Likopen i N-acetilcistein pružaju zaštitu od oštećenja izazvanih cisplatinom

Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-pošta:audrey.hu@wecistanche.com

Sinergistički zaštitni učinci likopena i N-acetilcisteina protiv hepatorenalne toksičnosti izazvane cisplatinom u štakora

Asmaa Elsayed, Ashraf Elkomy i dr.

Uvod

Cisplatin(CP) jedan je od najčešće korištenih kemoterapijskih lijekova. Iakocisplatinima dobro poznato antineoplastično djelovanje protiv višestrukih zloćudnih bolesti, štetni učinci, uglavnom zbog povećanih oksidativnih i staničnih apoptotskih učinaka u različitim tkivima, ograničavaju njegovu primjenu-2. CP (Cisplatin) je vrlo aktivan citotoksični agens u liječenju raka; međutim, nefrotoksičnost ograničava njegovu upotrebu4. CP (Cisplatin) primjena dovodi do oštećenja jetre zbog peroksidacije i oksidacije lipida što dovodi do promjena u jetrenim biomarkerima i antioksidativnim enzimima³. Mnoge studije su izvijestile o CP (Cisplatin)-inducirana hepatotoksičnost- i nefrotoksičnost10-14.

Likopen (LP)je aciklički karotenoid (derivat vitamina A) sa snažnim i učinkovitim djelovanjem hvatanja slobodnih radikala te protuupalnim, imunostimulirajućim, antibiotskim i antimutagenim učincima15,16, LP (Likopen) je crveni pigment koji je prisutan u velikoj količini u rajčicama i drugom crvenom voću. Kemijska struktura likopena sadrži mnoge dvostruke veze koje imaju glavnu ulogu u uklanjanju reaktivnih kisikovih vrsta (ROS)17 Konzumacija rajčica ili proizvoda od rajčice često je povezana s povećanim razinama likopena u cirkulaciji i smanjenim oksidativnim oštećenjima lipida, proteina i DNK18. LP (Likopen), prirodni antioksidans, ima antioksidativno djelovanje protiv nekoliko ozljeda tkiva uzrokovanih oksidativnim stresom9. In vitro likopen, antioksidativna učinkovitost je do 100 puta snažnija od vitamina E. Osim toga, LP (Likopen) ima kemopreventivno djelovanje protiv određenih oblika raka20 Zaštitno djelovanje LP (Likopen) protiv hepatorenalnog oštećenja izazvanog kemoterapijom privukla je znatnu istraživačku aktivnost posljednjih godina.

N-acetilcistein (NAC)je lijek i dodatak prehrani koji se obično koristi kao mukolitik za liječenje predoziranja paracetamolom1. NAC (N-acetilcistein) je predlijek L-cisteina, prekursora glutationa (GSH). Ravnoteža oksidans-antioksidans može se modulirati NAC-om (N-acetilcistein) regulacija razine GSH u stanicama, inhibicija peroksidacije lipida i uklanjanje RO2,23. NAC je sposoban vratiti ravnotežu prooksidansa/antioksidansa i često se koristi kao učinkovit antioksidans protiv oksidativnog stresa i in vivo i in vitro2425. CP (Cisplatin) klinički se koristio za mnoge bolesti kao kelator teških metala za zaštitu od oksidativnog stresa i sprječavanje ozljeda stanica26. NAC (N-acetilcistein) ima korisna ljekovita svojstva, uključujući inhibiciju karcinogeneze, tumorigeneze, mutageneze i rasta tumora i metastaza27.

Cilj ovog dizajna bio je utvrditi zaštitne učinke LP (Likopen) i/ili NAC (N-acetilcistein) protiv jetrene i bubrežne toksičnosti izazvane CP (Cisplatin) kod štakora istraživanjem biokemijskih markera, markera oksidativnog stresa i ekspresije kaspaze-3.

Cistanche može liječiti oštećenu funkciju bubrega

Materijali i metode

Kemikalije. CP (Cisplatin) (CAS br.: 15663-27-1), (50 mg/ml parenteralna primjena) kupljeno je od EIMC Pharmaceuticals Company (Kairo, Egipat).LP (Likopen) (CAS broj:502-65-8)kupljen je od tvrtke Sigma Aldrich (Saint Louis, MO, SAD).NAC (N-acetilcistein) (CAS broj: 616-91-1) je kupljen od South Egypt Drug Industries Company (SED-ICO) (6 October City, Egipat). Analitički setovi kupljeni su od Bio-diagnostics Company (Giza, Egipat).

DJELOVANJE EKSTRAKTA CISTANCHE: štiti jetru

Rezultati

Cisplatinnapravili su indukciju hepatotoksičnosti i nefrotoksičnosti na koju ukazuju povišene razine jetrenih i bubrežnih biomarkera u serumu (Tablica 1). Aktivnosti AST, ALT i ALP i koncentracija kreatinina, uree, kolesterola, triglicerida i LDL kolesterola bili su znatno povećani kao rezultat CP (Cisplatin) tretman u usporedbi s onima kod kontrolnih štakora. Također, CP (Cisplatin) smanjio serumske koncentracije ukupnih proteina, albumina i HDL kolesterola. S druge strane, slučaj je drugačiji gdje su ti parametri bili značajno smanjeni u štakora tretiranih CP-om s LP (Likopen), NAC (N-acetilcistein), ili kombinirani tretman (LP (Likopen) i NAC (N-acetilcistein)) u usporedbi sa skupinom CP. Značajno je da su ovi parametri značajno smanjeni kada su štakori pijani CP-om tretirani s oba LP (Cisplatin) i NAC (N-acetilcistein) u odnosu na liječenje LP-om (Likopen) ili NAC (N-acetilcistein) sama. Vrijednosti su bile značajno niže u usporedbi s kontrolama. Dakle, kombinacija LP i NAC pokazala je bolju zaštitu od hepatorenalnog oštećenja uzrokovanog CP nego sama.

Tablica 1. Učinci LP, NAC i/ili CP na biokemijske parametre seruma (n=7). Podaci su izraženi kao srednja vrijednost±SE (n=7).Različita slova superskripta u istom retku označavaju statističku značajnost na P manje od ili jednako 0.05.Cisplatin(CP) u jednoj dozi od 7,5 mg/kg (IP); likopen (LP) u dozi od 10 mg/kg; N-acetilcistein (NAC) u dozi od 150 mg/kg; aspartat aminotransferaza (AST); alanin aminotransferaza (ALT); alkalna fosfataza (ALP); lipoprotein visoke gustoće (HDL); lipoprotein niske gustoće (LDL).

Učinci CP (Cisplatin) intoksikacija i liječenje LP (Likopen), NAC (N-acetilcistein), i njihova kombinacija na MDA, reducirani glutation i antioksidativne enzime u jetrenom i bubrežnom tkivu prikazani su u tablicama 2, odnosno 3. Razine MDA značajno su porasle, a razine CAT, SOD i GSH u jetri su se značajno smanjile kod štakora pijanih CP-om u usporedbi s kontrolnim štakorima. LP (Likopen) i NAC (N-acetilcistein) tretmani su oslabili učinke CP (Cisplatin) na MDA u jetrenom tkivu, CAT, SOD i GSH, ali te su vrijednosti y i dalje bile značajno različite od kontrolnih vrijednosti. Kombinirani LP (Likopen) i NAC (N-acetilcistein) liječenje je značajno poboljšalo oksidativno oštećenje uzrokovano CP u tkivima jetre i bubrega u usporedbi s LP (Likopen) ili NAC (N-acetilcistein) samo liječenje. Ovi rezultati su potvrđeni nalazom histopatologije.

Tablica 2. Učinci LP, NAC i/ili CP na antioksidativne parametre u tkivima jetre (n=7).Podaci su izraženi kao srednja vrijednost±SE (n{{0}}). Različita slova superskripta u istom retku označavaju statističku značajnost kod P manje od ili jednako 0,05.Cisplatin(CP) u jednoj dozi od 7,5 mg/kg (IP); Likopen (LP) u dozi od 10 mg/kg; N-acetilcistein (NAC) u dozi od 150 mg/kg. malondialdehid (MDA); katalaza (CAT); superoksid dismutaza (SOD); reducirani glutation (GSH).

Tablica 3. Učinci LP NAC i/ili CP na antioksidativne parametre u bubrežnom tkivu. Podaci su izraženi kao srednja vrijednost ±SE (n=7).Različita slova superskripta u istom retku označavaju statističku značajnost na P manje od ili jednako 0.05.Cisplatin(CP) u jednoj dozi od 7,5 mg/kg (IP); Lvkopen (LP) u dozi od 10 mg/kg: N-acetilcistein (NAC) u dozi od 150 mg/kg. malondialdehid (MDA); katalaza (CAT); superoksid dismutaza (SOD); reducirani glutation (GSH).

Histopatološki nalazi pokazali su normalno organizirane hepatocite koji tvore zračeće jetrene vrpce oko središnje vene, s normalnim jetrenim tkivima uključujući krvne sinusoide i portalne strukture koje su opažene u dijelovima tkiva iz kontrolne fiziološke otopine, LP (Likopen), i NAC (N-acetilcistein)-liječeni štakori. Nasuprot tome, primijetili smo ozbiljne alternativne promjene u jetrenom parenhimu, uključujući gubitak normalnog rasporeda jetrenih vrpci, začepljenu središnju venu i sinusoide, pjenastu vakuoliziranu citoplazmu i izražene degenerativne promjene povezane s teškom nuklearnom piknozom koja je primijećena u dijelovima CP-a. (Cisplatin) tretirani štakori. Zanimljivo, LP (Likopen), NAC (N-acetilcistein), a njihova je kombinacija značajno obnovila uobičajenu jetrenu arhitekturu (Slika 1).

S druge strane, slika 2 prikazuje normalnu arhitekturu bubrežnog korteksa, bubrežnog korpuskula, glomerula, proksimalnih zavojitih tubula i distalnih zavojitih tubula štakora iz kontrole, LP (Likopen), i NAC (N-acetilcistein) grupe. Nasuprot tome, CP (Cisplatin)-opijani štakori pokazali su ozbiljne nefrotske lezije povezane s izraženim degenerativnim promjenama unutar epitelne obloge bubrežnih tubula, začepljenim međububrežnim krvnim žilama, hidropijskom degeneracijom, piknotičnim jezgrama u epitelnim stanicama i hijalinskim lijevanim materijalima u lumenu većine tubula. Liječenje LP-om (Likopen), NAC (N-acetilcistein), ili njihova kombinacija spriječila je histopatološke promjene bubrega izazvane CP (Cisplatin).

Što se tiče rezultata imunohistokemijskih ispitivanja, došlo je do dramatične pojačane regulacije kaspaze-3, bilo citoplazmatske ili jezgrene ekspresije u jetrenim i bubrežnim tkivima uzrokovane CP (Cisplatin)(sl. 3 i 4). S druge strane, ekspresije kaspaze-3 blago pojačano regulirane u odnosu na kontrolnu skupinu pronađene su u LP-u (Likopen) plus CP i NAC (N-acetilcistein) plus CP grupe. Štoviše, CP (Cisplatin)-posredovana kaspaza-3 regulacija naglo je smanjena kombiniranim liječenjem LP (Likopen) i NAC (N-acetilcistein).

DJELOVANJE EKSTRAKTA CISTANCHE: PROTUUPALNO

Rasprava

CP (Cisplatin) izaziva antikancerogene učinke interakcijom s DNK i induciranjem programirane stanične smrti. Više in vitro studija pokazalo je citotoksične učinke CP-a u različitim staničnim linijama, no provedeno je samo nekoliko in vivo studija45,32-36. Naši su nalazi u skladu s in vivo rezultatima drugih studija, uključujući uključenost oksidativnog stresa i apoptotskih mehanizama u hepatorenalno oštećenje izazvano CP-om i potencijalnu upotrebu LP-a (Likopen) i NAC (N-acetilcistein) kao zaštitna sredstva protiv ozljeda izazvanih CP.

Povišene aktivnosti jetrenih enzima ukazuju na stanično curenje i gubitak funkcionalnog integriteta hepatocita; enzimi jetre otpuštaju se u krvotok kada su plazma membrane hepatocita oštećene1, U ovoj studiji, CP (Cisplatin)-inducirana hepatotoksičnost dokazana je značajnim promjenama u serumskim jetrenim enzimima (AST, ALT i ALP). CP (Cisplatin) preuzima jetra i nakuplja se u hepatocitima, uzrokujući oštećenje stanica koje na kraju dovodi do povećanja cirkulirajućih jetrenih enzima*. Uz to, CP je povisio razine kreatinina i ureje, u skladu s prethodnim studijama,17,37. Povišene razine kreatinina i ureje uzrokovane su smanjenom brzinom glomerularne filtracije. Štoviše, Cayer i sur.38 pripisali su toksičnost jetre i bubrega uzrokovanu CP slobodnim radikalima koji se stvaraju u stanicama jetre i bubrega, što dovodi do peroksidacije lipida i posljedično do oksidativnog stresa koji oštećuje stanice.

Primjena CPV-a izazvala je značajno smanjenje ukupnih cirkulirajućih proteina i albumina. Ovaj rezultat bio je u skladu s Abuzinadom i Ahmadom3. Nakon oštećenja jetre, CP (Cisplatin) intoksikacija smanjuje sintezu proteina i mijenja funkcionalni integritet bubrega, što dovodi do proteinurije i, konačno, do smanjene razine proteina u cirkulaciji40.

Administracija CP (Cisplatin) rezultiralo je značajno povišenim cirkulirajućim kolesterolom, trigliceridima i LDL kolesterolom te smanjenim HDL kolesterolom. Jetra igra vitalnu ulogu u regulaciji razine kolesterola u plazmi. Stoga, kada je disfunkcija jetre izazvana liječenjem lijekovima, razine ukupnog kolesterola (TC) i LDL-kolesterola u serumu su povećane41. Značajan porast serumskih razina TC, triglicerida (TG) i LDL-kolesterola nakon izlaganja štakoracisplatinvjerojatno je posljedica štetnih učinaka CP-a, što dovodi do hepatocelularne disfunkcije i poremećenog metabolizma lipida, u skladu s nalazima Akindele i sur.42. Jetra sintetizira TG i transformira TG u kolesterol lipoproteina vrlo niske gustoće (VLDL) za transport do perifernih tkiva, a oštećenje sinteze VLDL-C rezultira povišenim razinama TG3. Uočen je značajan oporavak od oštećenja CP-a u LP-u (Likopen) i NAC (N-acetilcistein)-tretirane skupine. Osim toga, NAC (N-acetilcistein) i LP (Likopen) imaju hipolipidemijske učinke28,44.

Što se tiče parametara oksidativnog stresa/antioksidansa, razine MDA (povećana lipidna peroksidacija) značajno su povećane, a antioksidansi (CAT, SOD i GSH) značajno su smanjeni u tkivima jetre i bubrega nakon CP (Cisplatin) liječenje. Ovi rezultati su u skladu s Abd El-Kaderom i Tahalom, Abdel-Razekom i sur.12, i Elkomyjem i sur.!. Stvaranje ROS-a kao što su superoksidni anioni i hidroksilni radikali rezultira posredovanjem oksidativnog stresa i iscrpljivanjem antioksidansa u plazmi39.

LP (Likopen) inhibira peroksidaciju lipida izravnom reakcijom s različitim ROS i sprječavanjem oštećenja mitohondrija izazvanih CP (Cisplatin). Naši rezultati sugeriraju da LP (Likopen) ometa oksidaciju lipida mitohondrijske membrane. LP (Likopen) inhibira peroksidaciju lipida kao prekidač lanca, hvatač slobodnih radikala i modulator antioksidansa 45.

Blagotvorni učinci NAC-a (N-acetilcistein) pripisuju se njegovoj ulozi snažnog hvatača slobodnih radikala. Slobodna sulfhidrilna skupina NAC-a može izravno reagirati s elektrofilnim spojevima, kao što su slobodni radikali45. NAC također stimulira sintezu GSH i stoga stimulira endogenu antioksidacijsku aktivnost². Izravno antioksidativno djelovanje i stimulacija endogenog antioksidativnog djelovanja objašnjava sposobnost NAC (N-acetilcistein) za obnovu oksidativne homeostaze u jetri i bubrezima u našem istraživanju. Uklanjanje slobodnih radikala NAC (N-acetilcistein) može spriječiti poremećeni bubrežni protok krvi nakon okluzije donje šuplje vene i spriječiti smanjeni vaskularni otpor bubrega uzrokovan CP (Cisplatin) 48. Učinak NAC (N-acetilcistein) na bubrežni protok krvi i vaskularni otpor kod štakora pijanih CP-om može objasniti poboljšanje bubrežne funkcije uočeno u ovoj studiji.

Slika 1, Histopatološke promjene u dijelovima jetre.

(a)-(c) Normalna organizacija jetrenih vrpci (debela strelica), krvnog sinusoida (tanke strelice) i središnje vene (CV) jetre u kontroli (a), LP (Likopen)(b) i NAC (N-acetilcistein)(c) grupe.

CP (Cisplatin)-inducirane promjene u jetri uključuju ozbiljne degenerativne promjene, kao što je gubitak normalnog rasporeda jetrenih vrpci, vakuolizacija (tanke strelice), pjenasti izgled (debela strelica) i piknotičke jezgre nekih hepatocita (S).

(e)CP (Cisplatin)-inducirani gubitak normalne stanične arhitekture jetrenih vrpci s teškom vakuolacijom jetre (debela strelica), proširenim krvnim sinusoidom (tanka strelica) i piknotičnim jezgrama hepatocita (kratka strelica).

(f) histološke promjene u jetri u LP (Likopen) plus CP (Cisplatin) grupa. Umjereni učinci u jetri uključuju začepljene krvne žile (CV), prošireni krvni sinusoid (debela strelica) i kondenzaciju jezgrinog kromatina hepatocita (tanka strelica).

(g) Histološke promjene u jetri u NAC (N-acetilcistein) plus CP (Cisplatin) grupa. Umjereni učinci na jetru uključuju kongestiju CV-a, hidropičnu degeneraciju (tanke strelice) i degranuliranu citoplazmu hepatocita (debela strelica).

(h) Histološke promjene u jetri u LP (Likopen) plus NAC (N-acetilcistein) plus CP (Cisplatin) grupa. Blagi učinci na jetru uključuju proširene krvne žile （CV） i krvne sinusoide （strelice）. Ljestvica=50 μum.

Osim aktivnosti čišćenja ROS-a, LP (Likopen) i NAC (N-acetilcistein) obnovio aktivnosti SOD i CAT i razine GSH u CP (Cisplatin)-pijani štakori. Stoga snažno predlažemo da LP (Likopen) i/ili NAC (N-acetilcistein)-posredovana poboljšanja biokemijskih parametara seruma testiranih u ovoj studiji bila su posredovana supresijom ROS-a i pojačanom regulacijom antioksidativnih mehanizama protiv CP (Cisplatin)-inducirana oksidativna ozljeda.

LP (Likopen) sastoji se od atoma ugljika i vodika (CHs6) s mnogo dvostrukih veza koje smanjuju energiju potrebnu za delokalizaciju elektrona, pružajući dobar izvor donacije atoma vodika potrebnog za stabilizaciju slobodnih radikala. Od LP (Likopen) je lipofilan, integriran je s lipidnim dvoslojem stanične membrane što omogućuje apstrakciju H atoma iz LP (Likopen) umjesto da nezasićene masne kiseline zaustavljaju CP (Cisplatin)-inducirana peroksidacija lipida koja se vidi drastičnim smanjenjem MDA49.

Slika 2. Histopatološke promjene u dijelovima bubrega.

(a)-(c) Normalna arhitektura bubrežnog korteksa, bubrežnog korpuskula (strelica), glomerula (G), proksimalnih zavojitih tubula (P) i distalnih zavojitih tubula (D) u kontroli (a), LP (Likopen) (1b) i NAC (N-acetilcistein)(d) skupine.

(d) CP (Cisplatin) izazvane teške degenerativne promjene u ovojnici epitela bubrežnih tubula (f), začepljene interrenalne krvne žile (I), hidropična degeneracija (tanka strelica) i piknotičke jezgre epitelnih stanica (debela strelica).

(e) CP (Cisplatin)-inducirani gubitak normalne arhitekture u bubrežnim tubulima, s hijalinskim lijevanim materijalima u lumenu većine tubula (debele strelice), degranuliranom citoplazmom u nekim epitelnim stanicama (d) i deskvamiranim stanicama (tanka strelica).

(f) Histološke promjene u bubregu u LP (Likopen) plus CP (Cisplatin) grupa. Umjereni učinci na bubrežne tubule i degenerirane i oljuštene epitelne stanice (debela strelica).

(g) Histološke promjene u bubregu u NAC (N-acetilcistein) plus CP (Cisplatin) grupa. Umjereni učinci uključuju zagušene međububrežne krvne žile (C), hijalinske lijevane materijale u lumenu nekih tubula (h) i nekrozu u nekim epitelnim stanicama (e).

(h) Histološke promjene u bubregu u LP (Likopen) plus NAC (N-acetilcistein) plus CP (Cisplatin) grupa. Blagi učinci uključuju proteinske materijale u lumenu nekih tubula (debele strelice). Traka mjerila= 50 um.

NAC (N-acetilcistein) je donor tiola s antioksidativnim svojstvima. Izvrstan je izvor sulfhidrilnih skupina i in vivo se pretvara u metabolite koji stimuliraju proizvodnju glutationa (GSH), čime se održava unutarstanična razina GSH, pojačava detoksikacija i djeluje izravno kao hvatač slobodnih radikala50.

Histološka i imunohistokemijska opažanja trenutne studije bila su u skladu i potvrdila su promjene biokemijskih i oksidacijskih/antioksidacijskih parametara među eksperimentalnim skupinama. CP (Cisplatin) liječenje je pokazalo izražene nefrotoksične učinke, uključujući citoplazmatsku vakuolizaciju u tubularnim epitelnim stanicama i apoptozu kako su izvijestili Alhoshani i sur. 4. Ozbiljne degenerativne promjene u bubrežnim tubulima pojavile su se nakon CP (Cisplatin) liječenje, uključujući hidropsku degeneraciju, piknotičke jezgre, povećanje citoplazmatskih vezikula, citoplazmatsku vakuolizaciju, nekrozu i apoptozu tubularnih stanica i deskvamaciju nekrotičnih epitelnih stanica, ispunjavanje tubularnih lumena i stvaranje hijalinskih odljeva. Ovi rezultati su u skladu s rezultatima Persea i Večeric-Halera51.

Slika 3. Promjene u ekspresiji jetrene kaspaze-3.

(a)-(c) pokazala je negativne reakcije imunološkog bojenja u kontroli (a), LP (Likopen)(b) i NAC (N-acetilcistein)(c) grupe.(d) i(e)CP (Cisplatin)-inducirane promjene koje pokazuju jaku reakciju imunološkog bojenja.

(f) Bojanje kaspazom u LP (Likopen) plus CP (Cisplatin) skupina pokazala je umjereno imunološko bojenje. (g) Bojanje kaspazom u NAC (N-acetilcistein) plus CP skupina pokazala je umjereno imunološko bojenje.

(h) Bojenje kaspaze u LP (Likopen) plus NAC (N-acetilcistein) plus CP (Cisplatin) skupina pokazala je blago imunološko bojenje.

Mjerna traka= 50 μm. CP (Cisplatin) liječenje inducira ekspresiju kaspaza-3, što ukazuje na pojavu apoptoze tubularnih epitelnih stanica.

Ovi rezultati potvrđuju rezultate Liua i sur.52 i Millera i sur.53, koji su pokazali da CP (Cisplatin) je metabolički pretvoren u snažniji toksin, koji je uzrokovao oštećenje DNK i oštećenje mitohondrijske DNK i disanja.

Ove promjene izazvane toksinima dovode do aktivacije apoptotskih puteva i pokretanja upalnih odgovora.

CP (Cisplatin)-inducirana hepatotoksičnost, naznačena sinusoidnom dilatacijom, kongestijom krvnih žila i neorganiziranom arhitekturom jetrenih lobula, u skladu je s učincima izazvanim CP-om o kojima su izvjestili Elkomy i sur.1.

NAC (N-acetilcistein) nije imao nuspojava u jetri ili bubrezima, što se očituje normalnom histologijom u tim tkivima. Naši podaci potvrdili su da je liječenje NAC-om (N-acetilcistein) imao je zaštitni učinak protiv nefrotoksičnosti i hepatotoksičnosti, što je naznačeno slabljenjem CP (Cisplatin) izazvane degenerativne promjene u jetri i bubrezima. Liječenje štakora s LP (Likopen) smanjuje nefrotoksične i hepatotoksične učinke CP (Cisplatin), na što ukazuju umjereni histopatološki nalazi u jetri i bubrezima. Kombinacija LP-a (Likopen) i NAC (N-acetilcistein) ima veliki profilaktički učinak protiv CP (Cisplatin)-inducirana hepatotoksičnost i nefrotoksičnost. Štakori tretirani LP (Likopen) i NAC (N-acetilcistein) prije liječenja CP-om imali su samo blage histopatološke lezije jetre i bubrega i blagu ekspresiju kaspaze 3, što ukazuje na nižu razinu apoptoze. Ovi rezultati su u skladu s nalazima Jianga i sur.54, koji su smatrali da je LP (Likopen) antioksidativni lijek koji štiti jetru i bubrege od oksidativnog oštećenja izazvanog CP. Ovi rezultati su također u skladu s Abdel-Wahabom i sur.4, koji su pokazali da NAC (N-acetilcistein) oslabio je nefrotoksičnost izazvanu CP-om i obnovio pravilno funkcioniranje bubrega, te s De Vriesom7, koji je pokazao da NAC potiče detoksikaciju jetre. NAC također može smanjiti koncentraciju CP u bubrezima povećanjem njegovog izlučivanja putem bubrega i/ili sprječavanjem njegovog nakupljanja u bubrežnom tkivu, kao što je izvijestio Appenroth. Zhao i Shichi" pokazali su da slobodna sulfhidrilna skupina može izravno reagirati s elektrofilnim spojevima, kao što je slobodnih radikala, a Yalcin22 je pokazao da NAC može djelovati kao antioksidativni lijek.

Prethodno liječenje LP-om i/ili NAC-om štitilo je od hepatorenalne toksičnosti izazvane CP-om, što pokazuju poboljšani biokemijski parametri, markeri oksidativnog stresa, histopatologija i ekspresija kaspaze-3. Dijetalna kombinacija LP i NAC može povećati sposobnost uklanjanja ROS-a17. Naši su podaci otkrili da istodobna primjena LP i NAC izaziva bolji zaštitni učinak protiv CP insulta od njihovih pojedinačnih dodataka.

Also, other natural products protected against hepatorenal toxicity induced by CP as Citrullus colocynthis, garlic oil>, timokinon3 i L-karnitin'.

Slika 4, Promjene u ekspresiji bubrežne kaspaze-3. (a)-(c) pokazali su negativne reakcije imunološkog bojenja.

(a). Kontrolna skupina koja pokazuje vrlo blago imunološko bojenje na kaspazu-3. Bojenje kaspaze-3 u LP (Likopen)(b) i NAC (N-acetilcistein) (C) skupine pokazale su negativnu reakciju imunološkog bojenja.

(d) i (e) liječena skupina s CP (Cisplatin) pokazala je tešku reakciju imunološkog bojenja. (f) Bojanje kaspazom u LP (Likopen) plus CP skupina pokazala je umjereno imunološko bojenje.

(g) Bojanje kaspazom u NAC (N-acetilcistein) plus CP (Cisplatin) skupina pokazala je umjereno imunološko bojenje. (h) Bojenje kaspaze u LP (Likopen) plus NAC (N-acetilcistein) plus CP skupina pokazala je blago imunološko bojenje.

Mjerna traka =50 μm. bubreg povećavajući njegovo bubrežno izlučivanje i/ili sprječavajući njegovo nakupljanje u bubrežnom tkivu, kako je izvijestio Appenroth 36. Zhao i Shichi7 pokazali su da slobodna sulfhidrilna skupina može izravno reagirati s elektrofilnim spojevima, kao što su slobodni radikali, a Yalcin2 je pokazao da NAC (N-acetilcistein) može djelovati kao antioksidativni lijek.

Zaključak

Sve u svemu, naši podaci sugeriraju da CP uzrokuje značajno oštećenje tkiva u jetri i bubrezima zbog oksidativnog stresa i apoptotskih mehanizama, što je dokazano promijenjenim biokemijskim parametrima i histopatološkim lezijama. Kombinacija LP i NAC pokazuje zaštitne učinke protiv CP-posredovanog oštećenja jetre i bubrega.

UČINCI EKSTRAKTA CISTANCHE: ANTIOKSIDACIJSKI

Reference

1, Elkomy, A, et al. L-karnitin ublažava oksidativni stres i dezorganizaciju intermedijarnih filamenata citoskeleta ucisplatin-inducirana hepato-renalna toksičnost u štakora. Ispred. Pharmacol.11,574441(2020).

2. Sallam, AO et al. Poboljšavajuće djelovanje L-karnitina protivCisplatin-inducirana toksičnost gonada u štakora. Pak Vet. 41 (1), 147-151 (2021).

3. Antunes, LMG, Darin, JDAC & Bianchi, MDLP Zaštitni učinci vitamina C protivcisplatin-inducirana nefrotoksičnost i peroksidacija lipida u odraslih štakora: studija ovisna o dozi. Pharmacol.Res.41(4), 405-411(2000).

4. Alhoshani, AR et al. Zaštitni učinak dodataka rutina protivcisplatin-inducirana nefrotoksičnost u štakora. BMC Nephrol.18(1),194(2017).

5. Karale, S. & Kamath, JVE Učinak daidzeina nacisplatin-inducirana hepatotoksičnost i hepatotoksičnost u pokusnih štakora. Indijski J. Pharacol.49(1), 49-54(2017).

6. Boroja, T. et al. Ekstrakt ljetnog čubra (Satureja hortensis L.) Phytochemical profile and modulation ofcisplatin-inducirana jetra,

toksičnost za bubrege i testise. Food Chem Toxicol. 118, 252-263 (2018).

7. Neamatallah, T., El-Shitany, NA, Abbas, AT, Ali, SS& Eid, BGH Med štiti odcisplatin-inducirana jetrena i bubrežna toksičnost inhibicijom NF-KB-posredovane ekspresije COX-2 i apoptotskog puta BAX/Bcl-2/kaspaze-3 ovisnog o oksidativnom stresu. Food Funct.9(7), 3743-3754(2018).

8. Mohamed, HE& Badawy, MMMModulacijski učinak zingerona protivcisplatinili hepatotoksičnost izazvana y-zračenjem regulacijom molekularnog ciljanja. Appl Radiat Isot.154,108891(2019).

9. Abdel-Daim, MMet al. Utjecaj ulja češnjaka (Allium sativum) nacisplatin-inducirane hepatorenalne biokemijske i histopatološke promjene u štakora. Total Sci. Environ.710,136338 (2020).

10. El-Kordy, EA Učinak suramina na oštećenje proksimalnih tubularnih stanica bubrega izazvanoCisplatinu štakora (histološka i imuno-histokemijska studija). J. Microsc.Ultrastruct.7(4),153-164 (2019).

11. Abd El-Kader, M. & Taha, RI Usporedni nefroprotektivni učinci kurkumina i etorikoksiba protivcisplatin-inducirana akutna ozljeda bubrega u štakora. Acta Histochem.122(4), 151534 (2020).

12. Abdel-Razek, EA, Abo-Youssef, AM & Azouz, AABenzbromarone ublažavacisplatinnefrotoksičnost koja uključuje pojačanu ekspresiju receptora alfa (PPAR-) aktiviranog proliferatorom peroksisoma. Life Sci.243,117272(2020).

13. Barakat,LAA,Barakat,N,Zakaria, MM & Khirallah,SM Zaštitna uloga nanočestica cinkovog oksida u ozljedi bubrega izazvanojcisplatinu štakora.Life Sci.262,118503 (2020).

14. Sadeghi, H. et al. Antioksidativni i zaštitni učinak Stachys pilifera Benth protiv nefrotoksičnosti izazvanecisplatinkod štakora. Food Biochem.44(5), e13190 (2020).

15. Müller, L., Fröhlich, K. & Böhm, V. Usporedna antioksidacijska aktivnost karotenoida mjerena antioksidativnom snagom redukcije željeza (FRAP), ABTS testom izbjeljivanja (TEAC), DPPH testom i testom uklanjanja peroksilnih radikala. Food Chem.129, 139-148 (2011).