Učinci dijabetesa melitusa na seksualnu funkciju, histomorfologiju i ekspresije aktina -glatki mišićni mišić u kavernoznom tijelu penisa kod štakora
Mar 05, 2025
Sažetak:
Cilj:PromatratiSeksualna funkcija dijabetesaModel štakora i istražite mogući mehanizam sekundarne seksualne disfunkcije uzrokovane hiperglikemijom.
MetodeEksperimentalni štakori nasumično su podijeljeni u praznu skupinu (n =5) igrupa za dijabetes(n =15). Nakon što je životinjski model dijabetesa uspješno konstruiran, procijenjena je seksualna funkcija dviju skupina. Uočene su histološke karakteristike testisa u dvije skupine. Izmjeren je izraz -moot mišićnog aktina (-sma) u penisnom tkivu dvije skupine. Rezultati Razine spolnih hormona u serumu značajno su se smanjile (P<0.01). Histomorphological observation showed that in the diabetes group the interstitial tissue of testis was disordered; Compared with the blank group, the number of smooth muscle cells in the penis tissue was reduced, and the degree of fibrosis was aggravated. The expression of α-SMA positive cells in the diabetes group was significantly decreased (P<0.01).
ZaključakSmanjena razina spolnih hormona, smanjeni broj stanica glatkih mišića u kavernoznom tijelu penisa, smanjena ekspresija -sma u kavernoznom tijelu penisa, poremećena struktura intersticijskog tkiva testisa, morfološke promjene stanica glatkih mišića i pogoršanja fibroze u ovom dijabetesu. Istraživanje dijagnoze i liječenja ove bolesti s ovim fenotipskim značajkama bit će od velikog značaja.
Ključne riječi:dijabetes melitus;erektilna disfunkcija; seksualna funkcija; seksualni hormon; - Izraz aktina glatkih mišića
Biljni dodaci Cistanche za erektilnu disfunkciju uzrokovani dijabetesom
Dijabetes melitus (DM)dugo je bio žarište pozornosti i na domaćem i međunarodnom mjestu zbog velike učestalosti i rasprostranjenosti [1]. Različite komplikacije izazvane DM -om značajno utječu na kvalitetu života pacijenata. Među njima je učestalostErektilna disfunkcija (ED)u muškomDM bolesnicije izrazito uzdignut. Trenutno je DM postao visoko rizična skupina za ED [2–3]. Stoga, provođenje dubinskih studija oDM-induciran ED (DMed)ima veliki značaj. Ova studija ima za cilj promatrati učinke DM -a na erektilnu funkciju, spolne hormone, razinu ekspresije aktina -mote mišiće (-sma) u penisnom kavernoznom tijelu i morfologiju intersticijskog testisa ipenis kavernozni glatki mišićTkiva u štakora, preliminarno istražujući potencijalnu patološku osnovu ED -a izazvane DM -om.
1 Materijali i metode
1.1 Eksperimentalne životinje i reagensi
Odabrano je dvadeset odraslih muških SD štakora s ujednačenom tjelesnom težinom. Glavni eksperimentalni reagensi uključuju streptozotocin (STZ) i apomorfin (APO), kao i antitijela potrebna za otkrivanje ekspresije -sma. Ovu studiju odobrilo je Odbor za dobrobit životinja i etike bolnice Dongzhimen, Sveučilište kineske medicine u Pekingu (br. 17-04).
1.2 Eksperimentalne metode
1.2.1 Uspostavljanje dijabetičkog modela štakora
Twenty experimental SD rats were randomly divided into a control group (5 rats) and a diabetes group (15 rats). STZ was dissolved in citrate buffer to prepare a 10 mg/mL solution. The diabetes group was intraperitoneally injected with STZ solution at a dose of 55 mg/kg to induce the DM model rats. Blood glucose levels >16,7 mmol/l U bilo kojem trenutku nakon 5 dana intraperitonealne ubrizgavanja STZ smatrano je standardnim za uspješno uspostavljanje modela DM -a [4].
1.2.2 Test erektilne funkcije kod štakora
Nakon što su potvrdili uspješno modeliranje DM -a, štakori su vagani i stavljeni u prozirnu staklenu kutiju. Apo otapalo (100 ug/kg) supkutano je ubrizgano na stražnjem dijelu vrata na temelju tjelesne težine. Okoliš je bio miran, a zatvorena rasvjeta bila je prilagođena razini koja je dovoljna za promatranje erekcije penisa kod štakora. Broj erekcije penisa u roku od 30 minuta nakon subkutane injekcije je zabilježen i zabilježen. Kriteriji za erekciju penisa: povećanje penisa, povlačenje prepuca, izlaganje glansa popraćenih hiperemijom i crvenilom te vidljivost srednjeg i nižeg segmenata penisa.
1.2.3 Mjerenje spolnih hormona kod štakora
Razine spolnog hormona u serumu u dvije skupine izmjerene su metodom RadioiMunoasAsAs, slijedeći specifične postupke navedene u uputama RadioiMunoasAsAsAy.
1.2.4 Histopatološko promatranje intersticijskog tkiva testisa
Nakon prikupljanja krvi iz trbušne aorte štakora, desni testis je ujednačeno izvađen. Testik je ispravan PBS puferom i potpuno je fiksiran u paraformaldehidu 72 sata. Tkivo je ugrađeno u parafin, presječeno, obojeno hematoksilinom-eozinom (H&E) i opaženo za histološke karakteristike.
1.2.5 Promatranje penis kavernozne fibroze kod štakora
Nakon prikupljanja krvi iz trbušne aorte, tkivo penisa je izrezano i isprano PBS puferom. Tkivo je u potpunosti fiksirano u paraformaldehidu 72 sata, ugrađeno u parafin, presječeno i obojeno Massonovim trihromom. Relativni sadržaj vlakana glatkih mišića/kolagena u penis kavernoznom tkivu svake skupine primijećen je pod mikroskopom.
1.2.6 Mjerenje razine ekspresije -sma u penis kavernoznom tkivu
Kavernosno tkivo penisa podvrgnuto je rutinskoj deparafinizaciji na vodu, isprano PBS puferom 5 minuta i podvrgnuto popravljanju mikrovalne topline u citratnom puferu (pH 6. 0) 20 minuta. Nakon hlađenja do sobne temperature, tkivo je isprano tri puta s PBS -om, 3 minute svaki put. 3% otopina vodikovog peroksida primijenjena je u tamnoj sobi na sobnoj temperaturi 15 minuta, a slijedi PBS pranje. -SMA antitijelo je zatim dodano, a tkivo se inkubira preko noći na 4 stupnja. Nakon povratka na sobnu temperaturu, tkivo je isprano s PBS -om, inkubirano sekundarnim antitijelom na 37 stupnjeva 30 minuta i ponovo isprano PBS -om. DAB je primijenjen za razvoj boje u mraku, a reakcija je prekinuta vodom. PBS je korišten kao zamjena za primarno antitijelo kao negativna kontrola, a kvantitativna analiza provedena je s analizatorom slike.
1.3 Statističke metode
Podaci prikupljeni u ovoj studiji organizirani su korištenjem Microsoft Excela, a zatim su analizirani pomoću SPSS 25. 0 za statističko testiranje. Podaci svake skupine izraženi su kao srednja ± standardna odstupanja (x̄ ± s). P-vrijednost manja od 0. 0 5 (P <0,05) smatrana je statistički značajnom.
2 rezultata
2.1 Usporedba promjene tjelesne težine i glukoze u krvi između dvije skupine
Pogledajte tablicu 1.
2.2 Usporedba stope erekcije penisa između dvije skupine
Pogledajte tablicu 2.
2.3 Usporedba razine spolnog hormona u serumu između dvije skupine
Pogledajte tablicu 3.
2.4 Patološko promatranje intersticijskog tkiva testisa između dvije skupine
Intersticijsko tkivo testisa u kontrolnoj skupini činilo se normalno. Intersticijske stanice bile su okrugli ili ovalni oblik, s redovnom morfologijom, normalnim međućelijskim razmakom, uređenim rasporedom i bez značajnog smanjenja broja stanica. Suprotno tome, dijabetička skupina pokazala je intersticijski edem testisa, morfologiju nepravilne stanice, labave međućelijske prostore, neuredni raspored, poremećene unutarćelijske strukture i znakove dediferencijacije u nekim stanicama, gubeći strukturne značajke. Pogledajte sliku 1.
| Skupina | Veličina uzorka (n) | Osnovna tjelesna težina (g) | Tjelesna težina 5 dana nakon modeliranja (g) | Glukoza u krvi 5 dana nakon modeliranja (MMOL/L) | Tjelesna težina prije žrtvovanja (g) | Glukoza u krvi prije žrtvovanja (MMOL/L) |
|---|---|---|---|---|---|---|
| Grupa za dijabetes | 15 | 220.4 ± 5.5 | 264.2 ± 10.8** | 24.3 ± 5.0** | 316.7 ± 16.4** | 25.2 ± 5.1** |
| Kontrola | 5 | 220.0 ± 5.2 | 286.2 ± 10.1 | 4.9 ± 1.3 | 319.1 ± 13.9 | 6.8 ± 1.2 |
Bilješka: U usporedbi s kontrolnom skupinom,P <0. 01.
Tablica 2: Usporedba stope erekcije penisa između dvije skupine
| Skupina | Veličina uzorka (n) | Pozitivni slučajevi u testu erekcije (N) | Stopa erekcije (%) |
|---|---|---|---|
| Grupa za dijabetes | 15 | 5 | 33.3** |
| Kontrola | 5 | 4 | 80.0 |
Bilješka: U usporedbi s kontrolnom skupinom,P <0. 01.
Tablica 3: Usporedba razine spolnog hormona u serumu između dvije skupine (x̄ ± S)
| Skupina | Veličina uzorka (n) | T (nmol·l⁻¹) | Fsh (iu · l⁻¹) | LH (ng · l⁻¹) |
|---|---|---|---|---|
| Grupa za dijabetes | 15 | 3.38 ± 0.87** | 8.49 ± 3.06** | 489 ± 50.12** |
| Kontrola | 5 | 6.04 ± 1.26 | 5.98 ± 1.03 | 386 ± 40.73 |
Bilješka: U usporedbi s kontrolnom skupinom,P <0. 01.
2.4 Patološko promatranje intersticijskog tkiva testisa između dvije skupine
U kontrolnoj skupini, intersticijsko tkivo testisalo se normalno, s tim da su intersticijske stanice okrugle ili ovalne oblika, pokazujući redovnu morfologiju, normalne međućelijske prostore i uredno raspored. Broj stanica nije pokazao značajno smanjenje. U usporedbi s kontrolnom skupinom, dijabetička skupina pokazala je interstitni edem testisa, stanice nepravilno oblikovane, labave međućelijske prostore, neuredni raspored, poremećene unutarćelijske strukture i znakove dediferencijacije u nekim stanicama, gubeći svoje strukturne značajke. Pogledajte sliku 1.
2.5 Promatranje penis kavernozne fibroze između dvije skupine
Massonovo bojenje korišteno je za promatranje razlika u stupnju fibroze u penis kavernoznom tkivu između dvije skupine. U dijabetičkoj skupini, udio kolagenih vlakana bio je značajno veći, s povećanjem relativnog sadržaja, dok je udio stanica glatkih mišića bio manji, s smanjenjem relativnog sadržaja. Pogledajte sliku 2.
Slika 1 Obojao je rezultate testisa u dvije skupine (× 10, n=3)
Slika 2 Rezultati bojenja Corpora Cavernosa u dvije skupine (× 4, n=3)
2.6 Ekspresija -sma u Corpus Cavernosum stanicama glatkih mišića u dvije skupine
Imunohistokemija je korištena za otkrivanje ekspresije -sma u dvije skupine. U usporedbi s praznom skupinom, smeđe -žuto obojeni dio u dijabetičkoj skupini značajno je smanjen, to jest pozitivna ekspresija stanice -sma u dijabetičkoj skupini bila je značajno smanjena. Vidi sliku 3.
Sl. 3 Imunohistokemija Rezultati Corpus Cavernosum u dvije skupine (× 10, n=3)
