Kineska medicina Cistanche Kemijski sastav i analiza komponenti u tijelu Ⅲ

Poglavlje 2. Kvalitativna studija o kemijskom sastavu Cistanche deserticola

Cistanche je suhi ljuskavi list mesnate stabljikeCistanche deserticola YC.Mai Cistanche tubulosa (Schenk) R.Wight. To je jedan od poznatih tradicionalnih kineskih lijekova koji njeguju bubrege. Ima funkcijehranjivi bubreg-yang, obnavljanje esencije i krvi i vlaženje. Ima laksativni učinak i često se koristi za liječenje impotencije, neplodnosti, bolova u struku i koljenima, slabosti mišića i kostiju, suhoće crijeva i zatvora, itd. Ima farmakološke učinke kao što su anti- demencija, anti-Parkinsonova bolest, zaštita od cerebralne ishemije, te poboljšanje sposobnosti učenja i pamćenja. Radi razjašnjenja materijalne osnove zadjelotvornost Cistanche deserticola, ovo poglavlje koristi HPLC i LC-IT-TOF-MS za sveobuhvatnu karakterizacijukemijske komponente Cistanche. Na temelju sustavnog sažetka pravila krekiranja različitih vrsta kemijskih komponenti, sustavno se analiziraju svojstva Cistanche deserticola. Kemijski sastav, za pružanje bogatih podataka iz pouzdanih izvoradubinsko razjašnjenjeljekovitih svojstavaCistanche deserticolain vivo.

buy cistanche

KOLIKO JE POTREBNO DA CISTANCHE DJELUJE?

Odjeljak 1 Eksperimentalni materijali

1.Instrument

Shimadzu HPLC-IT-TOF-MS tekući maseni spektrometar (opremljen s 2 LC-20ADXR pumpe, SIL-20AC automatski uzorkivač, CTO-20AC kolonska pećnica, SPD-M20A UV detektor, DGU-20A3R dekontaminacijski plinski stroj, CBM-20A kontroler, ESI ionski izvor, Shimadzu Company, Japan), Milli-Q sustav za pročišćavanje ultračiste vode (Milipore Company, SAD): Mettler ME204 elektronička analitička vaga ( Mettler Toledo Company, Švicarska).

2. Reagensi

Metanol, acetonitril i mravlja kiselina čistoće za kromatografiju i spektrometriju mase nabavljeni su od Thermo-Fisher Company (Pittsburgh, PA, SAD). Voda je bila Milli-Q ultračista voda proizvedena u laboratoriju (Millipore, Bedford, MA, SAD). Svi ostali reagensi su analitičkog stupnja.

Salidrozid, 6-deoksikatalpol, 8-epiloganska kiselina, ehinakozid, akteozid, izozid verbaskozid (izoakteozid) i pinorezinol- -D-glukopiranozid (pinorezinol- -D-glukopiranozid) oba je osigurala istraživačka grupa profesora Tu Pengfeija u Ključnom laboratoriju za prirodne i biomimetičke lijekove na Sveučilištu u Pekingu. Sarkozid F (cistanozidF) je kupljen od Chengdu Mansite Biotechnology Co., Ltd., cistanozid A (cistanozid A), 2'-acetilakteozid (2'-acetilakteozid), 2'-acetilpoliumozid (2'-acetilpoliumozid), cistanozid poliglukozid (poliumozid) ), cistanozid E (cistanozidE), izocistanozid E (izocistanozidE), cistanozid C (cistanozidC), izocistanozid C (izocistanozidC) i cistanozid D (cistanozidD) svi su kupljeni od Shanghai Shidande Biotechnology Co., Ltd., tubulozid A (tubulozidA) i tubulozid B (tubulozidB) kupljeni su od Chengdu Weikeqi Biotechnology Co., Ltd.

Odjeljak 2 Eksperimentalni sadržaj

1. Priprema uzorka

1.1 Priprema referentne tvari

Precizno izvažite odgovarajuće količine različitih referentnih tvari u gornjem "Odjeljku 1 Eksperimentalni materijali" i pripremite 10 mM osnovne otopine s DMSO. Precizno pipetirajte 2 mL svake osnovne otopine i razrijedite je s 25% acetonitrila kako biste dobili 2 µM miješanu kontrolnu otopinu. 1.2 Priprema otopine za ispitivanje

Vodeni ekstrakt Cistanche deserticola napravljen je u našem laboratoriju, a uzorak je pohranjen u Modernization Research Center of Traditional Chinese Medicine, School of Traditional Chinese Medicine, Beijing University of Chinese Medicine. Uzmite 20 mg praha Cistanche deserticola, dodajte 40 mL vode da se otopi, promiješajte i centrifugirajte na 10000 okretaja u minuti 10 minuta i uzmite supernatant. Odnosno, dobivena je ispitna otopina.

3. Uvjeti masene spektrometrije

Ionski izvor elektrospreja (ESI), način skeniranja je istovremeno skeniranje pozitivnih i negativnih iona i automatsko pokretanje višerazinske masene spektrometrije. Raspon skeniranja mase MS'~MS' za pozitivne ione je m/z50~800, a za negativne ione je m/z100~1000. Naponi komore za raspršivanje su 4,5 kV odnosno -3.5 kV: brzina protoka plina za raspršivanje (Nz) je 1,5 Lmin; tlak plina za sušenje je 110MPa; napon detekcije je 1,55 kV; temperature zakrivljene cijevi desolventizatora (CDL) i modula grijanja su 200 stupnjeva. Tlak kolizijske komore je 1,5e-Pa; tlak ionske zamke je 2,8e-Pa; broj ponavljanja pozitivnog i negativnog prvog stupnja je 1, a vrijeme nakupljanja iona je 30 ms; broj ponavljanja pozitivnog i negativnog drugog stupnja je 2, a vrijeme akumulacije iona je 20ms. ; Energija disocijacije izazvane sudarom (CID) je 50%.

Odjeljak 3 Rezultati i rasprava

Izbor stupca

Kako bismo postigli bolje kromatografsko odvajanje, opsežno smo pregledali kromatografske kolone različitih proizvođača i specifikacija, kao što je kromatografska kolona ACEUltraCore 2.5 SuperC8 (30x150 mm, 2,5 um, Advance Chromatography Technologies Ltd., Aberdeen, Škotska), Shiseido Capcell Core Ci8 (2,1 mm x 150 mm, 2,7 μm), kolona Waters Acquity UPLC HSS T3 (2,1 x 100 mm, 1,8 μm, Milford, MA, SAD) i kolona Capcell Core ADME (2,1 x 150 mm, 2,7 μm, Shiseido Corporation, Japan). Sustavnom usporedbom utvrđeno je da se pri korištenju kromatografske kolone Capcell Core ADME (2,1 x 150 mm, 2,7 μm, Shiseido Co., Ltd., Japan) svaki kromatografski signal može bolje razdvojiti (slika 3-1).

2. Odabir uvjeta tekuće faze

Budući da su glavne kemijske komponenteCistanche deserticolasu feniletanol glikozidi, lignani, iridoidi i drugi spojevi, općenito bolje reagira u uvjetima negativnih iona. Kako bi se identificirale niske razine kemijskih komponenti u vodenom ekstraktu Cistanche deserticola, nagađa se da bi možda trebalo dodati kiseline mobilnoj fazi kako bi se povećala snaga. Stoga je ovaj eksperiment koristio vodu-metanol, vodu-acetonitril, 0.1% mravlja kiselina voda-metanol i 0.1% mravlja kiselina voda-acetonitril kao sustave mobilne faze za istraživanje. Utvrđeno je da 0.1% mravlja kiselina voda-acetonitril ima najbolji učinak odvajanja, s dobrim oblikom vrha i velikim kapacitetom vrha, pa su 0.1% mravlja kiselina voda i acetonitril odabrani kao mobilna faza. 3. Kvalitativna analiza kemijskih komponenti. Upotrijebite 19 postojećih referentnih tvari za istraživanje pravila fragmentacije masene spektrometrije raznih vrsta spojeva u Cistanche deserticola. Mješovite referentne tvari su PDA kromatogrami na 340 nm na stupcu ADME i BPC dijagrami u načinima pozitivnih i negativnih iona. Pogledajte sliku 3-1. Pregledali smo relevantnu literaturu putem PubMed-a, RSC-a, CNKl-a, Springera, ScienceDirecta, VIP-a i Wanfanga itd., te izradili vlastitu bazu podataka o kemijskim komponentama Cistanche deserticola. Na temelju usporedbe pravila fragmentacije masene spektrometrije i vremena zadržavanja poznatih spojeva, preliminarno smo identificirali 45 spojeva u Cistanche deserticola. spojeva, uključujući 31 feniletanol glikozid, 9 iridoida, 3 benzil glikozida i 2 lignana, kao što je prikazano u tablici 3-1.

buy cistanche

Usporedbom vremena povjerljivosti, MS' spektra i MS' spektra referentne tvari, spojevi 11, 12, 13, 17, 21, 22, 24, 25, 26, 28, 29, 32, 33, 36, 37, 38 sekvencijalno su točno identificirani kao genipin, cistanhein F, cistanheozid E, krizantozid, cistanhein A, tuberozin A, larresinol 4-0- -D glukozid, divizma glikozid, izokanabinoidni glikozid, pinorezin monometil eter glikozid, 2'acetil verbaskozid, cistanha glikozid C, izocistankozid C, tuberozin B i cistančni glikozid D.

Ovaj eksperiment koristi tehnologiju HPLC-IT-TOF-MS za brzu i preciznu sustavnu analizu složenih kemijskih komponenti u vodenom ekstraktu Cistanche deserticola, što daje osnovu za sveobuhvatnu analizu kvalitete Cistanche deserticola i istraživanja farmakoloških supstanci in vivo.

buy cistanche