Ekspresija imunoloških gena i funkcionalne mreže u različitim klasama lupus nefritisa Ⅱ
Nov 08, 2023
REZULTATI
Karakterizacija kohorte
Iz naše arhiveFFPE biopsije bubrega, identificirali smo 55 LN biopsija koje sadrže dovoljno tkiva za analizu. Biopsije su bile od pacijentica i sastojale su se od LN biopsija klase III (n=11), klase IV (n=23) i klase V (n=21). Uključene su samo biopsije LN klase III i IV s aktivnim lezijama (tj. A ili A/C, ali ne i C). Koristili smo TBM bolest (n=14) kao kontrolu. Također smo usporedili LN klase V s MN (n=9) s obzirom na jasne histološke sličnosti na svjetlosnoj mikroskopiji, ali različite etiologije. Demografski, klinički podaci i podaci o biopsiji prikazani su u tablici 1. Dob za biopsiju bila je u rasponu od ispod 1 godine do starijih od 11 godina. Aktivne glomerularne lezije, glomerularni polumjesec i nekroza bili su prisutni u biopsijama LN klase III i IV, ali ne i klase V. Glomerularna tromboza identificirana je samo u jednoj biopsiji klase III. Tubupartikularne inkluzije (TRI) identificirane su u većini biopsija klase III (91%), klase IV (78%) i klase V (81%). IFTA je bila niska u svim razredima.Kreatinin u serumui proteini u urinu:kreatininomjer je bio viši u klasi IV u usporedbi s klasom III ili klasom V LN (tablica 1, dodatna online slika 1A i B). Serumski albumin bio je smanjen u svim klasama u odnosu na TBM (tablica 1, dodatna online slika 1B). Komplementi C3 i C4 bili su značajno smanjeni iu klasi III i u klasi IV u usporedbi s klasom V LN (tablica 1, dopunska online slika 1C).
KLIKNITE OVDJE DA DOBIJETE BILJNU FORMULACIJU CISTANCHE ZA BUBREGE
Analiza ekspresije imunoloških gena u LN bubrežnim biopsijama
Prvo smo usporedili ekspresiju gena između svih klasa LN i uzoraka TBM i identificirali 171 (159 povećano i 12 smanjeno) različito eksprimiranih gena (slika 1A, dodatni online podaci S3). Analize puta su pokazale da je signalizacija IFN tipa I bila visoko obogaćena u LN u odnosu na kontrole uz JAK-STAT signalizaciju, kaskadu komplementa, MHC II, vezivanje Integrina, NF-κB i putove apoptoze (slika 1B, dodatni online podaci S4 i S5). Hijerarhijsko grupiranje korištenjem transkripata s log2 fold promjenom (FC) veće od ili jednako 1 (n=49) ili manje od ili jednako −0.5 (n=5) preko cijela kohorta otkrila je tri glavna klastera (slika 1C). S lijeva na desno na slici 1C, skupina 1 sadržavala je samo uzorke LN (n=16), skupina 2 sadržavala je sve osim jednog uzorka TBM (n=13TBM, n=3LN) a skupina 3 je bila dominantna LN (n=36LN nasuprot n=1TBM). Kao što je objavljeno,16 nije bilo jasnog odnosa između molekularnih klastera i histoloških klasa LN (slika 1C).
Usporedba klase V LN i idiopatske MN
Histološka lezija u klasi V LN je difuzna membranskaglomerulopatijasa sličnostima s idiopatskom MN. Kada smo usporedili LN klase V s uzorcima MN, bilo je 26 (23 s većom i 3 nižom ekspresijom) različito eksprimiranih gena (slika 2A, dodatni online podaci S6). Najviši pojam obogaćenja bio je tip I IFN signalizacije (slika 2B, online dodatni podaci S4 i S7). Temeljni skup od 67 gena povezanih s IFN-om tipa I reguliran je prema gore u podskupovima leukocita (neutrofili, CD4 i CD8 pozitivne T stanice, monociti) u SLE.24 Naš panel sadržavao je sonde usmjerene na 17 od ovih gena i 13 od 23 transkripta s višim ekspresije bili su dio ovog temeljnog skupa, što ukazuje da je potpis IFN tipa I ključna molekularna razlika između klase V LN i MN.
Slika 1 DGE u LN u usporedbi s TBM bolešću. (A) Dijagram vulkana koji prikazuje DGE LN (n=55 biopsija) u odnosu na TBM bolest (n=14 biopsija). Benjamini-Hochberg je prilagodio p=0.05 i log2 FC cut-off=0.5. (B) Mreža interakcije STRING za svih 171 značajno različito izraženih gena između LN i TBM (najviša ocjena pouzdanosti=0.9). Crveni čvorovi-IFN tipa I; plavi čvorovi— kaskada komplementa; ružičasti čvorovi-MHC II; žuti čvorovi—JAK-STAT signalizacija; ljubičasti čvorovi-vezivanje integrina; svijetlozeleni čvorovi-NF-κB+TIR domena; tamnozeleni čvorovi-NF-κB i modulacija apoptoze. (C) Toplinska karta svih značajno povećanih različito izraženih transkripata s log2 FC većim od ili jednakim 1 (n=49) i svih značajno smanjenih transkripata s log2 FC manjim od ili jednakim -0,5 (n=5 ) identificirani u LN u odnosu na TBM, u cijeloj kohorti (LN n=55 biopsije, MN n=9 biopsije, TBM n=14 biopsije). DGE, diferencijalna ekspresija gena; FC, preklopna promjena; LN, lupusni nefritis; MN, membranozna nefropatija; NS, beznačajno; TBM, tanka bazalna membrana.
Hijerarhijsko grupiranje pomoću 17 transkripata povezanih s IFN-om tipa I odvojilo je LN od uzoraka MN i TBM (slika 2C). Udio biopsija LN u IFN-pozitivnom klasteru (n=48, 87%) bio je značajno veći nego u IFN-negativnom klasteru (n=7, 13%, p<0.0001, Fisher exact test). Within the IFNpositive cluster, the next hierarchy contained two clusters, with higher or lower IFN expression. The proportion of class V LN samples in the cluster with lower IFN expression (n=14, 74%) was significantly greater than that in the cluster with higher IFN expression (n=5, 26%, p=0.0009, Fisher exact test). TRIs in glomerular endothelial cells is frequent in LN and related to the type I IFN response. TRIs were present in 45 out of 54 LN biopsies (83%, data unavailable for one biopsy) and of the 47 biopsies in the IFN-positive cluster, 89% (n=42) had TRIs (figure 2C). We measured the blood type I IFN signature in 25 (46%) of the 55 patients with LN. A high blood IFN score was present in 13 (62%) of the 21 patients within the renal biopsy IFN-positive cluster and 1 of the 5 (20%) of patients within the renal biopsy IFN-negative cluster. There were no significant differentially expressed genes between MN and TBM samples (online supplemental figure 2, online supplemental data S15).
Analiza ekspresije gena unutar histoloških LN klasa
Zatim smo izvršili DGE (slika 3A–C) i analizu puta (mrežna dodatna slika 3 i mrežni dodatni podaci S4, S16–S18) za svaku klasu LN. U usporedbi s TBM bolešću, u klasi III LN bila su 63 različito eksprimirana gena (60 povećano i 3 smanjeno, slika 3A, dopunski online podaci S8); u klasi IV LN 205 različito izraženih gena (189 povećano i 16 smanjeno, slika 3B, online dodatni podaci S9) i u klasi V LN 95 različito izraženih gena (92 povećano i 3 smanjeno, slika 3C, online dodatni podaci S10). Postojala su 52 značajna različito eksprimirana gena zajednička među klasama (slika 3D, dopunska tablica 2 na mreži), a analiza putova pokazala je obogaćenost puteva signala IFN tipa I, komplementa i MHC II (slika 3E, dopunski podaci na mreži S4 i S11). FC je bio veći u klasi IV za sva 52 gena u usporedbi s klasom V i za 85% gena u usporedbi s klasom III (mrežna dodatna tablica 2).
U usporedbi s TBM bolešću, bilo je 105 gena koji su bili značajno različito izraženi u klasi IV, ali ne ni u klasi III ni u V LN biopsijama (slika 3D). Analiza puta pokazala je obogaćivanje za NF-κB signalizaciju i Toll-IL1-domenu rezistencije, pozitivnu regulaciju metaboličkih procesa reaktivnih oksidativnih vrsta (ROS) i pozitivnu regulaciju putova aktivnosti peptidaze (slika 3F, dodatni online podaci S4 i S12 ). Kada smo iscrtali veličine učinka svih 205 značajno različito izraženih transkripata klase IV s odgovarajućim veličinama učinka za klasu III (slika 3G) i klasu IV (slika 3H) LN. većina promjena bila je usklađena. To je pokazalo da je samo mali broj transkripata u našem skupu podataka bio jedinstveno različito reguliran u biopsijama LN klase IV (tj. gdje su značajne veličine učinka u transkriptima LN klase IV imale male ili nulte veličine učinka bilo u klasi III bilo klasi IV LN).
Kako bismo istražili razlike između proliferativne i membranske LN, usporedili smo klasu IV s klasom V LN. Ovo je pokazalo 179 (167 viših i 12 slabijih ekspresija) različito eksprimiranih gena u klasi IV (slika 4A, dodatni online podaci S13). Analiza puta pokazala je obogaćivanje za tip I IFN signalizaciju, JAK-STAT signalizaciju, kaskadu komplementa, MHC II, vezivanje integrina, NF-κB i puteve apoptoze (slika 4B, dodatni online podaci S4 i S14). Dok je većina ovih putova također identificirana u našoj analizi jedne potklase klase IV i V u usporedbi s TBM bolešću (mrežna dopunska slika 3BC), uočili smo dodatnu značajnu regulaciju i obogaćivanje za ove putove u klasi IV u odnosu na klasu V ( slika 4B).
Slika 4. Diferencijalna ekspresija gena između klase IV i klase V LN. Dijagrami vulkana koji prikazuju diferencijalnu ekspresiju gena (DGE) klase IV (n=23 biopsije) u odnosu na klasu V (n=21 biopsije). Benjamini-Hochberg je prilagodio p=0.05 i log2 FC graničnu vrijednost=0.5. (B) Mreža interakcije STRING za 167 značajno različito eksprimiranih gena s većom ekspresijom u klasi IV u odnosu na klasu V (najviša ocjena pouzdanosti=0.9). Crveni čvorovi-IFN tipa I; plavi čvorovi-kaskada komplementa; ružičasti čvorovi-MHC II; žuti čvorovi—JAK-STAT signalizacija; ljubičasti čvorovi-vezivanje integrina; svijetlozeleni čvorovi-NF-κB+TIR domena; tamnozeleni čvorovi—NF- κB i modulacija apoptoze. FC, preklopna promjena; LN, lupusni nefritis; NS, beznačajno.
U usporedbi s TBM bolešću, bilo je 105 gena koji su bili značajno različito izraženi u klasi IV, ali ne ni u klasi III ni u V LN biopsijama (slika 3D). Analiza puta pokazala je obogaćivanje za NF-κB signalizaciju i Toll-IL1-domenu rezistencije, pozitivnu regulaciju metaboličkih procesa reaktivnih oksidativnih vrsta (ROS) i pozitivnu regulaciju putova aktivnosti peptidaze (slika 3F, dodatni online podaci S4 i S12) . Kada smo iscrtali veličine učinka svih 205 značajno različito izraženih transkripata klase IV s odgovarajućim veličinama učinka za klasu III (slika 3G) i klasu IV (slika 3H) LN. većina promjena bila je usklađena. To je pokazalo da je samo mali broj transkripata u našem skupu podataka bio jedinstveno različito reguliran u biopsijama LN klase IV (tj. gdje su značajne veličine učinka u transkriptima LN klase IV imale male ili nulte veličine učinka bilo u klasi III bilo klasi IV LN).
Kako bismo istražili razlike između proliferativne i membranske LN, usporedili smo klasu IV s klasom V LN. Ovo je pokazalo 179 (167 viših i 12 slabijih ekspresija) različito eksprimiranih gena u klasi IV (slika 4A, dodatni online podaci S13). Analiza puta pokazala je obogaćivanje za tip I IFN signalizaciju, JAK-STAT signalizaciju, kaskadu komplementa, MHC II, vezivanje integrina, NF-κB iputevi apoptoze(slika 4B, dodatni online podaci S4 i S14). Dok je većina ovih putova također identificirana u našoj analizi jedne potklase klase IV i V u usporedbi s TBM bolešću (mrežna dopunska slika 3BC), uočili smo dodatnu značajnu regulaciju i obogaćivanje za ove putove u klasi IV u odnosu na klasu V ( slika 4B).
RASPRAVA
Naša studija i druge16 18 19 pokazale su izvedivost upotrebe tehnologije NanoString za kvantificiranje ekspresije transkripta naFFPE tkivo bubrežne biopsijei, izvanredno, to je bilo moguće korištenjem biopsija koje su bile stare do 11 godina. Ovaj pristup ima potencijalnu kliničku korist budući da je FFPE tkivo integralna komponenta puta dijagnostičke biopsije bubrega. U našoj usporedbi LN s TBM bolešću identificirano je 36 značajnih STRING mrežnih klastera, s prvih 10 izraza koji uključuju NF-κB (najboljih 6 STRING klastera, 8 od ukupno 36) ili IFN alfa/beta signalizaciju (6 od 36 STRING klastera) . Komplement je također bio visoko zastupljen (6 od 36 STRING klastera). U skladu s objavljenim podacima, mogli smo detektirati IFN potpis tipa I u sve tri klase LN.16 Ovaj transkriptomski potpis povezan s IFN-om bio je tako dobro zastupljen u LN da je jasno razlikovao LN klase V i MN, unatoč njihovim zapanjujućim morfološkim sličnostima. Zanimljivo, nije bilo značajno povećanih transkripata kada smo usporedili MN s TBM.
Molekularni profil LN-a prvi je put proučavan uporabom laserom snimljenih glomerula iz smrznutog tkiva pacijenata s proliferativnim LN-om (klasa III i IV).17 Četiri klastera gena identificiraju B stanice, odgovor tipa I IFN-a, mijeloičnu lozu i proizvodnju izvanstanične opisane su matrice. Značajno, postojala je izrazita heterogenost između biopsija (što bi moglo biti i zbog tehničkih i bioloških razloga) i nije bilo jasnog profila između biopsija klase III i IV. U studiji koja je uključivala proliferativnu, mješovitu i klasu V LN i koja je zasebno analizirala glomerularne i tubulointersticijalne odjeljke, obilje RNA transkripata nije koreliralo niti s histološkom klasom niti s indeksima aktivnosti i kroničnosti Nacionalnog instituta za zdravlje.16 Slično, u Studija 28 uparenih biopsija od 14 pacijenata s LN-om, procijenjena pomoću NanoString imunološkog panela analognog našem istraživanju, nije bilo jasnih klastera kada je obilje transkripta RNA analizirano bilo iz glomerularnih ili tubulointersticijskih odjeljaka.18 Glavna snaga naše studije bila je izbor dobro definiranih biopsija klase III, IV i V bez miješanih lezija. Unatoč ovom pristupu, iu skladu s gore navedenim studijama, nismo mogli otkriti jasan transkriptomski potpis za svaki histološki podtip.
Međutim, identificirali smo 52 različito izražena gena u sve tri klase LN. Analiza STRING pokazala je obogaćivanje za IFN signalizaciju, MHC II i klasičnu aktivaciju komplementa posredovanu antitijelima. FC u LN klase IV bio je veći za većinu ovih gena u usporedbi s klasom III ili V. Primjetno je da je intrarenalna ekspresija gena povezanih s IFN-om pod utjecajem pogoršanja bolesti i liječenja, pri čemu su svi MX1, STAT1 i IRF7 pojačano regulirani kod pogoršanja, a smanjena ili dodatno povišena u biopsiji nakon liječenja kod osoba koje nisu odgovorile na terapiju. 19 U ovoj i našoj analizi nije bilo moguće odrediti doprinose IFN odgovora iz rezidentnih glomerularnih endotelnih stanica i iz infiltrirajućih leukocita, na signal iz potonjih je vjerojatnije da će utjecati protuupalna terapija. Identificirali smo 105 značajno različito izraženih gena u klasi IV LN gdje su svi identificirani klasteri obogaćeni STRING bili uključeni u NF-κB i apoptozu. Nagomilani dokazi impliciraju NF-κB u patogenezi LN-a uključujući ozljedu podocita,25 a ekspresija citokina posredovana NF-κB istaknuta je u izostanku odgovora. 19 Varijante nekoliko gena u TLR/NF-κB signalizaciji povezane su s LN-om, uključujući TLR 3/7/9, MYD88, IRAK1, TNFAIP3 i TNIP1, 26 ali ovo je prvi put da je NF-κB pripisan klasi IV LN. VCAM-1 je predložen kao biomarker aktivnosti LN-a,27 s povećanom ekspresijom između početne i fakturne biopsije18 i sposobnošću razlikovanja klase IV od drugih klasa. U skladu s tim, samo smo primijetili značajno povećanje u našem istraživanju u klasi IV LN. Naša analiza klase IV također je istaknula regulaciju metaboličkih procesa ROS-a, za koje je prijavljeno da imaju ulogu u SLE.21 CYBB, gen koji kodira beta lanac citokroma-245, podjedinice kompleksa enzima NADPH oksidaze , i M2 makrofagni marker CD163 povećani su u svim klasama, ali najviše u klasi IV. CD163 je predložen kao urinarni biomarker aktivnosti u LN.18 Prisutnost signalizacije IFN tipa I povezana je s abnormalnostima mitohondrija, što dovodi do insuficijencije mitohondrija i povećane stanične smrti kao regulatornog mehanizma u postojanom odgovoru IFN tipa I.21 Međutim, na životinjskim je modelima pokazano da je izmijenjena metabolička disfunkcija reverzibilna promjena u tkivima zahvaćenim lupusom, a nije potaknuta izlaganjem IFN-u tipa I i da se ispravna modulacija može obnoviti nakon imunosupresije na životinjskim modelima.28 Uočili smo sličnu mrežu interakcija STRING u našem klasa IV naspram klase V i naša analiza klase IV naspram TBM. Zapravo, uspoređujući ta dva, 71,4% (135 od 189) gena identificiranih u odnosu na TBM također je značajno više kada se uspoređuje klasa IV s klasom V, s putovima obogaćenim za tip I IFN signalizaciju, JAK-STAT signalizaciju, kaskadu komplementa, MHC II, vezivanje integrina, NF-κB i apoptoza. Iz ovoga možemo zaključiti da je imunološko obogaćivanje u LN klase IV značajno poboljšano iz naše kontrole bolesti (biopsije TBM) i iz LN klase V.
Eksploratorna analiza identificirala je osteopontin (OPN/SPP1), fibronektin (FN1) i galektin-3 (LGALS3) kao gene od interesa s obzirom na aktivnost lupusne bolesti.16 FN1 je također povezan s pogoršanjem.18 U našoj studiji, LGALS3 nije bila značajno izražena. Međutim, FN1 je bio značajan i u klasi IV i V. OPN je bio značajan samo u klasi IV, opažanje koje nije prikazano u izvornoj studiji. OPN je predložen kao biljeg kandidat za agresivni i proliferativni LN16 i povezan je s hipercelularnošću, staničnom proliferacijom i stvaranjem polumjeseca u mišjem LN.29 Ključni cilj naše studije bio je pružititranskriptomski profili cijelog bubregaza klasu III, IV i V LN s ciljem identificiranja molekularnih putova i upalnih molekula koje bi mogle biti ciljane za terapiju. Iako nismo identificirali nove putove za ciljanje u LN, nedavno odobrenje anifrolumaba, ljudskog monoklonskog protutijela za blokiranje podjedinice 1 IFN receptora tipa I, za liječenje lupusa pruža priliku za razumijevanje kako intrarenalni IFN potpis može utjecati na odgovor. Inhibicija komplementa također može biti potencijalna terapija za LN, a korištenje bubrežnih markera komplementa, kao što je kombinacija imunološkog bojenja komplementa i transkriptomskih profila, može biti metoda odabira pacijenata za studije dokaza koncepta.30
Naša studija ima važna ograničenja. Transkriptomska analiza bila je ograničena na 750 transkripata koje je ispitao naš NanoString panel. Međutim, panel je odabran zbog svoje sposobnosti ispitivanja transkripata imunološkog sustava i transkripata povezanih s upalom koji su očito od velike važnosti za razumijevanje molekularne patogeneze LN. Koristili smo cijele dijelove bubrežnog tkiva umjesto odvajanja glomerularnog i tubulointersticijalnog tkiva, tako da nismo mogli razlikovati ekspresiju iz različitih odjeljaka bubrega. Korištenje cijelog tkiva ima prednost jer je tehnički najizvodljiviji eksperimentalni pristup i najpraktičniji za daljnju kliničku primjenu. Ovo je bila retrospektivna studija pa su pristupi liječenju bili heterogeni. Ograničili smo naše biopsije na dobro definirane lezije klase III, IV i V bez značajnih ožiljaka kako bismo ojačali svoju sposobnost otkrivanja razlika između klasa. Kako bi na signale utjecale mješovite lezije ili lezije s kroničnim oštećenjem (npr. arterioskleroza, IFTA i glomeruloskleroza) potrebno je dodatno proučavati.
Ukratko, pružili smo transkriptomsku analizu čitavog dijela bubrega biopsija LN klase III, IV i V korištenjem panela imunoloških i upalnih genskih sondi. Identificirali smo putove zajedničke za sve tri klase i karakterizirali putove koji su bili značajno modulirani samo u našim biopsijama klase IV. Kako se razvijaju ciljaniji tretmani za LN, možda će biti moguće koristiti transkriptomsku analizu za informiranje o odabiru liječenja.
Zahvale Željeli bismo zahvaliti našim strpljivim suradnicima na njihovoj uključenosti u konzorcij MASTERPLANS (https://sites.manchester.ac.uk/masterplans/). Također bismo željeli zahvaliti Jamesu E. Petersu na njegovoj pomoći u kodiranju, statističkim savjetima i podršci. Zahvaljujemo Sveučilišnom koledžu London Nanostring Facility. Zahvaljujemo podršci Centra za biomedicinska istraživanja Nacionalnog instituta za zdravstvena istraživanja sa sjedištem pri Imperial College Healthcare National Health Service Trust i Imperial College London te Mreže za klinička istraživanja Nacionalnog instituta za zdravstvena istraživanja. INB je viši istraživač emeritus Nacionalnog instituta za zdravstvena istraživanja (NIHR), a financira ga NIHR Manchester Biomedicinski istraživački centar.
Suradnici ACG izveli su eksperimente, analizirali podatke i suautori rukopisa. HRW je pružio pomoć u prikupljanju uzoraka i kliničkom fenotipiziranju. HTC je pružio ekspertizu za bubrežnu patologiju. MB, LL, TDC i INB pružili su pomoć u kliničkom fenotipiziranju i interpretaciji podataka. MCP je nadzirao projekt i koautor rukopisa te je jamac.
Financiranje Ovaj je rad financiralo Vijeće za medicinska istraživanja, potpora MR/ M01665X/1, "Maksimiziranje terapeutskog potencijala za SLE primjenom novih i sustavnih pristupa i inženjeringa (MASTERPLANS)".
Izjava o odricanju od odgovornosti Izražena stajališta pripadaju autorima, a ne nužno stavovima Nacionalne zdravstvene službe, Nacionalnog instituta za zdravstvena istraživanja ili Ministarstva zdravstva.
Suprotstavljeni interesi Nema deklariranih.
Pristanak pacijenta za objavu Nije primjenjivo.
Etičko odobrenje Etičko odobrenje dobiveno je putem Imperial College Tissue Bank: MREC 12/WA/0196, Projekt: R16063. Sudionici su dali informirani pristanak za sudjelovanje u studiji prije sudjelovanja.
Podrijetlo i stručni pregled Nije naručeno; recenzirani izvana.
Izjava o dostupnosti podataka Podaci su dostupni na razuman zahtjev. Svi podaci relevantni za studiju uključeni su u članak ili učitani kao dopunske informacije. Podaci se nalaze u dodatnoj excel datoteci. Datoteke s neobrađenim podacima dostupne su na zahtjev.
REFERENCE
1 Gasparotto M, Gatto M, Binda V, et al. Lupusni nefritis: klinička slika i ishodi u 21. stoljeću. Reumatologija 2020;59:v39–51.
2 Hoover PJ, Costenbader KH. Uvid u epidemiologiju i liječenje lupus nefritisa iz perspektive američkog reumatologa. Kidney Int 2016;90:487–92.
3 Fanouriakis A, Kostopoulou M, Cheema K, et al. Ažuriranje zajedničkih preporuka Europske lige protiv reumatizma i Europske udruge za bubrege – Europske udruge za dijalizu i transplantaciju (EULAR/ ERA–EDTA) za liječenje lupus nefritisa iz 2019. Ann Rheum Dis 2020;79:713–23.
4 Moroni G, Vercelloni PG, Quaglini S, et al. Promjena obrazaca u kliničko-histološkoj prezentaciji i bubrežnom ishodu tijekom posljednjih pet desetljeća u skupini od 499 bolesnika s lupus nefritisom. Ann Rheum Dis 2018;77:1318–2
5. 5 Weening JJ, D'Agati VD, Schwartz MM, et al. Ponovno razmatranje klasifikacije glomerulonefritisa kod sistemskog eritemskog lupusa. J Am Soc Nephrol 2004;15:241-50.
6 Bajema IM, Wilhelmus S, Alpers CE, et al. Revizija klasifikacije Međunarodnog društva za nefrologiju/Društva za bubrežnu patologiju za lupusni nefritis: pojašnjenje definicija i modificirani indeksi aktivnosti Nacionalnog instituta za zdravlje i kroničnosti. Kidney Int 2018;93:789–96.
7 Haring CM, Rietveld A, van den Brand JAJG, et al. Segmentalne i globalne podklase lupusnog nefritisa klase IV imaju slične bubrežne ishode. J Am Soc Nephrol 2012;23:149–54.
8 Austin HA, Muenz LR, Joyce KM, et al. Difuzni proliferativni lupusni nefritis: identifikacija specifičnih patoloških značajki koje utječu na bubrežni ishod. Kidney Int 1984;25:689–95.
9 Dall'Era M, Cisternas MG, Smilek DE, et al. Prediktori dugotrajnog bubrežnog ishoda u ispitivanjima lupus nefritisa: lekcije naučene iz Euro-Lupus nefritis kohorte. Arthritis Rheumatol 2015;67:1305-13.
10 Moroni G, Gatto M, Tamborini F, et al. Nedostatak EULAR/ERA-EDTA odgovora nakon 1 godine predviđa loše dugoročne bubrežne ishode u bolesnika s lupus nefritisom. Ann Rheum Dis 2020; 79: 1077–83.
Usluga podrške Wecistanche-najvećeg izvoznika cistanche u Kini:
E-pošta:wallence.suen@wecistanche.com
Whatsapp/telefon:+86 15292862950
Kupite za više pojedinosti o specifikacijama:
https://www.xjcistanche.com/cistanche-shop
