Istraživanje učinaka Cistanche Phenylethanoid Glycosides na nealkoholnu masnu bolest jetre na temelju mrežne farmakologije i staničnih eksperimenata

Sažetak

Cilj: Istražiti poboljšanje učinaka Cistanche feniletanoidnih glikozida na nealkoholnu masnu bolest jetre (NAFLD).

Metode: Mrežna farmakologija korištena je za predviđanje potencijalnih mehanizama Cistanche feniletanoidnih glikozida protiv NAFLD-a. In vitro NAFLD model uspostavljen je induciranjem HepG2 stanica slobodnim masnim kiselinama (FFA). Viabilnost stanica procijenjena je korištenjem CCK-8 testa; Bojanje Oil Red O korišteno je za promatranje nakupljanja lipida; razine triglicerida (TG) i ukupnog kolesterola (TC) mjerene su korištenjem pribora za ispitivanje; JC-1 bojanje korišteno je za procjenu potencijala mitohondrijske membrane; unutarstanične razine ROS procijenjene su DCFH-DA fluorescentnom sondom; apoptoza je detektirana pomoću Hoechst 33342 bojenja; a ekspresija TNF-, PI3K, Akt i Bax proteina mjerena je Western blotom.

Rezultati: Identificirano je deset aktivnih spojeva i 77 potencijalnih ciljeva povezanih s učincima protiv NAFLD-a, s ključnim ciljevima uključujući TNF, NFKB1 i TLR4. Spojevi su pokazali dobar afinitet vezanja s ciljevima, posebno TNF-om. U usporedbi s modelnom skupinom, feniletanoidni glikozidi Cistanche značajno su smanjili akumulaciju lipida izazvanu FFA u HepG2 stanicama (P <0,01), smanjili unutarstanične razine TG, TC i ROS (P <0,01), obnovili potencijal mitohondrijske membrane, ublažili oštećenje mitohondrija, smanjili apoptozu, smanjili ekspresiju proteina Bax (P <0,05) i smanjena ekspresija proteina TNF-, PI3K i Akt (P < 0,05, P < 0,01).

Zaključak: Cistanche feniletanoidni glikozidi imaju anti-NAFLD učinke poboljšavajući akumulaciju lipida izazvanu FFA, mitohondrijskom disfunkcijom, oksidativnim stresom i apoptozom u HepG2 stanicama. Ovi učinci mogu biti povezani sa signalnim putem TNF/PI3K/Akt.

Ključne riječi: Cistanche feniletanoidni glikozidi; nealkoholna masna bolest jetre (NAFLD); metabolizam lipida; oksidativni stres;apoptoza; TNF/PI3K/Akt signalni put; mrežna farmakologija; stanični pokus

Cistanche Benefits in depression

Cistanche feniletanoidni glikozidi

catalog cistanche

Ekstrakt Cistanche visokog sadržaja na prodaju

Kontaktirajte nas kupite sada

1. Uvod

Nealkoholna masna bolest jetre (NAFLD) je kronična bolest jetre koju karakterizira steatoza jetre bez pretjeranog konzumiranja alkohola. Prevalencija u Kini dosegla je 32,9%. Njegova patogeneza uključuje više mehanizama, uključujući inzulinsku rezistenciju, oksidativni stres i neravnotežu crijevne mikrobiote. Klinički simptomi uključuju umor, nelagodu u području jetre i bolove u trbuhu, au težim slučajevima može napredovati do nealkoholnog steatohepatitisa (NASH).

Trenutačno su intervencije u načinu života primarni tretman za NAFLD. Iako je FDA odobrila prvi lijek za NAFLD, Resmetirom (Rezdiffra), 2024., on ima potencijalne štetne učinke kao što su ozljeda jetre i kardiovaskularni rizici. Stoga postoji hitna potreba za pronalaženjem sigurnih i učinkovitih tretmana za NAFLD.

Echinacoside in cistanche 7

Tradicionalna kineska medicina (TCM), sa svojim karakteristikama višestrukih komponenti, višestrukih ciljeva i višestrukih putova, dobro je usklađena sa složenom patogenezom NAFLD-a i nudi jedinstvene prednosti u njegovom liječenju.

Cistanche deserticolaiCistanche tubulosasu ljekovite biljke iz obitelji Orobanchaceae, navedene uShennong Bencao Jing. Njihove mesnate stabljike, bogate ljuskama, tradicionalno se koriste za toniziranje jetre i bubrega, obnavljanje esencije i krvi te vlaženje crijeva. Primarne aktivne komponente - feniletanoidni glikozidi - imaju protuupalna svojstva, snižavaju lipide i hepatoprotektivna svojstva. Međutim, još uvijek nedostaju sustavne studije o njihovim učincima protiv NAFLD-a.

Ova studija ima za cilj analizirati farmakološku osnovu i potencijalne mehanizme Cistanche feniletanoidnih glikozida u liječenju NAFLD-a korištenjem mrežne farmakologije, te dalje istražiti njihove mehanizme kroz stanične pokuse, pružajući teoretsku osnovu za razvoj novih lijekova.

Echinacoside in cistanche 11

2. Materijali

2.1 Alati mrežne farmakologije

TCMSP: https://tcmspw.com/tcmsp.php

CNKI: https://www.cnki.net/

PubMed: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/

PubChem: https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/

SwissTargetPrediction: http://www.swisstargetprediction.ch/

NetInfer: http://lmmd.ecust.edu.cn/netinfer/

SuperPred: https://prediction.charite.de/subpages/target_prediction.php

GeneCards: https://www.genecards.org/

DisGeNET: http://www.disgenet.org/

STRING: https://string-db.org/

Bioinformatika: https://www.bioinformatics.com.cn/

UniProt: https://www.uniprot.org/

RCSB PDB: https://www.rcsb.org/

Cytoscape 3.9.1: https://cytoscape.org/

R 4.3.3: https://www.r-project.org/

AutoDock Vina 1.5.7: https://vina.scripps.edu/

Acteoside in Cistanche 2

2.2 Stanična linija

HepG2 stanice raka ljudske jetre, kupljene od Wuhan Procell Life Science & Technology Co., Ltd.

2.3 Reagensi i lijekovi

Cistanche phenylethanoid glicosides (Broj serije. 201610, čistoća veća ili jednaka 80%, sadrži 44,5% ehinakozida i 16,1% verbaskozida), kupljen od Hotan Dechen Pharmaceutical Biotechnology Co., Ltd. Osnovna otopina pripremljena na 6,40 mg/mL, filtrirana i pohranjena na –20 stupnjeva.

Dodatni reagensi uključuju:

Fetalni goveđi serum (FBS), medij DMEM, penicilin-streptomicin, kit za bojenje Oil Red O, BCA kit, kit za otkrivanje ROS-a, Hoechst 33342, BSA-V, natrijev oleat, natrijev palmitat, setovi za testiranje TG i TC, CCK-8 test, JC-1 komplet za potencijal mitohondrijske membrane, antitijela za TNF-, PI3K p85, Akt, Bax, -aktin i sekundarna HRP-konjugirana antitijela.