Eksperimentalna studija usmjerene diferencijacije koštanih mezenhimalnih matičnih stanica (BMSC) do osteoblasta vođena serumom koji sadrži Cistanche Deserticola

ZENG Jian chun, FAN Yue guang＊, LIU Jian ren, ZENG Yi rong, YI Chun zhi, YAN Liang． ＊

Prva pridružena bolnica Sveučilišta tradicionalne kineske medicine Guangzhou, Guangzhou 510405, Guangdong, Kina

Kontakt:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Cistanchemože spriječitiosteoporozaipromoviratikostćelija rast

SAŽETAK

Cilj: Proučiti usmjerenu diferencijaciju BMSC-a vođenu DesertlivingomCistanche(Herba Cistanches) koja jača bubrege. Metode: Primarni BMSC-i dobiveni su kulturom cijele koštane srži i subkulturirani do četvrte generacije digestijom tripsinom, a zatim inokulirani u dvije ploče sa šest jažica pri 5×106 stanica po mililitru, sve su ploče podijeljene na tri skupine kao prazna skupina, skupina s deksametazonom (DXM) i skupina s Herba Cistanches, tri jažice u svakoj skupini, medij je promijenjen 2. dana. Prazna skupina je promijenjena s L－DMEM koji sadrži 10% FBS. Grupa s DXM-om zamijenjena je medijem koji je sadržavao 10 mmol ／ L natrijevog glicerofosfata, 0．1 μmol ／ L DXM-a i 50 mg ／ L vitamina C． HerbaCistanchesskupina je zamijenjena s medijem koji je sadržavao 10% krvnog seruma koji je sadržavao Herba Cistanches i L－DMEM． Jedna od ploča sa šest jažica obojena je alkalnom fosfatazom （AKP） desetog dana, a druga je obojena alizarinom Bordeaux dvadesetog dana. Rezultati: Desetog dana DXM grupa i Herba Cistanches grupa bile su pozitivne na ALKP obojene; od 12. dana na površini jažica mogli su se vidjeti bijeli kalcijevi čvorići; koji je alizarin bio pozitivan do dvadesetog dana.

Zaključak: Medij koji sadrži HerbaCistanchesmože usmjeriti BMSC da se diferenciraju u osteoblast, što obećava povoljne izglede za liječenje osteoporoze i razdvajanja prijeloma kosti.

KLJUČNE RIJEČICistanchedeserticola; Koštana srž; Mezenhimske matične stanice; Osteoblasti; Diferencijacija stanica

Mezenhimalne matične stanice (MSC) su vrsta pluripotentnih odraslih matičnih stanica, koje se uglavnom nalaze u koštanoj srži, ali također iu izvankoštanim tkivima koja potječu iz mezenhimalnog podrijetla tijekom embrionalnog razdoblja, kao što su kožni fibroblasti, masne matične stanice, satelitske stanice skeletnih mišića i krvne žile Endotelne stanice i tako dalje. MSC koštane srži (BM SC) komponente su strome koštane srži. Nakon izolacije i uzgoja in vitro, pod određenim induciranim uvjetima, imaju sposobnost diferencijacije u osteoblaste, hondrocite, živčane stanice, adipocite, kardiomiocite, itd. Glavni izvori sjemenih stanica u inženjeringu koštanog tkiva su osteoblasti i BMSC. Iako osteoblasti imaju dobru osteogenu aktivnost, oni imaju ograničene izvore, teško ih je odvojiti i dobiti u velikim količinama, te imaju nedovoljan potencijal za ekspanziju velikih razmjera in vitro, što je teško zadovoljiti potrebe kliničke primjene u inženjeringu koštanog tkiva. BMSC ne samo da imaju dobar potencijal diferencijacije osteoblasta, već i visok potencijal rasta. Aktivnost kostiju, snažan potencijal proliferacije i pogodan izvor mogu zadovoljiti inženjering autolognog tkiva i postati fokus istraživanja.

Kineska medicina vjeruje da bubreg kontrolira kosti i proizvodi srž. Suvremene farmakološke studije pokazale su da lijekovi za tonificiranje bubrega imaju različite stupnjeve uzbuđenja na hipofizno-nadbubrežno-gonadni sustav, te su usko povezani s metabolizmom kostiju. Estrogen ima učinak pospješivanja osteogeneze.

Kineska medicina vjeruje da bubreg kontrolira kosti i proizvodi srž. Suvremene farmakološke studije pokazale su da lijekovi za tonificiranje bubrega imaju različite stupnjeve uzbuđenja na hipofizno-nadbubrežno-gonadni sustav, te su usko povezani s metabolizmom kostiju. Estrogen može poboljšati stvaranje kostiju, a androgeni mogu pospješiti sintezu proteina, pospješiti povećanje koštanog matriksa i taloženje kalcija i fosfora. posljedica.Cistanches(HerbaCistanches) sadrže fenetilni alkohol, ukupne glikozide, ergot glikozide i betain, svi imaju učinke slične androgenima. Ovaj eksperiment ima za cilj proučavanje učinka tradicionalne kineske medicine koja tonizira bubregeCistanche-koji sadrži serum o diferencijaciji BMSC u osteoblaste.

Rasprava

Cistanchemedicinski serum inducira BMSC. Cistanche djeluje njegujući sredinu, jača jetru, njeguje bubrege, jača yang, vlaži crijeva i laksativno. Suvremene farmakološke studije pokazale su da lijekovi za tonificiranje bubrega imaju različite stupnjeve uzbuđenja na hipofizno-nadbubrežno-gonadni sustav, te su usko povezani s metabolizmom kostiju. Estrogen može poboljšati stvaranje kostiju, a androgeni mogu pospješiti sintezu proteina, pospješiti povećanje koštanog matriksa i taloženje kalcija i fosfora. Uloga [1]. Ukupni feniletanoidni glikozidi, ergosterozid i betain u Cistancheu imaju učinke slične androgenima. Ovaj eksperiment je otkrio da ljekoviti serum odCistanchemože inducirati BMSC da se diferenciraju u osteoblaste. Iako je pojedinačna kineska medicina ili složena kineska medicina korištena za induciranje BMSC-a da se diferenciraju u osteoblaste, specifični molekularni mehanizam još nije prijavljen. Istraživanje proteomike može analizirati razlike u srodnoj proteomici u ovom procesu i uspostaviti funkcionalnu proteomiku, s ciljem novog tumačenja teorije o bubrezima koji upravljaju kostima.

Gustoća stanica igra važnu ulogu u procesu diferencijacije BMSC-a u osteoblaste. Formiranje koštanih nodula ne zahtijeva samo osteoindukcijske agense, već također ovisi o gustoći inokuliranih stanica. Gustoća stanica mora doseći određenu gustoću i stanice se mogu spojiti. Diferencijacija osteoblasta. U ovom eksperimentu, kada stanice 4. generacije proliferiraju do više od 90 posto konfluencije, induktor se dodaje za kulturu. Kada je gustoća stanica preniska, stanice će se sporo razmnožavati i nema tendencije agregacije i rasta. U istoj jažici kulture s nejednakom gustoćom stanica, područje gustoće stanica ima nejasne granice stanica i zamagljenu strukturu, a stanice se okupljaju u nakupine. Bojenje AKP i bojanje alizarin crveno su pozitivne, ali nema gustoće stanica u području s nižom gustoćom stanica. Stanice su se agregirale u nakupine, a bojenje AKP-om i bojanje alizarin crvenim bili su negativni. Stoga upotreba mikronosača u inženjeringu koštanog tkiva u kombinaciji s učinkovitijim metodama kulture in vitro, kao što je trodimenzionalna kultura (RCCS), za dobivanje više stanica ima značajan utjecaj na uspjeh transplantacije stanica.

Klinički značajCistancheljekoviti serum za indukciju BMSC Inženjering koštanog tkiva ima široke izglede za kliničku primjenu i postao je žarište istraživanja u modernoj ortopediji. BMSC su trenutno najidealnije sjemenske stanice za inženjering koštanog tkiva. Središnja zadaća istraživanja njihovog djelovanja je kako ih diferencirati u osteoblaste pod najjednostavnijim mogućim uvjetima, a potom transformirati u zrele koštane stanice.

Trenutno se najčešće korišteni induktori za usmjerenu diferencijaciju BMSC-a sastoje od deksametazona, vitamina C i natrijevog glicerofosfata. In vitro kultura, deksametazon ima inhibitorni učinak na proliferaciju stanica [2], kao što se vidi u ovom eksperimentu, klinički, deksametazon ima nuspojave kao što su infekcija, osteonekroza i osteoporoza, što će ograničiti transplantaciju BMSC-a. Nakon primjene kao induktor u organizmu. Cistanche ima djelovanje na jačanje bubrega te jačanje kostiju i mišića. Ovaj eksperiment je otkrio da Cistanche ima učinak promicanja proliferacije BMSC-a i induciranja diferencijacije BMSC-a u osteogene. U dugotrajnoj kliničkoj primjeni nije primijećena nuspojava Cistanchea, a njegova uporaba kao induktora in vivo ima široke izglede za kliničku primjenu.

Ukratko, većina trenutačnih istraživanja BMSC-a kao sjemenskih stanica za inženjering koštanog tkiva još uvijek je u eksperimentalnoj fazi. Kako dobiti dovoljno BMSC-a u relativno kratkom vremenskom razdoblju i koristiti jednostavne metode za njihovo poticanje da se diferenciraju u osteogene, fokus je trenutnog istraživanja. Iako mehanizam Cistanche cistanche, koji ima funkciju oživljavanja bubrega i jačanja kostiju i mišića, u induciranju osteogene diferencijacije BMSC-a ostaje za daljnje proučavanje, njegova uporaba kao induktora diferencijacije BMSC-a za liječenje odgođenog srastanja, nezarastanja , a osteonekroza prijeloma s transplantacijom MSC ima svijetlu budućnost.

Cistanchemože spriječitiosteoporozai promoviratikoštana stanicarast