Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-pošta:audrey.hu@wecistanche.com

Yu Lixin Chen Xueqiang Wu Qunfeng Dong Weiqin Guo Songhua Yu Jian Feng Wei Yang Lei Fu Yifeng Li Junjie Luo Cheng

1 98. bolnica Kineske narodnooslobodilačke vojske, Huzhou, Zhejiang 313000

2 Zhejiang Sveučilište tradicionalne kineske medicine, Hangzhou, Zhejiang 310053

3 Ortopedska bolnica tradicionalne kineske medicine Fuyang, grad Hangzhou, provincija Zhejiang, Hangzhou 311400, Zhejiang, Kina

Sažetak

Cilj: Promotriti učinakCistanchevodeni ekstraktna ozdravljenjeosteoporotičanprijeloma u štakora i istražiti njihov mehanizam. Metode: Ženke štakora SPF stupnja SD nasumično su podijeljene u kontrolnu skupinu, modelnu skupinu i tretiranu skupinu, te modelirane prema srodnim metodama. 24 sata nakon modeliranja prijeloma, kontrolnoj skupini i modelnoj skupini davana je sonda normalne fiziološke otopine, a liječenoj skupini sondaCistanchevodeni ekstrakt jednom dnevno. Nakon 2 tjedna i 6 tjedana intervencije, krv je sakupljena iz abdominalne aorte za otkrivanje interleukina. Razine TP (IL-1 B) i transformirajućeg čimbenika rasta B l (TGF-8 1), prikupite uzorke prijeloma u isto vrijeme, izvršite mikro-CT skeniranje nakon fiksacije, izmjerite R0 Volumni udio kosti I kalusa (BV/TV) i drugi povezani parametri Nakon dekalcifikacije, dehidracije i ugradnje, napravljen je u blokove voska za upotrebu. Rezultati: 6 tjedana nakon uspostavljanja modela osteoporoze, mineralna gustoća kostiju štakora u modelnoj skupini i liječenoj skupini bila je niža nego u kontrolnoj skupini (P<0.05), but="" there="" is="" no="" significant="" difference="" between="" the="" treatment="" group="" and="" the="" model="" group.="" although="" the="" bone="" density="" of="" the="" treatment="" group="" is="" still="" lower="" than="" that="" of="" the="" control="" group="" after="" 2="" weeks="" and="" 6="" weeks="" of="" intervention,="" it="" is="" significantly="" higher="" than="" that="" of="" the="" model="" group=""><0.05). micro-ct="" scan="" shows="" the="" treatment="" group="" bv/tv,="" tb.="" sp,="" tb.="" n,="" tb.="" th,="" smi="" was="" better="" than="" the="" model="" group="" at="" 2="" and="" 6="" weeks="" after="" the="" intervention,="" and="" the="" bv/tv,="" tb.="" sp,="" smi="" parameters="" of="" the="" control="" group="" and="" the="" treatment="" group="" were="" not="" different="" from="" those="" of="" the="" treatment="" group.="" obviously,="" the="" micro-ct="" parameters="" of="" the="" model="" group="" at="" 2-time="" points="" were="" inferior="" to="" the="" control="" group.="" after="" 2="" weeks="" and="" 6="" weeks="" of="" intervention,="" comparing="" the="" serum="" ilt="" b="" and="" tgf-p="" 1="" levels="" of="" the="" 3="" groups,="" it="" was="" found="" that="" the="" il-1="" p="" levels="" of="" the="" treatment="" group="" were="" lower="" than="" those="" of="" the="" other="" two="" groups="" at="" 2="" weeks.="" at="" 6="" weeks,="" the="" il-1="" p="" levels="" of="" the="" treatment="" group="" were="" higher="" than="" those="" of="" the="" other="" two="" groups.="" the="" control="" group,="" but="" still="" significantly="" lower="" than="" the="" model="" group=""><0.05); in="" terms="" of="" tgf-b="" 1="" level,="" the="" treatment="" group="" was="" higher="" than="" the="" model="" group="" and="" the="" control="" group="" at="" 2="" and="" 6="" weeks,="" and="" there="" was="" no="" statistical="" difference="" between="" the="" control="" group="" and="" the="" control="" group.="" significance.="" conclusion:="" according="" to="" the="" analysis="" of="" bone="" mineral="" density,="" micro-ct="" scan="" parameters,="" and="" serum="" il-1="" b="" and="" tgf-b="" 1="" levels,="" it="" is="" found="" that="" the="" aqueous="" extract="" of="">Cistanchemože pospješiti zacjeljivanjeosteoporotičanprijeloma, a njegov mehanizam može biti povezan s njegovom inhibicijomosteoporotičanprijelomi. Nakon štakorskog seruma IL-1 B i potiče izlučivanje TGF-8 1, što može poboljšati osteoporozu i pospješiti cijeljenje prijeloma.

Ključne riječi: osteoporotični prijelom, Cistanche, cijeljenje prijeloma, štakor

Osteoporoza je bolest kod koje dolazi do smanjenja gustoće kostiju, razaranja fine strukture koštanog tkiva i povećane lomljivosti kostiju. Pacijenti mogu uzrokovati prijelome pod blagom vanjskom silom u svakodnevnom životu. To je česta klinička bolest i bolest koja se često javlja. Štoviše, ova vrsta prijeloma je uglavnom kod starijih pacijenata, često udružena s drugim bolestima, a većina prijeloma je usitnjena, loše stabilnosti, a ponekad dolazi do sporog ili nezaraslog cijeljenja prijeloma, te je visoka stopa invaliditeta i letaliteta. Trenutačno se liječi uglavnom kirurškim zahvatom, ručnom restauracijom i liječenjem protiv osteoporoze. Postoji nedostatak lijekova za ciljano liječenje pacijenata sosteoporotičanprijelomi. Tradicionalna kineska medicina ima dugu povijest liječenja osteoporoze i ima pozitivan učinak. Mnogi tradicionalni kineski lijekovi dokazano poboljšavaju kosti. Siromaštvo također može pospješiti zacjeljivanje prijeloma. Rongrong se obično koristi kao reprezentativni lijek za hranjenje bubrežnog janga i ima učinak hranjenja jetre i bubrega. Tradicionalna kineska medicina vjeruje da bubreg upravlja kostima, a liječenje prijeloma također je neodvojivo od bubrega i esencije. Suvremena farmakologija utvrdila je da pepeo od mesa ima i određeni estrogenski učinak. Ovo istraživanje namjerava koristiti mjerenje gustoće kostiju, mikro-CT i serumski interleukin-13 (IL-10), promatranje razine transformirajućeg faktora rasta-P KTGF-P 1) i vodeni ekstrakt paste od mesne hernije na ozdravljenje odosteoporotičanprijeloma kod štakora

Cistanche

1Materijali i metode

1.1 Pokusne životinje i oprema za reagense: 52 SPF ženke SD štakora težine 210~250g uzgojene su u Centru za pokuse na životinjama Sveučilišta tradicionalne kineske medicine Zhejiang. Kompleksni jod, Hangzhou Lonzo Medical Disinfectant Co., Ltd., serija broj 20160720; Penicillin, North China Pharmaceutical Co., Ltd., serijski broj F3117217; IL-18 komplet (broj serije: 20160715), TGF-8 1 komplet (broj serije: 20160722); Dvoenergetski rendgenski skener gustoće kostiju, 0STE0C0RE2; Mikro-CT, Skyscan1176O

1.2 EkstrakcijaCistanchevodeni ekstrakt: potopiti zemljucistanche(Farmaceutska tvornica tradicionalne kineske medicine Sveučilišta Zhejiang) 10 puta ultračista voda 0,5 sati, uvarak u tavi 1,5 sat, ponovite ekstrakciju 2 puta i miješana medicinska tekućina rotacijski kuhalo za paru Koncentrirajte do koncentracije od 1,5 g /ml i čuvati u hladnjaku na 4 stupnja za kasniju upotrebu.

1.3 Priprema modeliranja: Bodovi su sljedeći.

1.3. 1 Model osteoporoze: Štakori su prilagođeno uzgajani 1 tjedan prije modeliranja i nasumično podijeljeni u kontrolnu skupinu, modelnu skupinu i terapijsku skupinu, sa 16 štakora, 18 štakora i 18 štakora, a svaka se skupina temeljila na vremenskoj točki 2 tjedna i 6 tjedana. Svaki je bio podijeljen u dvije grupe. I skupina za liječenje i skupina modela anestezirane su s 1 posto pentobarbital natrija (0.4ml/100g), koža je anestezirana, dezinficirana, ogrnuta i koža je izrezana. Štakoru su uklonjeni bilateralni jajnici. Kontrolna skupina imala je samo rez. Nemoj

Uklanjanje jajnika

1.3. 2 Model prijeloma: 6 tjedana nakon pripreme modela osteoporoze bit će pripremljen model prijeloma. Nakon što su štakori u svakoj skupini anestezirani, izmjerena je mineralna gustoća kosti srednje bedrene kosti. , Rez, napraviti model poprečnog prijeloma srednje bedrene kosti, fiksirati Kirschnerovom žicom 1mm, sterilizirati i zašiti kožu reza.

1.4 Intervencija lijekovima: Detekcija bedrene kosti rendgenskim zrakama provedena je nakon modeliranja, štakori koji nisu uspjeli pripremiti model su eliminirani, a 80000 jedinica penicilina ubrizgano je intramuskularno nakon modeliranja kako bi se spriječila infekcija. 24 sata nakon operacije terapijska skupina dobila je vodeni ekstrakt paste od mesne kile (koncentracija 1,5 g/ml, lg/kg, jednom dnevno). Kontrolnoj skupini i modelnoj skupini dan je isti volumen fiziološke otopine.

1.5 Prikupljanje uzoraka: Uzorci štakora prikupljeni su 2 i 6 tjedana nakon intervencije. Nakon anestezije s 1 posto pentobarbital natrija, 5-10ml krvi je sakupljeno iz abdominalne aorte za pripremu seruma i pohranjeno u -20B hladnjaku. rezervni. Zatim su štakori žrtvovani, a uzorci prijeloma bedrene kosti su sakupljeni i stavljeni u 10 posto neutralni formaldehid na 72 sata.

1.6 Pokazatelji testiranja: Bodovi su sljedeći.

1.6. Slika 1 Mineralna gustoća kostiju: Svi štakori nakon modela osteoporoze bili su anestezirani prije modela prijeloma, a zatim je izmjerena mineralna gustoća kostiju srednje bedrene kosti. Tri skupine štakora dobile su uzorke nakon 2 i 6 tjedana intervencije, a uzorci su fiksirani 72 sata i zatim je ponovno izmjerena gustoća kostiju.

1.6. 2 Mikro-CT: Mikro-CT skeniranje se izvodi nakon što je uzorak fiksiran 72 sata, sa 200 slika iznad i ispod kraja frakture kao područja interesa (R01), kut skeniranja 360 stupnjeva, struja 555uA, napon 42kV, filter Al 0,2mm, rezolucija 8,73um, nakon završene rekonstrukcije trodimenzionalne slike i analize kalusa. Parametri detekcije su sljedeći: volumenski udio kosti BV/TV, faktor trabekularnog modela kosti (Tb. Pf); indeks strukturnog modela (SMI), itd."

1.6.3 Određivanje serumskog IL-1P i TGF-P1: Otopite serum štakora iz hladnjaka na -20 stupnjeva i provedite detekciju korak po korak u skladu s IL-13 i upute za komplet TGF" 1.

1.7 Statističke metode: za obradu koristiti softver za statističku analizu SPSS.19. Eksperimentalni podaci izraženi su kao srednja vrijednost ± standardna devijacija (G±s) i mineralna gustoća kostiju tri skupine štakora. Parametri mikro-CT-a JL-1 P JGF- P 1 razine su prosječne jednosmjernom analizom varijance, a koriste se usporedbe u paru između grupa Inspekcija, razina inspekcije je P<0.>

2 rezultata

2.1 Gustoća kostiju tri skupine: vidi tablicu 1.

Tablica 1. Rezultati mineralne gustoće kostiju u srednjoj bedrenoj kosti svake skupine štakora (x±s, g/cm²)

Napomena: u usporedbi sa skupinom modela, *P<0.05; compared="" with="" the="" control="" group.△=""><>

2.2 Micro-CT dvodimenzionalni presjek: sagitalni dvodimenzionalni presjek odabire slike uzdužne osi bedrene kosti u svakoj vremenskoj točki u svakoj skupini (vidi sliku 1), a horizontalni dvodimenzionalni poprečni presjek odjeljak odabire 100. sliku ispod linije prijeloma za usporedbu (Slika 2) ), na slici se može vidjeti da se kalus svake skupine postupno povećavao tijekom vremena, ali je bio plastičan u različitim stupnjevima 6 tjedana nakon prijeloma; u isto vrijeme, može se vidjeti da je kalus u kontrolnoj skupini bio velik, a korteks kalusa debeo i puzao preko linije prijeloma nakon 6 tjedana, dok je kalus u modelnoj skupini bilo manje kosti u kalusu na 2 tjedna, a korteks kalusa bio je labav nakon 6 tjedana. Iako volumen kalusa u liječenoj skupini nije bio velik nakon 2 tjedna, koštana masa u kalusa bila je veća od mase u modelnoj skupini. Kalus je bio bolje oblikovan nakon 6 tjedana. A linija prijeloma nije očita.

Kontrolna skupina Modelna skupina Tretmanska skupina

Slika 1 Sagitalni presjek srednje bedrene kosti svake skupine

Slika 2. Horizontalni presjek srednje bedrene kosti svake skupine

2.3 Mikro-CT trodimenzionalna rekonstrukcija: trodimenzionalna rekonstrukcija kalusa na slomljenom kraju bedrene kosti prikazana je na slici 3. Na slici 3 može se vidjeti da je kalus nastao duž periosta na oba kraja prijeloma. linije 2 tjedna nakon prijeloma u svakoj skupini, niti prijeloma u svakoj skupini još uvijek su bile čiste, posebno u modelnoj skupini i terapijskoj skupini, dok je kalus u kontrolnoj skupini bio debeo i debeo, uglavnom s pločama 6 tjedana nakon prijeloma . Trabekularne kosti bile su prevladavajuće i linija prijeloma je nestala, dok su modelna skupina bile labave kosti i linija prijeloma bila je nejasna, ali je skupina za liječenje imala više žuljevite kosti, pravilnu i deblju trabekularnu kost, a linija prijeloma nije bila očita.

Slika 3 Trodimenzionalna rekonstrukcija R0I kalusa na slomljenom kraju

2.4 Parametri mikro-CT-a: Koristite softver za analizu kalusa na slomljenom kraju. Pogledajte tablicu 2 za povezane parametre.

Tablica 2. Usporedba Micro-CT parametara svake skupine (x±s)

Kontrolna skupina Modelna skupina Tretmanska skupina

Napomena: u usporedbi sa skupinom modela, *P<0. 05;="" compared="" with="" the="" control="" group.=""><0.>

2.5 Razina serumskog IL-1 P .TGF-P 1: vidi tablicu 3.

Tablica 3 Usporedba razina IL-1 P JGF-0 1 u svakoj skupini G±s, n=8)

Napomena: u usporedbi sa skupinom modela, *P<0.05; compared="" with="" the="" control="" group,=""><0.05 0="" 3="">

Posljednjih je godina u kliničkoj praksi dokazano da tradicionalni kineski lijekovi Yinyangdian, Drynaria fortune i njihovi spojevi (Qing's Pills, Liuwei Dihuang Pills itd.) značajno poboljšavaju osteoporozu. Ova vrsta kineske medicine i spojeva uglavnom se koriste za prehranu jetre i bubrega. To je u skladu s načelom hranjenja bubrega i obnavljanja mišića u srednjoj i kasnoj fazi prijeloma. "Deset dana. Mesnata pasta za udove prvi put je objavljena u "Shen Nong's Materia Medica". Topla je po prirodi, ima funkciju hranjenja bubrega i jačanja janga, obnavljanja esencije i srži, njeguje krv i hidratizira suhoću, ugodne je boje i produžavanje života.

U ovoj studiji, mineralna gustoća kostiju terapijske skupine bila je viša od one u modelnoj skupini nakon 2 i 6 tjedana intervencije (P<0.05). micro-ct="" scan="" bv/tv="" parameters="" showed="" the="" results="" and="" bone="" mineral="" density="" of="" the="" treatment="" group="" at="" two="" time="" points="" after="" the="" intervention="" the="" measurement="" results="" are="" consistent,="" and="" bv/tv="" is="" an="" important="" indicator="" for="" the="" evaluation="" of="">osteoporotičancijeljenje prijeloma. Izravno odražava koštani sadržaj kalusa. To pokazuje da Rouganrong može utjecati na poticanje osteogeneze. Analiza može biti učinkovita u tijestu za herniju mesa. Sastojci imaju učinak pojačane regulacije BMP2, a BMP2 je jedan od članova obitelji TGF-8. A ovaj rezultat potvrđuju i drugi parametri mikro-CT skeniranja (Tb. Spjb. N, Tb. Th. SMI). Tb. Sp i SMI odražavaju biomehanička svojstva kalusa, a vrijednosti u terapijskoj skupini znatno su bolje nego u modelnoj skupini, što također dodatno sugerira da Roudongrong ima učinak poboljšanja gubitka kosti, promicanja osteogeneze i ubrzavanja cijeljenja prijeloma.

Što se tiče serumskih razina IL-1B i JGF-P 1, nakon 2 tjedna i 6 tjedana intervencije, utvrđeno je da je razina IL-1P terapijske skupine bila niža od druge dvije grupe na 2 tjedna i na 6 tjedana. Iako je razina IL-1 B terapijske skupine bila viša od kontrolne skupine, još uvijek značajno niža od modelne skupine (『<0.05); while="" the="" tgf-p="" 1="" level="" of="" the="" treatment="" group="" was="" higher="" than="" the="" model="" group="" and="" the="" control="" group="" at="" 2="" and="" 6="" weeks,="" and="" there="" was="" no="" statistically="" significant="" difference="" from="" the="" control="" group="" the="" level="" of="" il-1="" p="" directly="" affects="" the="" differentiation="" and="" activity="" of="" osteoclasts.="" an="" increase="" in="" its="" level="" will="" promote="" bone="" resorption="" and="" inhibit="" the="" proliferation="" and="" differentiation="" of="" osteoblasts.="" jhtgf-p="" 1="" is="" closely="" related="" to="" the="" proliferation,="" differentiation,="" and="" migration="" of="" osteoclasts.="" it="" has="" the="" effect="" of="" promoting="" cartilage="" and="" bone="" callus="" formation="" ⑵="" and="" accelerating="" the="" shaping="" of="" bone="" callus.="" this="" suggests="" that="">Cistanchelimenkapoboljšati gubitak koštane mase, potiču osteogenezu i ubrzavaju zacjeljivanje prijeloma. Može smanjiti razinu IL-13 uosteoporotičanfrakturne štakore i inhibiraju frakturu. Postiže se aktivnost koštanih stanica; osim toga, to također može biti povezano s činjenicom daCistanchemože povećati razinu TGF-B 1 u štakora s prijelomima, pospješiti osteogenu diferencijaciju i sazrijevanje i oblikovanje kalusa.

Ukratko, na temelju analize mineralne gustoće kostiju, parametara mikro-CT skeniranja i razine IL-1 P, TGF"1 u serumu, utvrđeno je da vodeni ekstraktCistanchelimenkapoboljšati gubitak koštane maseipospješuju cijeljenje prijeloma uzrokovanih osteoporozom. Mehanizam može biti povezan s ovim. Može inhibirati izlučivanje serumskog ILT 8 i pospješiti izlučivanje TGF-B 1 u štakora nakonosteoporotičanprijeloma, čime se poboljšava osteoporoza i pospješuje zacjeljivanje prijeloma.

4 Literatura

[1] Ma Yuanzheng, Wang Yipeng, Liu Qiang, et al. Smjernice za dijagnostiku i liječenje osteoporoze u starijih osoba u Kini (2018.) [J], Kineski časopis o osteoporozi, 2018., 24(12): 1541-1567.

[2] Zhu Gang, Sun Haibin, Xu Gang, et al. Terapeutski učinak i mehanizam alkoholnog ekstrakta mesne hernije na ovarijektomiziranim štakorima s osteoporozom [J]. Časopis Sveučilišta Jilin (medicinsko izdanje), 2018., 44(1): 68-72.

[3] Karvande A, Khedgikar V, Kushwaha P, et al. Ekstrakt srca iz Dalbergia sissoo potiče zacjeljivanje prijeloma i njegovu primjenu kod osteoporotičnih štakora izazvanih ovariektomijom [J]. Časopis za farmaciju i farmakologiju, 2017., 69(10): 1381-1397.

[4]Kevin 0'Neill, Christopher MS, Nicholas AM, et al. Procjena progresije cijeljenja prijeloma kod miševa mikro-kompjutoriziranom tomografijom [j]. Kost, 2012., (6): 1357-1367.

[5] Yao Xinmiao, Shi Xiaolin, Wang Jian, et al. Konsenzus stručnjaka o stupnjevitoj dijagnozi i liječenju primarne osteoporoze tradicionalnom kineskom medicinom u provinciji Zhejiang (2017.) [J], Zhejiang Journal of Traditional Chinese Medicine, 2018., 53(4): 237- 241.

[6] Ma Meng, Zhang Zhiguo, Ma Xiaohui. Napredak istraživanja u prevenciji i liječenju osteoporoze pojedinačnim i složenim kineskim lijekovima[J]. Kineski medicinski vodič, 2018., 20(8) =477-481.

[7] Zhang Yuequan, Zheng Danhong, Xu Jianfeng, et al. Učinak obiteljskog pirea od desertnog mesa na ekspresiju proteina BMP-2 kod miševa s osteoporozom koji brzo stare [J]. Ningxia Medical Journal, 2014., 36(12): 1114-1116