Određivanje lijekova za poboljšanje spola ilegalno dodano u zdravstvene proizvode od strane TLC-niskih kombinirana tehnologija

Sažetak:Utvrditi model otkrivanjalijekovi za poboljšanje seksaIlegalno dodana kromatografijom tankog sloja (TLC) i blizu infracrvene spektroskopije (NIｒS) kombinirana tehnologija, za brzu kvalitativnu i kvantitativnu analizu droga ilegalno dodane uProizvodi za zdravstvo． S the sadržaj kemijskih lijekovaU zdravstvenoj zaštiti se određuje HPLC metodom kao referentna vrijednost． TLC je korišten u studiji． Triklorometanski-metil alkohol-amonijev hidroksid (1 {0 ∶ 1 ∶ 0． 1) korišten je kao otapalo u razvoju, a ploča je otkrivena pod ultraljubičastom svjetiljkom． Niki spektar kemijskih komponentnih mjesta na TLC -u prikupio je niｒs． Brzi kvalitativni i kvantitativni model kemijskih lijekova utvrđen je korištenjem djelomične regresijske analize najmanjih kvadrata (PLS) u kombinaciji s metodom unakrsne validacije． I potvrđen za model． Uspostavio HPLC metodu analize s boljim stupnjem odvajanja i širokim linearnim rasponom． Uspostavili su modele analize TLC-nis sildenafila i noracetildenafila sa širokim linearnim rasponom, te bolje stabilne i predviđene rezultate． Koeficijent korelacije (ｒ2), korijenska srednja kvadratna pogreška validacije kalibracije (ｒmsecv) i korijenska srednja kvadratna pogreška predviđanja (ｒmsep) bili su {{1 0}．． 984, 0． 0 85 i 0． 081; 0． 982,0． 098 i 0． 087, odnosno． Koristeći TLC-niｒs model, otkriveno je da su 9 serija od 10 serija proizvoda za poboljšanje spola dodane sildenafil i nekvalificirana stopa od 90%, prosječno relativno odstupanje sadržaja sildenafila i noracetildenafila predviđenih bilo je 1． 86%, 1． 96%, odnosno． Rezultati su pokazali da se modeli analize TLC-Ni mogu koristiti za gornje kemijske komponente brzo određivanje u proizvodima za poboljšanje spola． Metoda s specifičnim i jednostavnom． Koji su osigurali ideje za brzo određivanje dodanih ilegalnih droga u zdravstvenim proizvodima．

 

Prirodni biljni dodaci za seksualne performanse

 

Ključne riječi: Proizvodi za zdravstvo; dodano ilegalno; Tlc-niｒ; HPLC; proizvod za poboljšanje spola

 

Kako se svijest javnosti o zdravstvenoj skrbi povećava, potražnja za zdravstvenim proizvodima raste, posebno zdravstveni proizvodi označeni kao tradicionalna kineska medicina. Zdravstveni proizvodi popularni su pojam za zdravu hranu, koji se u inozemstvu nazivaju dodaci prehrani. Nisu lijekovi i imaju funkciju regulacije ljudskih funkcija. Koriste ih određene skupine ljudi, ali nisu namijenjene liječenju bolesti [1]. Suočeni s iskušenjem velike dobiti, ilegalni dobavljači dodaju prekomjerne doze jeftinih kemijskih sirovina s očitim nuspojavama zdravstvenim proizvodima kako bi poboljšali učinkovitost proizvoda. To je uvelike poremetilo tržište zdravstvenih proizvoda moje zemlje i predstavljalo ozbiljnu prijetnju zdravlju ljudi. Na primjer, 2009. godine, pomoćni hipoglikemijski zdravstveni proizvod "Tangzhining kapsula" Xinjiang regije dodao je prekomjerne doze zabranjenog kemijskog lijeka glibenklamida, uzrokujući mnoge smrti. U 2014. godini, "Xianxian kapsula za mršavljenje" u provinciji Shanxi dodala je zabranjene kemijske lijekove Sibudramin i sildenafil, zbog čega su mnogi ljudi imali nuspojave ili čak umrijeli. Posljednjih godina, u nasumičnom inspekciji i procjeni zdravstvenih proizvoda, utvrđeno je da ilegalni proizvođači dodaju prekomjerne doze sildenafila proizvodima seksualnog zdravlja i tradicionalne pripravke za zdravlje kineske medicine kako bi prevarili potrošače, ozbiljno ugrožavajući zdravlje potrošača [2,3]; Slične pojave kao što su prekomjerne doze zabranjenih kemijskih lijekova poput fenafila, biguanida, furosemida i fenolftaleina u seksualnom zdravlju, hipoglikemijskih proizvoda i zdravstvenih proizvoda za mršavljenje pojavile su se u beskrajnom toku, a prikrivanje dodavanja postaje sve veće [4,5]; Takve se pojave često javljaju i u inozemstvu [6]. Ovi ilegalni akti s širokim utjecajem i velikom štetom zaslužuju duboko razmatranje od strane regulatornih tijela droga, a posebno je važno razviti brze metode uzorkovanja i otkrivanja tržišta.

Trenutno, metode otkrivanja koje se koriste za ilegalno dodavanje kemijskih lijekova u tradicionalnim kineskim lijekovima i zdravstvenim proizvodima uglavnom uključuju tanko slojnu kromatografiju (TLC) [7], tekuću kromatografiju visokih performansi (HPLC) [8], spektrometriju mase tekućine mase (LC-MS) [9], Speciometrij plinova i masa, masa (GC-MS) (GC-MS). Spektrometrija (RS) [11].
Među različitim metodama otkrivanja, LC-MS, GC-MS i IMS proučavani su više, ali zbog visoke cijene instrumenata i složene operacije, nisu ih lako promovirali i teško ih je popularizirati u urbanim i planinskim područjima s relativno zaostalim ekonomskim razvojem. TLC je jedna od četiri tradicionalne metode za identifikaciju lijekova. Brzi je, jednostavan i ima dobre efekte razdvajanja. Naširoko se koristi u kvalitativnoj i kvantitativnoj identifikaciji lijekova. Međutim, njegov nedostatak je taj što mora imati odgovarajuće referentne tvari ili referentne ljekovite materijale [12, 13]. Posljednjih godina razvijena je u blizini infracrvene spektroskopije (NIRS). Prikuplja informacije o apsorpciji vibracija i rotacije CH, OH, SH, NH, C=C i C {= O skupine detektirane tvari u bliskom infracrvenom spektru za kvalitativnu i kvantitativnu analizu tvari. Naširoko se koristi u poljoprivredi, nafti, kemijskoj industriji, duhanu i hrani. Trenutno se postupno primjenjuje na farmaceutsku i nadzornu industriju lijekova. Ima veliki razvojni potencijal u brzoj kvalitativnoj i kvantitativnoj otkrivanju i analizi lijekova [14, 15].

Stoga ovaj rad koristi postojeće popularne instrumente i testne metode za stvaranje kombinirane tehnologije TLC-NIRS. Uzimanje proizvoda seksualnog zdravlja kao primjer, uspostavljen je univerzalni kvalitativni i kvantitativni model otkrivanja za ilegalno dodavanje zabranjenih kemijskih lijekova za seksualno zdravlje. Može se koristiti učinkovito, brzo i jednostavno za probir i otkrivanje dodavanja zabranjenih kemijskih lijekova u tržišnim zdravstvenim proizvodima, smanjujući na taj način troškove otkrivanja.

1 instrumenti i testirani lijekovi

1.1 instrumenti

Fourier Transform Tensor 37 niｒ spektrometar (Bruker, Njemačka), Opus 5. 0 softver za analizu; LC -20 na tekućem kromatografu visoke performanse (Shimadzu, Japan), LC ROONSORD HORHOMATOGRAFIJA Radna stanica; BS224S elektronička analitička ravnoteža (Sartorius, Njemačka); Silika gel GF254 tanko slojevna ploča (Qingdao Ocean Biochemical Co., Ltd.).

 

1.2 test lijekova

Sildenafil ({510068-201401, 99,9%) i Narodenafil ({520039-201902, 96,5%) kupljeni su od Kineskog instituta za istraživanje hrane i lijekova, a strukture su prikazane na slici 1. Metanol je bio kromatografski čisti, a analitički su bili i kloroform. Zdravstveni uzorci bili su tržišni uzorci.

 

Sl. 1 strukture kemijskih lijekova koji poboljšavaju spol

 

2 metode i rezultata

2. 1 Priprema referentne otopine i otopine uzorka

Priprema referentne otopine: Uzmite otprilike 25 mg sildenafila i narendennafila, precizno ih odvažite, stavite ih u volumetrijsku tikvicu od 5 ml i otopite ih u metanolu kako bi pripremili mješovitu referentnu zalihu od oko 5 mg/ml svaka; Zatim uzmite otprilike 5 mg sildenafila i NarendensAfila, precizno ih odvažite, stavite ih u volumetrijsku tikvicu od 5 ml i otopite ih u metanolu kako biste pripremili jednu identifikacijsku referentnu otopinu od otprilike 1 mg/ml.

Priprema otopine uzorka: Uzmite dozu ovog proizvoda jednom, stavite je u volumetrijsku tikvicu od 5 ml, dodajte metanol i ultrazvuk za 3 0 min (100 W, 56 kHz), ohladite je, dodajte metanol u oznaku i filtrirate da biste dobili filtrat. Pri određivanju sadržaja točno izmjerite 1 ml svake otopine uzorka, otapajte ga u mobilnoj fazi na 25 ml i filtrirajte ga s 0,45 µM filter membranom. Budući da se masovne koncentracije komponenti otkrivenih u pozitivnim uzorcima (zdravstveni proizvodi s dodanim zabranjenim kemijskim lijekovima) uvelike razlikuju, volumen uzorkovanja može se na odgovarajući način povećati ili se otopina uzorka može na odgovarajući način razrijediti kako bi se njegova konačna koncentracija mase u linearnom rasponu.
Priprema pozitivne otopine uzorka: Budući da nije nacrtao pozitivan uzorak za Naringenfil, prazan uzorak (Huangjingbajitian kapsula, biologija Luoyang Kangti, rezultat ispitivanja je negativan) uzet je jednom, a dodano je odgovarajuće razrijeđeno referentno rješenje Naringenfila. Pozitivna otopina uzorka pripremljena je u skladu s metodom pripreme pod otopinom uzorka, tako da su koncentracije mase Naringenfil u otopini pozitivnog uzorka bile približno 5, 7,5 i 10 mg/ml, odnosno 4, 3 i 3 kopije svake masene koncentracije.

2. 2 kromatografska i spektralna stanja

2. 2. 1 HPLC kromatografski uvjeti

Phenomenex ODS C18 (25 0 mm × 4. 6 mm, 5 μm) Kromatografski stupac je korišten; 45% metanol (a) -55% 0. 3% vodena otopina fosforne kiseline (b) korištena je kao mobilna faza za eluciju 30 minuta; Brzina protoka bila je 1 ml/min, valna duljina detekcije bila je 290 nm; Temperatura stupca bila je 40 stupnjeva; Volumen ubrizgavanja bio je 10 μl.

 

2. 2. 2 TLC kromatografski uvjeti

Korištena je ploča s silikagelom GF254 tanko sloj, a kloroform-metanol amonijak (1 0: 1: 0. 1) korišten je kao otapalo za razvoj i isparavanje. Nakon sušenja u sušilici 1 sat, oznaka je pregledana pod ultraljubičastom svjetiljkom od 254 nm (vidi sliku 2).

 

2. 2. 3 Uvjeti stjecanja NIRS -a

Bruker NIRS sonda za čvrsto vlakno korištena je za mjerenje, s rasponom valnog broja od 12, 000 do 4, 000 cm -1, 64 skenira, rezolucija od 16 cm -1, temperature od 10 do 30 stupnjeva i i 30 stupnjeva. Kao referenca upotrijebljena je prazna silikagena gel GF254 tankog sloja, a spektar je prikupljen nakon oduzimanja pozadine. Svako mjesto kemijske komponente izmjereno je paralelno 5 puta, a NIRS informacije su spremljene.

 

2.3 Uspostavljanje metode određivanja sadržaja HPLC

2.3.1 Istraživanje linearnog odnosa

2. 0 ml mješovitog referentnog zaliha (sildenafil 5.25 mg/ml; narkolepsija 5.15 mg/ml) precizno je aspirirana i razrijeđena na 1 0 s metanolom, a zatim {}}}. 1. 0, 1.5, 2. {{2 {0}}, 2. 0, 2.5, 3. {{3 {32}}}, 3.5, 4. {34}, 5., 5. 7. {{4 0}}, 8. 0, 9. 0, 1 0. {{5 0}, 11. 13. 0, 14. {{6 {0}, 15. 0, 16. 0, 17. 0, 18. {7. 2 0. 0, 21. {{8 {82}}}}, 22. 0, 23. {86}}, 24. {88}}, 25. 26. 0, 27. 0, 28. 0, 29. {{1 {{1 {{1 {{0 6} 4}, 3}, 30.0, 30., 30., 30.0, 31. 36,0, 37.0, 38,0, 39,0, 40,0, 41,0, 42,0, 43.0, 44,0, 5 ml, otopi se u mobilnoj fazi i čine do 5 ml respektivno, dobro se trese.
Prema kromatografskim uvjetima pod "2.2.1", provedena je analiza uzoraka, određena je područja vrha, a jednadžba regresijskog linije izračunata je s vršnim područjem svake komponente kao ordinata (y) i masnom koncentracijom referentne supstance kao apscissa (x): sildenafil je y {} {}} {} {} {} {} {} {} {} {} {} 1}=0. 9989, linearni raspon 0. 0525 ~ 1.05 ug; Naphthol je y=1 × 106x {-3 184. 4, r=0. 9999, linearni raspon 0,0515 ~ 1,03 ug. Rezultati su pokazali da su gornje referentne tvari imale dobru linearnost unutar njihovih linearnih raspona.

 

2.3. 2 Preciznost, stabilnost, ponovljivost i test oporavka

Uzmite miješanu referentnu otopinu pod "2.3.1" i prazan uzorak (Huangjingbajitian kapsula, Luoyang Kangti Biološki, rezultat ispitivanja je negativan) i pripremite 6 uzoraka koje sadrže sildenafil i nardenafil paralelno prema metodi pod "2.1". Prema kromatografskim uvjetima pod "2.2.1", miješana referentna otopina ubrizgana je 6 puta kontinuirano radi preciznosti; Jedna od uzorki rješenja ubrizgana je na {0, 3, 6, 9, 12 i 24 sata za stabilnost; 6 otopina uzoraka pripravljena su paralelno za ponovljivost i oporavak, a svaki je uzorak ubrizgan jednom. Određena su vršna područja sildenafila i nardenafila, a izračunati su oporavak i njegova RSD vrijednost. Rezultati Prosječne stope oporavka sildenafila i nardenafila bile su 100. 16%, 100. 49%; Vrijednosti RSD -a bile su manje od 3% (n=6), što ukazuje da je instrument imao dobru preciznost, rješenje uzorka je bilo stabilno u roku od 24 sata, a metoda je imala dobar oporavak i ponovljivost.

 

2.3.3 Određivanje sadržaja

Precizno aspirirajte svaku otopinu uzorka, ubrizgajte i analizirajte prema kromatografskim uvjetima pod "2.2.1", mjerite 3 puta za svaku seriju, zabilježite područje vrha i izračunajte sadržaj. Rezultati pokazuju da je među 10 serija uzoraka seksualnog zdravlja 9 šarga sadržavalo zabranjeni kemijski lijek sildenafil, a dodana doza uvelike je varirala. Stopa detekcije bila je 90%. Rezultati su prikazani u tablici 1 i slici 3.

 

Tablica 1 Rezultati određivanja tvari ilegalno dodane u 10 proizvoda za poboljšanje spola (n=3)

 

Uzorak	Proizvođač	Težina uzorka	Sadržaj (mg/vrijeme)
Ekstrakt zlatnog cvijeta	Poljoprivredno sveučilište zapadne Kine	1 × 0.88 g	58.79 ± 1.03
Odbijajući insekte	Sveučilište znanosti i tehnologije u Hong Kongu	2 × 0.50 g	73.62 ± 0.21
Njemačka kamilica	Haiyun biološki	2 × 0.50 g	22.47 ± 0.23
Ranojutarnja rosa	Sveučilište znanosti i tehnologije u Hong Kongu	2 × 0.50 g	8.90 ± 0.03
Pelin	Američko stanište	2 × 0.50 g	61.83 ± 0.48
A. Niger	Poljoprivredno sveučilište zapadne Kine	2 × 0.50 g	45.20 ± 0.04
Zlatni konac	Sveučilište znanosti i tehnologije u Hong Kongu	2 × 0.50 g	Nije otkriveno

 

Sl. 3 HPLC od 10 proizvoda za poboljšanje spola

 

2.4 Uspostavljanje TLC-NIRS Kvalitativni model za seksualno zdravlje kemijskih lijekova

2.4.1 Prikupljanje spektralnih informacija

Prema uvjetima pod "2.2.3", prikupljeni su NIR -ovi referentnih mjesta identificirani nakon razvoja na tankoj slojevi TLC. Količine točaka miješane referentne otopine bile su 1, 2, 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45 i 50 µL, a volumen spota otopine uzorka bio je 2, 5 i 10 μl. Svako referentno mjesto miješane reference i uzorka s različitim količinama mjesta prikupljeno je 5 puta, a dijagram preklapanja NIRS prikazan je na slici 4. U pokusu, spektri miješane reference s različitim količinama mjesta odabrani su kao kalibracijski skup, a spektar uzoraka s različitim podacima bio je odabran kao da je predmet postavljen na to što je postavljeno postavljeno na lica Skup kalibracije.

Sl. 4 Izvorni nizovni spektri kemijskih lijekova