Kapsule na bazi cistanche ublažavaju kronični nebakterijski prostatitis kod štakora modulacijom crijevne mikrobiote, serumskih metabolita i SPHK1/S1P1/PI3K/Akt signalnog puta
Jul 04, 2025
3.5 Metabolomska analiza seruma CBC u EAP štakora
3.5.1 Multivarijantna statistička analiza fekalne metabolomike
Analiza glavnih komponenti (PCA) otkrila je jasna odvajanja skupina u modu pozitivnih iona međunormalne, modelne i visoke doze CBC skupine, sGrupa CBC grupiranje bliže normalnoj skupinia dalje od skupine modela. U načinu rada s negativnim ionima, primijećeno je djelomično preklapanje između normalnih i modelnih skupina, dok su uzorci tretirani CBC-om i dalje dobro razlikovali (Slika 5).
Diskriminantna analiza djelomičnih najmanjih kvadrata (PLS-DA) potvrdila je snažan učinak klasifikacije u sve tri skupine pod oba načina ionizacije. TheTest permutacije od 200 putapotvrdio pouzdanost modela, s aQ² odsječak ispod 0,05, što ukazuje da nema pretjeranog opremanja. Trend pada uR² i Q² vrijednostiduž X-osi dodatno je potvrđena stabilnost modela (Slika 6).
FORMULA ČAJ NA BAZI CISTANKE
3.5.2 Identifikacija diferencijalnih metabolita na koje utječe CBC
Diferencijalni serumski metaboliti filtrirani su na temeljuVIP > 1od PLS-DA,promjena puta Veća ili jednaka 1, ip < 0,05. Nakon isključivanja egzogenih spojeva,10 značajnih endogenih metabolitaidentificirani su (Tablica 9).
3.5.3 Analiza obogaćivanja KEGG puta
KEGG obogaćena analiza različitih metabolita pokazala je daKBC liječenje može modulirati ključne metaboličke putoveuključeni u kronični prostatitis. Obogaćeni putovi uključivali su:
Metabolizam sfingolipida
Metabolizam retinola
Metabolizam glicina, serina i treonina
Metabolizam glicerofosfolipida
Metabolizam arahidonske kiseline(Slika 7)
Poznato je da ti putovi igraju važnu ulogu uimunološka regulacija, oksidativni stres i upala.
3.5.4 Korelacija između diferencijalnih metabolita i crijevne mikrobiote
Spearmanova korelacijska analiza provedena je između 10 različitih metabolita i značajno promijenjenih bakterijskih svojti. Značajne korelacije uključuju:
PA(6-keto-PGF1 /i-20:0): u pozitivnoj korelaciji sLactobacillusiRomboutsia ilealis, negativno saNeglectibacter timonensis
SM[d16:2/20:4-2OH]: u pozitivnoj korelaciji sParaprevotella claraiRomboutsia ilealis
PS[18:1/20:0]: u pozitivnoj korelaciji sRomboutsia ilealis, negativno saOscillospiraceae
lizoPA (0:0/18:0): u negativnoj korelaciji sLactobacillusiRomboutsia ilealis, pozitivno saNeglectibacter timonensis
Ureidoizomaslačna kiselina: u negativnoj korelaciji sParaprevotella clara
16(R)-HETEi(2R,3R)-2-aminooktadekan-1,3-diol: u pozitivnoj korelaciji sNeglectibacter timonensis
Sfingozin: u negativnoj korelaciji sRomboutsia ilealis, pozitivno saNeglectibacter timonensis
lizoPA (18:0/0:0)iRetinoil-glukuronid: u negativnoj korelaciji sBifidobacterium animalisiRomboutsia ilealis(Slika 8)
Ove korelacije sugerirajusnažna veza između metabolomskih promjena izazvanih CBC-om i modulacije crijevne mikrobiote.
3.6 Regulacija puta SPHK1/S1P1/PI3K/Akt putem CBC-a
Western blot analiza je to pokazalaEkspresija proteina SPHK1 i S1P1 bila je značajno povišena u skupini modelau usporedbi s normalnom skupinom. CBC (visoke doze) značajnosmanjene razine proteina SPHK1 i S1P1. Nije primijećena značajna razlika u ekspresiji SPHK2 među skupinama (Slika 9, Tablica 10).
Dodatno,PI3K i Aktrazine ekspresije bile su značajno smanjene u modelnoj skupini, dokp-PI3K i p-Aktrazine su značajno povećane, što ukazuje na aktivaciju puta. KKS liječenjevraćene razine PI3K i Aktiinhibira njihovu fosforilaciju, smanjujućiomjeri p-Akt/Akt i p-PI3K/PI3K.
Ovi rezultati sugeriraju daCBC inhibira signalni put SPHK1/S1P1/PI3K/Akt, pridonoseći njegovom protuupalnom učinku.
4. Rasprava
Kronični nebakterijski prostatitis (CNP) čini preko90% svih dijagnoza prostatitisaa povezan je sa složenom etiologijom, uključujućipatogena mikrobna infekcija, oksidativni stres, imunološka disregulacija i autoimune reakcije [20–21].
Nedavni dokazi to upućujuupale i autoimunostisredišnji su za CNP patogenezu [22-24]. Theeksperimentalni autoimuni prostatitis (EAP) štakorski model, koji oponaša ljudski CNP u histopatologiji i imunološkom odgovoru, stoga je odabran [25].
U našim prethodnim studijama farmakokemije seruma, CBC komponente su pronađene uveća zastupljenost u fecesu nego u serumu, implicirajućiintestinalna interakcija kao primarni način djelovanja(vidi CNKI poboljšane publikacijske materijale).
CBC poboljšava patologiju prostate i upalne indekse
Bojanje HE pokazalo je da je CBC ublaženinfiltracija limfocita, obnovljenoacinarna struktura, i povećao seizlučevine žlijezda. CBC značajnosmanjen broj leukocitau homogenatima prostate i obnovljenalecitin gustoća tijela- oba ključna CNP dijagnostička markera [26-28]. Upala dovodi do oštećenja epitela i smanjene sekrecije lecitina, dok aktivirani makrofagi gutaju lecitinska tjelešca [29]. CBC je učinkovito poništio te patološke promjene.
CBC takođersmanjeni proupalni citokini(TNF-, IL-1, IL-6, IL-8, IL-2, iNOS) ipovišeni protuupalni IL-10, podržavajući njegovo snažno protuupalno djelovanje.
CBC regulira disbiozu crijevne mikrobiote
CNP je usko povezan sneravnoteža crijevne mikrobiote, što može smanjitikratkolančane masne kiseline (SCFA)i ugroziti crijevnu barijeru, dopuštajućiLPS translokacijai izazivanje upale prostate putemmolekularni obrasci povezani s mikrobima (MAMPs) [30].
Studije to pokazujuCistanche polifenolipoboljšati neravnotežu mikrobiote i modulirati ključne svojte uključene uupalna bolest crijeva (IBD)[31]. U ovoj studiji,Lactobacillus i Bifidobacterium animalisbili su iscrpljeni kod EAP štakora, ali su se oporavili nakon CBC tretmana. Poznato je da ovi probiotici ublažavaju urogenitalnu upalu [32-33]. Nasuprot tome,Veillonella, često obogaćen u autoimunim stanjima [34], bio je povišen u EAP štakora i smanjen nakon primjene CBC-a. Slično tome,Prevotellaceae, povezan s rakom prostate [35], obogaćen je EAP skupinom i smanjen CBC-om.
CBC modulira ključne metaboličke putove
Otkrivena metabolomikaelevacija sfingozinau EAP štakora, značajno smanjen CBC-om, što ukazuje na uključenost umetabolizam sfingolipida. Sfingolipidi su ključne strukturne i signalne molekule uključene ustanični rast, apoptozu i imunološku regulaciju [36].
Sfingozin-1-fosfat (S1P), sintetiziraoSPHK1/2, snažan je posrednik lipida koji se veže naS1P receptori (S1PR)za regulaciju trgovine imunološkim stanicama i upleten je uupalne i autoimune bolesti[37-39]. S1PR modulatorFTY720 (fingolimod)pokazalo se da smanjuje upalu i oštećenje tkiva u EAP modelima [40].
S1P također aktivira nizvodne puteve poputPI3K/Akt, koji su povezani s kroničnom upalom. U našem istraživanju, CBCsmanjeni SPHK1 i S1P1, i inhibiranoPI3K i Akt fosforilacija, što ukazuje na regulatorni učinak na ovu kritičnu os.
Zaključak
Ova studija, integrirajućisekvenciranje crijevne mikrobiote i neciljana metabolomika, to pokazujeKapsule na bazi cistanhe (CBC)učinkovito:
Poboljšatioštećenje tkiva prostate
Potisnutiupalnih citokina
Vratitikorisna crijevna flora
Reguliratimetabolizam sfingolipida
InhibiratiSPHK1/S1P1/PI3K/Akt signalizacija
Ovi nalazi pružajuuvjerljivi dokaziza potencijal CBC-a kaomulti-target biljna terapija za kronični nebakterijski prostatitis, i ponuditi aznanstvenu osnovu za njegovu proširenu kliničku primjenu.
