Učinci različitih metoda obrade na intrinzičnu kvalitetu i karakteristike Cistanche
Sep 22, 2022
Cilj: Optimizirati metode prerade Cistanche Cistanche i proučiti učinke različitih metoda prerade na intrinzičnu kvalitetu i svojstva Cistanche Cistanche.
Metode: Različiti tretmani pred sušenjem (nerezano i nepareno, nerezano i kuhano na pari 20 minuta, svježe narezano, kuhano na pari 5 minuta nakon svježih kriški) i metode sušenja (sušenje na 80, 70, 60, 50 stupnjeva, prirodno Sadržajehinakozid, verbaskozid, cistanozid A, iznadbazen, 2'-acetilverbazozid, tuberozid Aipolisaharidu Cistanche su određeni uzorci sušeni na suncu, sušeni u hladu i liofilizirani, te je korištena sveobuhvatna ocjena. Način obradeCistancheoptimizirana je metodom, okus uzoraka određen je tehnologijom elektroničkog jezika, tekstura uzoraka neizravno je ocijenjena brzinom rehidracije i indeksom tvrdoće te je proučavana korelacija između njih i sadržaja glavnih kemijskih komponenti.
REZULTATI: Sveobuhvatna metoda bodovanja korištena je za odabir najbolje metode obrade svježe Cistanche, kuhanje na pari 20 minuta i zatim sušenje na 60 stupnjeva. Studija korelacije pokazala je da su okus, tekstura i druga svojstva u različitim stupnjevima povezani sa sadržajem nekih komponenti. .
Zaključak: Kako bi se učinkovito osigurala kvalitetaCistanche, potrebno je odabrati odgovarajuće metode obrade za preradu u podrijetlu, a informacije o karakteru kao što su okus i tekstura mogu u određenoj mjeri odražavati sadržaj aktivnog sastojka u medicinskom materijalu, što je pogodno za brzu identifikaciju kvalitete medicinskog materijala.
Ključne riječiCistanche; obrada podrijetla; feniletanol glikozidi（Phg）; polisaharidi; elektronički jezik; likovi
BesplatnoUzorak praha ekstrakta Cistanche
Cistancheje suha ljuskava stabljika odCistanche DeserticolaYC Ma iliCistanche Tubulosa(Schenk) Wight, koji ima funkciju osnaživanja yanga bubrega,hranjiva esencija i krv, vlaženje crijeva i laksativ [1].
Obrada odCistancheprakticira se od davnina. U "Zhenglei Materia Medica" postoji zapis o "branju 5. svibnja i sušenju u hladu". Sadašnji načini prerade su sušenje, soljenje i podrumarstvo. Zbog velikog volumenaCistanche, visok sadržaj šećera i poteškoće u sušenju, gornja metoda nije samo dugotrajna, mukotrpna i na nju lako utječu prirodni uvjeti, već se i s protokom vremena i sekundarnim vlaženjem aktivni sastojci lako gube, što utječe na kvalitetu ljekovite tvari [2].
Kako bi se osigurala visoka kvaliteta i ujednačenost ljekovitih materijalaCistanche, potrebno je optimizirati metode obrade njegovog podrijetla, kako bi ga standardizirali i standardizirali. Na temelju iskustva uzgajivača medicinskih proizvoda u području proizvodnje i izvješća o istraživanju srodnih znanstvenika o metodama obradeCistancheu proizvodnom području posljednjih godina [3-6], ovaj eksperiment uzeo je mesnatu stabljiku svježe Cistanche kao predmet istraživanja kako bi istražio tretman pred sušenjem i metode sušenja Cistanche, koristeći više pokazatelja. Za procjenu kvaliteteCistanchei optimizirati najbolju metodu obrade u proizvodnom području, ima za cilj osigurati temelj za standardizaciju obrade u proizvodnom područjuCistanche, te osigurati novu referentnu metodu za sveobuhvatnu procjenu i cjelokupnu kontrolu kvalitete ljekovitog materijalaCistanche.
1 Instrumenti i materijali
1.1 Instrumenti
Agilent 1260 tekućinski kromatograf visoke učinkovitosti (Agilent Company, SAD); UV6100S UV spektrofotometar (Shanghai Meipuda Instrument Co., Ltd.); elektronički jezik ASTREE II (Francuska tvrtka Alpha MOS); FA2004 analitička vaga (Shanghai Sunny Hengping) Scientific Instrument Co., Ltd.); DV215CD Analitička vaga (Ohaus Instrument Co., Ltd.); GY-4 digitalni mjerač tvrdoće (Yueqing Aidelberg Instrument Co., Ltd.); SB-3200DTN ultrazvučni čistač (Ningbo Xinzhi Biotechnology Co., Ltd.).
1.2 Materijali
Echinacea (Lot: Y29M10H84490), Verbasin (Lot: Y21A9H59554), Cistanoside A (Lot: P14N9F74960), Isorrascoside (Lot: Y12D8H50507), 2′-Acetyl Verbasin (Lot: P27N6F6623), Tube Anthoside A (serijski broj: P622N6F6) tvari su kupljene od Shanghai Yuanye Biotechnology Co., Ltd., maseni udio veći ili jednak 98 posto; D-bezvodna referentna tvar glukoze (broj serije: 110833-201707, Kineski nacionalni institut za kontrolu hrane i lijekova); acetonitril je kromatografske čistoće; ostali reagensi su analitičke kvalitete. SvježeCistancheza eksperiment je prikupljeno izUzgoj cistančebaza Hongkuisha Industrial Development Co., Ltd. iz Inner Mongolia AlxaCistancheSkupina u listopadu 2019. Sukulentne stabljike s ljuskastim listovima. Ubrano svježeCistanchebio ravnomjerno izmiješan i nasumično podijeljen u skupine. Svaka skupina uzoraka postavljena je tako da ima 3 ponavljanja. Metode obrade uzoraka prikazane su u tablici 1.
2. Metode i rezultati
2.1 Određivanje feniletanol glikozida
2.1.1 Kromatografski uvjeti: Korištena je kolona Agilent Eclipse XDB-C18 (250 mm×4,6 mm, 5 μm), mobilna faza bila je 0.1 postotna otopina mravlje kiseline (A)-acetonitril (B), gradijent eluacije (0 ~ 10 min, 9 posto ~ 15 posto B; 10 ~ 40 minuta, 15 posto ~ 26 posto B; 40 ~ 45 minuta, 26 posto ~ 9 posto B;
Brzina protoka bila je 1.0 mL/min; valna duljina detekcije bila je 330 nm; temperatura stupca bila je 30 stupnjeva; volumen injekcije je bio 10 μL, a kromatogram je prikazan na slici 1.
2.1.2 Priprema otopine referentne tvari: Precizno odvažite odgovarajuću količinu ehinakozida, verbaskozida,cistanozid A, izoverbazin, 2′-acetilverbazin i tuberozid A, i stavite ga u 5 mL u smeđu odmjernu tikvicu, otopite s 50 posto metanola i razrijedite do volumena kako biste pripremili referentnu otopinu s koncentracijama {{6} },809, {{10}},932, 0,185, 0,272, 0,582, odnosno 0,068 mg/mL.
2.1.3 Priprema otopine za ispitivanje: Uzmite 0.5 g odCistanche Tubulosauzorak praha (propušten kroz sito br. 4), točno ga izvažite, stavite u smeđu odmjernu tikvicu, točno dodajte 25 mL 50 postotnog metanola, čvrsto zatvorite i izvažite. Nakon uranjanja od 30 minuta, ultrazvučne obrade (150 W, 40 kHz) tijekom 40 minuta, pustite da se ohladi i zatim dopunite težinu, dobro protresite, ostavite da odstoji, uzmite supernatant i filtrirajte ga mikroporoznom membranom od 0,45 μm.
2.2 Određivanje polisaharida
2.2.1 Priprema otopine referentne tvari: uzmite 10,03 mg referentne tvari D-anhidroglukoze, točno izvažite, otopite u vodi i razrijedite do 100 mL kako biste dobili otopinu referentne tvari koncentracije od 100,3 ug/mL.
2.2.2 Priprema ispitne otopine: uzmite 0.5 g praha uzorka Cistanche Tubulosa (propuštenog kroz sito br. 4), točno izvažite, stavite u začepljenu konusnu tikvicu, dodajte 25 mL 80 postotka etanola i sonicirati na 80 stupnjeva. (150 W, 40 kHz) 30 minuta, filtrira dok je vruće i ponovljena ekstrakcija jednom. Nakon što je ostatak na filtru isparen do suhoće, dodano je 25 mL vode i sonikirano 30 minuta. , Precizno izvucite 1 mL otopine i razrijedite je na 10 mL.
2.2.3 Uvjeti detekcije: uzmite 2 mL ispitne otopineCistanche, dodajte 1 mL 6 postotnog fenolnog reagensa, dobro protresite, brzo dodajte 5 mL koncentrirane sumporne kiseline, protresite 5 minuta, zagrijavajte u kipućoj vodenoj kupelji 15 minuta, ohladite i stavite na 482 stupnja. Apsorpcija je izmjerena u nm. Koristite vodu umjesto ispitne otopine kao slijepu probu.
2.3 Ispitivanje linearnog odnosa Razrijedite referentnu otopinu prema određenom omjeru kako biste pripremili miješanu referentnu otopinu niza koncentracija i mjerite prema gornjoj metodi. Uzmite koncentraciju referentne otopine kao apscisu, a površinu vrha ili apsorbanciju kao ordinatu. Linearna regresija, rezultati su prikazani u tablici 2.
2.4 Metodološka istraživanja
2.4.1 Ispitivanje preciznosti:
Točno nacrtajte svaku referentnu otopinu i mjerite je neprekidno 6 puta u skladu s metodama pod "2.1.1" i "2.2.3" i izračunajte kako biste dobili ehinakozid, verbaskozid,cistanozid A, isaveraside, 2′ RSDs područja vrha -acetil verbazozida i tuberozida A i apsorbancije glukoze bili su 0.76 posto, 0.53 posto, 0.81 posto, 0.25 posto , {{10}}.44 posto , 0.62 posto , 0. . 49 posto, što pokazuje da je preciznost instrumenta dobra.
2.4.2 Ispitivanje ponovljivosti:
Uzmite 6 kopija iste serijeCistancheza ispitivanje praha, točno izvažite, pripremite ispitnu otopinu prema metodama pod "2.1.3" "2.2.2", i pritisnite "2.1.1" "2.2". 2,3", izračunati RSD-ovi ehinakozida, verbaskozida, cistanozida A, izoverbasina, 2'-acetilverbazozida, tuberozida A i polisaharida bili su 0.82 posto, respektivno. , 1.47 posto, 0.88 posto , 1,53 posto , 0.55 posto , 0.44 posto , 1,13 posto , što ukazuje da metoda ima dobru ponovljivost.
2.4.3 Test stabilnosti:
Točno nacrtajte rješenje testaCistanchepod točkom "2.1.3", i ubrizgajte uzorke na 0, 2, 4, 8, 12 i 24 h prema kromatografskim uvjetima pod točkom "2.1.1", te izračunajte češere. RSDs područja vrha krizanteminog glikozida, verbaskozida, cistanozida A, izoveraskozida, 2'-acetilverbazozida i tuberozida A bili su 0. 47 posto , 1. 12 posto , 0. 42 posto, {{20}}. 65, odnosno. postotak, 0.57 posto, 0,47 posto, što pokazuje da testna otopina ima dobru stabilnost unutar 24 sata; točno apsorbirati ispitnu otopinuCistanchepod "2.2.2", pritisnite "2.2.3" Uvjeti detekcije pod točkom izmjereni su na 0, 15, 30, 60, 120 i 240 min, redom, a RSD apsorbancije polisaharida izračunato je na 1,24 posto, što pokazuje da je ispitivana otopina bila stabilna unutar 240 min.
2.4.4 Ispitivanje iskorištenja uzorka:
Uzmite 6 dijelovaCistancheza ispitivanje praha s poznatim sadržajem komponente, svaki dio je 0,25 g, točno izvagano, dodajte
Dodajte referentnu otopinu sa sadržajem svake komponente u uzorku, pripremite ispitnu otopinu prema metodama pod "2.1.3" "2.2.2" i prema "2.1.1" "2.2. Mjereno metodom pod stavka 3", i izračunato za dobivanje Echinacee
24 posto , 1{{20}}2. 69 posto , 101. 13 posto , 101. 13 posto , 101. 13 posto , 101. 13 posto , 101. 102. 38 posto , 101. 27 posto , 99. 94 posto , 99. 23 posto , RSD je bio 0. 98 posto , 2. 18 posto , 0. 86 posto , 1. 26 posto , 1. 13 posto , 0. 94 posto , 2. 34 posto , što ukazuje da su dvije metode točne i pouzdane.
2.5 Učinci različitih metoda obrade na sadržaj aktivnih komponenti u Cistanche Zbroj sadržaja ehinakozida i verbaskozida uCistancheuzoraka bio je veći od 0,30 posto, što je bilo u skladu s izdanjem Kineske farmakopeje iz 2020. [1].
Istraživanjem je utvrđeno da je ukupna količina indeksnih komponenti u cijelom osušenom ljekovitom materijalu veća nego u svježim rezovima, a ukupna količina indeksnih komponenti u parenom uzorku RZ3 prije sušenja bila je najveća. posto, što je više od 14 puta više od razine navedene u Farmakopeji. Vidljivo je da je sadržaj djelatnih tvari nakon parenja i obrade ljekovitog materijala u podrijetlu veći. Usporedbom utjecaja sušenja na suncu, sušenja u hladu, sušenja pjeskarenjem i sušenja zamrzavanjem na sadržaj djelatnih tvari u nerezanoj i kuhanoj na pari Cistanche utvrđeno je da je udio ehinakozida najveći u uzorku RZ2; Sadržaj '-acetilverbasina i tuberozida A bio je najveći, sadržaj odCistancheA u uzorku RZ6 bio je najveći, a udio polisaharida u uzorku RZ5 bio je najveći, što ukazuje da su različiti načini sušenja različito utjecali na sadržaj aktivnih sastojaka u Cistanche.Cistanche. Za sveobuhvatnu ocjenu njegove kvalitete potrebno je koristiti više pokazatelja.
Metodom AHP određen je težinski koeficijent indeksa ocjene kvaliteteCistanche, te su izračunati težinski koeficijenti sedam indikatora ehinakozida, verbaskozida, cistanozida A, izoverbazinskog glikozida, 2′-acetilverbazičnog glikozida, piplozida A i polisaharida. 0.2668, 0.2668, 0.1626, 0.{{10}}958, 0.0958, 0,0561, 0,0561.
Prema važnosti mjerenih komponenti uCistanche, the 7 indicators were divided into 4 levels, and the priority order of each indicator was determined: echinacoside=verbasicose glycosides>cistanoside A>isoverbasin glycosides=2′-acetyl group Verbasin>tuberozin A{{0}}polisaharid, čime se konstruira prioritetni trenutak prosudbe za usporedbu u paru. Slučajni omjer konzistencije CR je indeks za mjerenje je li dobiveni težinski koeficijent razuman. U ovom eksperimentu, CR= 0. 0066 < 0,10,="" što="" pokazuje="" da="" je="" matrica="" prioriteta="" prosudbe="" za="" parnu="" usporedbu="" pokazatelja="" u="" skladu="" s="" testom="">
Koeficijent je razuman i učinkovit i može se koristiti za sveobuhvatno bodovanje metoda prerade u optimalnom proizvodnom područjuCistanche [7].
Kako bi podaci bili ujednačeni, potrebno je normalizirati indikatore evaluacije, formula je yi=xi-xmin*xmax-xmin, gdje je yi normalizirana vrijednost indikatora, xi stvarna vrijednost indikator, a xmax i xmin su indikatori. Maksimalne i minimalne vrijednosti grupe, te ponderirani sveobuhvatni rezultat izračunava se prema formuli K=y1×l1 plus y2×l2 plus …y6×l6 plus y7×l7, gdje je K vrijednost sveobuhvatnog rezultata , y1, y2…y6, y7 rezultat je normalizacije sadržaja ehinakozida, verbaskozida, cistanozida A, izoveraskozida, 2′-acetilverbazičnog glikozida, tuberozida A i polisaharida. Utezi. Sveobuhvatni rezultati bodovanja pokazali su da je ukupna kvaliteta najboljeg uzorka RZ3, odnosno cjelokupnog svježegCistanchekuhana je na pari 20 minuta, a zatim osušena na 60 stupnjeva kao najbolja metoda obrade u podrijetlu. Rezultati su prikazani u tablici 3.
