Istraživanje mehanizma Xian Fang Huo Ming napitka temeljenog na Cistancheu u regulaciji signalnog puta PI3K/Akt/NF-κB u liječenju kroničnog prostatitisa/sindroma kronične boli u zdjelici na temelju mrežne farmakologije i pokusa na životinjama
Oct 27, 2025
Sažetak
Cilj:Istražiti mehanizam djelovanja napitka Xian Fang Huo Ming (XFHY) na bazi Cistanche u liječenju kroničnog prostatitisa/sindroma kronične boli u zdjelici (CP/CPPS) putem mrežne farmakologije, molekularnog spajanja i eksperimentalne provjere na životinjskim modelima.
Metode:Aktivni sastojci i odgovarajući ciljevi XFHY dobiveni su iz baza podataka TCMSP i SwissTargetPrediction. Ciljevi povezani s CP/CPPS prikupljeni su s OMIM-a, GeneCards i DisGeNET-a. Temeljni terapijski ciljevi identificirani su putem konstrukcije PPI mreže i topološke analize. DAVID baza podataka korištena je za analizu obogaćivanja GO i KEGG. Molekularno spajanje provedeno je korištenjem AutoDocka, a vizualizacije generirane putem GraphPad Prism 8. In vivo, ozljeda prostate i upalna infiltracija u CP/CPPS štakora izazvana 3% λ-karagenanom procijenjeni su korištenjem bojenja hematoksilin-eozinom (HE). ELISA je korištena za otkrivanje ekspresije TNF-a, IL-1 i COX-2. PCR u stvarnom vremenu i Western blotting korišteni su za procjenu ekspresije PI3K, Akt i NF-κB p65 mRNA i proteina u tkivu prostate.
Rezultati:Bojanje HE nije pokazalo značajnu upalu u lažnoj skupini, dok je modelna skupina pokazala upalnu staničnu infiltraciju. Rezultati ELISA-e ukazali su na značajno povišene TNF-, IL-1 i COX-2 u skupini modela (P<0.01), confirming successful modeling. XFHY significantly reduced these markers in a dose-dependent manner. PCR showed that low, medium, and high doses of XFHY downregulated PI3K, Akt, and NF-κB p65 mRNA expression. Western blot confirmed that XFHY inhibited phosphorylation of PI3K, Akt (Ser473 and Thr308), and NF-κB p65.
Zaključak:XFHY može ublažiti CP/CPPS inhibicijom puta PI3K/Akt/NF-κB i smanjenjem upale. Aktivacija NF-κB može biti povezana s Akt fosforilacijom na Ser473 i Thr308.
Ključne riječi:mrežna farmakologija; Molecular Docking;Cistanche; piće Xian Fang Huo Ming;Kronični prostatitis/Sindrom kronične boli u zdjelici; PI3K/Akt/NF-κB
Dodatak ekstrakta TCM Cistanche za liječenjeKronični prostatitis
1. Uvod
Prostatitis je jedno od najčešćih stanja u urologiji. Prema NIH klasifikaciji dijeli se na četiri tipa: tip I (akutni bakterijski prostatitis), tip II (kronični bakterijski prostatitis), tip III (kronični prostatitis/sindrom kronične boli u zdjelici, CP/CPPS) i tip IV (asimptomatski prostatitis). Među njima je tip III najzastupljeniji, karakteriziran bolovima u zdjelici i perineumu, simptomima donjeg urinarnog trakta, psihološkim poremećajima i seksualnom disfunkcijom, što ozbiljno utječe na zdravlje i kvalitetu života muškaraca.
Prednosti dodatka ekstrakta Tcm Cistanche
Etiologija i patogeneza CP/CPPS ostaju nejasne i mogu uključivati upalu, imunološku disfunkciju i neuroendokrine poremećaje. Među njima, upala se smatra ključnim čimbenikom u napredovanju bolesti. Trenutačni tretmani usmjereni su na simptomatsko olakšanje korištenjem blokatora, NSAIL-a, antidepresiva i anksiolitika. Međutim, zbog složenosti i kroničnosti simptoma, sama zapadna medicina često ne uspijeva dati zadovoljavajuće rezultate.
Nedavni konsenzus stručnjaka sugerira da tradicionalna kineska medicina (TCM) ima jedinstvene prednosti u liječenju CP/CPPS-a, osobito tamo gdje zapadna medicina ne uspijeva. Iako drevni tekstovi TCM-a ne spominju eksplicitno CP/CPPS, obično se klasificira pod izrazima kao što su "jing zhuo", "lao lin" i "yin bol", s patogenim mehanizmima koji uključuju vlagu-toplinu, stagnaciju toksina i zastoj krvi. U skladu s tim, tretman je usmjeren na uklanjanje topline, odvodnju vlage, poticanje cirkulacije krvi i opuštanje meridijana.
Piće Xian Fang Huo Ming (XFHY)potječe iz"Ispravljena rasprava o receptima za žene", hvaljen kao klasičan lijek za apscese i upale. Čisti toplinu i toksine, jača krv i otapa čvorove. U modificiranoj formuli koja se ovdje koristi,Cistanchezamjenjuje druge tradicionalne monarch biljke, djelujući na toniziranje bubrežnog yanga, poboljšavajući cirkulaciju i smanjujući upalu. Formula također uključuje rep anđelike, korijen crvenog božura, tamjan, smirnu, koru mandarine i druge biljke sa sinergističkim učincima za čišćenje od topline, smanjenje oteklina i drenažu gnoja.
Profesor Chen Shenghui, na temelju godina kliničke prakse, primijenio je XFHY za liječenje CP/CPPS-a koji karakteriziraju vlažna toplina i zastoj krvi. Klinički rezultati pokazuju da XFHY može ublažiti bol i urinarne simptome dok povećava protuupalni citokin IL-10 u tekućini prostate, čime se smanjuje upala.
Ova studija ima za cilj dodatno istražiti mehanizme XFHY protiv uporabe CP/CPPSmrežna farmakologijaipokusi na životinjama, pružajući teorijsku osnovu za njegovu kliničku primjenu.
Dodatak ekstrakta Tcm Cistanche
2. Materijali
2.1 Životinje
Ukupno 70 muških štakora Sprague-Dawley (SD) bez specifičnih patogena (SPF) (starih 6 tjedana, 200-220 g) kupljeno je od Jiangxi Qianchong Scientific Instruments Co., Ltd. (Licenca br. SCXK(Zhe)2024-0001). Štakori su bili smješteni u Centru za laboratorijsku životinjsku tehnologiju Sveučilišta tradicionalne kineske medicine Jiangxi u kontroliranim uvjetima (12-satni ciklus svjetlo/mrak, vlažnost 60%±5%, temperatura 23±1 stupanj) sa slobodnim pristupom hrani i vodi. Nakon tjedan dana aklimatizacije započeli su pokusi. Etičko odobrenje izdalo je Etičko povjerenstvo Sveučilišta tradicionalne kineske medicine Jiangxi (br. odobrenja JZLLSC20241201).
2.2 Lijekovi
XFHY sastav na bazi cistanche (po dozi):
Cistanche 9 g
Fritillaria 6 g
Saposhnikovia 6 g
Kora mandarine 9 g
Obrađene ljuske pangolina 6 g
Tamjan 6 g
Mira 6 g
Korijen crvenog božura 6 g
Korijen trihozantesa 6 g
Korijen sladića 6 g
Rep anđelike 6 g
Gledicija trn 6 g
Angelica Dahurica 3 g
Sve biljke su otopljene i koncentrirane u temeljnu otopinu koja je ekvivalentna 0,729 g/mL sirovog bilja, zatim razrijeđena na 0,3645 g/mL i 1,458 g/mL za niske i visoke doze, pohranjena na 4 stupnja.
Sve su biljke nabavljene od certificiranih dobavljača TCM-a u provinciji Jiangxi, a autentičnost ih je potvrdio direktor Xiong Haoran iz ljekarne pridružene reproduktivne bolnice, Sveučilište tradicionalne kineske medicine Jiangxi.
Kontrolni lijek:
Tamsulozin hidroklorid kapsule s produljenim otpuštanjem (Jiangsu Hengrui Pharmaceuticals, 0,2 mg/kapsula, H20050392).
Lokalni lijek:
Mupirocin mast (Sino-American Tianjin Smith Kline, 15g, H10930064).
Dodatak ekstrakta Tcm Cistanche
2.3 Reagensi i antitijela
λ-karagenan(MedChemExpress, serija HY-125474)
ELISA setoviza TNF-, IL-1, COX-2 (Wuhan Beinlai Biotechnology, serija RA20035, RA20020, RA2008)
Antitijela: PI3K, Akt, p-Akt (Ser473), NF-κB i p-NF-κB (tehnologija stanične signalizacije, SAD)
p-PI3K antitijela(Abmart, Šangaj, serija PC6417S)
p-Akt (Thr308)(Qinke Bio, Jiangsu)
HRP-konjugirana sekundarna antitijela(Biografija tri orla, Wuhan)
qPCR i RNA kompleti(ComWin Biotech, Jiangsu)
ECL reagensi(Meilunbio®, Dalian)
PVDF membrane(Millipore, Njemačka)
2.4 Instrumenti
Centrifuge, PCR cikleri, qPCR strojevi, sustavi elektroforeze, Western blot aparati, ELISA čitači i oprema za mikroskopiju nabavljeni su od vodećih proizvođača znanstvene opreme uključujući Leicu, Perkin Elmer, Bio-Rad i druge (pogledajte cijeli popis u odjeljku s izvornim materijalima).
