hrJezik
Dom / Znanje / Sadržaj

Znanje

Ehinakozid suzbija deksametazonom induciranu inhibiciju rasta i apoptozu u osteoblastičnim MC3T3-E1 stanicama

Mar 11, 2022

Kontakt: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-pošta:audrey.hu@wecistanche.com

Sažetak.

Glukokortikoidi (GK) naširoko se koriste u liječenju kroničnih bolesti. Dugotrajna i/ili predozirana primjena GC-a ima mnoge nuspojave na ljudsko zdravlje uključujući GC-induciranu osteoporozu (GIOP). U ovom istraživanju cilj je bio procijeniti utjecaj kojiehinakozid iz cistanče(ECH) djeluje na mišje osteoblastične MC3T3-E1 stanice tretirane deksametazonom. Otkrili smo da ECH(ehinakozid iz cistanče) (5, 10, 20, and 40 mg/l) inhibited dexamethasone (1,000 nM)-suppressed cell viability as demonstrated by Cell Counting Kit-8 (CCK-8) assay. The dose of 10 mg/l was selected for the following experiments because this dose had a better effect than the dose of 5 mg/l, and the doses >10 mg/l imalo je sličan učinak kao ova doza. ECH(ehinakozid iz cistanče)(10 mg/l) ili pifitrin‑ (PFT-) (inhibitor p53, 20 µM) potisnuo je deksametazonom induciranu MC3T3-E1 apoptozu kao što je prikazano analizom protočne citometrije dvostrukog označavanja aneksin V/propidij jodid (PI) . ECH(ehinakozid iz cistanče)ili PFT-liječenje također je ublažilo djelovanje deksametazona na inhibiciju ekspresije Bcl-2 kao i djelovanje deksametazona na stimulaciju ekspresije p53 i Bax. Štoviše, prekomjerna ekspresija p53 posredovana lentivirusom poništila je učinke ECH(ehinakozid iz cistanče)u stanicama MC3T3-E1 tretiranim deksametazonom, što sugerira da ECH(ehinakozid iz cistanče)inducirani anti-apoptotski učinci u osteoblastima tretiranim deksametazonom preko puta ovisnog o ap53-. Ukratko, ECH(ehinakozid iz cistanče)ima zaštitni učinak protiv apoptoze osteoblastičnih stanica izazvane deksametazonom, što sugerira da ECH(ehinakozid iz cistanče)mogu imati potencijal za kliničku primjenu u liječenju GIOP-a.

cistanche to treat osteoporosis

Cistanche deserticola ima mnoge učinke, kliknite ovdje da biste saznali više

Uvod

Glukokortikoidi(GC) se često koriste za liječenje širokog spektra kroničnih bolesti, uključujući upale, rak i autoimune poremećaje (1). Međutim, produljena i/ili predozirana primjena GC ima mnoge nuspojave, kao što su hipertenzija, hiperglikemija, glaukom, osteonekroza i osteoporoza (2-4). Jasno je da uporaba GC-a povećava gubitak koštane mase i rizik od prijeloma (3-6). GC mogu inducirati apoptozu osteoblasta i oslabiti funkciju tih stanica. Na primjer, deksametazon, GC hormon, može pojačati ekspresiju p53 u osteoblastičnim MC3T3-E1 stanicama, uzrokujući tako staničnu apoptozu (7,8). Apoptoza osteoblasta dovodi do smanjenog stvaranja kostiju. Uvedena je oralna primjena bisfosfonata (alendronat i risedronat) (9,10) za liječenje osteoporoze izazvane GC (GIOP). Međutim, niske stope pridržavanja ograničavaju učinkovitost oralnih bisfosfonata. Drugi lijekovi također imaju ograničenja kao što je neprikladna primjena [zoledronatna kiselina (11)] i visoka cijena [PTH 1-34 (teriparatid) (12,13)]. Posljedično, postoji potreba za razvojem novih mogućnosti liječenja GIOP-a.

Ehinakozid iz cistanče (ECH)je feniletanoidni glikozid izoliran iz tradicionalne kineske medicineHerbaCistanches(14). ECH(ehinakozid iz cistanče)ima zaštitne učinke na neuronski sustav (15-20), jetru (21,22) i pluća (23) promicanjem stanične proliferacije i inhibicijom upalnog odgovora, proizvodnje reaktivnih kisikovih vrsta (ROS) i stanične apoptoze. Iako je ECH(ehinakozid iz cistanče)također može pospješiti osteoblastičnu regeneraciju kosti i ima izvanrednu antiosteoporotičku aktivnost u modelima štakora (24,25), nema postojećih zapisa koji opisuju učinke ECH(ehinakozid iz cistanče)na GC-induciranu apoptozu osteoblastičnih stanica. Stoga smo istražili utjecaj ECH(ehinakozid iz cistanče)djeluje na apoptozu osteoblastičnih stanica izazvanu deksametazonom i razjasnio je preliminarni mehanizam u stanicama MC3T3-E1.


CISTANCHE

Materijali i metode

Uzgoj od Stanice. Banka stanica Kineske akademije znanosti (Šangaj, Kina) osigurala je mišje osteoblastične MC3T3-E1 stanice. Rast stanica odvijao se u -minimalnom esencijalnom mediju (-MEM) (Hyclone; GE Healthcare, Logan, UT, SAD) koji je sadržavao 10 posto fetalnog goveđeg seruma (FBS; Gibco; Thermo Fisher Scientific, Inc., Grand Island, NY, SAD ) i penicilin/streptomicin (Beijing Solar Science and Technology Co., Ltd., Peking, Kina). Održavanje stanica provedeno je u okruženju s 95 posto zraka i 5 posto ugljičnog dioksida na temperaturi od 37˚C.

Theproizvodnjaodlentivirusprekomjerno izražavanje p53. Da bi se stvorio ekspresijski konstrukt p53, sintetizirana je regija kodirajuće sekvence proteina (CDS) mišjeg gena p53 i umetnuta uEkoRI/bamHI restrikcijska mjesta lentivirusnog ekspresijskog vektora pLVX-puro (Clontech Laboratories, Inc., Palo Alto, CA, SAD) tvrtke Genewiz, Inc. (Peking, Kina). Konstrukt je verificiran DNA sekvenciranjem. 293T stanice (Shanghai GeneChem Co., Ltd., Šangaj, Kina) transficirane su mješavinom plazmida, uključujući virusne plazmide za pakiranje i p53 ekspresijski plazmid (pLVX-p53) ili kontrolni plazmid (pLVX) putem Lipofectamine 2000 (Invitrogen: Thermo Fisher Scientific, Inc., Carlsbad, CA, SAD) na temelju uputa proizvođača. Virusni supernatant sakupljen je 48 sati nakon transfekcije i korišten za infekciju MC3T3-E1 stanica. Procjena ekspresije p53 provedena je 48 sati nakon virusne infekcije.

Kvantitativnopolimerazalanacreakcija(qPCR). Koristili smo TRIzol reagens (Invitrogen: Thermo Fisher Scientific, Inc.) za odvajanje ukupne RNA i MC3T3-E1 stanica i RevertAid™ First Strand cDNA Synthesis kit (Thermo Fisher Scientific, Inc., Rockford, IL, SAD) prema uputama proizvođača za reverznu transkripciju ukupne RNK. Razina p53 mRNA detektirana je putem qPCR-a na ABI Prism 7300 Sequence Detection System (Applied Biosystems: Thermo Fisher Scientific, Inc., Foster City, CA, SAD). Prajmeri su bili sljedeći: 5'-CCC CTGTCATCTTTGTCCCT-3' i 5'-AGCTGGCAGAAT AGCTTATTGAG-3' za p53, 5'-CTGCCCAGAACATCA TCC-3' i 5'-CTCAGATGCCTGCTTCAC{{ 18}}' za GAPDH.

Zatim smo procijenili razine p53 mRNA putem 2-ΔΔCT metoda (26) s GAPDH kao internom kontrolom.

Western blotting. Liza stanica MC3T3-E1 odvijala se u puferu za ispitivanje radioimunoprecipitacije s inhibitorima proteaze (Beijing Solarbio Science & Technology Co., Ltd.), a centrifugiranje lizata nastavljeno je 15 minuta na temperaturi od 4˚C pri 9600 xg tako da se oborina može ukloniti. Nakon toga, procijenili smo količinu proteina pomoću BCA test kita (Thermo Fisher Scientific, Inc.). Jednaka količina proteina dodana je na 10 ili 15 posto SDS-PAGE i prenesena na nitroceluloznu membranu (EMD Millipore, Bradford, MA, SAD). Membrane su blokirane s 5 posto obranog mlijeka i ispitane primarnim antitijelima. Nakon ispiranja 3 puta fiziološkom otopinom puferiranom fosfatom (PBS), provedena je inkubacija membrana sa sekundarnim antitijelom konjugiranim peroksidazom hrena (1:1, 000; kat. br. A0208; Beyotime Institute of Biotechnology, Shanghai, Kina). . Proveli smo Western blotting testove pomoću kompleta za poboljšanu kemiluminiscenciju (ECL) (EMD Millipore). Kao interni standard korišten je GAPDH. Izvori primarnih protutijela bili su sljedeći: Bax (Sc-493) i Bcl-2 (Sc-492) oba iz Santa Cruz Biotechnology, Inc. (Santa Cruz, CA, SAD); p53 (br. 2524) i GAPDH (br. 5174) oba od Cell Signaling Technology, Inc. (Danvers, MA, USA).

Eksperimentalno grupiranje. Kako bi se odredila odgovarajuća doza deksametazona, tretman MC3T3-E1 stanica proveden je nizom količina deksametazona (0, 1, 10, 100 i 1,000 nM; Sigma -Aldrich; Merck KGaA, St. Louis, MO, SAD). 48 h nakon inkubacije stanica, testovi kompleta za brojanje stanica -8 (CCK-8) provedeni su za otkrivanje stanične proliferacije.

Za odabir odgovarajuće doze ECH(ehinakozid iz cistanče), tretman MC3T3-E1 stanica proveden je s 1,000 nM deksametazona i različitim dozama ECH (0, 2,5, 5, 10, 20 i 40 mg/l; Shanghai Aladdin Biochemical Technology Co., Ltd., Šangaj, Kina). Stanice uzgojene u normalnim uvjetima (mock) poslužile su kao kontrola. CCK-8 analiza je provedena nakon 48 h kulture.

Za sve ostale pokuse, stanice MC3T3-E1 podijeljene su u pet skupina: skupina 1 (lažna), stanice su uzgajane u normalnim uvjetima; skupina 2, stanice su transducirane s pLVX lentivirusom; skupina 3, stanice uzgojene s 10 mg/l ECH(ehinakozid iz cistanče); skupina 4, stanice s 20 uM pifitrina- (PFT-; Selleck Chemicals, Houston, TX, SAD); skupina 5, stanice transducirane pLVX-p53 lentivirusom i tretirane s 10 mg/l ECH(ehinakozid iz cistanče). Stanice u skupinama 2-5 tretirane su s 1,000 nM deksametazona. Stanična apoptoza i ekspresija proteina mjereni su nakon 48 h kulture.

Ćelijatest proliferacije.Zasijali smo MC3T3-E1 stanice u 96-pločice s jažicama 3x103stanica/jažici i uzgaja ih u normalnim uvjetima preko noći. Stanice su tretirane kako je naznačeno. Nakon 48 h kulture, CCK8 (Signalway Antibody LLC, College Park, MD, SAD) test je zatim obavljen prema uputama proizvođača. Ukratko, medij kulture u svakoj jažici zamijenjen je sa 100 µl 10 postotne otopine CCK-8 u mediju. Nakon inkubacije stanica u trajanju od 1 h na temperaturi od 37˚C, procijenili smo apsorbanciju na valnoj duljini od 450 nm čitačem mikropločica. Izračunata je relativna održivost stanica (postotak) s vezama na kontrolne jažice.

Ćelijaprocjena apoptoze. Koristili smo komplet za apoptozu stanica Annexin V-FITC (Beyotime Institute of Biotechnology) za kvantificiranje stanica koje su podvrgnute ranoj apoptozi prema uputama proizvođača. Ukratko, skupljanje tretiranih stanica provedeno je tripsinizacijom. Stanice su isprane preko PBS-a i resuspendirane s puferom za vezanje aneksina. Inkubacija stanica je provedena preko Annexin V-FITC u trajanju od 15 minuta na temperaturi od 4˚C nakon čega je uslijedila inkubacija s propidijevim jodidom (PI) tijekom 5 minuta na 4˚C. Smatralo se da stanice u donjem desnom kvadrantu (Annexin V-FITC pozitivne i PI negativne) aktivno prolaze kroz ranu apoptozu.

Statističkianaliza. Podaci su srednje vrijednosti ± SD za sva tri neovisna eksperimenta. Tukeyjev test višestrukih usporedbi i jednosmjerna analiza varijance provedeni su kako bi se analizirale razlike između skupina putem softvera GraphPad Prism (verzija 6.0; GraphPad Software, Inc., San Diego, CA, SAD). P<0.05 was="" considered="" to="" indicate="" a="" statistically="" significant="">

CISTANCHE

Rezultati

Osnivanjeoda prikladna dozaoddeksametazon.Kako bi se odredila odgovarajuća doza deksametazona, stanice MC3T3-E1 bile su izložene sve većim količinama deksametazona (0, 1, 10, 100 i 1,000 nM) tijekom 48 h. . Kao što je prikazano na slici 1, relativna održivost stanica određena je testom CCK-8 povećana je u stanicama tretiranim niskim koncentracijama deksametazona (1 i 10 nM), a značajno smanjena u stanicama izloženim visokim koncentracijama deksametazona (100 i 1,000 nM).

Establishment of the suitable dose of DEX. Concentrations of 0, 1, 10, 100 or 1,000 nM of DEX were added to MC3T3-E1 cells for 48 h, and CCK-8 was then performed

Najznačajnije smanjenje uočeno je u stanicama s 1,000 nM deksametazona. Stoga je 1,000 nM deksametazona odabrano u narednim testovima.

Učinak ECH(ehinakozid iz cistanče)na inhibiciju rasta stanica izazvanu deksametazonom. Zatim smo istražili učinak ECH(ehinakozid iz cistanče)na inhibiciju rasta stanica izazvanu deksametazonom. Tretman MC3T3-E1 stanica proveden je s 1,000 nM deksametazona i različitim dozama ECH(ehinakozid iz cistanče)(0, 2,5, 5, 10, 20 i 40 mg/l; slika 2). 48 h nakon tretmana, dodavanje ECH(ehinakozid iz cistanče)u dozama od 5, 10, 20 i 40 mg/l značajno je smanjilo oštećenje stanica izazvano deksametazonom. ECH(ehinakozid iz cistanče)u dozi od 10 mg/l ima očitiji učinak nego onaj u dozi od 5 mg/l. Vijabilnost stanica bila je slična u stanicama tretiranim s 10, 20 i 40 mg/l ECH(ehinakozid iz cistanče). Dakle, 10 mg/l ECH(ehinakozid iz cistanče)korišten je u sljedećim eksperimentima.

Prekomjerna ekspresija p53 konstruiranjem lentivirusa. Dexamethasone može pojačati p53, čime inducira apoptozu osteoblasta (8). Za proučavanje učinaka ECH(ehinakozid iz cistanče) on dexamethasone-induced p53 expression, we constructed a lentivirus encoding p53 (pLVX-p53) and transduced the virus into MC3T3-E1 cells. The expression of p53 was analyzed at 48 h after transduction. Fig. 3 shows that p53 mRNA and protein levels were increased to >2 puta u pLVX-p53-transduciranim stanicama u usporedbi sa stanicama s kontrolnim virusom (pLVX). p53 je bio uključen u učinak ECH(ehinakozid iz cistanče) na apoptozu izazvanu deksametazonom. Stanice MC3T3-E1 tretirane su Plavixom ili pLVX-p53, 10 mg/l ECH(ehinakozid iz cistanče), 20 µM PFT- (inhibitor p53) i 1,000 nM deksametazona, a zatim je stanična apoptoza izmjerena pomoću pribora za apoptozu Annexin V-FITC. Kao što je prikazano na slici 4A, liječenje deksametazonom značajno je induciralo apoptozu stanica u usporedbi sa stanicama uzgojenim u normalnim uvjetima (lažni). ECH(ehinakozid iz cistanče) i PFT-tretman značajno su zaštitili stanice MC3T3-E1 od apoptoze izazvane deksametazonom. Dodatno, prekomjerna ekspresija p53 poništila je zaštitne učinke ECH (ehinakozid iz cistanče).

Poznato je da Bcl-2 i Bax, kao važne regulatore apoptoze, regulira p53 (27). Western blot je pokazao da su promjene ekspresije p53 i Bax proteina bile u skladu s promjenama stanične apoptoze, dok se ekspresija Bcl-2 promijenila u suprotnom smjeru (sl. 4B i C). Značajno, razine proteina p53 bile su značajno potisnute ECH(ehinakozid iz cistanče)i PFT-tretman u stanicama s prekomjernom ekspresijom p53 i tretiranim deksametazonom (slika 4C). Ovi podaci sugeriraju da je ECH(ehinakozid iz cistanče)može imati zaštitne učinke na apoptozu izazvanu deksametazonom putem inhibicije ekspresije p53.

15_1

Učinci cistanche echinacoside

Rasprava

Antiapoptozna funkcija ECH(ehinakozid iz cistanče)opisano je u modelu akutne ozljede jetre izazvane D-galaktozaminom (D-GalN) i lipopolisaharidom (LPS) te u stanicama ljudskog neuroblastoma (SH-SY5Y) izazvanim faktorom nekroze tumora ili 1-metil{{6 }}fenilpiridinijion (MPP plus ) (17,22,28). Zabilježeno je da liječenje deksametazonom može inhibirati proliferaciju i inducirati apoptozu stanica MC3T3-E1 (8,29). U trenutnoj studiji, relativna vitalnost stanica bila je značajno smanjena u stanicama izloženim visokim koncentracijama deksametazona (100 i 1,000 nM), što je bilo u skladu s prethodnom studijom (8). Dodatni ECH tretman (5-40 mg/l) značajno je inhibirao vitalnost stanica potisnutu deksametazonom. Štoviše, izloženost deksametazonu (1,000 nM) stimulirala je apoptozu stanica MC3T3-E1, koju je liječenje ECH-om u značajnoj mjeri obuzdalo. Izvješće je dalo prvi prikaz kako je ECH zaštićen od apoptoze stanica osteoblasta izazvane deksametazonom i sugeriralo da bi ECH mogao imati potencijal za kliničku primjenu u GIOP-u.

Nadalje, pokušali smo istražiti preliminarni mehanizam zaštitnih učinaka ECH(ehinakozid iz cistanče). Deksametazon može pojačati transkripciju p53, čime inducira apoptozu osteoblasta i zaustavljanje staničnog ciklusa (8). ECH u stanicama SH-SY5Y smanjuje p53 (28). Ovdje je PFT- (inhibitor p53) imao slične zaštitne učinke kao ECH, dok je prekomjerna ekspresija p53 poništila zaštitne učinke ECH. Promjene ekspresije proteina p53 pod različitim uvjetima bile su u skladu s promjenama stanične apoptoze. Ovi rezultati pokazuju da bi ECH mogao imati zaštitne učinke na apoptozu osteoblastičnih stanica izazvanu deksametazonom putem inhibicije ekspresije p53. Proteini obitelji Bcl-2, kao što su Bcl-2 i Bax, mogu promijeniti propusnost mitohondrijske membrane, aktivirati efektorske kaspaze i uzrokovati apoptozu stanice (30). Dobro je poznato da p53 može regulirati Bcl-2 i Bax (27). Ovdje je liječenje PFT- ili ECH(ehinakozid iz cistanče) oslabio je inhibitorne učinke deksametazona na razine proteina Bcl-2 protiv apoptoze, kao i stimulativne učinke koje deksametazon ima na razine proteina Bax pro-apoptoze, dok je prekomjerna ekspresija p53 poništila učinke ECH. Ovi rezultati dodatno su pokazali uključenost p53 u zaštitnu funkciju ECH.

Ukratko, pokazali smo da ECH(ehinakozid iz cistanče)ima obećavajući zaštitni učinak na apoptozu osteoblastičnih stanica induciranu deksametazonom, što sugerira da ECH može imati potencijal za kliničku primjenu u liječenju GIOP-a.

effects of echinacoside from cistanche

Učinci ehinakozida iz cistanhe

Reference

  1. Buttgereit F, Burmester GR i Lipworth BJ: Optimizirana glukokortikoidna terapija: Oštrenje starog koplja. Lancet 365: 801-803, 2005.

  2. Schäcke H, Döcke WD i Asadullah K: Mehanizmi uključeni u nuspojave glukokortikoida. Pharmacol Ther 96: 23-43, 2002.

  3. Fukushima W, Fujioka M, Kubo T, Tamakoshi A, Nagai M i Hirota Y: Nacionalno epidemiološko istraživanje idiopatske osteonekroze glave bedrene kosti. Clin Orthop Relat Res 468: 2715-2724, 2010.

  4. Civitelli R i Ziambaras K: Epidemiologija osteoporoze izazvane glukokortikom. J Endocrinol Invest 31 (Suppl): 2-6, 2008.

  5. Gudbjornsson B, Juliusson UI i Gudjonsson FV: Prevalencija dugotrajnog liječenja steroidima i učestalost donošenja odluka za sprječavanje osteoporoze izazvane steroidima u svakodnevnoj kliničkoj praksi. Ann Rheum Dis 61: 32-36, 2002.

  6. van Staa TP, Geusens P, Pols HA, de Laet C, Leufkens HG i Cooper C: Jednostavan rezultat za procjenu dugoročnog rizika od prijeloma kod pacijenata koji koriste oralne glukokortikoide. QJM 98: 191-198, 2005.

  7. Rickard DJ, Sullivan TA, Shenker BJ, Leboy PS i Kazhdan I: Indukcija brze diferencijacije osteoblasta u kulturama stromalnih stanica koštane srži štakora deksametazonom i BMP-2. Dev Biol 161: 218-228, 1994.

  8. Li H, Qian W, Weng X, Wu Z, Li H, Zhuang Q, Feng B i Bian Y: Glukokortikoidni receptor i sekvencijalna aktivacija P53 deksametazonom posreduju u apoptozi i zaustavljanju staničnog ciklusa osteoblastičnih MC3T3-E1 stanica. PLoS One 7: e37030, 2012.

  9. Stoch SA, Saag KG, Greenwald M, Sebba AI, Cohen S, Verbruggen N, Giezek H, West J i Schnitzer TJ: oralni alendronat 70 mg jednom tjedno u bolesnika s gubitkom koštane mase izazvanim glukokortikoidima: A 12- mjesec dana randomizirano, placebom kontrolirano kliničko ispitivanje. J Rheumatol 36: 1705-1714, 2009.

  10. Wallach S, Cohen S, Reid DM, Hughes RA, Hosking DJ, Laan RF, Doherty SM, Maricic M, Rosen C, Brown J, et al: Učinci liječenja risedronatom na gustoću kostiju i prijelom kralješka u pacijenata na terapiji kortikosteroidima. Calcif Tissue Int 67: 277-285, 2000.

  11. Reid DM, Devogelaer JP, Saag K, Roux C, Lau CS, Reginster JY, Papanastasiou P, Ferreira A, Hartl F, Fashola T, et al; Istraživači HORIZON-a: Zoledronska kiselina i risedronat u prevenciji i liječenju osteoporoze izazvane glukokortikoidima (HORIZON): multicentrično, dvostruko slijepo, dvostruko lažno, randomizirano kontrolirano ispitivanje. Lancet 373: 1253-1263, 2009.

  12. Langdale BL, Rajzbaum G, Jakob F, Karras D, Ljunggren O, Lems WF, Fahrleitner-Pammer A, Walsh JB, Barker C, Kutahov A, et al: Smanjenje stope prijeloma i bolova u leđima i povećana kvaliteta života u žena u postmenopauzi liječeni teriparatidom: 18-Mjesečni podaci iz Europske Forsterove opservacijske studije (EFOS). Calcif Tissue Int 85: 484-493, 2009.

  13. Saag KG, Zanchetta JR, Devogelaer JP, Adler RA, Eastell R, See K, Krege JH, Krohn K i Warner MR: Učinci teriparatida u odnosu na alendronat za liječenje osteoporoze izazvane glukokortikoidima: Tridesetšestomjesečni rezultati randomiziranog, dvostruko slijepo, kontrolirano ispitivanje. Arthritis Rheum 60: 3346-3355, 2009.

  14. Jia Y, Guan Q, Guo Y i Du C: Ehinakozid stimulira staničnu proliferaciju i sprječava apoptozu stanica u crijevnim epitelnim MODE-K stanicama pojačanom ekspresijom transformirajućeg faktora rasta- 1. J Pharmacol Sci 118: 99-108, 2012.

  15. Kuang R, Sun Y, Yuan W, Lei L i Zheng X: Zaštitni učinci ehinakozida, jednog od feniletanoidnih glikozida, na H(2)O(2)-induciranu citotoksičnost u PC12 stanicama. Planta Med 75: 1499-1504, 2009. (monografija).

  16. Kuang R, Sun Y i Zheng X: Supresija dušikovog oksida uključena u zaštitni učinak ehinakozida na oštećenje PC12 stanica izazvano H2O2-. Nat Prod Commun 5: 571-574, 2010.

  17. Deng M, Zhao JY, Tu PF, Jiang Y, Li ZB i Wang YH: Echinacoside spašava neuronske stanice SHSY5Y od apoptoze izazvane TNFalpha. Eur J Pharmacol 505: 11-18, 2004.

  18. Geng X, Tian X, Tu P i Pu X: Neuroprotektivni učinci ehinakozida u mišjem MPTP modelu Parkinsonove bolesti. Eur J Pharmacol 564: 66-74, 2007.

  19. Zhao Q, Gao J, Li W i Cai D: Neurotrofični i neurospašavajući učinci ehinakozida u subakutnom MPTP mišjem modelu Parkinsonove bolesti. Brain Res 1346: 224-236, 2010.

  20. Zhu M, Lu C i Li W: Prolazna izloženost ehinakozidu dovoljna je za aktiviranje Trk signalizacije i zaštitu neuronskih stanica od rotenona. J Neurochem 124: 571-580, 2013.

  21. Wu Y, Li L, Wen T i Li YQ: Zaštitni učinci ehinakozida na hepatotoksičnost izazvanu ugljikovim tetrakloridom kod štakora. Toksikologija 232: 50-56, 2007.

  22. Li X, Gou C, Yang H, Qiu J, Gu T i Wen T: Echinacoside poboljšava akutno oštećenje jetre izazvano D-galaktozaminom plus lipopolisaharidom u miševa putem inhibicije apoptoze i upale. Scand J Gastroenterol 49: 993-1000, 2014.

  23. Zhang Y, Xing J, Ai T, Wen T, Guan L i Zhao J: Zaštita ehinakozida od akutne ozljede pluća uzrokovane oleinskom kiselinom u štakora. Free Radic Res 41: 798-805, 2007.


Mogli biste i voljeti