Napredak u dermatologiji pomoću inovacije DNA aptamera "Aptamin C": Prevencija oksidativnog stresa i maksimiziranje učinka vitamina C kroz antioksidaciju

joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Sooho Choi PhD1|Jeongmin Han Ph.D. Kandidat2|Ji Hyun Kim MS kandidat1|A-Ru Kim dr.sc. Kandidat3|Sang‐Heon Kim Ph.D. Kandidat3|dr. Weontae Lee, profesor2|Moon-Young Yoon Ph.D., profesor3|Gyuyoup Kim PhD1|Yoon‐Seong Kim Ph.D., profesor1

Sažetak

Pozadina:Vitamin C(također poznata kao L-askorbinska kiselina) ima ključnu ulogu u smanjenju reaktivnih kisikovih vrsta (ROS) i regeneraciji stanica štiteći stanice od oksidativnog stresa. Iako se vitamin C naširoko koristi u kozmetičkim i terapeutskim tržištima, postoje brojni dokazi da se vitamin C lako podvrgavaoksidacijazrakom, pH, temperaturom i UV svjetlom nakon skladištenja. Ovaj nedostatak vitamina C smanjuje njegovu snagu kao antioksidansa i smanjuje rok trajanja proizvoda koji sadrže vitamin C kao njegov sastojak. Kako bismo prevladali nedostatak vitamina C, razvili smo Aptamin C, inovativni DNA aptamer koji maksimizira antioksidacijsku učinkovitost vitamina C tako što se veže na reducirani oblik vitamina C i odgađa njegovoksidacija.

Metode:Vezanje aptamina C s vitaminom C određeno je ITC analizom. ITC eksperiment je proveden s 0.2 mmol/Lvitamin Ckoji je ubrizgan 25 puta u alikvotima od 2 µL u ćeliju s uzorkom od 1,8 mL koja je sadržavala aptamin C u koncentraciji od 0.02 mmol/L. Podaci su prilagođeni izotermi vezanja na jednom mjestu pomoću programa s izvorom za ITC v.5.0.

Rezultati:Da bi se istražio učinak aptamina C ivitamin Ckompleksa u ljudskoj koži, provedena su i in vitro i klinička ispitivanja. Uočili smo da je kompleks aptamina C i vitamina C bio značajno učinkovit u smanjenju bora, učinku izbjeljivanja i povećanju hidratacije. U kliničkom ispitivanju, ispitanici liječeni kompleksom pokazali su dramatično poboljšanje nadraženosti kože i svrbeža. Aptamin C kompleks u testu nije pokazao nuspojavu.

Zaključak:Uzeti zajedno, ovi rezultati pokazali su da bi Aptamin C, inovativni novi spoj, potencijalno trebao poslužiti kao ključni kozmeceutski sastojak za niz stanja kože.

KLJUČNE RIJEČIantioksidacija, aptamin C (aptamer koji veže vitamin C),oksidacija, oksidativni stres,vitamin C(L-askorbinska kiselina)

cistancheposjeduju snažnu sposobnost antioksidacije

1|UVOD

Reaktivne kisikove vrste (ROS) su kemijski reaktivne kemijske vrste koje sadrže kisik, koji ima važnu ulogu u staničnoj signalizaciji i homeostazi.1-3 To uključuje ne samo pozitivne učinke kao što su indukcija obrambenih gena domaćina i mobilizacija sustava za prijenos iona, već također ima ulogu u apoptozi (programiranoj staničnoj smrti).4,5 Razine ROS-a mogu se povećati stresom iz okoliša, što dovodi do oštećenja staničnih struktura.3 Taj se fenomen naziva "oksidativnim stresom". Oksidativni stres jedan je od vodećih uzroka raznih bolesti uključujući neurodegenerativne bolesti, Lou Gehrigovu bolest, autizam, multiplu sklerozu i kožne bolesti.6-15 Nadalje, oksidativni stres ima izravan utjecaj na proces starenja kože16; proteini, lipidi i DNA osjetljivo reagiraju na oksidativni stres koji uzrokuje ROS.17 Antioksidansi su vrlo učinkoviti u zaštiti kože jer reagiraju izravno na ROS sprječavajući ih da dođu do bioloških ciljnih molekula.18,19 Antioksidansi kao što suvitamin C, vitamin E, koenzim Q10 i polifenolni spojevi štite kožu od oštećenja uzrokovanih ROS. Antioksidansi time pomažu u prevenciji i liječenju raznih kožnih bolesti te usporavaju proces starenja kože.20 Upotreba vitamina C u industriji prvenstveno je zbog njegovih antioksidacijskih svojstava, koja su rezultatvitamin Csposobnost neutraliziranja slobodnih radikala kisika, kroz proces koji se naziva uklanjanje radikala.21,22 Međutim, zbog tih istih antioksidativnih svojstava, sama molekula je inherentno osjetljiva na razgradnju putemoksidacija. Kako bismo riješili ovaj problem, razvili smo Aptamin C, DNA aptamer koji se specifično veže na vitamin C i inhibira oksidaciju vitamina C. Aptameri su jednolančani oligonukleotidi bazirani na DNA ili RNA sposobni selektivno vezati širok raspon molekula. Aptameri se obično identificiraju in vitro metodom odabira koja se naziva sustavna evolucija liganda eksponencijalnim obogaćivanjem ili "SELEX". Utvrdili smo da Aptamin C inhibiraoksidacijavitamina C iz nekoliko oksidacijskih sredstava i održava antioksidacijsku aktivnost tijekom dugotrajnog skladištenja. Kako bi se potvrdila procjena sigurnosti Aptamina C, eksperimenti su provedeni na staničnoj razini i izravno primijenjeni na ljude te nije uočena nikakva toksičnost. Kožne bolesti poput atopijskog dermatitisa, psorijaze i akni povezane su s imunološkim odgovorom i ROS-om.23Vitamin Cima sposobnost uklanjanja ROS-a i ima protuupalni učinak.24 Aptamin C sprječavaoksidacijavitamina c i maksimizira njegovu učinkovitost sporim otpuštanjem. Stoga očekujemo da će Aptamin C‐vitamin C kompleks pokazati sinergijski učinak.

2|MATERIJALI I METODE

2.1|Probir aptamera protiv vitamina C sa smanjenim grafen-oksidom

Ova metoda je provedena modificiranjem metode prethodnog istraživanja.25 Kandidati za ssDNA koji se mogu specifično vezati navitamin Crazvijeni su iz nasumične biblioteke ssDNA koja se sastoji od oko 1X1018 različitih sekvenci. Za biblioteku ssDNA upotrijebili smo prilagođenu sekvencu veličine 60 mera i sadrži 30 nasumično generiranih sekvenci nukleotida i početno mjesto za amplifikaciju (5′‐ATGCGGATCCCGCGC‐(N)30‐GCGCGAAGCTTGCGC‐3′). Izveli smo ukupno pet rundi dok smo mijenjali eksperimentalne uvjete kako bismo odabrali specifičniju sekvencu. Ukupni volumen za reakciju bio je 200 μL. Oko 20 μL 10× pufera za vezanje (10× PBS dodano 10 mmol/L MgCl2), 80 μL rGO (5 mg/mL, razrijeđeno u vodi) i 200 pikomola ssDNA biblioteke (20 μL 100 μmol/L zalihe ) su dodani i dopunjeni dH2O do 200 μL. Reakcija je trajala 30 minuta kako bi se biblioteka ssDNA vezala na rGO, a zatim je smjesa centrifugirana na 20 000 g 20 minuta kako bi se uklonio supernatant. Peleta rGO isprana je 1 put s 200 µL pufera za vezanje, što je ista koncentracija kao ciljno stanje vezanja svake runde. Za eluaciju kandidata potrebno je 200 nanomolavitamin Crazrijeđenog u 200 μL pufera za vezanje dodani su u talog rGO, a korak eluiranja trajao je 1 sat. Eluirana ssDNA podijeljena je centrifugiranjem na 20 000 g tijekom 20 minuta i umnožena. Izvršili smo taloženje EtOH-om kako bismo eliminirali nečistoće osim ssDNA prije amplifikacije. Napravili smo asimetrični PCR kako bismo dobili umnoženu ssDNA. Omjer početnice za prosljeđivanje i obrnute početnice asimetrične PCR bio je 10:1. Napravili smo elektroforezu na 2,5 postotnom agaroznom gelu da potvrdimo PCR produkt s nekoliko mikrolitara. Asimetrični PCR ne može proizvesti samo ssDNA. Dakle, napravili smo metodu drobljenja i namakanja da izoliramo ssDNA kandidate. Za metodu smo napravili elektroforezu na 12 postotnom poliakrilamidnom nativnom gelu i obojili gel etidijevim bromidom (EtBr). Za odvajanje dvolančane DNA (dsDNA) i ssDNA, dio gela obojen ssDNA izrezan je, usitnjen i ekstrahiran ssDNA puferom za drobljenje i namakanje (500 mmol/L NH4OAc, 0,1 posto SDS, 0,1 mmol/L EDTA) preko noći. Smrvljeni gel je odvojen centrifugiranjem. Supernatant koji sadrži ssDNA se koncentrira i pročišćava taloženjem EtOH. Osušena ssDNA je skupljena sa steriliziranim dH2O i to je korišteno za sljedeću rundu kao biblioteka.

prirodni sastojcicistanche amazonka

2.2|Pokus izotermne titracijske kalorimetrije (ITC).

Eksperiment kalorimetrije s izotermnom titracijom proveden je korištenjem VP‐ITC sustava (MicroCal Inc Northampton) na 25 stupnjeva u fosfatnom puferu slane otopine koja se sastoji od 1 mmol/L magnezijevog klorida (pH 7,4). Prije svakog pokusa titracije, Aptamin C 2 mL ivitamin CUzorci od 600 µL otplinjeni su 30 minute pod vakuumom, bez miješanja, na temperaturi nekoliko stupnjeva nižoj od eksperimentalne. Pripremili smo 0,2 mmol/L vitamina C koji je ubrizgan 25 puta u alikvotima od 2 µL u ćeliju s uzorkom od 1,8 mL koja je sadržavala Aptamin C u koncentraciji od 0,02 mmol/L. Podaci su prilagođeni izotermi vezanja na jednom mjestu korištenjem izvornog programa za ITC v.5.0 (MicroCal Inc).

2.3|Testovi oksidacije vitamina C temeljeni na fluorescentnoj mikroploči

Oksidacijaodvitamin Cmjeren je detekcijom oksidiranog produkta dehidroaskorbata (DHA) korištenjem modificirane verzije metode koju su opisali Vislisel et al.7 U ovoj metodi, DHA se detektira reakcijom s o-fenilendiaminom (OPDA) da nastane fluorescentni kondenzacijski produkt 3-( dihidroksietil)furo[3,4‐b] kinoksalin‐1‐on. Test je proveden kako slijedi u crnim pločama s 384 jažice (Greiner Bio-One). Aptameri su najprije otopljeni u fosfatno puferiranoj fiziološkoj otopini, pH 7,2, koja sadrži 1 mM MgCl2, u koncentraciji od 200 µmol/L, zatim su presavijeni zagrijavanjem na 95 stupnjeva i ostavljeni da se polako ohlade do sobne temperature 15 minuta. Savijeni aptameri su zatim razrijeđeni 1:1 (v:v) u svježe pripremljenu otopinu od 5 mmol/Lvitamin Cu testnom puferu [50 mmol/L natrijev acetat, 1 posto (w/v) BSA, 0,05 posto (v/v) Tween 20, 1 mM MgCl2 (Sigma, sve komponente) podešen na pH 5,5], i smjesa je inkubirana 30 minuta na sobnoj temperaturi, kako bi se aptameri mogli vezati prije dodavanja oksidatora. Oksidatori su zatim dodani otopinama vitamina C/aptamera u koncentracijama (EM) H2O2 (Sigma). Oksidatori su prethodno razrijeđeni do svojih radnih koncentracija u puferu za ispitivanje. Uzorci su zatim inkubirani na sobnoj temperaturi 10 minuta prije dodavanja OPDA (Sigma) u koncentraciji od 5,5 mmol/L u puferu za ispitivanje. Odmah nakon dodavanja OPDA, određena je fluorescencija uzoraka na 425 nm pomoću čitača ploča SpectraMax® i3X (Molecular Devices) s ekscitacijom na 345 nm, tijekom 45 minuta s mjerenjima svakih 60 sekundi. Svi uzorci i posude s reagensima zamotani su u foliju kako bi se zaštitili od svjetlosti tijekom svih inkubacija koje su provedene za testove fluorescencije.

2.4|Mjerenje smanjenja vitamina C pomoću DCPIP-a (2,6-diklorfenolindofenol)

Da bi se odredilo smanjenjevitamin C, proveli smo eksperimente koristeći DCPIP reakciju. Vitamin C reagira s DCPIP-om, mijenjajući boju iz plave u bezbojnu. Pripremljeni vitamin C tretiran je s 5 posto Aptamin CTM, a neobrađeni vitamin C inkubiran je na sobnoj temperaturi 8 tjedana. Uzorak je mjeren nakon 2, 4 i 8 tjedana. Otprilike 2 mL DCPIP-a dodano je u stožastu tikvicu pomoću pipete i dodavan je prvi netretirani vitamin C dok otopina nije postala bezbojna. Količinavitamin Cdodano je izmjereno i ponovljeno s drugim uzorcima. Prema tim podacima izračunat je stupanj redukcije svakog uzorka.

2.5|In vitro studija učinka protiv bora u ljudskim dermalnim fibroblastima

Kako bi se procijenila vitalnost stanica u ljudskim dermalnim fibroblastima, stanice su tretirane različitim konačnim koncentracijama aptamina C svitamin C(Aptamin C ug plus vitamin C ug/mL) {{0}}.01 plus 0.5 ug/mL, 0,1 plus 5 ug/mL, 0,5 plus 25 ug /mL, 1 plus 50 ug/mL i 2 plus 100 ug/mL. Zatim su stanice tretirane koncentracijama aptamina C s vitaminom C kako bi se otkrila aktivnost unutarstaničnog kolagena, unutarstanične kolagenaze (MMP-1) i elastaze.

Ljudski dermalni fibroblasti (HDF) odabrani su na temelju "Smjernica za procjenu učinkovitosti funkcionalne kozmetike (ΙI)" MFDS-a. HDF-ovi su uzgajani u DMEM/F12 3:1 smjesi s visokim sadržajem glukoze uz dodatak 10 posto FBS-a i 1 posto antibiotika-antimikotika u vlažnoj atmosferi s 5 posto CO2 na 37˚C.

HDF-ovi (5 × 104 stanica/jažici) su nasađeni u ploče s 24 jažice i inkubirani 24 sata te su tretirani različitim koncentracijama aptamina C svitamin Ci inkubirana 24 sata. Nakon 24 sata, supernatant je sakupljen, a količina prokolagena oslobođenog u medij izmjerena je na 450 nm pomoću Procollagen Type IC-Peptide (PIP) ELISA Kita. Stupanj proizvodnje kolagena kalibriran je ukupnim sadržajem proteina i uspoređen s TGF-1 kao pozitivnom kontrolom. Kao kontrola otapala korišten je medij bez materijala za ispitivanje.

HDF-ovi (5 × 104 stanica/jažici) su nasađeni u ploče s 24 jažice i inkubirani 24 sata te su tretirani različitim koncentracijama aptamina C svitamin Ci inkubirana 48 sati. Nakon 48 sati, izmjerena je aktivnost kolagenaze na 450 nm pomoću MMP-1 humanog ELISA kompleta. Aktivnost MMP-1 procijenjena je ukupnim sadržajem proteina i uspoređena s TGF-1 kao pozitivnom kontrolom. Kao kontrola otapala korišten je medij bez materijala za ispitivanje.

Svi podaci su izraženi kao srednja vrijednost ± standardna devijacija i potječu iz 3 neovisna eksperimenta. Statistička analiza provedena je t-testom nezavisnih uzoraka pomoću softverskog programa SPSS® (IBM) na razini značajnosti P <>

2.6|Mjerenje bora kože pomoću 3D sustava za analizu slike

U istraživanju su sudjelovale 22 ispitanice (prosječne dobi: 50,05 ± 2,94 godine). Nabori kože papka procijenjeni su sustavom za analizu 3D slike na početku, 4. i 8. tjedna. Hidratacija kože procijenjena je metodom kapacitivnosti, a TEWL metodom difuzije vode na površini kože i elastičnost kože metodom usisavanja procijenjeni su na početku, 2, 4 i 8 tjedana nakon tretmana. Također, samoupitnike koji se tiču ​​učinkovitosti ispitanici su ispunjavali 2, 4 i 8 tjedana, a upitnike o upotrebljivosti 8 tjedana nakon liječenja. Svi dobiveni podaci statistički su obrađeni programom SPSS®. Parametri bora vranije šape procijenjeni su korištenjem PRIMOS® Premium (GFMesstechnik GmbH). Ovaj sustav je omogućio kvantitativnu analizu hrapavosti, dubine, površine i volumena izbočenih bora na koži. Slika je analizirana na istom području u smislu parametara bora kože (1, Prosječna dubina bora; 2, Srednja dubina najveće bore; 3, Maksimalna dubina najveće bore; 4, Ukupna površina bora; 5, Ukupni volumen bora; 6 , Ukupni faktor oblika bora; 7, Ukupna dužina bora; 8, Ra; 9, Ry; i 10, Rz) na početku, 4 i 8 tjedana nakon tretmana Primosom 5.8 E ver. Softver.

3|REZULTATI

3.1|Za uspješno izvođenje rGO‐SELEX-a s nestabilnom metom bio je potreban rigorozan pristup pripremi pufera

Knjižnica ssDNA, koja je bila vezana za rGO preko π-π interakcija slaganja između aromatskih prstenova površine grafena i baza DNA 26,27 i nevezane ssDNA na rGO, odvojena je i uklonjena centrifugiranjem. ssDNA koja je adsorbirana na površini rGO eluirana je tretmanom s ciljnim spojem. Prema literaturnim izvješćima, konformacija aptamera mijenja se nakon vezanja s metom i slabljenjem interakcija π‐πslaganja s rGO.28-31 Ovaj proces je ponovljen u pet ciklusa. Svaka sljedeća runda odvijala se uz oštrije puferske uvjete i kraća vremena eluiranja. Ova nam je izvedba omogućila održavanje ssDNA s boljom specifičnošću za ciljne spojeve.

NGS podaci obogaćene biblioteke proizvedene rGO-SELEX procesom dali su 404071 sekvenciju. Odabrali smo 119 sekvenci iz ovih podataka, razvrstali ih u 11 grupa na temelju sličnosti strukture i odabrali reprezentativne sekvence za kandidate za aptamere (Slika 1A).

3.2|Odabir aptamina C

Sekundarne strukture kandidata za Aptamin C predviđene su korištenjem besplatnog softvera M‐Fold.32,33 Kandidati su grupirani prema položaju, duljini, obliku i broju stabljike i petlje strukture s najvećim potencijalom (Slika 1B). DHA, oksidvitamin C, detektira se njegovom reakcijom s o-fenilendiaminom (OPDA) koji ima ulogu indikatora.34 Ako se aptamer veže i sprječava njegovuoksidacija, na vitamin C i sprječava njegovu oksidaciju, signal fluorescencije 3-(dihidroksietil)-furo-[3,4-b] kinoksalin-1-ona, produkta kondenzacije vitamina C i OPDA, bit će niži od signala kontrola bez aptamera. Dijagram svakog kandidata aptamera pomiješanog s vitaminom C i oksidansom, s pozitivnim kontrolama,vitamin Cplus oksidans i scramble sekvence pomiješane s vitaminom C i oksidansom (Slika 1C). Pokazalo se da pet aptamera, aptamin Cb, Cc, Cf, Cg i Ck, imaju antioksidacijske učinke.

3.3|Inhibicija oksidacije vitamina C pomoću aptamina C

Aptamin C ima visok afinitet vezanja zavitamin C. Vezanje aptamina C s vitaminom C određeno je ITC analizom. Iz izoterme vezanja mogu se dobiti entalpija (ΔH), entropija (ΔS) i stehiometrija (n) reakcije vezanja. Egzotermno vezanje aptamina Cb detektirano je ITC mjerenjem, a entalpija (ΔH) je izračunata kao 302,5 ± 3,788, entropija (ΔS) je izračunata kao 18,9, stehiometrija(n) je izračunata kao 56,7 ± {{21 }}.426, a konstante disocijacije (Kd) izračunate su kao 2,13 uM za vitamin C. Egzotermno vezanje aptamina Cf detektirano je iz ITC mjerenja, a entalpija (ΔH) je izračunata kao 279,2 ± 2,992, entropija (ΔS) je izračunata kao 18,4, stehiometrija(n) je izračunata kao 167 ± 1,15, a konstante disocijacije (Kd) su izračunate kao 0.89uM za vitamin C. Egzotermno vezanje aptamina Ck otkriveno je iz ITC mjerenja, a entalpija (ΔH ) izračunato je kao 250.4 ± 3,742, entropija (ΔS) je izračunata kao 19,8, stehiometrija (n) je izračunata kao 82,2 ± 0,732, a konstante disocijacije (Kd) su izračunate kao 0,90 µmol/L za vitamin C (Slika 2A). ITC mjerenja otkrivaju da je promjena u entropiji nakon povezivanja s aptaminom C glavna pokretačka snaga zavitamin C. Spriječitioksidacijavitamina C u tekućem stanju, sve otopine su pripremljene s deioniziranom vodom tretiranom dušikom. Fluorescencija je bila izražena i kvantitativno analizirana kada se OPDA (o-fenilendiamin) vezao na DHA koju stvaraoksidacijavitamina C. Stupanj oksidacije vitamina C prema koncentraciji aptamina C (125, 250, 500 i 1000 nmol/L) uspoređen je i potvrđen OPDA testom. Rezultati su pokazali da jevitamin Cpretvorba u dehidroaskorbinsku kiselinu bila je sporija kada je koncentracija aptamina C bila veća. (Slika 2B). Ovi podaci dokazuju da je Aptamin C inhibitor oksidacije vitamina C ovisan o dozi.

Proveli smo eksperimente kako bismo utvrdili može li Aptamin C spriječitioksidacijavitamina C tijekom dugog vremenskog razdoblja. Liječen aptaminom C zajednovitamin C, i netretiranog vitamina C izloženi su svjetlu i ostavljeni da odstoje na sobnoj temperaturi 8 tjedana. Kao rezultat toga, kada je neliječeni vitamin C ostavljen na miru, stupanj redukcije je smanjen na manje od pola u 2 tjedna, a gotovo svi su oksidirani nakon 4 tjedna. U prisutnosti Aptamina C, vitamin C je smanjen na oko pola manje od 8 tjedana (Slika 2C). To sugerira da Aptamin C sprječava oksidaciju vitamina C tijekom dugog vremenskog razdoblja.

cistanche bodybuilding

3.4|Analiza aktivnosti intracelularne kolagenaze (MMP-1) i kolagena

U analizi aktivnosti kolagenaze, proizvodnja matrične metaloproteinaze-1 (MMP-1) bila je značajno smanjena ovisno o dozi, sa 7.06 posto, 9,29 posto i 31,81 posto pri koncentracijama od {{1{ {12}}}}01 plus 0.5 ug/mL, 0.1 plus 5 ug/mL i 0.5 plus 25 ug/ mL (Slika 3A). Na analizi sinteze kolagena, prokolagen tipa Ι karboksi-terminalni peptid (PIP) značajno je povećan na način ovisan o dozi, s povećanjem od 25.{{20}} posto na 0,01 plus 0,5 ug/mL , 41,99 posto na 0,1 plus 5 ug/mL, i 71,18 posto na 0,5 plus 25 ug/mL (Slika 3B).

3.5|Klinička studija učinaka smanjenja bora na ljudskoj koži

Statistička analiza parametara bora provedena je pomoću sustava za analizu 3D slike, kako bi se procijenili učinci poboljšanja bora na koži testiranog proizvoda na ljudskoj koži. U usporedbi s kontrolnom skupinom, parametar "Prosječna dubina bora" smanjen je za 4,77 posto nakon 4 tjedna i 4,25 posto nakon 8 tjedana, parametar "Prosječna dubina najveće bore" smanjen je za 3,37 posto nakon 4 tjedna i 4,53 posto nakon 8 tjedana," Parametar "Max. dubina najveće bore" smanjen je 4,36 posto nakon 4 tjedna i 7,19 posto nakon 8 tjedana, parametar "Ukupna duljina bora" smanjen je 1,61 posto nakon 4 tjedna i 2,67 posto nakon 8 tjedana, parametar "Ra" smanjen je 4,22 posto nakon 4 tjedna i 3,90 posto nakon 8 tjedana, parametar "Ry" smanjen je 2,66 posto nakon 4 tjedna i 7,11 posto nakon 8 tjedana, parametar "Rz" smanjen je 3,69 posto nakon 4 tjedna i 6,22 posto nakon 8 tjedana, smanjenje je bilo 3,69 posto ‐7,11 posto (Slika 4).

4|ZAKLJUČAK

Vitamin Cje komercijalno važna ali nestabilna molekula, tako da je poboljšanje njene stabilnosti od interesa za različite tržišne sektore. Naš rad pokazuje da aptamin C, DNA aptameri, potencijalno produljuje rok trajanja i povećava snagu takvih proizvoda odlaganjemvitamin C oksidacijau otopini. Pokazali smo kliničku učinkovitost kompleksa Aptamin C u smanjenju bora i hidrataciji kože. Aptamin C kompleks također bi mogao pomoći u ublažavanju oštre kože.

poboljšati izbjeljivanje kože