Predviđanje i provjera mehanizma i provjera pustinjskog ciganchea u liječenju upalne bolesti crijeva ⅱ
Nov 15, 2024
| Složeni naziv (kineski) | TCMSP ID | Molekularna masa | Usmena bioraspoloživost |
|---|---|---|---|
| -sitosterol (植物甾醇) | Mol000358 | 36.91 | 0.75 |
| anchidonolol (安诺炼) | Mol005320 | 45.57 | 0.20 |
| takvillinolol (苏沟酚) | Mol005384 | 57.52 | 0.56 |
| Yangambul (杨安补) | Mol007563 | 57.53 | 0.81 |
| kvercitrin (槲皮素) | Mol000098 | 46.43 | 0.28 |
| myricetin (桑椹素) | Mol001454 | 37.05 | 0.68 |
| acetozid (毛蕨花酷) | Mol003333 | 2.94 | 0.62 |
| ekdisteroid (脱皮激素) | Mol003734 | 3.14 | 0.38 |
| poliumusid (金合欢苷) | Na | Na | Na |
| Cistanoside A (肥皂树 A) | Mol008856 | 3.62 | 0.36 |
| Cistanoside B (肥皂树 B) | Mol008872 | 4.27 | 0.35 |
| Cistanoside C (肥皂树 C) | Na | Na | Na |
| Cistanoside D (肥皂树 D) | Mol008882 | 5.19 | 0.69 |
| Tubulozid A (管花草 A) | Na | Na | Na |
| Tubulozid B (管花草 B) | Na | Na | Na |
| ISOACREOSID (异亮芨芨草) | Mol107795 | 1.52 | 0.66 |
| 2- acetilakteosid (乙酰柠檬晶) | Na | Na | Na |
| L-arabinoza (l- 阿拉伯糖) | Mol010200 | 54.12 | 0.03 |
| galaktozid (半乳糖) | Mol010203 | 10.22 | 0.55 |
| Dulciol (半乳醇) | Na | Na | Na |
| D-glukarna kiselina (D- 葡萄糖酸) | Mol012957 | 60.80 | 0.06 |
| manitol (甘露醇) | Mol000003 | 17.73 | 0.03 |
| fruktoza (果糖) | Mol000053 | 1.68 | 0.03 |
| ksiloza (木糖) | Mol000731 | 58.74 | 0.03 |
| glukoza (葡萄糖) | Mol000734 | 24.44 | 0.03 |
| Rhamnoza (鼠李糖) | Mol004690 | 40.73 | 0.03 |
| saharoza (蔗糖) | Mol000842 | 7.17 | 0.23 |
| mannoza (甘露糖) | Mol000951 | 1.76 | 0.03 |
Evo tablice prevedena na engleski:
| Složeni naziv (kineski) | TCMSP ID | Molekularna masa | Usmena bioraspoloživost |
|---|---|---|---|
| fruktoza (果糖) | Mol000053 | 1.68 | 0.03 |
| ksiloza (木糖) | Mol000731 | 58.74 | 0.03 |
| glukoza (葡萄糖) | Mol000734 | 24.44 | 0.03 |
| Rhamnoza (鼠李糖) | Mol004690 | 40.73 | 0.03 |
| saharoza (蔗糖) | Mol000842 | 7.17 | 0.23 |
| mannoza (甘露糖) | Mol000951 | 1.76 | 0.03 |
| Cistanin (肉桂素) | Mol008855 | 71.78 | 0.06 |
| Cistahlorin (肉桂苷素) | Na | Na | Na |
| Kankanosid A (甘菊苷 A) | Na | Na | Na |
| Kankanosid B (甘菊苷 B) | Na | Na | Na |
| 8- epiloganska kiselina (8- 表乙酸) | Mol003203 | 98.51 | 0.09 |
| glukozid (榈苷) | Na | Na | Na |
| liriodendrin (鹤掌枫脂素) | Mol007927 | 5.19 | 0.29 |
| Citrusin A (柑橘素 A) | Mol013438 | 25.04 | 0.73 |
| Palmitinska kiselina (棕榈酸) | Mol000069 | 19.30 | 0.10 |
| niacin (烟酸) | Mol000421 | 47.65 | 0.02 |
Slika 1 Mreža interakcije "lijek-informatički sastojci"
3.1.4 Analiza obogaćivanja i KEGG
Kao što je prikazano na slikama 3 i 4, biološki proces Cistanche pustinikole u liječenju IBD -a uglavnom je povezan s fosforilacijom proteina, negativnom regulacijom apoptoze, odgovorom na egzogene podražaje itd., Uglavnom uključivanje signalnih putova poput inhibicijskog otpora PI3K/AKT i EGFR.
3.1.5 Provjera molekularnog pristajanja
Rezultati verifikacije molekularnog pristajanja (tablica 2) pokazuju da su energije vezanja cilja jezgre i komponente jezgre sve manje od -4. 7 kJ/mol, što ukazuje da se molekule liganda mogu dobro vezati za protein receptora. Među njima je vezana energija Akt1 i -sitosterola najbolja kombinacija.
Novi oralni dodatak biljka Cistanche za zatvor
Podržavajuća usluga Wecistanche-a-najveći izvoznik Cistanchea u Kini:
E -pošta: wallence.suen@wecistanche.com
Whatsapp/tel: +86 15292862950
3.2 Rezultati eksperimenta na životinjama
3.2.1 Učinak CE na tjelesnu težinu miša
U usporedbi s praznom kontrolnom skupinom, tjelesna težina miševa u grupi modela značajno je smanjena (p ＜ ＜ ＜ ＜ {{0}}. 0 1); U usporedbi s skupinom modela, tjelesna težina miševa u pozitivnoj kontrolnoj skupini i dozama CE značajno je povećana (p ＜ 0,05 ili p ＜ 0,01). Rezultati su prikazani u tablici 3.
Slika 4 KEGG Analiza potencijalnih ciljeva Cistanche Deserticola u liječenju IBD -a
Tablica 2 Rezultati jezgrenih komponenti i ciljanih proteina jezgre (KJ/MOL)
| Spoj | TNF | Acti | Stat3 | Egfr | SRC |
|---|---|---|---|---|---|
| Oleanolna kiselina | -6.2 | -10.0 | -7.9 | -7.6 | -8.6 |
| Ursolna kiselina | -5.2 | -10.0 | -8.0 | -7.7 | -8.0 |
| Glicirrhetinska kiselina | -6.4 | -11.3 | -8.0 | -9.2 | -8.3 |
| 18 - glikorrhetinska kiselina | -4.8 | -6.8 | -5.2 | -4.8 | -5.5 |
Tablica 3 tjelesna težina, DAI, duljina debelog crijeva i patološki rezultat miševa u svakoj skupini (x ± s)
| Skupina | n | Težina (g) | Duljina tijela (CM) | Dai (%) | Patološki rezultat |
|---|---|---|---|---|---|
| Kontrolirati | 8 | 20.84 ± 0.61 | 7.48 ± 0.18 | 0 | 0.13 ± 0.22 |
| Model | 7 | 14.24 ± 0.92a | 5.77 ± 0.35* | 3.30 ± 0.50* | 2.85 ± 0.61* |
| Niska doza | 7 | 17.59 ± 0.75b | 7.47 ± 0.70b | 1.99 ± 0.45b | 0.93 ± 0.36b |
| CE niska doza | 7 | 16.23 ± 0.99b | 7.27 ± 0.42b | 2.66 ± 0.48b | 2.22 ± 0.60b |
| CE srednja doza | 8 | 17.07 ± 0.67b | 7.37 ± 0.34b | 2.06 ± 0.31b | 1.51 ± 0.29b |
| CE visoka doza | 8 | 17.37 ± 0.41b | 7.43 ± 0.62b | 1.85 ± 0.43b | 1.13 ± 0.77b |
O: U usporedbi s kontrolnom skupinom, str<0.01; b: Compared to the model group, P<0.01; c: Compared to the model group, P<0.05.
3.2.2 Učinak CE na duljinu dai i debelog crijeva
U usporedbi s praznom kontrolnom skupinom, Dai miševa u grupi modela značajno je porastao, a duljina debelog crijeva je značajno skraćena (P<0.01); compared with the model group, the DAI of rats in the positive control group and CE groups at each dose was significantly reduced, and the colon length was significantly shortened (P<0.01). All increased significantly (P＜0.05 or P＜0.01). The results are shown in Table 3 and Figure 5.
3.2.3 Učinci CE na histopatološku morfologiju mišjeg debelog crijeva
Sludjeća debelog crijeva miševa u praznoj kontrolnoj skupini bila je potpuna i jasna u strukturi, a nisu pronađene infiltracije i čireve upalne stanice; Sludjeća debelog crijeva miševa u grupi modela bila je nepotpuna, većina žlijezda je uništena, neke su kuglane stanice nestale, a kripta struktura uništena; U usporedbi s modelom koji uspoređuje skupine, poboljšano je oštećenje tkiva debelog crijeva u pozitivnoj kontrolnoj skupini i CE skupina, upalna stanica infiltracija i uništavanje žlijezde u tkivu kolovoza značajno su smanjeni, stupanj upale je značajno smanjen, a ocjena histopatologije debelog crijeva (p ＜ ＜ ＜ {{＜ ＜ ＜ ＜ ＜ ＜ ＜ ＜ ＜ ＜ ＜ ＜ ＜ ＜ ＜ ＜ ＜ ＜ ＜ ＜ ＜ ＜ ＜ ＜.<0.01). The results are shown in Figure 6 and Table 3.
3.2.4 Utjecaj CE na razine upalnih čimbenika u tkivu mišjeg debelog crijeva
U usporedbi s praznom kontrolnom skupinom, razine IL {{0}}, il -1, MPO i tnf- u tkivu debelog crijeva miševa u grupi modela značajno su povećane (p ＜ ＜ {}} {} ＜ ＜ ＜ ＜ ＜ ＜ ＜ ＜ ＜ ＜ ＜ ＜ ＜ ＜ ＜ ＜ ＜ ＜ ＜ ＜ ＜ ＜ ＜ ＜ ＜ ＜ ＜ ＜ ＜ ＜ ＜ ＜. Razina IL -10 značajno je smanjena. (P <0,01); U usporedbi s skupinom modela, razine IL -6, il -1, MPO i TNF- u tkivu debelog crijeva miševa u pozitivnoj kontrolnoj skupini i CE skupine su značajno smanjene (p <0,05 ili p <0,01), il -10
Razina je značajno povećana (p ＜ ＜ ＜ 0. 01). Rezultati su prikazani u tablici 4.
3.2.5.
U usporedbi s praznom kontrolnom skupinom, razine ekspresije proteina u PI3K, P-PI3K, EGFR, TNF-, STAT3, P-STAT3, Akt1, P-Akt1 i SRC u tkivu debelog crijeva miševa u grupi modela značajno su povećane (P< 0.05 or P＜0.01); compared with the model group, the expression levels of the above proteins in the colon tissue of mice in the positive control group and CE groups were significantly reduced (P＜0.05 or P＜0.01).
Rezultati su prikazani na slici 7 i tablici 5.
Tablica 4 Usporedba razine upalnih faktora u tkivu mišjeg debelog crijeva (x ± S)
| Skupina | n | Il -10 (pg/ml) | Il -6 (pg/ml) | Il -1 (pg/ml) | Tnf- (pg/ml) | MPO (U/L) |
|---|---|---|---|---|---|---|
| Kontrolirati | 8 | 47.0 ± 4.70 | 17.35 ± 0.64 | 291.27 ± 72.33 | 387.71 ± 116.76 | 23.06 ± 7.26 |
| Model | 7 | 3.68 ± 0.32a | 145.08 ± 23.86a | 338.94 ± 95.11a | 635.27 ± 135.15a | 97.06 ± 28.07a |
| Niska doza | 7 | 44.74 ± 8.34b | 23.23 ± 4.64b | 300.52 ± 84.71b | 448.21 ± 123.28b | 38.60 ± 16.78b |
| CE niska doza | 7 | 12.87 ± 3.26b | 81.12 ± 18.95b | 331.24 ± 95.80b | 510.81 ± 110.63b | 51.61 ± 11.62b |
| CE srednja doza | 8 | 21.80 ± 4.12b | 50.75 ± 22.16b | 323.62 ± 79.21b | 508.68 ± 146.97b | 45.53 ± 15.21b |
| CE visoka doza | 8 | 31.10 ± 7.40b | 27.55 ± 41.22b | 294.13 ± 86.05b | 461.42 ± 140.30b | 44.26 ± 13.58b |
O: U usporedbi s kontrolnom skupinom, str<0.01; b: Compared to the model group, P<0.01.
O: prazna kontrolna skupina; B: Grupa modela; C: pozitivna kontrolna skupina; D: CE grupa s visokim dozama; E: CE grupa srednje doze; F: CE grupa s malim dozama.
Slika 7 Elektroforeza ekspresije proteina jezgre u tkivu debelog crijeva miševa u svakoj skupini
4 Rasprava
U ovom istraživanju, rezultati eksperimenata molekularnog priključaka pokazali su da su temeljni komponente kvercetin, suzilid, -sitosterol i cistanche glikozid H pokazali snažnu sposobnost vezanja na jezgrene ciljeve TNF, AKT1, STAT3, EGFR i SRC. Odražava sinergističke karakteristike višekomponenti i multi-ciljeva Cistanche Deserticola.
Studije su pokazale da kvercetin može značajno inhibirati izlučivanje i oslobađanje upalnih čimbenika i upalnih posrednika, te ima dobre protuupalne učinke [17]. Suzilid može učinkovito promicati izlučivanje gama-interferona od strane imunoloških stanica, a ima učinak povećanja vitalnosti imunoloških stanica i smanjenja održivosti tumorskih stanica. Suzilid i kvercetin također imaju učinak promicanja izlučivanja gama-interferona od strane imunoloških stanica. Sinergija [18].
-Sitosterol može ublažiti progresiju kolitisa reguliranjem razine upalnih faktora kao što su il -6, il -1 i tnf- [19]. Cistancheside H može regulirati oksidativni stres i upalne reakcije signalnim putovima poput metabolizma glicerofosfolipida i metabolizma arahidonske kiseline [20].
Može se vidjeti da kvercetin, suzilid, -sitosterol i Cistanche glikozid H mogu biti materijalna osnova Cistanche Deserticola u liječenju IBD -a.
Analiza KEGG -a pokazala je da Cistanche Deserticola igra terapijski učinak na IBD uglavnom regulacijom signalnih putova kao što su PI3K/AKT i EGFR rezistencija inhibitora tirozin kinaze. Studije su istaknule da aktivacija signalnog puta PI3K/Akt može promicati oslobađanje upalnih čimbenika i uzrokovati upalno oštećenje [21].
SRC je molekula signalne signale uzvodno signalnog puta PI3K/AKT. DSS koji ulaze u stanice mogu brzo aktivirati signalni put SRC/PI3K/AKT i promicati regrutovanje urođenih imunoloških stanica poput makrofaga i neutrofila do upalnih oštećenih tkiva, ubrzavajući oslobađanje upalnih čimbenika agresira upalni odgovor tijela [22].
EGFR se može fosforiliranje vezanjem na proteine povezane s uzvojem, aktivirajući signalni put PI3K/AKT, a zatim surađivati s Wnt signalnim putem za posredovanje upalnih odgovora [23]. Akt1 može aktivirati nuklearni faktor κB, promičući na taj način sintezu i oslobađanje protuupalnih čimbenika i ubrzati upalni odgovor [24].
STAT3 je jezgra ciljani protein signalnog puta JAK/STAT. Kad se STAT3 brzo aktivira, može ubrzati oslobađanje upalnih čimbenika kao što su IL -6 i IL -1, što dovodi do povećanja upalne infiltracije [25]
. TNF- je prvi citokin koji se oslobađa u imunološkom odgovoru, može posredovati u crijevnoj upali kroz različite mehanizme, a također može izravno inducirati apoptozu crijevnih epitelnih stanica [26].
Može se vidjeti da TNF-, Akt1, STAT3, EGFR i SRC mogu biti temeljni ciljevi Cistanche Deserticola u liječenju IBD-a. Daljnji eksperimenti na životinjama otkrili su da CE može smanjiti razinu ekspresije gore navedenih proteina, dokazujući točnost predviđanja ciljane mrežne farmakologije.
Ukratko, ova studija sustavno je potvrdila učinak Cistanche Deserticola u liječenju IBD -a putem mrežne farmakologije i eksperimenata na životinjama. Njegov specifični mehanizam djelovanja može se povezati s regulacijom signalnog puta SRC/EGFR/PI3K/AKT.
