosa. Ako je koncentracija gela za razdvajanje premala, staze elektroforeze će migrirati i aktivacija proteina će biti nepotpuna; predugo vrijeme elektroforeze uzrokovat će pomicanje trake izvan sloja gela; odgovarajuće vrijeme prijenosa učinit će Western blot zamagljenim, čime će utjecati na inkubaciju primarnog antitijela Kombinirajte sa sekundarnim antitijelima. S obzirom na to, ova je studija bila kroz preliminarne pokuse i na kraju je odabran 15-postotni gel za odvajanje, podvrgnut elektroforezi i prenesena membrana tijekom 2 sata za izvođenje Western blottinga na A 1-42 i A 1-40 kako bi se istražila njihova ekspresija .

Među tehničkim metodama koje se trenutno koriste za regulaciju proteina, Western-blot metoda uglavnom se koristi za kvantifikaciju za istraživanje specifične ekspresije srodnih proteina. Imunohistokemijska metoda polazi od kvalitativnog gledišta. S jedne strane, može intuitivnije pokazati stupanj specifičnog vezanja proteina i antitijela, as druge strane, može poduprijeti kvantitativne rezultate. Budući da imunohistokemija otkriva ekspresiju proteina vezanjem antitijela na antigenska mjesta na histopatološkim rezovima, priprema histopatoloških rezova je posebno važna. Presjek nije lako biti predebeo. Nakon što je isječak dovršen, potrebno ga je sačuvati kako bi se izbjeglo vanjsko oštećenje isječka tkiva; prije obrade potrebno je provesti odgovarajuću deparafinizaciju, a vrijeme ne smije biti kraće od 2 sata; odaberite pufer limunske kiseline s blagim uvjetima i manje slučajnog oštećenja antigena Izvršite popravak, uklonite katalazu, potpuno izložite antigensko mjesto i učinite da primarno antitijelo potpuno pristane na mjesto. Gornje dvije metode, kao metode detekcije koje se često koriste u molekularnoj biologiji, nadopunjuju jedna drugu i pružaju tehničku podršku za istraživanje regulacije proteina.

Ova studija koristila je HE i druge metode za istraživanje lezija hipokampusa i ekspresije A-proteina u mozgu. Rezultati su pokazali da je nakon intervencije odCistanchefeniletanoid , stanična morfologija područja CA1 hipokampusa u mozgu miševa modela AD poboljšala se u različitim stupnjevima. Razine ekspresije A 1-42 i A 1-40 bile su značajno smanjene. Osim toga, otkriveno je da je zaštitni neuronski učinak intervencijske skupine verbaskozida bio bolji od učinka ukupnefeniletanoidni glikozidiskupina. Ukupni glikozidi odCistanche feniletanoidni glikozidiimaju veliki potencijal za poboljšanje patoloških promjena u području mozga miševa modela AD i zatim imaju antagonistički učinak na AD. Specifični mehanizam djelovanja treba dalje proučavati u budućnosti. Ova studija upotpunjuje podatke istraživanja o mehanizmuCistancheantagonizira AD iz perspektive A, a u isto vrijeme postavlja istraživačke temelje za daljnje razjašnjavanje mehanizma djelotvornih komponenti ili aktivnih monomeraCistancheprotiv AD u kasnijem razdoblju.