Cistanche glikozid za inhibiciju aktivnosti tirozinaze

 

2 rezultata i rasprava

 

2.1 Učinci PHG -a, GLA i njihovih kombinacija na aktivnost tirozinaze

Slika 1pokazuje inhibitorni učinciPHGS PBS otopina, GLA PBS otopina, iPHGS/GLA PBS otopinaO aktivnosti tirozinaze.

IzSlika 1A, polu-maksimalne inhibicijske koncentracije (IC50) odPHGS PBS otopina, GLA PBS otopina, iARB PBS rješenjena aktivnosti tirozinaze su bile(2.192 ± 0.038) g/L, (1.376 ± {0. 025) Ug/ml, i({{{0}}. 101 ± 0,003) Ug/ml, odnosno. Red moć inhibicije tirozinaze bio jeARB> GLA> PHGS.

IzSlika 1b, u masovnoj koncentraciji0. 4 mg/ml, stope inhibicije tirozinaze odPHGS/GLA (10: 1), PHGS/GLA (5: 1), iPHGS/GLA (1: 1)PBS rješenja su bile88.06%, 92.93%, i94.37%, odnosno. Posljednja dva bila su veća od stope inhibicije pojedinih komponenti u istoj koncentraciji (36,92% za PHGS PBS otopinui92,71% za rješenje GLA PBS). Nadalje, stopa inhibicijePHGS/GLA (1: 1)Rješenje PBS -a bilo je usporedivo s onom pozitivne kontroleARB.

Na temelju izračuna:

Ekstrakt Cistanche s glikozidom visoke razine za inhibiciju aktivnosti tirozinaze

 

ACI (kombinacijski indeks)Vrijednosti zaPHGS/GLA (1: 5) ~ PHGS/GLA (1:40)PBS rješenja su bileCi> 1, što ukazuje na antagonističke učinke.

ACI vrijednostizaPHGS/GLA (40: 1) ~ PHGS/GLA (1: 1)PBS rješenja su bileCi <1, što ukazuje na sinergističke učinke.

To pokazuje da kada je omjer masePHG -ovi za GLAje40: 1, 20: 1, 10: 1, 5: 1 ili 1: 1, Kombinacija pokazuje značajne sinergističke učinke u inhibiranju aktivnosti tirozinaze.

 

 

Sl. 1 Inhibicija tirozinaze pomoću PHGS PBS otopina s različitim koncentracijama mase, otopine GLA PBS (A) i PHGS PBS otopine, otopina GLA PBS i PHGS/GLA PBS otopina s masnom koncentracijom 0}. 4 g (b) i CI vrijednost

 

2.2 Učinci PHG -a, GLA i njihovih kombinacija na uklanjanje slobodnih radikala

Slika 2ilustrira DPPH radikalne i abts⁺ radikalne sposobnosti uklanjanjaPHGS otopina etanola, GLA etanol otopina, iPHGS/GLA Etanol otopina.

IzSlika 2a, IC50 vrijednosti za uklanjanje radikala DPPHPhgs, Glava, iVcbili su(21,135 ± 1,164) Ug/ml, (55,537 ± 5,230) Ug/ml, i(2.852 ± {0. 252) Ug/ml, odnosno. Redoslijed sposobnosti uklanjanja radikala DPPH bio jeVC> PHGS> GLA.

IzSlika 2B, IC50 vrijednosti za abts⁺ radikalno čišćenjePHGS otopina etanola, GLA etanol otopina, iVC rješenje etanolabili su(22,7 0 9 ± 0,686) Ug/ml, (11,677 ± 0. 120) Ug/ml, i(3.237 ± 0. 345) Ug/ml, odnosno. Redoslijed Abts⁺ radikalne sposobnosti uklanjanja bio jeVC> GLA> PHGS.

IzSlika 2C, u koncentraciji0.4 g/L, DPPH stope čišćenjaPHGS/GLA (40: 1) ~ PHGS/GLA (1: 1)rješenja etanola bile su87.02% ~ 89.43%, koji su bili viši od stope uklanjanja pojedinih komponenti (85,32% za PHGS otopinu etanolai83,31% za rješenje GLA etanola) i usporedivo s pozitivnim kontrolomVc (84.54%). ACI vrijednostizaPHGS/GLA (1: 5) ~ PHGS/GLA (1:40)rješenja etanola bile suCi> 1, što ukazuje na antagonističke učinke, dokCI vrijednostizaPHGS/GLA (40: 1) ~ PHGS/GLA (1: 1)rješenja etanola bile suCi <1, a stope uklanjanja radikala DPPH bile su sve gore85%, što ukazuje na snažnu sposobnost uklanjanja radikala DPPH.

IzSlika 2d, u koncentraciji0.4 g/L, Abts⁺ stope radikalnog uklanjanjaPHGS/GLA (40: 1) ~ PHGS/GLA (1: 1)rješenja etanola bile su99.87% ~ 100.13%, koji su bili viši od onih u pojedinim komponentama (97,81% za PHGS otopinu etanolai97,96% za rješenje GLA etanola) i usporedivo s pozitivnom kontrolomVc (99.92%). ACI vrijednostizaPHGS/GLA (1: 5) ~ PHGS/GLA (1:40)rješenja etanola bile suCi> 1, što ukazuje na antagonističke učinke, dokCI vrijednostizaPHGS/GLA (40: 1) ~ PHGS/GLA (1: 1)rješenja etanola bile suCi <1, što ukazuje na snažnu ABTS⁺ radikalnu sposobnost uklanjanja.

Ukratko, među devet kombinacijaPHGS/GLA, PHGS/GLA (1: 1), PHGS/GLA (5: 1), iPHGS/GLA (10: 1)PBS otopine odabrane su za naknadne stanične eksperimente zbog njihove relativno visoke inhibicije aktivnosti tirozinaze i snažnih sinergističkih učinaka u antioksidaciji.

Stope inhibicije tirozinaze:94,37%, 92,93%i 88,06%, odnosno.

Stope čišćenja radikala DPPH:89,44%, 88,72%i 88,10%, odnosno.

Abts⁺ Stope uklanjanja radikala:100,13%, 100,01%i 99,87%, odnosno.

---

2.3 Učinci PHG -a, GLA i njihovih kombinacija na održivost B16F10 i HACAT stanica

Slika 3prikazuje učinkePHGS DMEM otopina, GLA DMEM otopina, iPHGS/GLA DMEM otopinao održivostiB16F10iHakatstanice.

IzSlika 3A -C:

Phgsu koncentracijama od78.125 ~ 625 ug/ml(Slika 3a) iGlavau koncentracijama od3.125 ~ 25 ug/ml(Slika 3b) nije pokazao citotoksičnost premaB16F10 stanice.

PHGS/GLA (1: 1), PHGS/GLA (5: 1), iPHGS/GLA (10: 1)DMEM otopine u koncentraciji25 ug/mlnije pokazao citotoksičnost (slika 3c).