Koagulacija, receptori aktivirani proteazom i dijabetička bubrežna bolest: lekcije iz miševa s nedostatkom ENOS-a

Kontakt:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Koagulacija, receptori aktivirani proteazom i dijabetička bubrežna bolest: lekcije iz miševa s nedostatkom eNOS-a

Yuji Oe,1 Mariko Miyazaki1 i Nobuyuki Takahashi2

1 Odjel za nefrologiju, endokrinologiju i vaskularnu medicinu, diplomska škola Sveučilišta Tohoku

Medicina, Sendai, Miyagi, Japan

2Odjel za kliničku farmakologiju i terapiju, Fakultet farmaceutskih znanosti Sveučilišta Tohoku & Fakultet farmaceutskih znanosti, Sendai, Miyagi, Japan

Poznato je da disfunkcija endotelne sintaze dušikovog oksida (eNOS) pogoršava napredovanje i prognozu dijabetičke bubrežne bolesti (DKD). Jedan od mehanizama putem kojih se to postiže jest da su niske razine eNOS-a povezane s hiperkoagulabilnošću, što potiče oštećenje bubrega. U vanjskoj koagulacijskoj kaskadi, tkivni faktor (faktor III) i faktori koagulacije nizvodno, kao što je aktivni faktor X (FXa), pogoršavaju upalu aktivacijom receptora aktiviranih proteazom (PAR). Nedavno je pokazano da nedostatak ili smanjena ekspresija eNOS-a kod dijabetičkih miševa, kao modela uznapredovalog DKD-a, povećava razine faktora bubrežnog tkiva i ekspresije PAR1 i 2 u njihovim bubrezima. Nadalje, farmaceutska inhibicija ili genetska delecija koagulacijskih faktora ili PAR-ova ublažila je upalu kod DKD-a kod miševa kojima nedostaje eNOS. U ovom pregledu sažimamo odnos između eNOS-a, koagulacije i PAR-ova i predlažemo novu terapijsku opciju za liječenje pacijenata s DKD-om.

Ključne riječi: dijabetička glomeruloskleroza; faktor Xa; upala; faktor tkiva

Tohoku J. Exp. Med., rujan 2021., 255 (1), 1-8.

Ekstrakt cistanke može vrlo dobro pomoći kod bolesti bubrega

Broj bolesnika s dijabetičkom bubrežnom bolešću (DKD) u porastu je diljem svijeta (de Boer i sur. 2011.; Kainz i sur. 2015.; Ogurtsova i sur. 2017.). DKD je jedan od glavnih uzroka smrtnosti bolesnika s komplikacijama dijabetesa (Afkarian et al. 2013). Nadalje, DKD je proagresivan i glavni je uzrok završne faze bubrežne bolesti koja zahtijeva nadomjesnu bubrežnu terapiju (Gregg i sur. 2014.; Liyanage i sur. 2015.). U Japanu dijabetička nefropatija čini više od 39 posto novih pacijenata na dijalizi (Nitta et al. 2020.). Stoga je potreban razvoj novih terapijskih mogućnosti za liječenje bolesnika s DKD-om.

Sve je veći interes za ulogu koagulacijskog sustava u patogenezi DKB. Hiperkoagulabilnost je povezana s DKD (Goldberg 2009; Domingueti i sur. 2016). Pokazalo se da je povišena razina fibrinogena u krvi povezana s niskom procijenjenom brzinom glomerularne filtracije, visokom proteinurijom i ozbiljnom histološkom ozljedom, te je bila prediktor progresije u završni stadij bubrežne bolesti (Dalla Vestra et al. 2005; Pan et al. dr. 2018.; Zhang i dr. 2018.). Neka su istraživanja pokazala korelaciju između razine D-dimera, produkta razgradnje fibrina, i bubrežne disfunkcije kod DKD-a (Domingueti i sur. 2018.; Pan i sur. 2018.). Hiperkoagulabilnost kod DKD-a vjerojatno je određena višestrukim čimbenicima. Na primjer, sustav renin-angiotenzin-aldosteron aktivira tkivni faktor (TF, faktor III) i povećava trombotičke događaje (Dielis et al. 2005). Inače, hiperglikemija, dislipidemija, upala ili endotelna disfunkcija uključeni su u protrombotičko stanje u patogenezi DKD (Goldberg 2009).

Endotelna disfunkcija prisutna je kod DKD-a koja napreduje do mikrovaskularnih komplikacija (Goldberg 2009; Nakagawa et al. 2011). Poremećena proizvodnja endotelne sintaze dušikovog oksida (eNOS) ili smanjena aktivnost eNOS (npr. poremećena fosforilacija eNOS) obilježje je endotelne disfunkcije kod DKD (Nakagawa i sur. 2011.; Cheng i sur. 2012.). Pokazali smo da je gubitak ekspresije eNOS-a bio povezan s povišenjem razine TF-a i vanjske aktivnosti koagulacijskog sustava (Li et al. 2010; Wang et al. 2011a), što je usko povezano s trombotičkim događajima u bolesnika s kroničnim bubrežnim poremećajem. bolesti (Kolachalama et al. 2018).

koagulacijske proteaze, kao što je aktivni faktor FVII (FVIIa), aktivni faktor (FXa) i trombin, koji su prisutni u vanjskoj koagulacijskoj kaskadi, posreduju u ozljedi tkiva kroz mehanizam ovisan o receptoru aktiviranom proteazom (PAR) (Madhusudhan et al. 2016; Posma i dr. 2019). U ovom pregledu sažimamo nalaze dobivene od dijabetičkih miševa kojima nedostaje eNOS i raspravljamo o odnosu između puta koagulacije-PAR, razina eNOS-a i patogeneze DKD-a.

Put tkivnih faktora/receptora aktiviranih proteazom

Tkivni faktor (TF), poznat kao faktor III, transmembranski je protein od 47 kDa koji stupa u interakciju s faktorom VII (FVII) (Grover i Mackman 2018). Kompleks TF/FVIIa je aktivator vanjske kaskade koagulacije i katalizira aktivaciju FX i FIX. FXa i aktivirani kofaktor V (FVa) tvore protrombotski kompleks koji stvara trombin. Konačno, trombin pretvara fibrinogen u fibrin, što dovodi do stvaranja tromba (Grover i Mackman 2018). TF se eksprimira u vaskularnim glatkim mišićnim stanicama i adventicijskim fibroblastima. Pod upalnim uvjetima, njegova ekspresija je inducirana u endotelnim stanicama ili cirkulirajućim stanicama kao što su monociti (Østerud i Bjørklid 2006).

Proteazom aktivirani receptori (PAR) članovi su superobitelji G-protein spregnutih receptora, koja se sastoji od četiri PAR proteina (PAR1-4). PAR-ovi se podvrgavaju cijepanju proteazama na N-terminalnom kraju i aktiviraju se nakon vezanja na novi N-terminus koji sadrži vezani ligand. Četiri člana PAR (PAR1-4) aktiviraju specifične koagulacijske proteaze: kompleks TF i FVIIa aktivira PAR2, faktor Xa aktivira i PAR1 i PAR2, a trombin aktivira PAR1, PAR3 i PAR4 (Camerer et al. 2000; Coughlin 2005; Rothmeier i Ruf 2012; Zhao i dr. 2014). Odnos između TF, koagulacijskih proteaza i PAR prikazan je na slici 1.

Poznato je da su PAR-ovi široko izraženi u bubrežnim stanicama i uključeni su u patofiziologiju oštećenja bubrega. I PAR1 i PAR2 su eksprimirani u glomerularnim endotelnim stanicama, mezangijskim stanicama i tubularnim stanicama bubrega dobivenim od ljudi ili miševa; PAR2, PAR3 i PAR4 su izraženi u ljudskim podocitima; PAR1, PAR3 i PAR4 eksprimiraju se u mišjim podocitima (Tanaka i sur. 2005; Vesey i sur. 2005; Madhusudhan i sur. 2012; Dong i sur. 2015; Madhusudhan i sur. 2016).

Iako su dokazani štetni ili zaštitni učinci PAR-a kod ozljede bubrega, prikupljeni podaci sugeriraju da PAR-i pogoršavaju upalu stimulirajući proizvodnju citokina i kemokina (Rothmeier i Ruf 2012; Isermann 2017; Posma et al. 2019). U skladu s ovim otkrićem, agonisti PAR1 i PAR2 potiču ekspresiju upalnih medijatora, kao što su monocitni kemotaktički protein 1 (MCP1) i inhibitor aktivatora plazminogena-1 (PAI-1), i profibrotičkih molekule u endotelnim, mezangijalnim i tubularnim stanicama bubrega (Vesey i sur. 2005; Vesey i sur. 2013; Ellinghaus i sur. 2016; Waasdorp i sur. 2016; Oe i sur. 2019). U studijama in vivo, nedostatak PAR1 ili prisutnost inhibitora PAR1 smanjila je upalu u modelima polumjesecastog glomerulonefritisa ili opstruktivne ozljede bubrega (Cunningham et al. 2000; Waasdorp et al. 2019; Lok et al. 2020). Slično tome, terapijski učinci inhibicije PAR2 kod ozljeda bubrega bili su popraćeni smanjenjem upale u bubrezima (Hayashi i sur. 2016; Du i sur. 2017; Han i sur. 2019; Watanabe i sur. 2019).

Polimorfizmi endotelne sintaze dušikovog oksida u DKD

Endotelna sintaza dušikovog oksida (eNOS) jedna je od tri izoforme NOS-a i doprinosi stvaranju NO u vaskularnom endotelu (Walford i Loscalzo 2003). NO koji proizvodi eNOS u vaskularnom endotelu

Slika 1. Odnos između faktora zgrušavanja i receptora aktiviranih proteazom (PAR).

U kaskadi ekstrinzične koagulacije, tkivni faktor (TF) i aktivni FVII (FVIIa) kompleks aktiviraju proteazom aktivirani receptor 2 (PAR2), aktivni FX (FXa) aktivira i PAR1 i PAR2, a trombin cilja PAR1, PAR3 i PAR4. Cijepanje N-terminalne sekvence PAR-ova koagulacijskim proteazama otkriva novu N-terminalnu sekvencu koja djeluje kao vezani ligand i potiče upalu.

igra ključnu ulogu u regulaciji vaskularne relaksacije, protuupalnog djelovanja i prevencije stvaranja tromba (Walford i Loscalzo 2003). Poremećena ekspresija eNOS-a povezana je s razvojem DKD-a. Nedavno provedene meta-analize na ljudima otkrile su da su geni G894T (rs1799983), C-786T (rs2070744) i intron 4b/4a ​​(rs869109213) u eNOS (NOS3) usko povezani s razvoj DKD-a (Dellamea i sur. 2014; Zhang i sur. 2015; Dong i sur. 2018). Od ovih varijanti, uloga polimorfizma G894T (Glu298Asp) u funkciji eNOS-a dobro je opisana. Smanjena proizvodnja NO ili akumulacija nitrita naznačena je u transficiranim CHO stanicama s 298Asp u usporedbi s onima s 298Glu (Noiri et al. 2002). Zajedno, ovi rezultati pokazuju da je smanjena proizvodnja NO zbog disfunkcije eNOS-a važna za napredovanje DKD-a kod ljudi.

Miševi s dijabetesom bez eNOS-a kao model ljudske dijabetičke nefropatije

Uspostava pouzdanih pretkliničkih modela koji nalikuju ljudskom DKD-u ključna je za proučavanje novih terapijskih mogućnosti. Na temelju dokaza koji pokazuju povezanost između polimorfizma eNOS-a i DKD-a, nekoliko je studija pokazalo da su eNOS knock-out modeli DM tipa I i tipa II neki od uspješnih modela koji oponašaju ljudski DKD (Brosius et al. 2009; Azushima et al. 2018). Pokazalo se da dijabetički miševi izazvani streptozotocinom bez eNOS-a razvijaju ozbiljnu albuminuriju, mezangijalnu ekspanziju, zadebljanje glomerularne bazalne membrane i arteriolarnu hijalinozu, nalik ljudskoj DKD (Nakagawa et al. 2007). Slično, miševi s dijabetesom tipa II (DB/DB) bez eNOS-a pokazali su tešku glomerulosklerozu i albuminuriju (Zhao et al. 2006).

Povišeni TF kod dijabetičkih miševa kojima nedostaje eNOS

NO inhibira stvaranje tromba i agregaciju trombocita (Walford i Loscalzo 2003). Budući da je uočeno stvaranje glomerularnog tromba u dijabetičkih miševa kojima nedostaje eNOS (Nakagawa et al. 2007.), oslabljena ekspresija eNOS-a vjerojatno je povezana s povećanjem koagulacije ovisne o TF-u. Povezanost između eNOS-a i TF-a u DKD-u obrađena je u našim prethodnim izvješćima (Li i sur. 2010; Wang i sur. 2011a; Oe i sur. 2016) (Slika 2).

Smanjena ekspresija eNOS-a ili nedostatak ekspresije eNOS-a povećava aktivnost bubrežnog TF-a u dijabetičkih Akita miševa

Karakterizirali smo ekspresiju TF-a u dijabetičkih Akita (Ins2Akita/ plus) miševa, model tipa I DM, s različitim razinama ekspresije eNOS-a (eNOS plus / plus, eNOS plus /- i eNOS-/-) (Wang et al. 2011a ). Otkrili smo da je ozbiljnost DKD-a povezana sa smanjenom ekspresijom eNOS-a. Izlučivanje albumina mokraćom, glomeruloskleroza i smanjenje brzine glomerularne filtracije pogoršani su sljedećim redoslijedom: eNOS plus / plus; Ins2Akita/ plus < enos="" plus="" ;="" ins2akita/="" plus="">< enos-/-;="" ins2akita/="" plus="" .="" zanimljivo,="" ekspresija="" i="" aktivnost="" bubrežnog="" tf-a="" bili="" su="" povećani="" u="" enos="" plus="" ;="" ins2akita/="" plus="" i="" enos-/-;="" ins2akita/="" plus="" miševi="" u="" usporedbi="" s="" onima="" u="" enos="" plus/plus;="" ins2akita/="" plus="" miševi.="" taloženje="" glomerularnog="" fibrina="" također="" je="" bilo="" značajno="" u="" enos="" plus="" ;="" ins2akita/="" plus="" i="" enos-/-="" ;="" ins2akita/="" plus="" miševi.="" nadalje,="" bubrežna="" ekspresija="" tf="" mrna="" bila="" je="" u="" korelaciji="" s="" težinom="" bolesti,="" izlučivanjem="" albumina="" u="" urinu="" i="" ekspresijom="" bubrežnih="" upalnih="">

Neutralizirajuća protutijela protiv TF ublažavaju upalu u bubrezima dijabetičara

eNOS-Knockout miševi

Povećanje koagulacije ovisne o TF-u povezano je s povećanom upalom (Witkowski i sur. 2016.). Inhibicija koagulacijskog sustava ovisnog o TF-u ublažila je upalne bolesti, kao što je sepsa izazvana LPS-om (Pawlinski et al. 2010). Kako bismo razjasnili uzročnu vezu između upale i TF-a kod DKD-a, ispitali smo kratkoročni učinak neutralizirajućih protutijela protiv TF-a na upalu dijabetičkih bubrega kod miševa s nedostatkom eNOS-a (Li et al. 2010.). Rezultati su pokazali da je primjena anti-TF antitijela značajno smanjila razine bubrežne ekspresije gena povezanih s upalom i fibrozom kao što su Tnfa, Ccl2, Tgfb i Col4 mRNA u mišjim bubrezima četiri dana nakon neutralizacije TF-a.

Inhibitor koagulacije FXa ublažava ozljede bubrega kod dijabetičkih miševa kojima nedostaje eNOS

Koagulacija FXa, smještena nizvodno od TF/VIIa, također doprinosi upali kroz PAR-ovisne putove. Njegova uloga u DKD-u dokazana je na nekoliko životinjskih modela. Sumi i sur. (2011.) pokazali su da fondaparinuks, inhibitor FXa, smanjuje razinu proteina u mokraći, hipertrofiju glomerula i taloženje fibrina u DB/DB miševa. Terapeutski učinak inhibicije FXa kod DKD miševa kojima nedostaje eNOS pokazala je naša skupina (Oe et al. 2016.). Edoxaban (50 mg/kg/dan), oralni FXa inhibitor, primijenjen je na eNOS-/-; Ins2Akita/ plus miševi tijekom tri mjeseca, a rezultati su pokazali poboljšanje histoloških ozljeda, kao što je proliferacija mezangijalnog matriksa. Razine ekspresije upalnih gena u bubrezima smanjene su edoksabanom (Tablica 1). FXa aktivira i PAR1 i PAR2. Kako bismo razjasnili mehanizam oštećenja bubrega posredovanog FXa, pokazali smo da su protuupalni učinci FXa inhibitora slični onima koji su pronađeni u PAR2-/- miševa i PAR2-/- miševa s FXa inhibitorima . Ovi nalazi sugeriraju da je FXa vjerojatno uzrokovao upalu putem mehanizma koji ovisi o PAR2-u DKD-u. Nasuprot tome, edoksaban nije poboljšao oštećenje glomerula u eNOS plus/plus; Ins2Akita/ plus miševi, što sugerira da je terapeutski učinak inhibicije FXa bio povezan s hiperkoagulabilnošću ovisnom o eNOS-u kod dijabetičkih miševa tipa I.

Ostali čimbenici zgrušavanja u DKD

Budući da trombin cilja na PAR1, koji napreduje vaskularnu upalu (Chen i Dorling 2009), trombin vjerojatno pogoršava DKD. Međutim, dokazana je zaštitna ili štetna uloga trombina u patogenezi DKD; niske doze trombina (50 pM) su spriječene, dok su visoke doze trombina (20 nM) pogoršale glukozom induciranu apoptozu u podocitima (Wang et al. 201lb). Učinci inhibitora trombina kao što je dabigatran na dijabetičke miševe kojima nedostaje eNOS trebali bi se razjasniti u budućnosti.

Fibrinogen je uključen u različita upalna stanja. Zanimljivo je da je djelomično smanjenje ili odsutnost fibrinogena bilo korisno za modele bubrežne ishemije-reperfuzije ili opstruktivne fibroze bubrega (Sorensen et al. 2011; Craciun et al, 2014). Budući da je taloženje glomerularnog fibrina povećano kod dijabetičkih miševa kojima nedostaje eNOS (Nakagawa et al. 2007; Li et al. 2010; Wang et al. 201la), razjašnjavanje njegove uloge u patogenezi DKD-a zaslužuje daljnja istraživanja.

Tablica 1. Učinci inhibicije tkivnog faktora (TF), koagulacijskog faktora Xa (FXa) i receptora aktiviranog proteazom (PAR) kod miševa s dijabetičkom bubrežnom bolešću (DKD) sa smanjenom ili nedostatkom ekspresije eNOS.

Ekspresija PAR1 i PAR2 u dijabetičkih miševa kojima nedostaje eNOS

Povećana ekspresija PAR-a povezana je s oštećenjem bubrega. Mi i drugi smo pokazali da su razine ekspresije Par1 i/ili Par2 mRNA povećane u životinjskim modelima s dijabetičkom nefropatijom, ozljedom bubrega izazvanom adeninom, opstruktivnom fibrozom bubrega i ozljedom bubrega izazvanom cisplatinom (Chung et al. 2013; Hayashi i dr. 2016.; Oe i dr. 2016.; Watanabe i dr. 2019.). Nadalje, razine glomerularnog PAR2 proteina bile su povećane u DB/DB miševa, modela tipa II DM (Sumi et al. 2011). Pokazali smo povezanost između ekspresije PAR-a i nedostatka eNOS-a kod dijabetičkih miševa (Oe et al. 2016.). Razina ekspresije Par1 mRNA bila je značajno viša u eNOS−/−; Ins2Akita/ plus miševi nego u eNOS−/−; Ins2Akita/ plus i ne-DM miševi. Slično, ekspresija Par2 bila je značajno viša u eNOS−/−; Ins2Akita/ plus miševi nego kod ne-DM miševa. Nasuprot tome, razine Par4 mRNA nisu se razlikovale među genotipovima. Nedostatak eNOS-a pogoršava upalu kod DKD-a (Wang et al. 2011a). Budući da proupalni citokini navodno povećavaju PARs (Nystedt et al. 1996.), povišena upala uzrokovana nedostatkom eNOS-a vjerojatno izaziva bubrežnu ekspresiju Pars u DKD. Zajedno, rezultati naših studija sugeriraju da su razine ekspresije PAR1 i PAR2, slično slučaju TF, povećane u bubrezima s dijabetesom kada nedostaje eNOS (slika 2).

Delecija PAR2 ublažila je dijabetičku ozljedu bubrega kod miševa sa smanjenim eNOS-om

Mi i drugi bavili smo se ulogom PAR2 u DKD-u u prethodnim studijama. Delecija Par2 nije utjecala na oštećenje glomerula kod dijabetičkih divljih tipova Akita miševa (Ins2Akita/ plus) s eNOS-om (Oe et al. 2016.). Nadalje, dijabetički miševi izazvani STZ-om bez PAR2 pokazali su smanjenu albuminuriju u usporedbi s miševima divljeg tipa dijabetičara, ali povećanu mezangijsku ekspanziju (Waasdorp et al. 2017.). Zajedno, ovi rezultati pokazuju da ne postoje nikakvi ili blagi terapeutski učinci inhibicije PAR2 na oštećenje bubrega u ranim i blagim modelima DKD. Nasuprot tome, pokazali smo učinke nedostatka PAR2 na DKD kod dijabetičkih Akita miševa sa smanjenom ekspresijom eNOS-a (eNOS plus /-; Ins2Akita/ plus )(Oe et al. 2016). Nedostatak PAR2 značajno je smanjio razine izlučivanja albumina u urinu, mezangijalnu ekspanziju i debljinu GBM. Razine ekspresije proupalnih gena i gena povezanih s fibrozom, uključujući Tnfa, Tgfb i Col4, također su smanjene u bubrezima miševa. Ovi nalazi sugeriraju da je PAR2 patogen ne u ranoj, već u relativno uznapredovaloj dijabetičkoj glomerularnoj ozljedi uzrokovanoj nedostatkom eNOS (Tablica 1).

Dvostruka blokada PAR1 i PAR2 kod dijabetičkih miševa sa smanjenim eNOS-om

Pokazali smo da PAR1 i PAR2 kooperativno doprinose patogenezi DKB (Mitsui et al. 2020). U ovoj studiji, mužjaci tip I dijabetičara Akita miševa heterozigotni za eNOS (Ins2Akita/ plus; eNOS plus /-) korišteni su kao model DKD-a. Ovi miševi su tretirani nosačem, PAR1 antagonistom (E5555, 60 mg/kg/dan), PAR2 antagonistom (FSLLRY, 3 mg/kg/dan) ili E5555 plus FSLLRY tijekom 4 tjedna. Primjena samog antagonista PAR1 ili PAR2 oslabila je ozljedu glomerula, kao što je mezangijalna ekspanzija i taloženje kolagena IV, u usporedbi s primjenom nosača. Uočeni su sinergistički terapijski učinci inhibicije PAR1 i PAR2, a omjer albumina i kreatinina u urinu bio je značajno smanjen kada su i PAR1 i PAR2 bili blokirani s E5555 plus FSLLRY u usporedbi s primjenom nosača. Nadalje, dvostruka blokada PAR1 i PAR2 pomoću E5555 plus FSLLRY sinergistički je ublažila histološku ozljedu, uključujući mezangijalnu ekspanziju, glomerularnu infiltraciju makrofaga i taloženje kolagena tipa IV. Razine ekspresije gena povezanih s upalom i fibrozom u bubrezima također su smanjene (Tablica 1).

Usredotočili smo se na proupalne učinke agonista PAR1 i PAR2 na ljudske endotelne stanice (Mitsui et al. 2020.). Rezultati su pokazali da stimulacija s PAR1 i PAR2 agonistima sinergistički povećava razine ekspresije MCP1 i PAI1 mRNA. Učinak agonista PAR1 blokiran je inhibitorom NF-κB, dok je učinak agonista PAR2 blokiran inhibitorima NF-kB i MAPK. Zajedno, PAR1 i PAR2 kooperativno pridonose vaskularnoj upali i DKD kroz različite signalne putove (slika 3).

Zaključak

U ovom smo se pregledu usredotočili na odnos između puta koagulacijske proteaze-PAR i nedostatka eNOS-a u dijabetičkih miševa. Niska proizvodnja eNOS-a povezana je s hiperkoagulabilnošću i pojačanim PAR signaliziranjem, koji su štetni kod DKD-a. Ovi nalazi mogu ukazivati ​​na njihovu patološku ulogu u uznapredovaloj ili kasnijoj fazi DKD (npr. sa zatajenjem bubrega i/ili velikom proteinurijom). Oralni inhibitori FXa naširoko se koriste za prevenciju tromboze (Patel i sur. 2011.; Robertson i sur. 2015.). Njihova uporaba u liječenju DKD-a je obećavajuća opcija. Nadalje, neki antagonisti PAR1, uključujući atopaxar i vorapaxar, mogu se koristiti u antiagregacijskoj terapiji za prevenciju akutnog koronarnog sindroma

Slika 3. Različite uloge PAR1 i PAR2 u vaskularnoj upali i dijabetičkoj bubrežnoj bolesti (DKD).

U ljudskim endotelnim stanicama, agonist PAR1 povećava ekspresiju kemokina i citokina putem signalnog puta NF-κB, dok ih agonist PAR2 povećava putem signalnih putova NF-κB i MAPK. PAR1 i PAR2 sinergistički uzrokuju vaskularnu upalu preko različitih putova u DKD.

(Goto i sur. 2010.; Tricoci i sur. 2012.). Osim toga, postoji značajan napredak u razvoju antagonista PAR2 (Lim i sur. 2013.; Cheng i sur. 2017.; Jiang i sur. 2018.), a oni mogu biti nove terapijske mogućnosti za liječenje bolesnika s DKD-om.

Priznanja

Ovu studiju poduprla je Gonryo Medical Foundation. Željeli bismo zahvaliti Editageu (https://www. editage.com) za uređivanje na engleskom jeziku.

Sukob interesa

Autori izjavljuju da nema sukoba interesa.

Reference

Afkarian, M., Sachs, MC, Kestenbaum, B., Hirsch, IB, Tuttle, KR, Himmelfarb, J. i de Boer, IH (2013.) Bolest bubrega i povećani rizik smrtnosti kod dijabetesa tipa 2. J. Am. Soc. Nephrol., 24, 302-308.

Azushima, K., Gurley, SB & Coffman, TM (2018.) Modeliranje dijabetičke nefropatije u miševa. Nat. Rev. Nephrol., 14, 48-56.

Brosius, FC, Alpers, CE, Bottinger, EP, Breyer, MD, Coffman, TM, Gurley, SB, Harris, RC, Kakoki, M., Kretzler, M., Leiter, EH, Levi, M., McIndoe, RA , Sharma, K., Smithies, O., Susztak, K., et al. (2009) Mišji modeli dijabetičke nefropatije. J. Am. Soc. Nephrol., 20, 2503-2512.

Camerer, E., Huang, W. & Coughlin, SR (2000) Aktivacija receptora 2 aktiviranog proteazom faktorom VIIa ovisna o tkivnom faktoru i faktoru X. Proc. Natl. Akad. Sci. SAD, 97, 5255-5260.

Chen, D. & Dorling, A. (2009.) Kritične uloge trombina u akutnoj i kroničnoj upali. J. Thromb. Haemost., 7 Suppl 1, 122-126.

Cheng, H., Wang, H., Fan, X., Paueksakon, P. i Harris, RC (2012.) Poboljšanje aktivnosti endotelne sintaze dušikovog oksida usporava napredovanje dijabetičke nefropatije u DB/DB miševa. Kidney Int., 82, 1176-1183.

Cheng, RKY, Fiez-Vandal, C., Schlenker, O., Edman, K., Aggeler, B., Brown, DG, Brown, GA, Cooke, RM, Dumelin, CE, Doré, AS, Geschwindner, S. , Grebner, C., Hermansson, NO, Jazayeri, A., Johansson, P., et al. (2017) Strukturalni uvid u alosteričku modulaciju receptora aktiviranog proteazom 2. Nature, 545, 112-115.

Chung, H., Ramachandran, R., Hollenberg, MD & Muruve, DA (2013.) Proteinazom aktivirani receptor-2 transaktivacija receptora epidermalnog faktora rasta i signalni putovi transformirajućeg receptora faktora rasta doprinose fibrozi bubrega. J. Biol. Chem., 288, 37319-37331.

Coughlin, SR (2005) Receptori aktivirani proteazom u hemostazi, trombozi i vaskularnoj biologiji. J. Thromb. Haemost., 3, 1800-1814.

Craciun, FL, Ajay, AK, Hoffmann, D., Saikumar, J., Fabian, SL, Bijol, V., Humphreys, BD i Vaidya, VS (2014.) Farmakološko i genetsko smanjenje fibrinogena štiti od fibroze bubrega. Am. J. Physiol. Renal Physiol., 307, F471-484.

Cunningham, MA, Rondeau, E., Chen, X., Coughlin, SR, Holdworth, SR & Tipping, PG (2000.) Receptor 1 aktiviran proteazom posreduje upalu bubrega ovisnu o trombinu, stanično posredovanu u polumjesečastom glomerulonefritisu. J. Exp. Med., 191, 455-462.

Dalla Vestra, M., Mussap, M., Gallina, P., Bruseghin, M., Cernigoi, AM, Saller, A., Plebani, M. i Fioretto, P. (2005.) Markeri akutne faze upale i glomerularne strukturu u bolesnika s dijabetesom tipa 2. J. Am. Soc. Nephrol., 16 Suppl 1, S78-82.

de Boer, IH, Rue, TC, Hall, YN, Heagerty, PJ, Weiss, NS & Himmelfarb, J. (2011.) Vremenski trendovi u prevalenciji dijabetičke bolesti bubrega u Sjedinjenim Državama. JAMA, 305, 2532-2539.

Dellamea, BS, Pinto, LC, Leitão, CB, Santos, KG & Canani, LH (2014.) Polimorfizmi gena endotelne sintaze dušikovog oksida i rizik od dijabetičke nefropatije: sustavni pregled i meta-analiza. BMC Med. Genet., 15, 9.

Dielis, AW, Smid, M., Spronk, HM, Hamulyak, K., Kroon, AA, ten Cate, H. i de Leeuw, PW (2005.) Protrombotski paradoks hipertenzije: uloga renin-angiotenzina i kalikreina kininskih sustava. Hipertenzija, 46, 1236-1242.

Domingue, CP, Dusse, LM, Carvalho, M., de Sousa, LP, Gomes, KB i Fernandes, AP (2016.) Diabetes mellitus: veza između oksidativnog stresa, upale, hiperkoagulabilnosti i vaskularnih komplikacija. J. Komplikacije dijabetesa, koagulacija, eNOS i DKD 7

30, 738-745.

Domingue, CP, Fóscolo, RB, Dusse, LMS, Reis, JS, Carv- također, MDG, Gomes, KB i Fernandes, AP (2018.) Povezanost različitih biomarkera bubrežne funkcije s razinama D-dimera u bolesnika s dijabetesom tipa 1 melitus (bubrežni biomarkeri i D-dimer u dijabetesu). Arh. Endocrinol. Metab., 62, 27-33.

Dong, J., Peng, Y., Wang, Y. i Zhang, Y. (2018.) Uloge polimorfizama gena endotelne sintaze dušikovog oksida u dijabetes melitusu i s njim povezanim vaskularnim komplikacijama: sustavni pregled i meta-analiza. Endokrini, 62, 412-422.

Dong, W., Wang, H., Shahzad, K., Bock, F., Al-Dabet, MM, Ranjan, S., Wolter, J., Kohli, S., Hoffmann, J., Dhople, VM, Zhu, C., Lindquist, JA, Esmon, CT, Gröne, E., Gröne, HJ, et al. (2015) Aktivirani protein C ublažava ishemiju bubrega-reperfuzijsku ozljedu ograničavajući javno mokrenje proteina koji veže Y-kutiju-1. J. Am. Soc. Nephrol., 26, 2789-2799.

Du, C., Zhang, T., Xiao, X., Shi, Y., Duan, H. i Ren, Y. (2017.) Receptor aktiviran proteazom-2 potiče upalu epitela tubula bubrega inhibicijom autofagije putem PI3K/Akt/mTOR signalni put. Biochem. J., 474, 2733-2747.

Ellinghaus, P., Perzborn, E., Hauenschild, P., Gerdes, C., Heitmeier, S., Visser, M., Summer, H. i Laux, V. (2016.) Izražavanje pro- upalni geni u ljudskim endotelnim stanicama: usporedba rivaroksabana i dabigatrana. Thromb. Rez.,

142, 44-51.

Goldberg, RB (2009) Citokini i citokinima slični markeri upale, endotelna disfunkcija i neuravnotežena koagulacija u razvoju dijabetesa i njegovih komplikacija. J. Clin. Endocrinol. Metab., 94, 3171-3182.

Goto, S., Ogawa, H., Takeuchi, M., Flather, MD & Bhatt, DL; J-LANCELOT (Japanese-Lesson from Antagonizing the Cellular Effect of Thrombin) Istraživači (2010.) Dvostruko slijepe, placebom kontrolirane studije II. faze antagonista receptora 1 aktiviranog proteazom E5555 (atopaxar) u japanskih pacijenata s akutnim koronarnim sindromom ili visokorizična koronarna arterijska bolest. Eur. Heart J., 31, 2601-2613.

Gregg, EW, Williams, DE & Geiss, L. (2014.) Promjene u komplikacijama povezanim s dijabetesom u Sjedinjenim Državama. N. engl. J. Med., 371, 286-287.

Grover, SP & Mackman, N. (2018) Tkivni čimbenik: bitan posrednik hemostaze i pokretač tromboze. Arterioskler. Thromb. Vasc. Biol., 38, 709-725.

Han, Y., Tian, ​​L., Ma, F., Tesch, G., Vesey, DA, Globe, GC, Lohman, RJ, Morais, C., Suen, JY, Fairlie, DP i Nikolić-Paterson, DJ (2019) Farmakološka inhibicija receptora aktiviranog proteazom-2 smanjuje stvaranje polumjeseca kod nefrotoksičnog serumskog nefritisa štakora. Clin. Exp. Pharmacol. Physiol., 46,

456-464.

Hayashi, S., Oe, Y., Fushimi, T., Sato, E., Sato, H., Ito, S. i Takahashi, N. (2016.) Proteazom aktivirani receptor 2 pogoršava adeninom induciranu bubrežnu tubulointersticijsku ozljedu u miševi. Biochem. Biophys. Res. Commun.,483, 547-552.

Isermann, B. (2017.) Homeostatski učinci signalizacije ovisne o koagulacijskoj proteazi i receptora aktiviranih proteazom. J. Thromb. Haemost., 15, 1273-1284.

Jiang, Y., Yau, MK, Lim, J., Wu, KC, Xu, W., Suen, JY & Fairlie, DP (2018.) Snažan antagonist receptora 2 aktiviranog proteazom koji inhibira višestruke signalne funkcije kod raka kod ljudi Stanice. J. Pharmacol. Exp. Ther., 364, 246-257.

Kainz, A., Hronsky, M., Stel, VS, Jager, KJ, Geroldinger, A., Dunkler, D., Heinze, G., Tripepi, G. i Oberbauer, R. (2015.) Predviđanje prevalencije kronične bolesti bubrega u dijabetičara u zemljama Europske unije do 2025. Nephrol. Biraj. Transplant., 30 Suppl 4, iv113-118.

Kolachalama, VB, Shashar, M., Alousi, F., Shivanna, S., Rijal, K., Belghasem, ME, Walker, J., Matsuura, S., Chang, GH, Gibson, CM, Dember, LM, Francis, JM, Ravid, K. & Chitalia, VC (2018) Uremička otopina-aril ugljikovodik receptor-osovina faktora tkiva povezuje se s trombozom nakon vaskularne ozljede kod ljudi. J. Am. Soc. Nephrol., 29, 1063- 1072.

Li, F., Wang, CH, Wang, JG, Thai, T., Boysen, G., Xu, L., Turner, AL, Wolberg, AS, Mackman, N., Maeda, N. i Takahashi, N. (2010.) Povišena ekspresija tkivnog faktora doprinosi pogoršanju dijabetičke nefropatije kod miševa kojima nedostaje eNOS i koji su hranjeni hranom bogatom mastima. J. Thromb. Haemost., 8, 2122-2132.

Lim, J., Iyer, A., Liu, L., Suen, JY, Lohman, RJ, Seow, V., Yau, MK, Brown, L. i Fairlie, DP (2013.) Pretilost izazvana prehranom, upala masnog tkiva , a metabolička disfunkcija u korelaciji s ekspresijom PAR2 oslabljena je antagonizmom PAR2. FASEB J., 27, 4757-4767.

Liyanage, T., Ninomiya, T., Jha, V., Neal, B., Patrice, HM, Okpechi, I., Zhao, MH, Lv, J., Garg, AX, Knight, J., Rodgers, A ., Gallagher, M., Kotwal, S., Cass, A. i Perković, V. (2015.) Pristup liječenju završne bubrežne bolesti širom svijeta: sustavni pregled. Lancet, 385, 1975-1982.

Lok, SWY, Yiu, WH, Li, H., Xue, R., Zou, Y., Li, B., Chan, KW, Chan, LYY, Leung, JCK, Lai, KN & Tang, SCW

(2020.) Antagonist PAR-1 vorapaxar ublažava ozljedu bubrega i tubulointersticijsku fibrozu. Clin. Sci. (Lond.), 134, 2873-2891.

Lv, B., Wang, H., Tang, Y., Fan, Z., Xiao, X. & Chen, F. (2009.) Protein iz kutije 1 grupe visoke mobilnosti inducira ekspresiju tkivnog faktora u vaskularnim endotelnim stanicama putem aktivacije NF-kappaB i Egr-1. Thromb. Haemost., 102, 352-359.

Madhusudhan, T., Kerlin, BA & Isermann, B. (2016.) Sve veća uloga koagulacijskih proteaza u bolesti bubrega. Nat. Rev. Nephrol., 12, 94-109.

Madhusudhan, T., Wang, H., Straub, BK, Gröne, E., Zhou, Q., Shahzad, K., Müller-Krebs, S., Schwenger, V., Gerlitz, B., Grinnell, BW, Griffin, JH, Reiser, J., Gröne, HJ, Esmon, CT, Nawroth, PP, et al. (2012.) Za citoprotektivno signaliziranje aktiviranim proteinom C potreban je proteazom aktivirani receptor-3 u podocitima. Krv, 119, 874-883.

Mitsui, S., Oe, Y., Sekimoto, A., Sato, E., Hashizume, Y., Yamakage, S., Kumakura, S., Sato, H., Ito, S. i Takahashi, N. ( 2020) Dvostruka blokada receptora 1 i 2 aktiviranog proteazom dodatno poboljšava dijabetičku bolest bubrega. Am. J. Physiol. Renal Physiol., 318, F1067-F1073.

Nakagawa, T., Sato, W., Glushakova, O., Heinig, M., Clarke, T., Campbell-Thompson, M., Yuzawa, Y., Atkinson, MA, Johnson, RJ & Croker, B. ( 2007) Miševi s nokautom endotelne sintaze dušikovog oksida s dijabetesom razvijaju uznapredovalu dijabetičku nefropatiju. J. Am. Soc. Nephrol., 18, 539-550.

Nakagawa, T., Tanabe, K., Croker, BP, Johnson, RJ, Grant, MB, Kosugi, T. i Li, Q. (2011.) Endotelna disfunkcija kao potencijalni čimbenik dijabetičke nefropatije. Nat. Rev. Nephrol., 7, 36-44.

Nitta, K., Goto, S., Masakane, I., Hanafusa, N., Taniguchi, M., Hasegawa, T., Nakai, S., Wada, A., Hamano, T., Hoshino, J., Joki, N., Abe, M., Yamamoto, K. i Nakamoto, H.; Odbor za registar bubrežnih podataka Japanskog društva za dijaliznu terapiju (2020.) Godišnje izvješće o podacima o dijalizi za 2018., JSDT registar bubrežnih podataka: metode istraživanja, podaci o ustanovi, incidencija, prevalencija i smrtnost. Ren. Zamijeniti. Ther., 6, 41.

Noiri, E., Satoh, H., Taguchi, J., Brodsky, SV, Nakao, A., Ogawa, Y., Nishijima, S., Yokomizo, T., Tokunaga, K. i Fujita, T. (2002. ) Povezanost polimorfizma eNOS Glu298Asp sa završnim stadijem bubrežne bolesti. Hipertenzija, 40, 535-540.

Nystedt, S., Ramakrishnan, V. & Sundelin, J. (1996.) Receptor 2 aktiviran proteinazom je induciran posrednicima upale u ljudskim endotelnim stanicama. Usporedba s receptorom za trombin. J. Biol. Chem., 271, 14910-14915.

Oe, Y., Fushima, T., Sato, E., Sekimoto, A., Kisu, K., Sato, H., Sugawara, J., Ito, S. i Takahashi, N. (2019) Aktivirano proteazom receptor 2 štiti od VEGF inhibitora induciranog 8 Y. Oe et al. ozljeda glomerularnog endotela i podocita. Sci. Rep., 9, 2986.

Oe, Y., Hayashi, S., Fushima, T., Sato, E., Kisu, K., Sato, H., Ito, S. i Takahashi, N. (2016.) Koagulacijski faktor Xa i receptor aktiviran proteazom 2 kao nove terapijske mete za dijabetičku nefropatiju. Arterioskler. Thromb. Vasc. Biol., 36, 1525- 1533.

Ogurtsova, K., da Rocha Fernandes, JD, Huang, Y., Linnenkamp, ​​U., Guariguata, L., Cho, NH, Cavan, D., Shaw, JE & Makaroff, LE (2017) IDF Atlas dijabetesa: Global procjene prevalencije dijabetesa za 2015. i 2040. Diabetes Res. Clin. Pract., 128, 40-50.

Østerud, B. & Bjørklid, E. (2006.) Izvori tkivnog faktora. Semin. Thromb. Hemost., 32, 11-23.

Owens, AP, Passam, FH, Antoniak, S., Marshall, SM, McDaniel, AL, Rudel, L., Williams, JC, Hubbard, BK, Dutton, JA, Wang, J., Tobias, PS, Curtiss, LK , Daugherty, A., Kirchhofer, D., Luyendyk, JP, et al. (2012) Simvastatin inhibira aktivaciju koagulacije ovisno o faktoru monocitnog tkiva u hiperkolesterolemičnih miševa i majmuna. J. Clin. Invest., 122, 558-568.

Pan, L., Ye, Y., Wo, M., Bao, D., Zhu, F., Cheng, M., Ni, X. & Fei, X. (2018.) Klinički značaj hemostatskih parametara u predviđanju za dijabetes melitus tipa 2 i dijabetičku nefropatiju. Dis. Markeri, 2018, 5214376.

Patel, MR, Mahaffey, KW, Garg, J., Pan, G., Singer, DE, Hacke, W., Breithardt, G., Halperin, JL, Hankey, GJ, Piccini, JP, Becker, RC, Nessel, CC, Paolini, JF, Berkowitz, SD, Fox, KA, et al. (2011.) Rivaroksaban u odnosu na varfarin u nevalvularnoj fibrilaciji atrija. N. engl. J. Med.,

365, 883-891. Pawlinski, R., Wang, JG, Owens, AP, Williams, J., Antoniak, S., Tencati, M., Luther, T., Rowley, JW, Low, EN, Weyrich, AS i Mackman, N. ( 2010) Hematopoetski i nehematopoetski stanični tkivni faktor aktivira kaskadu koagulacije u endotoksemičnih miševa. Krv, 116, 806-814. Posma, JJ, Grover, SP, Hisada, Y., Owens, AP, Antoniak, S., Spronk, HM & Mackman, N. (2019) Uloge koagulacijskih proteaza i PAR (proteazom aktiviranih receptora) u mišjim modelima upale bolesti. Arterioskler. Thromb. Vasc. Biol., 39, 13-24.

Robertson, L., Kesteven, P. & McCaslin, JE (2015.) Oralni izravni inhibitori trombina ili oralni inhibitori faktora Xa za liječenje duboke venske tromboze. Cochrane Database Syst. Rev.,

CD010956.

Rogero, MM & Calder, PC (2018.) Pretilost, upala, receptor 4 sličan naplati i masne kiseline. Hranjive tvari, 10, 432.

Rothmeier, AS & Ruf, W. (2012.) Signalizacija receptora 2 aktiviranog proteazom u upali. Semin. Immunopathol. , 34 , 133-149.

Samad, F. & Ruf, W. (2013.) Upala, pretilost i tromboza. Krv, 122, 3415-3422.

Shrestha, C., Ito, T., Kawahara, K., Shrestha, B., Yamakuchi, M., Hashiguchi, T. i Maruyama, I. (2013.) Palmitat zasićene masne kiseline inducira izvanstanično oslobađanje histona H3: a moguća mehanička osnova za upalu i trombozu uzrokovanu prehranom s visokim udjelom masti. Biochem. Biophys. Res. Commun., 437, 573-578. Sörensen, I., Susnik, N., Inhester, T., Degen, JL, Melk, A., Haller,

H. & Schmitt, R. (2011.) Fibrinogen, djelujući kao mitogen za tubulointersticijske fibroblaste, potiče fibrozu bubrega. Kidney Int., 80, 1035-1044.

Sumi, A., Yamanaka-Hanada, N., Bai, F., Makino, T., Mizukami, H. & Ono, T. (2011.) Uloge koagulacijskog puta i faktora Xa u progresiji dijabetičke nefropatije u DB/ DB miševi. Biol. Pharm. Bull., 34, 824-830.

Tanaka, M., Arai, H., Liu, N., Nogaki, F., Nomura, K., Kasuno, K., Oida, E., Kita, T. i Ono, T. (2005.) Uloga koagulacije faktor Xa i proteazom aktivirani receptor 2 u proliferaciji ljudskih mezangijskih stanica. Kidney Int., 67, 2123-2133.

Tricoci, P., Huang, Z., Held, C., Moliterno, DJ, Armstrong, PW, Van de Werf, F., White, HD, Aylward, PE, Wallentin, L., Chen, E., Lokhnygina, Y., Pei, J., Leonardi, S., Rorick, TL, Kilian, AM, et al. (2012) Antagonist trombinskog receptora vorapaksar u akutnim koronarnim sindromima. N. engl. J. Med., 366, 20-33.

Vesey, DA, Cheung, CW, Kruger, WA, Poronnik, P., Gobe, G. & Johnson, DW (2005.) Trombin stimulira proupalne i proliferativne odgovore u primarnim kulturama stanica ljudskih proksimalnih tubula. Kidney Int., 67, 1315-1329.

Vesey, DA, Suen, JY, Seow, V., Lohman, RJ, Liu, L., Gobe, GC, Johnson, DW & Fairlie, DP (2013) PAR2-inducirani upalni odgovori u tubularnom epitelu ljudskog bubrega Stanice. Am. J. Physiol. Renal Physiol., 304, F737-750.

Waasdorp, M., de Rooij, DM, Florquin, S., Duitman, J. & Spek, CA (2019.) Receptor aktiviran proteazom-1 doprinosi oštećenju bubrega i intersticijalnoj fibrozi tijekom kronične opstruktivne nefropatije. J. Cell. Mol. Med., 23, 1268-1279.

Waasdorp, M., Duitman, J., Florquin, S. & Spek, CA (2016.) Nedostatak receptora aktiviranog proteazom-1 štiti od dijabetičke nefropatije izazvane streptozotocinom kod miševa. Sci. Rep., 6, 33030.

Waasdorp, M., Duitman, J., Florquin, S., Spek, CA i Spek, AC (2017.) Receptor 2 aktiviran proteazom u dijabetičkoj nefropatiji: dvosjekli mač. Am. J. Transl. Res., 9, 4512-4520.

Walford, G. & Loscalzo, J. (2003.) Dušikov oksid u vaskularnoj biologiji.

J. Thromb. Haemost., 1, 2112-2118.

Wang, CH, Li, F., Hiller, S., Kim, HS, Maeda, N., Smithies, O. & Takahashi, N. (2011a) Umjereno smanjenje endotelnog NOS-a u miševa usporedivo s onim povezanim s ljudskim NOS3 varijanti pogoršava dijabetičku nefropatiju. Proc. Natl. Akad.

Sci. SAD, 108, 2070-2075.

Wang, H., Madhusudhan, T., He, T., Hummel, B., Schmidt, S., Vinnikov, IA, Shahzad, K., Kashif, M., Muller-Krebs, S., Schwenger, V. , Bierhaus, A., Rudofsky, G., Nawroth, PP & Isermann, B. (2011.) Niska, ali kontinuirana aktivacija koagulacije poboljšava glukozom induciranu apoptozu podocita: zaštitni učinak faktora V Leidena u dijabetičkoj nefropatiji. Krv, 117, 5231-5242.

Watanabe, M., Oe, Y., Sato, E., Sekimoto, A., Sato, H., Ito, S. i Takahashi, N. (2019) Proteazom aktivirani receptor 2 pogoršava nefrotoksičnost izazvanu cisplatinom. Am. J. Physiol. Renal Physiol., 316, F654-F659.

Witkowski, M., Landmesser, U. i Rauch, U. (2016.) Tkivni faktor kao poveznica između upale i koagulacije. Trendovi Cardiovasc. Med., 26, 297-303.

Zhang, J., Wang, Y., Zhang, R., Li, H., Han, Q., Wu, Y., Wang, S., Guo, R., Wang, T., Li, L. i Liu, F. (2018.) Fibrinogen u serumu predviđa dijabetički ESRD u bolesnika s dijabetesom tipa 2. Diabetes Res. Clin. Pract., 141, 1-9.

Zhang, Y., Xiao, HQ, Zeng, XT, Zuo, HX & Xu, YC (2015.) Povezanosti između polimorfizama endotelne sintaze dušikovog oksida i rizika od dijabetičke nefropatije: ažurirana meta-analiza. Ren. Neuspjeh, 37, 312-326.

Zhao, HJ, Wang, S., Cheng, H., Zhang, MZ, Takahashi, T., Fogo, AB, Breyer, MD & Harris, RC (2006.) Nedostatak endotelne sintaze dušikovog oksida dovodi do ubrzane nefropatije kod dijabetičkih miševa. J. Am. Soc. Nephrol., 17, 2664-2669.

Zhao, P., Metcalf, M. & Bunnett, NW (2014.) Pristrano signaliziranje receptora aktiviranih proteazom. Ispred. Endocrinol. (Lausanne), 5, 67.