Mrežna farmakologija i eksperimentalna validacija spoja na bazi cistanhe u liječenju benigne hiperplazije prostate putem modulacije puta PI3K/AKT
Jun 17, 2025
Sažetak
Cilj:
Za istraživanjepreventivni i terapeutski učinci granulata na bazi cistanhenabenigna hiperplazija prostate (BPH)i razjasniti temeljne mehanizme krozmrežna farmakološka predviđanjau kombinaciji sain vivo pokusi na životinjama.
Biljne tablete na bazi cistanhe s visokim sadržajem aktivnih sastojaka
Idi na popis proizvoda i saznaj više pojedinosti
Metode:
(1) Aktivni sastojciodCistanche deserticolai druge potporne biljke pregledane su putemTCMSP baza podataka, dopunjen rudarstvom literature. Ciljevi ovih fitokemikalija predviđeni su pomoćuPubChem, Swiss Target Prediction, iUsporedna toksikogenomska baza podataka (CTD). Ciljevi povezani s BPH prikupljeni su izGeneCards, CTD, Banka lijekova, iDisGeNET. Identificirana analiza raskrižja125 potencijalnih terapijskih ciljevaCistanche u liječenju BPH. Amreža protein-protein interakcije (PPI).konstruiran je korištenjemNIZ, iAnalize obogaćivanja puta GO i KEGGizvedeni su putemMetascape. Sveobuhvatanmreža "herb-compound-target-pathway".je vizualiziran pomoćuCytoscape, a ključni ciljevi su potvrđeni putemmolekularno spajanjekorištenjemAutoDock Vina.
(2) Šezdeset mužjaka štakora nasumično je podijeljeno u šest skupina: kontrola, model, pozitivna kontrola (Qianlie ShutongKapsule, 0,324 g/kg), i tri skupine dozaCistanche složene granule(visoka: 3,24 g/kg, srednja: 1,62 g/kg, niska: 0,81 g/kg). BPH je izazvankastracija i injekcija testosteron propionata. Štakori su primali oralni tretman dnevno tijekom 30 dana. Izračunati su mokra težina i indeks prostate. Serumske razine odCOX-2, VEGF, iPGE2mjereni su ELISA testom.Histopatološke promjenepromatrane su HE bojenjem, iekspresija proteinaodAKT1, p-AKT1, PI3K, p-PI3K, COX-2, iVEGFprocijenjeno je Western blotom.
Rezultati:
(1) Ukupno260 složenih meta, 1584 mete povezane s BPH, i125 preklapajućih terapijskih ciljevasu identificirani. Uključeni ključni ciljeviAKT1, TNF, TP53, IL1, EGFR, CASP3, iPTGS2. To su pokazale analize obogaćivanjaIL-17, HIF-1, TNF, iPI3K-AKT signalni putoviigrati kritične uloge. Osnovni aktivni sastojci kao što suluteolin, apigenin, glikozidi trputca, mangiferin, iizoviteksinpokazao jake afinitete vezanja s ciljevima poputAKT1, PTGS2, CASP3, iIL6, s energijama vezanja manjim ili jednakim –6 kcal/mol.
(2) In vivo rezultati su to pokazaliCistanche granule značajno smanjuju težinu i indeks prostate(P < 0,05 ili P < 0,01), poboljšanožljezdana strukturai ublaženaepitelna hiperplazija. Serumske razine odCOX-2, PGE2, iVEGFbili značajno sniženi. Izražavanjep-AKT1, p-PI3K, COX-2, iVEGFu tkivu prostate značajno je smanjen (P < 0,05 ili P < 0,01).
Zaključak:
Ova studija daje preliminarne dokaze daBiljna terapija na bazi cistanhenaprežepreventivno i terapeutsko djelovanje protiv BPH, prvenstveno kroz modulacijuPI3K/AKT signalni put, inhibicijaCOX-2 i PGE2, i suzbijanjeProliferacija stanica prostate posredovana VEGF-om. Ključne bioaktivne komponente poputglikozidi trputca, mangiferin, iluteolinmogu poslužiti kao glavni farmakološki agensi. Ovi nalazi podupiru potencijalEkstrakt cistančekao aprirodni lijek za zdravlje prostate.
Ključne riječi:
Cistanche deserticola; Ekstrakt cistanče; benigna hiperplazija prostate (BPH); mrežna farmakologija; PI3K/AKT put; VEGF; COX-2; PGE2; upala prostate; prirodni lijek za prostatu; biljni tretman za BPH; tradicionalna kineska medicina; fitoterapija; molekularno spajanje; štakorski model
Pozadina
Benigna hiperplazija prostate (BPH)je čest urološki poremećaj u muškaraca srednje i starije dobi. U svojim ranim stadijima BPH karakterizira učestalo mokrenje, hitnost, neodlučnost i nepotpuno mokrenje. Kako bolest napreduje, mogu se pojaviti teži simptomi kao što su hematurija, bolno mokrenje, kamenci u mokraćnom mjehuru, pa čak i bubrežna disfunkcija [1-2]. Studije [3] su pokazale da učestalost BHP raste s dobi, zahvaćajući preko 50% muškaraca starijih od 50 godina, čime značajno narušavaju kvalitetu života.
Trenutačni tretmani BPH uglavnom uključujulijekovi i kirurške intervencije, što može dovesti donuspojave, komplikacije i dugotrajne posljedice[4–7]. Stoga,Tradicionalna kineska medicina (TCM)formulacije koje suklinički učinkovit s manje nuspojavadobili su sve veću pozornost kao alternativne terapije za BPH.
Biljne granule na bazi cistankepokazali su protuupalne, diuretičke i zaštitne učinke na tkiva u urinarnim stanjima. Prethodne studije [9-10] pokazale su da se biljni recepti prvenstveno temelje naCistanche deserticolanaprezati sezaštitne učinkeprotiv BPH u životinjskim modelima. Preliminarno istraživanje naše skupine [11] sugerira da ova formula može smanjiti upalu prostate zainhibicija medijatora upalekao nprCOX-2, PGE2, IL-6, iTNF-. Odprostatitis je često komorbidno stanje koje pogoršava BPH, ova studija ima za cilj procijenitimehanizam djelovanja i terapijski potencijalod aSpoj na bazi cistanhekorištenjemmrežna farmakologija i in vivo validacijau štakorskom modelu BPH.
Usluga podrške tvrtke Wecistanche-Kontaktirajte nas da biste dobili veleprodajnu cijenu
E-pošta:wallence.suen@wecistanche.com
Whatsapp/telefon:+86 15292862950
1. Materijali i metode
1.1 Pokusne životinje
Ukupno 70 muških SD štakora SPF stupnja (180–220 g) osigurao je Centar za laboratorijske životinje Medicinskog sveučilišta Guangxi (licenca: SCXK [Gui] 2020-0003). Protokole za životinje odobrio je Institucionalni odbor za etiku životinja (broj odobrenja: GXBGMP20220602). Štakori su držani u standardnim uvjetima s kontroliranom temperaturom (23 ± 2 stupnja), vlagom (60 ± 5%) i 12-satnim ciklusom svjetlo/tama.
1.2 Lijekovi i reagensi
Granule spoja Cistanche (probna formulacija)
Pozitivna kontrola: Qianlie Shutong kapsule (0,324 g/kg)
Injekcija testosteron propionata (15 mg/kg)
ELISA setovi za COX-2, PGE2, VEGF
Antitijela: anti-AKT1, p-AKT1, PI3K, p-PI3K, COX-2, VEGF, GAPDH
Western blot reagensi, SDS-PAGE gelovi i sustavi za oslikavanje
Svi reagensi nabavljeni su od pouzdanih domaćih i inozemnih dobavljača
1.3 Oprema
Analitička vaga (preciznost 0,0001 g)
Invertirani biološki mikroskop (Olympus IX73)
Čitač mikropločica (Tecan M200)
Western blot sustav (Bio-Rad)
Stanica za snimanje (GE Imager 680)
1.4 Ciljno predviđanje za Cistanche aktivne spojeve
Aktivni sastojci odCistanche deserticolai druge komplementarne biljke su preuzete izTCMSP baza podataka, filtrirano premaoralna bioraspoloživost (OB veća ili jednaka 30%)isličnost lijeku (DL veći ili jednak 0,18). Literaturno potvrđeni bioaktivni spojevi koji ne zadovoljavaju te pragove također su uključeni. Navodni ciljevi su predviđeniPubChem, SwissTargetPrediction, iCTD, koristeći filtere za visoku GI apsorpciju i povoljna ADME svojstva.
1.5 Identifikacija ciljeva povezanih s BPH
"BPH" je pretraživan u više baza podataka uključujućiDisGeNET, CTD, GeneCards, iBanka lijekovaza prikupljanje ciljeva povezanih s bolešću. Zadržani su samo ciljevi s rezultatima relevantnosti iznad medijana, a duplikati su uklonjeni kako bi se dobio ciljni skup BHP visoke pouzdanosti.
1.6 Analiza presjeka za potencijalne terapijske ciljeve
PresijecanjemCistanche složene metes poznatimGeni povezani s BPH, identificirali smo potencijalanti-BPH terapijski ciljevi, vizualiziran putemVennovi dijagramikoristeći R softver.
1.7 Izgradnja mreže protein-protein interakcije (PPI).
Potencijalne mete su učitane naSTRING v11.5baze podataka za izgradnju PPI mreže. Vizualizacija i topološka analiza (centralnost stupnja) provedene su pomoćuCytoscape 3.9.1.
1.8 GO i KEGG analiza obogaćivanja
Analize obogaćivanja zaGenska ontologija (GO)funkcije iKEGG puteviprovedeni su korištenjemMetascape, sa značajem postavljenim naP <0,01.
1.9 Izgradnja mreže "biljni spoj-ciljani put".
Ključni putovi relevantni za BPH odabrani su iz rezultata obogaćivanja KEGG-om. Avišeslojna mrežapovezivanje biljaka, aktivnih spojeva, ciljeva i putova konstruirano je u Cytoscapeu, a ključni čvorovi analizirani su pomoćuMrežni analizatordodatak.
1.10 Provjera molekularnog spajanja
Šest osnovnih ciljnih proteina (PTGS2, AR, CASP3, IL6, PTGS1, AKT1) i spojevi najvišeg ranga (luteolin, apigenin, izoviteksin, mangiferin, glikozidi trpuca) odabrani su zamolekularno spajanje. Kristalne strukture proteina preuzete su sRCSB banka podataka o proteinima(https://www.rcsb.org), a spajanje je izvedeno pomoćuAutoDock Vina. Energije vezanja vizualizirane su i analizirane korištenjemPyMOL.
1.11 Životinjski model i grupiranje
Nakon 7 dana privikavanja, 60 mužjaka štakora nasumično je podijeljeno u 6 skupina (n=10): kontrola, model, pozitivna kontrola i niske, srednje i visoke dozeSkupine Cistanche spojeva(0,81, 1,62, 3,24 g/kg). BPH je izazvan putemorhiektomijaslijediinjekcije testosteron propionata(15 mg/kg) tijekom 28 dana. Primjena lijeka započela je 29. dana i nastavila se 30 dana.
1.12 Sakupljanje uzoraka
Nakon završnog tretmana, štakori su anestezirani i krv je sakupljena iz abdominalne aorte. Prostata je secirana, izvagana iindeks prostate (mg/g)bio izračunat. Uzorci su pohranjeni na –80 stupnjeva za analizu.
1.13 ELISA za serumske upalne markere
Serumske razine odCOX-2, PGE2, iVEGFodređeni su korištenjem ELISA kompleta prema uputama proizvođača.
1.14 Histološka analiza (H&E bojenje)
Tkiva prostate su fiksirana, uklopljena u parafin, izrezana i obojenahematoksilin i eozin (H&E). Patološke promjene uočene su svjetlosnim mikroskopom.
1.15 Western blotting
Razine ekspresije proteinaAKT1, p-AKT1, PI3K, p-PI3K, COX-2, iVEGFanalizirali suWestern blot. Intenzitet trake je kvantificiran pomoćuSlikaJ, saGAPDHkao unutarnja kontrola.
1.16 Statistička analiza
Podaci su analizirani pomoćuSPSS 22.0. Rezultati su prikazani kaosrednja vrijednost ± SD. Jednosmjerna ANOVA iLSD-t testkorišteni su za grupne usporedbe, saP < 0,05smatraju statistički značajnim.
